GUA DE PRCTICAS DE LABORATORIO

INSTITUCIN: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA: LABORATORIO CLNICO E HISTOPATOLGICO

PERODO ACADMICO: ABRIL AGOSTO 2017

DOCENTE: Mgs. XIMENA ROBALINO
ASIGNATURA: HEMATOLOGA I
SEMESTRE: TERCERO
FECHA DE LA PRCTICA: NMERO DE LA PRCTICA: 2
8 de Mayo del 2017
HORA: 10:00 13:00 horas DURACIN: 3 HORAS

GRUPO N7

NOMBRE DE LOS ALUMNOS Orozco Coello Karla Lissete

PARTICPANTES
SERIE ROJA
TITULO DE LA UNIDAD:

RECUENTO DE ERITROCITOS
TEMA DE LA PRCTICA:

Aprender a realizar un recuento de Eritrocitos por milmetro cbico de sangre, interpretar

OBJETIVO GENERAL: el resultado, as como adiestrarse en el manejo de la cmara de Neubauer y la pipeta de
Thoma

Determinacin del nmero de eritrocitos presentes en un volumen determinado de sangre

OBJETIVOS ESPECFICOS: Aprender las tcnicas y el procedimiento para el recuento de hemates con sangre diluida.

Adquirir la destreza de contar eritrocitos con ayuda del piano contador de clulas.
FUNDAMENTO TERICO O CONTENIDO CIENTFICO:

ERITROCITOS
RECUENTO DE ERITROCITOS
Los procedimientos generales de recuento de eritrocitos incluyen la aspiracin de una cantidad muy exacta de sangre en una pipeta
escrupulosamente limpia. A continuacin se diluye hasta una determinada seale la misma pipeta con un lquido que es
anticoagulante e isotnico respecto a los eritrocitos. Despus de efectuar la adecuada mezcla, la solucin resultante se coloca en
una cmara de recuento muy limpia (hemocitmetro) y se cubre con un cubreobjetos standarizado pticamente plano y
limpio. La cantidad de eritrocitos se cuenta sobre la platina de un microscopio de luz.
HEMOCITMETRO O CMARA CUENTA GLBULOS
Es un instrumento de vidrio compuesto por dos cmaras de recuento separadas por un surco horizontal y limitadas a cada lado
por un canal vertical. El mejor modo de mantenerlos limpios es con agua, secarlos con un pao blando y guardarlos en alcohol
absoluto, cuando se va a utilizar se secan cuidadosamente con un pao blando.
PIPETAS DILUTORAS
Son de vidrio tubulares y su calibracin es muy cuidadosa. Si se precisa pueden calibrarse por mtodos gravimtricos o
colorimtricos.
La sangre aspirada hasta la seal 0.5 y diluida hasta la seal 101 hace una dilucin de 0.5 partes en 100(o sea 1:200) en la zona
de la ampolla de la pipeta, porque el contenido libre de las clulas de la parte capilar no participa en el proceso de dilucin.
LIQUIDO DE DILUCIN
Existen diversos tipos de lquidos de dilucin utilizados en el laboratorio. Los ms comunes son los lquidos de Gower y de Hayem.
TCNICA DE RECUENTO DE ERITROCITOS
1. Se mantiene horizontalmente la pipeta y se introduce una muestra de sangre en la misma exactamente hasta la seal 0,5. Un
exceso de sangre se puede reducir hasta que descienda a la seal 0.5 tocando ligeramente el extremo de la pipeta con el
dedo. Es preciso eliminar cualquier resto de sangre que est por fuera de la pipeta.
2. La pipeta se coloca inclinada (45) y se gira ligeramente a medida que se llena hasta cerca de la seal 101. A continuacin se
coloca verticalmente y se termina de llenar con el lquido de dilucin hasta la seal 101.
3. Se quita con cuidado el tubo de aspiracin de goma y la pipeta se sujete entre el dedo pulgar y medio colocado en ambos
extremos, sometindola a una agitacin horizontal e inclinada durante 2 a 3 minutos. Ms cmodo resulta obturar los extremos
con unos tapones de goma y colocarla en un agitador; a tal fin sirve la perla de vidrio situada en la ampolla de la pipeta, que
facilita una mezcla fcil, y rpida de la solucin con la muestra de sangre.
 4. Despus de la agitacin, se desprecian las 4 a 8 primeras gotas de cada pipeta para eliminar el lquido del capilar que no
contiene hemates. A continuacin se carga el hemocitmetro.
5. Se coloca el cubreobjetos exactamente encima de las cmaras de recuento. La pipeta, parcialmente vaca, se sujeta como si
fuese un lpiz. Mediante el dedo ndice se controla el flujo de lquido colocndolo en el extremo prximo a la ampolla; el extremo
de la pipeta se coloca en el borde que une el cubreobjetos y la cmara. Se disminuye la presin del dedo ndice y el lquido
pasa entre el cubreobjetos y el hemocitmetro por atraccin capilar hasta que se llena la cmara. No debe haber burbujas y
los surcos adyacentes no deben contener lquido.
6. Se coloca el hemocitmetro en la platina del microscopio y se deja 3 minutos para que las clulas se distribuyan. Utilizando un
objetivo de 10 x se localiza el cuadrado grande central y se comprueba que las clulas estn uniformemente distribuidas.
Despus se pasa al objetivo de 40 x y con la luz reducida se cuentan las clulas en 5 de los 25 cuadrados pequeos situados
en el gran cuadrado central; es decir, los 4 cuadrados pequeos externos y uno central. Como cada cuadrado pequeo est
limitado por dobles lneas (en el rayado modificado de Neubauer) y cada uno contiene 16 cuadrados ms pequeos, se cuenta
un total de 80 cuadrados ms pequeos. Las clulas que estn situadas tocando las lneas que limitan los bordes superior e
izquierdo de cada cuadrado ms pequeo se incluyen en el recuento y se excluyen las de los lmites inferior y derecho. Se
comienza a contar por el cuadrado pequeo superior izquierdo externo y a continuacin el superior derecho externo, el inferior
derecho externo, el inferior izquierdo externo y finalmente el central. En los 16 cuadrados ms pequeos que contienen los
cuadrados menores, se inicia el recuento de izquierda a derecha contando los cuatro primeros cuadrados pequeos, y luego
de derecha a izquierda los cuatro cuadrados de lalnea inferior, y as sucesivamente. Se anota por separado el nmero de los
hemates de cada grupo de 16 cuadrados y se suman los resultados.
Clculo y trascripcin de los resultados. El recuento eritrocitario total slo se calcula exactamente cundo se tienen en cuenta
las dimensiones del espacio hemnocitmetro cubreobjetos y las diluciones de la pipeta. Es decir, que se calcula mejor el nmero
de hemates por milmetro cbico de sangre cuando se tienen en cuenta el rea contada, la profundidad de la cmara y la dilucin,
segn la frmula siguiente:

ERITROCITOS: Nmero de eritrocitos contados x 400 x 200 x 10

80

rea total de la cmara: 400 Dilucin: 200

Profundidad o altura de la cmara: 10 rea contada: 80

ERITROCITOS x mm cbico: Nmero de eritrocitos contados x 10.000

REPORTE: Eritrocitos en millones x mm cbico de sangre total
Si el paciente est muy anmico o si se han contado menos de 400 clulas debe disminuirse la dilucin hasta 1:100 llenando la
pipeta con sangre hasta la seal 1,0en lugar de hasta la seal 0,5.
Si el paciente est intensamente policitmico o se han contado ms de 600 clulas, debe aumentarse la dilucin de la sangre hasta
1:500 o 1:333 llenando la pipeta con sangre hasta la seal 0,2 o 0,3 respectivamente.

MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS MUESTRA: SANGRE DESFIBRINADA Y SANGRE

ANTICOAGULADA

Cmara de Neubauer,
Microscopio
Agitador automtico de pipetas
Piano contador de clulas
Pipeta de Thoma
Lquido de dilucin Hayem,
Papel absorbente
Gradilla
Asorbedor de goma
Tubos de ensayo pequeos
Pipetas automticas de 1000 ul , 100 ul, 10 ul.

PROCEDIMIENTO:

a) 1. La sangre es recogida en un tubo lila con EDTA

b) 2. Colocar el tubo de plstico y la boquilla para aspirar en la pipeta
c) 3. Llenar la pipeta de glbulos rojos con sangre hasta la marca 0.5 para realizar una dilucin de 1/200, y si se carga hasta 1, la
dilucin ser 1/100. Limpiar la punta con gasa o papel absorbente. Si la sangre se pasa de la marca, se puede absorber con gasa
el excedente
d) 4. Introducir la pipeta en el tubo que contiene el diluyente (Hayem) y llenar de lquido de dilucin hasta la marca de 101
e) 5. Se tapa la punta y se coloca en un rotador automtico o se hace rotar manualmente de 2-3 minutos
f) 6. Destapar la pipeta y descartar 5 a 8 gotas del tallo, luego colocar una gota pequea cerca de un extremo de la cmara para que
por capilaridad se llene exactamente. Dejar 2 minutos que los eritrocitos se sedimenten
g) 7. Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x. luego con el objetivo de 40x contar sobre el cuadro grande
central de la cmara solo en 5 cuadrados pequeos: uno central y cuatro angulares
h) 8. En el recuento se incluyen las clulas que cubren o tocan por dentro o por fuera las lneas limitantes superior e izquierda en el
cuadro pequeo de recuento y no se consideran los que estn en los lmites inferior y derecho.
GRFICOS Y RESULTADOS:

conteo en zig-zag cmara

de Neubauer Cuadrcula de la cmara
de Neubauer

Introduccion de la muestra para Reencuento de eritrocitos

la camaraa de Neubauer
Reencuento de
CONCLUSIONES Eritrocitos

Aprendimos a realizar un recuento de Eritrocitos por milmetro cbico de sangre, adems de reconocer a un eritrocito e
interpretar el resultado,
Determinamos el nmero de eritrocitos presentes en un volumen determinado de sangre con ayuda de la cmara de
Neubauer y el piano contador de clulas.
Adquirimos la destreza de contar eritrocitos con ayuda del piano contador de clulas eritrocitarias de una manera mas
rpida y conveniente para evitar equivocaciones.

VALORES DE REFERENCIA: Completar tabla por edad y gnero

VALORES DE REFERENCIA
(Millones de clulas/mm3)
Hombres:..4 500 000-5 500 000
Mujeres:....4 000 000-5 000 000
Nios (4 aos):.........................4 200 000-5 200 000
Lactantes (1-6 meses):.....3 800 000-5 200 000
Recin nacidos:..5 000 000-6 000 000
PREGUNTAS:
1.- QUS LA POLIGLOBULIA.-
Trastorno en el cual aumenta la proporcin de glbulos rojos por volumen sanguneo, debido a un aumento del nmero de
eritrocitos o a una disminucin del plasma sanguneo o policitemia absoluta o relativa
2.- QU ES LA ANEMIA.-
Sndrome que se caracteriza por la disminucin anormal del nmero o tamao de los glbulos rojos que contiene la
sangre o de su nivel de hemoglobina.
3.- QUS ES LA HEMOCONCENTRACIN.-
Aumento de la viscosidad de la sangre sin que se haya producido un aumento absoluto del nmero de clulas, sino
por una disminucin del volumen plasmtico.
4.- QU ES LA HEMODILUCIN.-
Disminucin de la viscosidad de la sangre debido a una reduccin del nmero de corpsculos celulares y de la
cantidad de protenas en la sangre.

BIBLIOGRAFA:
GARCA ESPINOZA, Benjamn. Hematologa II, Citologa, Fisiologa y Patologa de hemates y leucocitos. Paraninfo

VIVES CORRONS, Joan Llus. Manual de Tcnicas en Laboratorio de Hematologa. Tercera edicin. Masson. 2006

Lic. Franklin Ramos

MsC. Patricia Mio Orbe Mgs. XIMENA ROBALINO RESPONSABLE DEL
DIRECTOR DE CARRERA DOCENTE LABORATORIO
 LABORATORIO CLNICO UNACH

Avenida Antonio Jos de Sucre km. 1 1/2 va Guano Tel. 032367133

Riobamba- Ecuador

Nombre: Granda Fernndez Daniela Ahda

Fecha: 30 de Junio del 2017

Edad: 19 aos

Cdigo: 011

RESULTADO

Biometra hemtica

Prueba Resultados Unidad Valor

Referencial

Eritrocitos 4,7 millones/ml Millones/ml 4,2 - 5,2

millones/ml

F:

Analista