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BIOTECNOLOGIAS REPRODUCTIVAS EN CAMELIDOS


SUDAMERICANOS DOMESTICOS: AVANCES Y PERSPECTIVAS

Wilfredo Huanca1, Ada Cordero2, Teodosio Huanca3 y Gregg P. Adams4

INTRODUCCIN
La crianza de los camlidos domsticos, alpacas y largo intervalo generacional y la capacidad fisiolgica
llamas, es una de las actividades de mayor importancia de una hembra que solo puede tener hasta 4 cras,
e impacto en el desarrollo socio econmico de la durante toda su vida reproductiva (Novoa C. 1999).
poblacin alto andina de nuestro pas, no solo por
su capacidad de adaptacin a las difciles condiciones Los esfuerzos para el desarrollo y aplicacin de
medioambientales, alturas sobre los 4,000 metros biotecnologas reproductivas no siempre han sido
snm, sino por su utilizacin como una fuente desarrollados en forma programada y continua, sino
alimenticia de protena de origen animal y medio de como esfuerzos individuales y aislados e incluso
transporte y en el caso de la alpaca, como un recurso algunos investigadores consideran que no es posible
para la produccin de fibra de buena calidad. desarrollar y aplicar estas tecnologas por los pobres
resultados obtenidos. Sin embargo, el desarrollo
El Per tiene ms de 3 millones de alpacas (87 % de de estas biotecnologas ha requerido la mejora del
la poblacin mundial) y la segunda poblacin mundial conocimiento sobre la fisiologa reproductiva de esta
en llamas con ms de 1 milln de animales; sin especie., contando con la ayuda de tcnicas como la
embargo, Las deficiencias en los esquemas de crianza ultrasonografa.
tradicional, como la crianza conjunta de alpacas
y llamas, con los consiguientes cruzamientos no El objetivo del presente trabajo es realizar una breve
programados, han contribuido a disminuir la calidad revisin del estado actual del conocimiento, sustentado
gentica de los animales, originando una prdida en en estudios realizados en nuestro pas, especialmente
la cantidad y calidad de fibra, reportndose que el 45 en Inseminacin Artificial, Transferencia de Embriones
% de la produccin de fibra tiene una finura de 26.0 y Fertilizacin In Vitro; con el propsito de disponer
micras y el 46 % una de 33.0 micras y solo un 8 % de alternativas tecnolgicas que puedan servir como
presenta una fibra del 22.0 micras (Freyre G. 2006). herramientas para la mejora gentica de los camlidos
domsticos, alpacas y llamas; as como la posibilidad
La aplicacin de biotecnologas reproductivas como la de su potencial uso en los camlidos no domsticos.
Inseminacin Artificial (IA) ha contribuido al progreso
gentico obtenido en especies domesticas como
los bovinos de leche, contribuyendo a obtener los INSEMINACIN ARTIFICIAL
actuales niveles de produccin lctea. En camlidos, La IA con semen congelado es una de las ms importantes
la posibilidad de mejora gentica de los rebaos de tecnologas reproductivas en la produccin de animales
productores mediante la prueba de progenie, con la domsticos y combinada con una prueba de progenie,
formacin de ncleos de reproductores, requiere aos ha contribuido sustancialmente en el mejoramiento
de trabajo y esta limitada, entre otros factores, por el gentico de bovinos lecheros, especialmente cuando
fue posible disponer de semen congelado de toros
de alta calidad gentica En camlidos, si bien existen
1
Laboratorio de Reproduccin Animal Facultad reportes sobre el desarrollo de la IA y aun cuando
de Medicina Veterinaria puede ser considerada una alternativa tecnolgica, aun
Universidad Nacional Mayor de San Marcos no se han superado las limitantes existentes, como el
2
Departamento de Nutricin Facultad de desarrollo de protocolos de criopreservacin, limitando
Zootecnia Universidad Nacional Agraria La por ahora al desarrollo de la Inseminacin Artificial con
Molina el uso de semen fresco (Huanca y Adams 2007), con
3
Programa Nacional de Investigacin en las consiguientes dificultades para permitir una amplia
Camlidos EE ILLPA INIA Puno difusin de reproductores genticamente superiores.
4
Veterinary Biomedical Sciences, Western
Collage of Veterinary Medicine University of Existen diferencias fisiolgicas entre los camlidos
Saskatchewan, Saskatoon Canada y otras especies domsticas, siendo una primera
E-mail: whuanca2002@yahoo.com diferencia el hecho que las hembras camlidas

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son especies de ovulacin inducida, es decir que 1999). Los resultados observados son variables y si
se requiere el estmulo de la copula para inducir bien con el uso de la enzima se observa motilidad
ovulacin (San Martn et al 1968), pero esta diferencia espermtica, esta caracterstica no siempre se ha
ms que una dificultad puede ser una ventaja para reflejado en mejoras en la tasa de preez. Igualmente
la aplicacin de la IA. Sin embargo, otras diferencias, existe poca informacin sobre el uso de dilutores,
como la dificultad para la coleccin de semen debido reportndose el uso de Yema citrato (Pacheco et al
a las caractersticas de cpula de la hembra (posicin 1996), solucin de Suero de Albmina Bovina (BSA) y
y duracin); as como el manejo del semen debido a su Glucosa (Huanca y Gauly 2001), Tris Glucosa - Yema
naturaleza viscosa; han sido los principales obstculos Huevo (Raymundo et al 2000).
para el desarrollo masivo de la IA, a los que hay que
agregar la baja concentracin de espermatozoides y el El primer reporte sobre IA en alpacas fue realizado por
alto porcentaje de anormales (Fernndez-Baca 1993). Fernndez-Baca y Novoa (1968), utilizando semen sin
diluir de 2 vicuas y 4 paco-vicuas, obtenindose una
Los reportes sobre mtodos de coleccin de semen son sola cra de 42 alpacas inseminadas. Posteriormente se
diversos, desde el uso de sacos vaginales (Mogrovejo ha reportado la inseminacin de 83 alpacas y 11 llamas
et al 1952), esponjas vaginales (San Martn 1961) y con semen fresco obtenido por electroeyaculacin de
electroeyaculacin (Fernndez-Baca y Caldern 1965; una vicua y 4 paco-vicuas, con una tasa de 48 %
Caldern W. 1968); con las consiguientes dificultades en hembras inducidas a ovulacin con Gonadotropica
para los machos durante la copula y la calidad del Corionica Humana (hCG) y 11 % en hembras inducidas
semen. Posteriormente se reporta el uso de una a ovulacin con machos vasectomizados (Leyva et
vagina artificial adaptada de ovinos (Sumar J y Leyva al 1977). Igualmente se reporta una tasa de preez
V.1981), que si bien mejora la tcnica de coleccin, an del 73 % a la IA con semen fresco y depositado en
presenta dificultades para mantener una temperatura los cuernos uterinos, as como un 67 % de preez
adecuada durante el largo de la cpula. El uso de a la IA por laparoscopia (Bravo et al 1997), similar
una frazadilla elctrica cubriendo la vagina Artificial, al reporte de Pacheco (1996). Sin embargo, todas
permite algunas mejoras en la tcnica de coleccin, esas experiencias fueron realizadas en centros
facilitando el mantenimiento de la temperatura experimentales, a diferencia de una experiencia a
(Gauly and Leindiger , 1996). Igualmente, el uso de nivel de criadores particulares, donde se reporta una
un maniqu (Sumar y Leyva 1981) o la coleccin con tasa de preez del 51 % de 207 alpacas inseminadas
hembra receptiva (Gauly and Leindiger 1996; Huanca con semen fresco diluido con una solucin de BSA +
y Gauly 2001) se presentan como alternativas para la Glucosa e induciendo la ovulacin con un anlogo
coleccin de una muestra de semen fisiolgicamente de GnRH o LH, entre 24 a 26 horas antes de la
normal; sin embargo, se requiere un entrenamiento Inseminacin (Apaza et al 2001).
de los animales y no siempre todos los machos llegan
a aceptar el maniqu; mientras que el uso de hembra Los reportes sobre semen congelado son muy
receptiva genera incomodidades en el operador. escasos; as tenemos que un estudio realizado con
Otras alternativas de coleccin incluyen la coleccin semen obtenido por electroeyaculacin y diluido con
de semen mediante una fstula uretral (Prez G. Tris Yema huevo Glicerol, solo se observo un 10
2006) y una ms reciente ha sido reportada por % de motilidad pos descongelamiento (McEvoy et al
Giulano et al (2007) mediante la coleccin de semen 1992); as mismo, otro estudio con semen tratado con
con uso de electroeyaculacin pero con una previa colagenasa y posteriormente diluido con citrato de
anestesia del animal, con resultados interesantes y sodio Yema huevo Glicerol (7 %) permite obtener
sin contaminacin del semen con orina. una motilidad entre el 30 40 % (Bravo 1996). El uso
de etilinglicol como agente crioprotector ha sido
Los estudios sobre conservacin de semen no son reportado, permitiendo una tasa de motilidad pos
totalmente satisfactorios, particularidades como descongelamiento del 20 % (Santiani et al 2005). A
la alta viscosidad del semen de alpacas y llamas pesar de estos resultados a la fecha no se ha reportado
(Lichtenwalner et al 1996; Bravo et al 1997) se estudios que nos permitan sealar la factibilidad de
constituyen en factores que dificultan el desarrollo congelar semen de camlidos. Posiblemente, como
de las tcnicas de conservacin., dificultando la sucede con otras especies, no va a ser fcil congelar
determinacin de la concentracin, morfologa y semen, ms an si a las dificultades de contar con
motilidad espermtica, adems del alto porcentaje de un dilutor apropiado, hay que considerar los altos
espermatozoides anormales (Fernndez- Baca 1993) y porcentajes de anormalidades presentes en los
una motilidad oscilatoria (Sumar y Garca 1986, Garnica eyaculados.
et al 1993). Intentos para reducir la alta viscosidad ha
sido reportada, mediante con el uso de enzimas como Los resultados obtenidos sugieren que es posible la
la colagenasa, hyaluronidasa y tripsina (Bravo W. et coleccin de semen con vagina artificial colocada en
2000) o mediante una accin mecnica (Valdivia M. un maniqu y envuelta con una frazadilla elctrica,

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as como el desarrollo de la IA con semen fresco; sin y Garcia 1999), sealan que ante la insercin de
embargo se requieren nuevos estudios que permitan un progestageno intravaginal en llamas a cualquier
desarrollo protocolos de criopreservacin de semen, momento del estadio folicular inhibe el crecimiento
por lo que parece que el uso de la IA en camlidos va folicular y si al final del tratamiento se aplica 500
a estar, por ahora, restringido al uso de semen fresco UI de eCG, se obtiene 5.2 2.5 folculos y 2.1 2.9
diluido y utilizado inmediatamente, con resultados embriones recuperados (Chaves et al 2002). Similares
cercanos al 50 %. resultados han sido reportados por otros autores. En
alpacas, se realizo un estudio con la aplicacin de
TRANSFERENCIA DE EMBRIONES un progestgeno intravaginal y la administracin
En camlidos, el primer reporte sobre transferencia de 1000 UI de eCG, obtenindose una alta respuesta
de embriones fue realizado por Sumar et al. (1974), ovrica con el numero de Cuerpos lteos (Velsquez
posteriormente otros reportes confirman la y Novoa 1999). Estudios realizados por nuestro grupo
factibilidad de la aplicacin de la tcnica pero con una de investigacin sugieren que es factible obtener
variabilidad en la respuesta ovrica a los protocolos de una adecuada respuesta ovrica en alpacas y llamas,
superestimulacion, as como la respuesta en nmero cuando los animales son sometidos previamente a
y calidad de embriones recuperados (Del Campo et un protocolo de sincronizacin de onda folicular y el
al 1995). estimulo hormonal se inicial durante la emergencia de
las ondas de crecimiento folicular, sustentado en el
La ultrasonografa ha contribuido a mejorar el reporte de Ratto et al (2003).
conocimiento sobre la fisiologa ovrica en especies
domsticas ((Pierson and Ginther 1984) y no Referente a la hormona a utilizar, se ha reportado un
domsticas; contribuyendo al conocimiento de la estudio para evaluar la respuesta de ambas hormonas,
dinmica folicular ovrica en llamas (Adams et al 1990) FSH y eCG, en llamas, habindose determinado
y alpacas (J. Vaughan 2001). La diferencia sustancial, que el nmero de folculos 6 mm sometidas a un
como ocurre en las especies de ovulacin inducida, protocolo de estimulacin ovrica fue de 17.9 2.2
que si no ocurre copula, el folculo dominante ingresa al tratamiento con FSH y 17.7 2.2 folculos con eCG
a una fase de regresin y se produce una nueva onda (Ratto et al 2005). Estos resultados permitieron obtener
de crecimiento folicular (Sumar J. 2000). evidencia que existe una buena respuesta ovrica a
la accin de ambas hormonas, sin diferencias entre
La ovulacin en alpacas y llamas puede ser inducida ambas. Alpacas y llamas sometidas a un protocolo
por la administracin de hormonas exgenos como hormonal de estimulacin ovrica con eCG, iniciando
la Gonadotropina Corionica Humana (hCG), Hormona el tratamiento durante la emergencia de las ondas de
Liberadora de las Gonadotropina (GnRH) (Bourke et crecimiento folicular, permite obtener el desarrollo
al 1995) o Hormona Luetinizante (LH) (Huanca et al de 12.8 1.4 folculos y 8.1 1.0 cuerpos Lteo en
2001). La ovulacin ocurre alrededor de las 30 horas llamas y 7.5 1.2 folculos y 5.9 1.3 cuerpos lteo
despus de la aplicacin de GnRH, LH o por estimulo en alpacas (Huanca et al 2006)
de monta (Ratto et al 2006, Huanca et al 2001).
La recuperacin embrionaria puede ser realizada va
Una primera etapa en el desarrollo de protocolos quirrgica o no quirrgica. El primer reporte sobre
de Ovulacin Mltiple y Transferencia de Embriones coleccin de embriones fue realizado de oviductos de
(MOET) involucra la superestimulacin ovrica, con alpaca, previa laparotoma (Novoa y Sumar, 1968) y
el propsito de inducir el crecimiento, maduracin la primera cra nacida por transferencia fue reportada
y ovulacin de un gran nmero de folculos. Los por Sumar J. (1974). Posteriormente se reporta la
protocolos de estimulacin ovrica aplicados en coleccin de embriones mediante una tcnica no
camlidos incluyen el uso de Hormona Folculo quirrgica a los 7 das en llamas y la transferencia
Estimulante (FSH) o Gonadotropina Corionica Equina en fresco con el nacimiento de una cra (Wiepz and
(eCG), durante una fase luteal inducida con la Chapman 1985) Otros estudios confirman que la
aplicacin de Hormonas hipotalmicas (GnRH); fase recuperacin de embriones en estadio de blastocisto
luteal artificial con la aplicacin de progestgenos puede ser realizada a los 7 das pos servicio mediante
exgenos y durante una fase de receptividad sexual tcnicas no quirrgicas en llamas y alpacas. La tcnica
(Bourke et. al 1992; Correa et al 1994). Las respuestas de recuperacin no quirrgica utilizada en camlidos
obtenidas son variables, alta incidencia de folculos es similar a la reportada en vacunos, mediante la
luteinizados, baja tasa de recuperacin embrionaria inclusin de una solucin de Dulbecco PBS y los
(0 2.3 embriones/ donadora) y de calidad variable embriones recuperados observados y evaluados en
(Del Campo M. et al 1995). un estereoscopio (Huanca et al 2004).

Los estudios orientados a la inhibicin del desarrollo Resultados sobre recuperacin y transferencia de
folicular con tratamientos con progesterona (Leyva embriones en llamas han sido descritos por Huanca

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et al (2006) sealando la recuperacin de 4.8 0.9 siempre se encuentran cerca a los laboratorio, por lo
embriones, con una tasa de recuperacin 66,1 % del que en una primera fase se evaluaron las diferencias en
nmero posible de embriones, determinado en base la calidad de ovocitos obtenidos de ovarios de alpacas
al nmero de cuerpos lteos. La tasa de preez fue del y transportados desde el matadero, bajo dos diferentes
68.9 %. En alpacas, se recuperaron 1.6 0.3, respuesta temperaturas (4 y 35 C), los resultados sugieren una
diferente de la observada en llamas, con una tasa mejor calidad de los ovocitos procedentes de ovarios
de recuperacin del 23.6 % de embriones posibles, transportados a 35 C , respecto a los 4C, (Huanca et
con una tasa de preez del 30.0 %. Igualmente, se al 2007).En el segundo caso, coleccin de ovocitos
ha reportado la recuperacin de 37 embriones de va transvaginal, Brogliatti et al (2000) utilizando
47 hembras no estimuladas (79 %), de las cuales un transductor transvaginal de 7.5 MHZ y aplicado
resultaron en un 41 % de preez al ser transferidas a va transvaginal reporta la coleccin de 76 COCs de
receptoras (Taylor et al 2001). 134 folculos (57 %), mientras que la recuperacin
de ovocitos via transvaginal en llamas, sometidas
La recuperacin de las hembras donadoras fue a estimulo hormonal permiti la recuperacin de
evaluada, habindose observado una recuperacin 10.72.1 y 11.2 2.3 COCs (71 y 74 % ) (Ratto et
del tracto reproductivo, determinado por ecografa, a al 2005). En alpacas, un ensayo preliminar seala la
las 3 semanas posteriores al lavado uterino y una tasa factibilidad de recuperar ovocitos va transvaginal
de preez luego de ser servidas, del 40 %, con un solo (Huanca et al 2006) y an cuando se requieren mas
servicio (Huanca et al 2006). Esta observacin permite investigacin, estos resultados sugieren que es posible
plantear la posibilidad de realizar tratamientos de recuperar ovocitos va transvaginal sin originar daos
superestimualcin y recuperacin embrionaria al mayores en llamas y alpacas.
inicio de la poca de empadre y luego de un descanso,
realizar el servicio de las donadoras y obtener tasas Miragaya et al (2002) estudio la maduracin In Vitro
de preez similares a las observadas bajo condiciones de ovocitos, obtenidos por aspiracin quirrgica a las
de empadre continuo. 22 horas despus de la administracin de un anlogo
de GnRH, en llamas estimuladas con un progestageno
Estos resultados sugieren la posibilidad de obtener y estimuladas con 500 UI de eCG,obteniendo una
resultados satisfactorios con los protocolos de maduracin de 62 %, similar al reporte de Del Campo et
superestimulacin ovrica en alpacas y llamas, al (1992). Estudios sobre Fertilizacin In Vitro sealan
permitiendo obtener embriones de buena calidad una tasa de desarrollo al estadio de pro ncleo del
y viabilidad y que al ser transferidos permiten 29.2 y 57.1 % con dos diferentes dosis de heparina (2
obtener tasas de preez sobre el 50 %. Igualmente, y 5 ug/ml), pero solo una tasa de desarrollo del 5.6 %,
la rpida recuperacin de las hembras donadoras, 6.0 % y 4.7 % para los estadios de morula, blastocisto
permite sealar que una vez realizado el protocolo temprano y blastocisto expandido, luego de 9 das de
de estimulacin hormonal, las hembras requieren un cultivo (Del Campo et al 1994).
descanso aproximado de un mes, con tasas de preez
muy similares a las obtenidas bajo condiciones de Los resultados obtenidos sealan que el desarrollo de
crianza de los productores. protocolos de FIV deber ser una de las prioridades de
investigacin, en forma sistemtica y conjuntamente
FERTILIZACION IN VITRO con la Transferencia de embriones permitirn
La tcnica de Fertilizacin In Vitro (FIV) se presenta contribuir a disear alternativas tecnolgicas para los
como una de las tecnologas que mayor desarrollo esta programas de mejoramiento gentico en los camlidos
experimentando en los ltimos tiempos. La coleccin domsticos y en base a los resultados obtenidos,
de ovocitos del folculo ovrico para la posterior evaluar la posibilidad de su aplicacin en camlidos
maduracin nuclear y citoplasmtica, es la primera no domsticos.
fase en el desarrollo de esta tcnica (Miragaya et al
2006). En camlidos existe escasa informacin referida CONCLUSIN
a la coleccin de ovocitos de ovarios de mataderos y Los resultados obtenidos a la fecha sealan que
madurados In Vitro. Un estudio realizado con ovocitos el desarrollo de la IA esta limitada al uso de semen
obtenidos de ovarios de matadero y madurados a 38 fresco y se requiere estudios que permitan desarrollar
C y 5 %de CO2 , en los que se utilizaron medios de protocolos orientados a obtener semen congelado,
maduracin de uso en bovinos, reporta una alta tasa con resultados expresados en tasa de preez similares
de ovocitos en MII (62 %) a las 32 horas de incubacin a los obtenidos con semen fresco. En Transferencia
(Del Campo et al 1992). de Embriones se han establecido protocolos de
superovulacin que permiten obtener un nmero
La obtencin de ovocitos puede ser realizada de alrededor de 5 embriones viables/ donadora y con
ovarios procedentes de mataderos o por aspiracin una tasa de preez mayor al 40 %. De otro lado, los
transvaginal. En el primer caso, los mataderos no estudios sealan que la recuperacin de las hembras

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donadoras se produce en un tiempo no mayor a los 40 con progesterona y gonadotropinas. Arch.Med.


das, permitiendo una tasa de preez, al ser expuestas Vet.26:5964.
al macho, similar a las reportadas en las condiciones
de campo. Los estudios inciales sobre Fertilizacin Chaves MG, Aba MA, Agero A, Egey J, Berestin V,
In Vitro nos permiten sugerir lo promisorio de esta Rutter B. 2002. Ovarian follicular wave pattern and the
tcnica y que contribuir, conjuntamente con la effect of exogenous progesterone on follicular activity
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Agradecimientos 12th International Congress on Animal Reproduction.
Los autores expresan su agradecimiento por el Vol 1 pp 324-326.
financiamiento recibido del Concejo Nacional de
Ciencia y Tecnologa (CONCYTEC), (Proyecto PROCOM Del Campo MR,Del Campo CH, Donoso MX, Berland
166 2006) y al Proyecto INCAGRO - Subproyecto M, Mapletoft RJ. 1994. In vitro fertilization and
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