PRACTICA N7 Glucolisis

"Ao del ao del Buen Servicio al Ciudadano

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA DE ALIMENTOS

ASIGNATURA: LABORATORIO DE BIOQUIMICA GENERAL

GRUPO: 91G
SEMESTRE ACADEMICO: 2017B
PROFESORA: BLGA. Ms.C. Alicia Cecilia Decheco Egsquiza
PRACITCA N4: GLUCOLISIS DEL HIGADO

INTEGRANTES:

Arce Huillca, John Claudio

Gamboa Cern , Katherine

Jess Veneros, Diego

Rosas Fretel, Andrs Anthony

Universidad Nacional del Callao Noviembre del 2017, Callao Per

PRACTICA N7 Glucolisis

INTRODUCCIN
El glucgeno es el polisacrido de reserva ms importante en las clulas animales.
Al igual que la amilopectina, el glucgeno es un polmero con subunidades de
glucosa unidas por enlaces (1 4) y ramificaciones del tipo (1 6), pero el
glucgeno est ms ramificado (una ramificacin cada 8 a 12 residuos) y es ms
compacto que el almidn. El glucgeno es especialmente abundante en el
hgado, donde puede llegar a representar el 7% de su peso; tambin se
encuentra en el msculo esqueltico. Algunos grnulos de glucgeno contienen
tambin, ntimamente unidos, los enzimas responsables de su sntesis y
degradacin.

En la gluclisis (del griego glykys, que significa dulce y lysis , que significa
romper) lo que sucede es que se degrada una molcula de glucosa en una
serie de reacciones catalizadas enzimticamente, dando dos molculas de
piruvato. Durante la secuencia de reacciones parte de la energa libre cedida por
la glucosa se conserva en forma de ATP. La gluclisis fue la primera ruta
metablica elucida y es probablemente la que se conoce mejor, mientras que la
gluconeogenesis es la sntesis de la glucosa a partir del piruvato y el lactato. Para
la sntesis de un mol de glucosa son necesarios 4 moles de ATP y 2 moles de GTP (
ITP) a partir de 2 moles de piruvato y/o lactato. El camino que lleva la
glucogenesis es basicamente el inverso del de la gluclisis excepto por 3 pasos
especificos entre la glucosa y glucosa-6-fosfato, fructosa-6-fosfato y fructosa-1,6-
bifosfato, and fosfoenolpiruvato (PEP) y piruvato . Esta tiene su lugar
principalmente en el hgado y su misin es proporcionar glucosa para exportarla a
otros tejidos cuando se han agotado otras fuentes de glucosa.(Hayashi, 2008).

Universidad Nacional del Callao Noviembre del 2017, Callao Per

PRACTICA N7 Glucolisis

OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

Comprender la importancia de la funcin que desempean la glucolisis en

las clulas

OBJETIVO ESPECIFICO

Definir que es la glucolisis

Identificar las diferentes etapas
Conocer su rendimiento energtico
Aprender las funciones de la glucolisis
Comprender las diferentes regulaciones

Universidad Nacional del Callao Noviembre del 2017, Callao Per

PRACTICA N7 Glucolisis

MARCO TERICO
Glucolisis
La glucolisis es, seguramente, la ruta metablica ms antigua que se conserva,
como lo prueba su presencia en todos los seres vivos y la naturaleza qumica de
las reacciones que tienen lugar en ella. Se trata de un conjunto de procesos que
hacen posible la degradacin oxidativa de la glucosa (y de otros monosacridos
que pueden transformarse en ella) en ausencia de oxgeno. Sin embargo, en
estas condiciones la oxidacin de los monosacridos es solo parcial, dando lugar
a compuestos orgnicos que no estn totalmente oxidados.

La produccin de energa en la fosforilacin ocurre exclusivamente mediante

fosforilacin a nivel de sustrato, mientras que los electrones y los protones que se
arrancan de la glucosa a lo largo del proceso acaban siendo transferidos al
NAD+ para dar lugar a NADH+H+. El compuesto final que se obtiene como
resultado de la degradacin es el piruvato:

La glucolisis tiene lugar en el citoplasma de las clulas eucariotas, circunstancia

que tiene su inters, porque apoya la teora de que los eucariotas evolucionaron
a partir de procariotas anaerobios; de hecho, el oxgeno resulta txico en el
citoplasma, y la clula lo enva rpidamente hacia la mitocondria, donde puede
aprovecharse.

Descripcin del proceso

Desde el punto de vista qumico pueden distinguirse varias etapas distintas en la
glucolisis, mediante las cuales se van "preparando" paulatinamente los diferentes
compuestos para facilitar la reaccin global:

1. Fase de activacin: requiere el aporte de energa en forma de ATP, que se

recuperar en reacciones posteriores. La activacin permite que los
compuestos activados reaccionen con mayor facilidad. Esta "inversin
energtica" recuperable se da en muchos procesos metablicos.
A. Transformacin de la glucosa en glucosa 6-fosfato: La glucosa reacciona
con una molcula de ATP, fosforilndose y liberando ADP. En realidad no se
trata de un proceso de activacin energtica (aunque tambin sea
necesario para eso), sino que tiene un motivo diferente desde el punto de
vista de la lgica celular. La membrana plasmtica permite el paso de loa
glucosa mediante difusin facilitada a travs de transportadores
especficos. Esto hara imposible la acumulacin de glucosa dentro de la
clula, ya que ese transporte es bidireccional y a favor de gradiente. La
modificacin qumica de la glucosa, concretamente la fosforilacin,
impide que la glucosa 6-fosfato salga de la clula (porque no existe
transportador para ella). Toda la glucosa intracelular est fosforilada.
B. Transformacin de la glucosa 6-fosfato en fructosa 6-fosfato: Es una
reaccin de isomerizacin espontnea y reversible, que transforma la
forma aldosa en la cetosa. La glucosa 6-fosfato es una sustancia que
puede participar en varias rutas metablicas, mientras que la fructosa 6-

Universidad Nacional del Callao Noviembre del 2017, Callao Per

PRACTICA N7 Glucolisis

fosfato solo interviene en la glucolisis. La formacin de este compuesto

permite, por lo tanto, regular la cantidad de glucosa que se metaboliza y,
en consecuencia, la cantidad de energa que se va a producir mediante
esta ruta.
C. Transformacin de la fructosa-6-fosfato en fructosa 1,6-difosfato: Con esta
nueva fosforilacin se consigue que el compuesto alcance la energa
interna suficiente para sufrir la siguiente reaccin.
2. Rotura de la fructosa 1,6-difosfato: La molcula se rompe en dos mitades del
mismo tamao, gliceraldehdo 3-fosfato y dihidoxiacetona fosfato. Ambos
compuestos son ismeros entre s (son las formas fosforiladas de las dos triosas
que existen), y de hecho se transforman la una en la otra en una reaccin
espontnea y reversible. Este equilibrio es fundamental en la continuacin de la
ruta, ya que solo el gliceraldehdo 3-fosfato es metabolizado. Sin embargo, a
medida que dicha sustancia se va consumiendo, la dihidroxiacetona fosfato se
transforma en gliceraldehdo, de acuerdo con el principio de equilibrio
qumico.
3. Oxidacin y fosforilacin a nivel de sustrato: La ltima fase de la glucolisis
consiste en una serie de reacciones que, conjuntamente, suponen su oxidacin
parcial acoplada a la fosforilacin a nivel de sustrato que sintetiza ms ATP del
que se haba consumido durante la activacin. Los electrones y protones
separados en el proceso se ceden a una coenzima de oxidacin-reduccin.
A. Transformacin del gliceraldehdo 3-fosfato en 1,3-difosfoglicerato: se trata
de una oxidacin tan exotrmica que basta para unir un grupo de fosfato
inorgnico al grupo cido recin formado. Los electrones y los protones
separados de la molcula de gliceraldehdo 3-fosfato son cedidos al
NAD+ para formar una molcula de NADH+H+ (dos por cada molcula de
glucosa).
B. Fosforilacin de ADP y formacin de 3-fosfoglicerato: El 1,3-difosfoglicerato
reacciona con el ADP dando lugar a las primeras molculas de ATP que se
producen en la ruta metablica. Como cada molcula de glucosa ha
permitido la formacin de dos molculas de 1,3-difosfoglicerato en esta
reaccin se recupera la energa invertida en la activacin del
monosacrido.
4. Recuperacin de la energa proporcionada para la activacin: El 3-
fosfoglicerato conserva an el grupo fosfato que se haba unido durante la
fase de activacin. El final de la glucolisis permite la recuperacin de este ATP,
proporcionando por tanto un balance energtico positivo. Para que esta
reaccin sea posible, es necesario que antes el 3-fosfoglicerato sufra ciertas
modificaciones quimicas.
A. Transformacin del 3-fosfoglicerato en 2-fosfoglicerato: El grupo fosfato
cambia de posicin dentro de la molcula, lo que facilita las reacciones
posteriores.
B. Deshidratacin del 2-fosfoglicerato: Da lugar a un compuesto llamado
fosfoenolpiruvato.

Universidad Nacional del Callao Noviembre del 2017, Callao Per

PRACTICA N7 Glucolisis

C. Formacin de piruvato y ATP: El fosfoenolpiruvato reacciona con el ADP

transfirindole el grupo fosfato. El producto final de la glucolisis es el
piruvato.
Balance energtico de la glucolisis: Cada molcula de glucosa que interviene en
la glucolisis necesita utilizar dos molculas de ATP para activarse por completo. Su
hidrlisis y oxidacin posterior acaba proporcionando cuatro molculas de ATP,
por lo que el balance neto de la glucolisis es de una ganancia de dos ATPs por
molcula de glucosa. Adems, se sintetizan tambin dos molculas de
NADH+H+ en la oxidacin del gliceraldehdo 3-fosfato.

El compuesto final de la degradacin de la glucosa mediante esta va es el

piruvato, una molcula de tres tomos de carbono que an est parcialmente
reducida, por lo que an sera posible extraer ms energa qumica de ella. El
destino del piruvato, sin embargo, depende de la naturaleza de la clula y de las
condiciones en las que sta se desarrolle: las clulas aerobias que disponen de
oxgeno van a seguir aprovechando la energa contenida en esa molcula,
gracias a la respiracin celular, pero las clulas que no disponen de oxgeno, o
que son incapaces de utilizarlo, no pueden obtener ms energa de esta
molcula.

Universidad Nacional del Callao Noviembre del 2017, Callao Per

PRACTICA N7 Glucolisis

MATERIALES, REACTIVOS, MUESTRAS Y EQUIPOS

MATERIALES

Pipeta
Vaso precipitado de
50ml
Bureta
Soporte universal
Mortero
Piln
Piceta
Agua destilada

REACTIVOS

Solucin de NaOH 0.1N

Ph metro
fenolftaleina
Agua destilada

MUESTRAS

Hgado

EQUIPO
Balanza analtica

Universidad Nacional del Callao Noviembre del 2017, Callao Per

PRACTICA N7 Glucolisis

PROCEDIMIENTO

1. Sobre bao amarilla en una cacerola grande con agua a 30C llevar
un recipiente pequeo lleno de hgado y sellado.

2. Para la titulacin con NaOH 0.1N se us 20ml de hgado en un vaso

precipitado con gotas de fenolftalena. Se hace un movimiento de la
mueca hasta que aparezca e color fucsia.

3. Realizar la medicin de ph y titulacin cada 30 minutos.

Universidad Nacional del Callao Noviembre del 2017, Callao Per

 PRACTICA N7 Glucolisis

RESULTADOS

ESQUEMA DEL PROCEDIMIENTO

MACERADO DE HIGADO DE
EXTRACTO + NaCl + buffer
HIGADO CON AGUA
fosfato
DESTILADA

INCUBACION POR
10 A 30

TITULACION #1

PARA COMPROBAR
EXISTENCIA DE ACIDO
LACTICO SE REALIZA
LA SEGUNDA
TITULACION

TITULACION #2

Universidad Nacional del Callao Noviembre del 2017, Callao Per

PRACTICA N7 Glucolisis

DISCUSIONES

La prctica de glucolisis, el frasco que contiene el extracto debe

mantenerse a una temperatura de 30
Debido a proceso de la enzima deshidrogenasa que facilita y
permite el cambio de cido pirvico a cido lctico.
La segunda titulacin se realiza despus de 30 de haber realizada la
titulacin anterior y se realiza para poder observar el cido lctico
producido.
Mientras se realiza la titulacin se debe mantener en el periodo de
incubacin a 30.

CONCLUSIONES
El metabolismo intermediario puede dividirse en rutas catablicas,
que son las responsables de la degradacin de las molculas
nutritivas de alto contenido energtico, y en rutas anablicas.
Las rutas catablicas y anablicas que se inician en un nutriente
determinado o que conducen a l, como la glucosa no son
exactamente inversas una de otra, sino que son qumica y
enzimticamente diferentes.
La glucosa se oxida parcialmente en la ruta y produce una pequea
cantidad de ATP. Se realiza oxidacin parcial sin el uso de oxgeno,
de modo que la gluclisis pueda formar parte de la respiracin
aerbica y anaerbica.
En la titulacin la muestra de hgado nos salio de con color marron
rojizo determinando asi su actividad enzimtica y la velocidad de
reaccin.

Universidad Nacional del Callao Noviembre del 2017, Callao Per

PRACTICA N7 Glucolisis

RECOMENDACIONES
Tener una muestra en trminos moderados de espeso y bien licuado
para poder determinar con mayor rapidez y eficacia las enzimas.
Anotar el gasto de de NaOH que se uso en la muestra del hgado a
medida de que se usa la pipeta.
Agitar la muestra continuamente usando la bagueta, hasta que el
color cambie a medida de que el NaOH se va cayendo en la
muestra
Se recomienda usar una pequea cantidad de la muestra, para que
no se altere el resultado.

CUESTIONARIO
1. Defina Va Anfiblica, pulunasa, fosforilasa quinasa, dextrina limite,
prostaglandina.
Va Anfiblica: Es una va catablica y anablica al mismo tiempo.
Pulunasa: Es un polisacrido formado por unidades de maltotriosa,
tres unidades de glucosa conectadas por un enlace 1, 4
glucosdico forman maltotriosa.
Fosforilasa quinasa: Es una protena quinasa especifica que activa
el glucgeno fosforilasa para liberar glucosa 1-fosfato procedente
del glucgeno.
Dextrina Limite: Es el producto de la digestin completa de la
amilopectina o del glucgeno por la alfa- amilasa.
Prostaglandina: Son un conjunto de sustancia de carcter lipdico
derivadas de los cidos grasos de 20 carbonos.

2. Porque la glucolisis constituye el ncleo central del metabolismo de

los carbohidratos? Cmo se regula?

Porque todos los azucares pueden convertirse en glucosa.

La Fosfofructoquinasa-1 es la enzima principal de la regulacin de la
glucolisis, acta como una llave de agua, si est activa cataliza ms
fructosa 1.6-bifosfato, lo que permitir a las enzimas siguientes
transformar mucho piruvato.

Universidad Nacional del Callao Noviembre del 2017, Callao Per

PRACTICA N7 Glucolisis

3. Cmo se lleva a cabo la sealizacin qumica entre las clulas?

Se lleva acabo por las molculas secretadas unidas a la membrana

plasmtica.
Sntesis del mensajero, liberacin de la sustancia qumica por la clula
mensajera.
Transporte hacia la clula diana.
Deteccin del mensajero por protenas receptoras especficas.
Activacin de fenmenos intracelulares.
Eliminacin de la seal.

4. Explique que necesitan las rutas metablicas para producir energa o

sintetizar productos finales.
Un Sustrato que conduzca y de inicio a las reacciones qumicas de las
rutas metablicas, energa necesario para poder iniciar la ruta,
adems de las enzimas que intervienen y muy importante reguladora.
5. Explique los destinos metablicos del piruvato, indicando cuales de
ellas se dan en un ambiente aerbico o anaerbico.

En presencia de oxigeno las dos molculas de piruvatos se convierten

en dos molculas en dos molculas de acetil CoA por la enzima
complejo piruvato deshidrogenasa que irn al ciclo de Krebs

En ausencia de oxigeno las dos molculas de piruvato se convierten

en dos molculas de lactato por la enzima lactato deshidrogenasa.

Universidad Nacional del Callao Noviembre del 2017, Callao Per

PRACTICA N7 Glucolisis

Bibliografa:

http://es.calameo.com/books/00345705114ee33b7368c

https://es.slideshare.net/apaulinamv/8-gliclisis-y-fermentacin

http://b-log-ia20.blogspot.pe/2010/02/glucolisis-y-fermentacion.html

https://www.clubensayos.com/Ciencia/Glucolisis/1795748.html

Universidad Nacional del Callao Noviembre del 2017, Callao Per