522171 - LABORATRIO DE BIOQUMICA

Prof. Dr. Alexandre Cavagis

Experimento 1 Reaes de Caracterizao Qualitativa de Carboidratos

cidos concentrados hidrolisam e desidratam carboidratos gerando furfurais ou

hidroximetilfurfurais, que so aldedos derivados do furano. Em presena de derivados
fenlicos, ocorre uma reao de condensao, formando compostos coloridos:

Figura 1 Reao de formao de furfural e condensao com -naftol

Objetivo: Mostrar que acares que se desidratam em furfurais ou

hidroximetilfurfurais, em presena de cidos minerais concentrados, condensam-se com
fenis permitindo sua identificao qualitativa. Nas reaes a seguir, tais
caracterizaes sero observadas por meio da formao de complexos de coloraes
especficas.
1. Reao de Molisch

Indica qualitativamente a presena de carboidratos em geral, que formam

furfurais (pentoses) ou hidroximetilfurfurais (hexoses) pela ao desidratante de cidos
concentrados e em presena de -naftol.

Procedimento: Prepare 5 tubos de ensaio e coloque 1,0 mL das seguintes solues

aquosas de carboidratos em cada um deles:

Tubo 1: 1,0 mL de gua destilada (branco)

Tubo 2: 1,0 mL de soluo 1% de amido
Tubo 3: 1,0 mL de soluo 0,1 mol. L-1 de sacarose
Tubo 4: 1,0 mL de soluo 0,1 mol. L-1 de glicose
Tubo 5: 1,0 mL de soluo 0,1 mol. L-1 de frutose

Em seguida, adicione 1,0 mL do reativo de Molisch em todos os tubos e agite. Na

capela, deixe escorrer cuidadosamente, pela parede de cada tubo, 2,0 mL de H2SO4
concentrado (no agite o tubo aps colocar o cido!). Observe o que ocorre e tire suas
concluses.

2. Reao de Seliwanoff (para cetoses)

Ceto-hexoses produzem furfurais mais rapidamente que aldo-hexoses, permitindo

diferenci-los pela velocidade de aparecimento de uma colorao vinho caracterstica.

Procedimento: Adicione 1,0 mL das seguintes solues de acares em tubos distintos:

Tubo 1: 1,0 mL de gua destilada (branco)

Tubo 2: 1,0 mL de soluo 1% de amido
Tubo 3: 1,0 mL de soluo 0,1 mol. L-1 de sacarose
Tubo 4: 1,0 mL de soluo 0,1 mol. L-1 de glicose
Tubo 5: 1,0 mL de soluo 0,1 mol. L-1 de frutose

Em seguida, adicione 1,5 mL de cido clordrico concentrado e 0,5 mL do reativo de

Seliwanoff em cada um dos tubos. Aquea em banho-maria fervente por 15 segundos e
observe, comparativamente, o tempo que leva para que uma colorao vinho aparea.
Tire suas concluses, com base nas estruturas qumicas de cada acar.

3. Reao de Bial (teste para pentoses)

Quando pentoses sofrem desidratao por cidos concentrados, originam-se

furfurais os quais, em presena de orcinol, formam complexos de cor verde.

Procedimento: Coloque 1,0 mL dos seguintes acares em tubos distintos:

Tubo 1: 1,0 mL de gua destilada (branco)

Tubo 2: 1,0 mL de soluo 0,1 mol. L-1 de sacarose
Tubo 3: 1,0 mL de soluo 0,1 mol. L-1 de xilose
Tubo 4: 1,0 mL de soluo 0,1 mol. L-1 de glicose
Tubo 5: 1,0 mL de soluo 0,1 mol. L-1 de frutose

Em seguida, adicione em todos os tubos 2,0 mL do reativo de Bial. Aquea em banho-

maria fervente por 10 segundos e tire suas concluses, com base nas estruturas dos
acares analisados.

4. Reao de Benedict para acares redutores

Conforme comentado durante as aulas tericas, alguns acares, chamados

acares redutores, podem ser oxidados por oxidantes brandos, tais como o Cu2+.

Procedimento: Prepare 6 tubos de ensaio contendo as seguintes solues:

Tubo 1: 1,0 mL de gua destilada (branco)

Tubo 2: 1,0 mL de soluo 1% de amido
Tubo 3: 1,0 mL de soluo 0,1 mol. L-1 de sacarose
Tubo 4: 1,0 mL de soluo 0,1 mol. L-1 de glicose
Tubo 5: 1,0 mL de soluo 0,1 mol. L-1 de frutose

Tubo 6: 1,0 mL de soluo 0,1 mol. L-1 de sacarose + 0,5 mL de HCl 6,0 mol. L-1 +
aquecimento por 3 minutos em banho-maria fervente. Deixe esfriar.

Em seguida, adicione a cada um dos 6 tubos 1,5 mL do reativo de Benedict e coloque

todos os tubos juntos em banho-maria fervente por 5 minutos. O que ocorre? Explique.

Solues utilizadas nos experimentos:

1. Reativo de Molisch: 1,0 g de -naftol para 100 mL de lcool etlico absoluto.

2. Reativo de Seliwanoff: 0,5 g de resorcinol para 100 mL de lcool etlico absoluto.

3. Reativo de Bial: 0,75 g de orcinol + 250,0 mL de HCl concentrado (37 % de pureza)

+ 15 gotas de soluo de cloreto frrico a 10 %

4. Reativo de Benedict: 173 g de citrato de sdio + 100,0 g de carbonato de sdio anidro

+ 17,3 g de sulfato de cobre (CuSO4.5 H2O) em 1000 mL de gua destilada.