78

UJI DAYA HAMBAT EKSTRAK KULIT BATANG Rhizophora mucronata

TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila, Streptococcus
agalactiae DAN JAMUR Saprolegnia sp. SECARA IN VITRO

(Inhibition Test of Rhizophora mucronata Bark Extract against Aeromonas

hydrophila Bacteria Growth, Streptococcus agalactiae, and fungus Saprolegnia sp.
In Vitro)
1
Dedi Pradana, 2Dwi Suryanto dan 3Yunasfi
1
Mahasiswa Program Studi Manajemen Sumberdaya Perairan, Fakultas Pertanian,
Universitas Sumatera Utara, Medan, Indonesia 20155
2
Departemen Biologi, Fakultas MIPA, Universitas Sumatera Utara, Medan, Indonesia
20155
3
Program Studi Manajemen Sumberdaya Perairan, Fakultas Pertanian, Universitas
Sumatera Utara, Medan, Indonesia 20155

ABSTRACT

This study was aimed to determine antimicrobial potential of stem bark extract
of Rhizophora mucronata against bacterial pathogens i.e. Aeromonas hydrophila,
Streptococcus agalactiae and fungus Saprolegnia sp. and to determine the extract
toxicity to Artemia Salina Leach. Extraction was done by a single maceration using
methanol, ethyl acetate and n-hexane. Phytochemical test was conducted to all extracts.
Toxicity test was conducted using Brine Shrimp Lethality Test. Antimicrobial activity
test was done using the agar diffusion method. Phytochemical test of stem bark extract
of Rhizophora mucronata showed that the extract contained of alkaloid, tannin,
steroid/terpenoid and saponin. All of the extact of Rhizophora mucronata were toxic to
A. salina. The result showed that ethyl acetate extract was the most toxic. Antimicrobial
test results showed that ethyl acetate extract of stem bark of R. mucronata was broad
antimicrobial spectrum because it was able to inhibit the growth of all microbes.

Keywords: Antimicrobial activity, Aeromonas hydrophila, Rhizophora mucronata,

Streptococcus agalactiae, Saprolegnia sp.

1. PENDAHULUAN penyakit bakterial yaitu penyakit Motil

Indikator keberhasilan dalam Aeromonas Septicemia (MAS) atau
usaha budidaya ikan adalah kondisi penyakit bercak merah yang disebabkan
kesehatan ikan. Kesehatan ikan yang bakteri Aeromonas hydrophila sebagai
menurun yang didukung dengan bakteri patogen Gram negatif dan
lingkungan yang buruk akan penyakit Streptococcosis yang
menimbulkan penyakit pada ikan disebabkan oleh Streptococus
budidaya yang dapat merugikan usaha agalactiae sebagai bakteri patogen
tersebut. Penyakit pada ikan budidaya Gram positif. Penyakit mikotik
diantaranya terdiri atas penyakit diantarannya disebabkan oleh
bakterial yang timbul akibat serangan Saprolegnia sp. yang menyebabkan
bakteri dan penyakit mikotik yang penyakit saprolegniasis pada ikan
timbul akibat serangan jamur. Contoh budidaya (Kordi, 2004).

Penanggulangan penyakit dapat
dilakukan dengan cara pencegahan
diantaranya dengan menciptakan
lingkungan steril dan pemberian pakan
yang bernilai gizi baik. Pada ikan yang
terserang penyakit, biasanya dilakukan
pengobatan dengan memberikan bahan
kimia atau sejenisnya (Wiyanto, 2010).
Penggunaan bahan kimia seperti
antibiotik sering menimbulkan
resistensi bakteri dan fungi, mencemari
lingkungan bahkan residu pada ikan
yang dapat membahayakan konsumen.
Menurut Kordi (2012), tumbuhan
mangrove mengandung senyawa seperti
alkaloid, flavonoid, fenol, terpenoid,
steroid dan saponin yang dapat
digunakan antara lain untuk racun ikan,
antimikrobial, anti kanker dan anti
leukimia.
Penelitian terhadap tumbuhan
mangrove famili Rhizophoraceae, di
antaranya pada spesies R. mucronata
belum banyak dilaporkan, terutama
kajian senyawa kimia kulit batangnya
yang berpotensi sebagai antimikroba
untuk penyakit ikan. Untuk mengetahui
potensi tersebut maka perlu penelitian
awal untuk melihat apakah kulit batang
R. mucronata memiliki zat aktif atau
tidak yang dapat dilakukan diantaranya
menggunakan metode Brine Shrimp
Lethality Test. Menurut Meyer dkk.
(1982), Brine Shrimp Lethality Test
(BSLT) merupakan suatu pengujian
atau skrining awal untuk menentukan
apakah suatu senyawa mempunyai
kandungan bioaktif menggunakan larva
Artemia salina Leach. Kematian A.
salina Leach digunakan sebagai
parameter untuk menunjukkan apabila
mortalitas senyawa tersebut tinggi,
maka senyawa bioaktif tersebut
mempunyai potensi sebagai kandidat
obat di masa datang. Suatu zat
dikatakan aktif atau toksik bila nilai
LC50 < 1000 ppm. Selanjutnya ekstrak
kulit batang R. mucronata diujikan
79
terhadap bakteri A. hydrophila, S.
agalactiae dan jamur Saprolegnia sp.
untuk melihat kemampuan senyawa
bioaktif ekstrak kulit batang R.
mucronata dalam menghambat ketiga
mikroba tersebut.
2. METODE PENELITIAN
Waktu dan Tempat
Penelitian dilaksanakan dari
bulan September Nopember 2013.
Ekstraksi dan uji fitokimia kulit batang
R. mucronata di Laboratorium Kimia
Bahan Alam, Fakultas Matematika dan
Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas
Sumatera Utara. Uji aktivitas antibakteri
di Stasiun Karantina Ikan Pengendalian
Mutu dan Keamanan Hasil Perikanan
Kelas I Medan II. uji Brine Shrimp di
Unit Pelayanan Teknis (UPT) Budidaya
Ikan, Dinas Perikanan dan Kelautan
Kota Medan.
Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam
penelitian ini adalah pisau, timbangan
analitik, stoples kaca, gelas ukur,
corong, blender, erlenmeyer, vortex,
aluminium foil, rotary evaporator,
spatula, cawan petri, karet gelang, pipet
tetes, tabung reaksi, rak tabung reaksi,
hot plate, ayakan, beaker glass, cotton
bud, autoclave, laminar air flow,
refrigerator/lemari es, sprayer, api
bunsen, jarum ose, pinset, magnetic
stirrer, tisu, kapas, kertas cakram,
mikropipet, jangka sorong, inkubator,
waterbath (penangas air), botol vial,
plat TLC, kamera digital dan alat tulis.
Adapun bahan yang digunakan
adalah pelarut n-heksana (non polar),
etil asetat (semi polar), metanol (polar),
kulit batang R. mucronata, akuades
steril, alkohol 70%, spirtus, biakan A.
hydrophila diperoleh dari Balai
Karantina Ikan Pengendalian Mutu dan
Keamanan Hasil Perikanan Kelas I
Medan II, S. agalactiae diperoleh dari
Balai Penelitian dan Pengembangan

Budidaya Air Tawar Bogor dan jamur
Saprolegnia sp. diperoleh dari
Laboratorium Mikrobiologi, Fakultas
MIPA Universitas Sumatera Utara, kista
A. salina, besi (III) klorida (FeCl3) 1%,
cerium sulfat (CeSO4) 1%, pereaksi
dragendorf, pereaksi bouchardat,
pereaksi mayer, pereaksi wagner,
standar triterpenoid dan -sitosterol,
HCl 2 N, air laut, Dimethyl sulfoxide
(DMSO), Potato Dextrose Agar (PDA),
Tryptic Soy Agar (TSA), kloramfenikol,
nistatin, larutan Mc. Farland 0.5,
larutan NaCl 0,9 %.
Ekstraksi Kulit Batang R. mucronata
Kulit batang tumbuhan R.
mucronata dikumpulkan sebanyak 9 kg
dari pohon berdiameter lebih dari 30 cm
di kawasan hutan mangrove desa Denai
Kuala, Kec. Pantai Labu, Kab. Deli
Serdang. Kulit dicuci dan dipotong
kecil-kecil kemudian dikering-anginkan
selama 7 hari. Kulit batang yang sudah
kering dihaluskan dengan blender dan
diayak hingga diperoleh serbuk yang
halus dan seragam sebanyak 1,47 kg
kemudian disimpan ke dalam stoples
kaca.
Langkah selanjutnya ekstraksi
bahan aktif dengan metode maserasi
tunggal sesuai dengan kepolarannya.
Serbuk sampel masing-masing
sebanyak 300 g direndam dengan 1 l
pelarut etil asetat dan 1 l pelarut
metanol dan sebanyak 870 g direndam
dengan 1,5 l n-heksana di dalam
erlenmeyer kemudian ditutup dengan
alumunium foil selama 24 jam sambil
sesekali diaduk. Setelah itu sampel
disaring dengan kapas sehingga
diperoleh filtrat dan ampas. Filtrat yang
diperoleh dievaporasi pelarutnya
menggunakan rotary evaporator
sehingga diperoleh ekstrak kental yang
kemudian dipekatkan dengan penangas
air (water bath) agar seluruh pelarutnya
habis menguap. Ekstrak tersebut
80
kemudian disimpan di dalam botol vial
tertutup.
Uji Fitokimia
Analisis fitokimia dilakukan
berdasarkan Depkes (2009) yang diacu
oleh Tirtana dkk. (2013) sebagai
berikut:
a. Saponin
Larutan ekstrak sebanyak 2 ml
ditambahkan akuades, kemudian
dikocok kuat-kuat. Senyawa saponin
akan menghasilkan busa setinggi 1 10
cm yang stabil dan tidak kurang dari 10
menit. Pada penambahan 1 tetes HCl 2
N, busa tidak hilang.
b. Steroid/ triterpenoid
Sebanyak 2 ml larutan ekstrak
dimasukkan ke dalam tabung reaksi
kemudian ditambah dengan pereaksi
Lieberman-Burchard. Senyawa steroid
menimbulkan warna hijau dan
triterpenoid menimbulkan warna ungu.
Untuk pengujian menggunakan CeSO4
1% dilakukan dengan metode Thin
Layer Chromatography (TLC). Plat
TLC diberi tanda sesuai dengan nama
pelarut yang digunakan dalam ekstraksi.
Plat TLC kemudian dibagi menjadi 3
bagian untuk diteteskan ekstrak sampel,
standar triterpenoida dan -sitosterol.
Selanjutnya tetesan ekstrak tersebut
disemprot dengan penampak noda
(CeSO4 1%) dan dipanaskan di atas hot
plate. Selanjutnya diamati perubahan
warna yang terjadi dan bandingkan
dengan standar triterpenoida dan -
sitosterol.
c. Senyawa golongan fenolik (tanin
dan flavanoid)
Larutan ekstrak sebanyak 2 ml
dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan
ditambahkan 2 tetes pereaksi FeCl3 1%.
Tanin akan menghasilkan warna biru
atau hitam kehijauan. Untuk senyawa
flavonoid maka sampel dengan pelarut
etil asetat sebanyak 2 ml dimasukkan ke
dalam tabung reaksi dan di tambahkan 2
tetes pereaksi FeCl3 1%. Larutan positif

mengandung flavonoid apabila terjadi
perubahan warna menjadi warna biru
atau hitam kehijauan.
d. Alkaloid
Larutan ekstrak sebanyak 2 ml
dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan
diperiksa adanya senyawa alkaloid
dengan cara:
1. Larutan ekstrak ditambah 2 tetes
pereaksi Dragendorf. Hasil positif
jika terbentuk endapan berwarna
merah jingga atau cokelat muda
sampai kuning/oranye.
2. Larutan ekstrak ditambah 2 tetes
pereaksi Bouchardat. Hasil positif
jika terbentuk endapan berwarna
cokelat sampai hitam.
3. Larutan ekstrak ditambah 2 tetes
pereaksi Mayer. Hasil positif jika
terbentuk endapan berwarna
putih/kuning.
4. Larutan ekstrak ditambah 2 tetes
pereaksi Wagner. Hasil positif jika
terbentuk endapan berwarna
cokelat.
Uji Aktivitas Antibakteri dan
Antifungi
Bakteri A. hydropila dan S.
agalactiae diremajakan masing-masing
dengan cara menggoreskan jarum ose
yang mengandung bakteri A. hydropila
pada 1 cawan petri yang berisi media
TSA dan S. agalactiae pada petri yang
lainnya secara aseptis. Setelah itu
dinkubasi selama 24 48 jam pada suhu
37oC.
Untuk peremajaan jamur
Saprolegnia sp. dilakukan dengan
mengambil potongan kecil miselium
menggunakan blade dan menanamnya
secara aseptis pada media PDA. Setelah
itu diinkubasi pada suhu 27 oC selama 2
3 hari.
Bakteri yang telah diremajakan
diambil biakannya menggunakan jarum
ose dan disuspensikan ke dalam tabung
reaksi berisi 3 ml larutan NaCl 0,9%.
Suspensi yang terbentuk disetarakan
81
dengan larutan baku Mc. Farland 0.5
yang ekuivalen dengan suspensi sel
bakteri dengan konsentrasi 1,5 108
cfu/ml (Andrews, 2008).
Konsentrasi larutan uji yang
digunakan adalah 20%, 40% dan 60%
(b/v). Konsentrasi 60% dibuat dengan
cara menimbang ekstrak kulit batang R.
mucronata sebanyak 0,6 g yang
dilarutkan dengan 1 ml DMSO. Larutan
dengan konsentrasi 40% dan 20%
dibuat dengan cara pengenceran dari
konsentrasi 60% menggunakan 0,5 ml
DMSO. Kontrol negatif digunakan
DMSO dan kontrol positif digunakan
kloramfenikol (30 g/ml) untuk bakteri
dan nistatin (100 g/ml) untuk jamur.
Pengujian antibakteri dilakukan
dengan metode disc diffusion (tes
Kirby-Bauer). Cutton bud steril
dimasukkan ke dalam tabung reaksi
yang berisi suspensi bakteri kemudian
dioleskan pada media TSA. Setelah
olesan bakteri mengering, kertas cakram
(diameter 6 mm) yang telah direndam
ekstrak selama 1 jam pada berbagai
konsentrasi ditiriskan dan diletakkan di
atas media yang berisi olesan bakteri
dengan sedikit ditekan agar cakram
menempel pada permukaan media
(Gambar 1). Selanjutnya diinkubasi
pada suhu 37oC selama 24 48 jam.
Uji terhadap Saprolegnia sp.
dilakukan dengan cara mengambil
potongan kecil miselium dengan bentuk
kubus dan menanamkannya di media
PDA dengan posisi di tengah. Kertas
cakram yang telah berisi ekstrak dengan
berbagai konsentrasi diletakkan di
sekitar potongan jamur tersebut dengan
jarak yang sama (Gambar 2). Setelah itu
diinkubasi pada suhu 27oC selama 2 3
hari.
Pengukuran Zona Hambat
Menurut Pratiwi (2008),
aktivitas antibakteri dinyatakan positif
apabila terbentuk zona hambat berupa
zona bening disekeliling kertas cakram.

Diameter zona hambat dideskripsikan
dengan Gambar 1 di bawah ini:
a
c
b dan 10 ppm dibuat dengan memipet 50
Gambar 1. Perhitungan diameter zona
hambat antibakteri.
Keterangan:
a = Diameter kertas cakram (6 mm)
b = Diameter zona hambat yang
terbentuk (mm)
c = Daerah yang ditumbuhi bakteri
Aktivitas antifungi ditentukan
dengan rumus uji antagonis yaitu
dengan mengukur jari-jari pertumbuhan
hifa normal dikurang dengan jari-jari
pertumbuhan hifa yang terhambat oleh
ekstrak (Suryanto dkk., 2011).
a antibakteri data hasil pengukuran zona
y x b
c
d dengan metode deskipstif dalam bentuk
Gambar 2. Perhitungan zona hambat
jamur Saprolegnia sp.
Keterangan:
a = Pertumbuhan koloni jamur
b = Zona hambat ekstrak R. mucronata
terhadap koloni jamur
c = Blank disc yang telah berisi ekstrak
d = Letak koloni jamur yang ditanam
x = Koloni jamur yang terhambat
pertumbuhannya (mm)
y = Koloni jamur yang pertumbuhannya
normal (mm)
y x = Jari-jari zona hambat (mm)
Uji Toksisitas Ekstrak dengan
Metode Brine Shrimp Lethality Test
Kista A. salina Leach ditetaskan
di dalam bejana yang sudah diisi 3 l air
laut buatan bersalinitas 35 ppt. Bejana
dilengkapi dengan alat aerasi dan kista
dibiarkan menetas pada suhu 25 oC,
82
setelah 48 jam hewan uji siap untuk
digunakan.
Larutan induk dibuat dengan
melarutkan 20 mg sampel dalam 2 ml
DMSO. Larutan uji 1000 ppm dibuat
dengan memipet larutan induk sebanyak
500 l, sedangkan larutan uji 100 ppm
l dan 5 l dari larutan induk. Pada
setiap konsentrasi uji ditambahkan air
laut 2 ml kemudian masukkan 10 ekor
A. salina ke dalam setiap vial dan
cukupkan volumenya sampai 5 ml
dengan air laut. Masing-masing
konsentrasi uji dibuat 3 ulangan
termasuk kontrol positif (DMSO) dan
kontrol negatif (air laut). Setelah 24 jam
dilakukan pengamatan terhadap
kematian A. salina.
Analisis Data
Pada pengujian aktivitas
bening dirata-ratakan dan dianalisis
tabel dan gambar. Pengaruh pemberian
ekstrak kulit batang R. mucronata pada
berbagai konsentrasi uji terhadap
toksisitas A. salina dihitung dengan
analisis probit untuk menetukan LC50.
Perhitungan LC50 dilakukan dengan
persamaan regresi linear y = a + bx
yang didapatkan dari grafik hubungan
antara log konsentrasi dengan mortalitas
probit menggunakan program Microsoft
excel.
3. HASIL
Uji fitokimia
Dari hasil uji fitokimia pada
masing-masing pelarut diketahui bahwa
ekstrak kulit batang R. mucronata
mengandung senyawa metabolit
sekunder seperti yang terlihat pada
Tabel 1 dan Gambar 3 berikut ini:
 83

Tabel 1. Hasil identifikasi kandungan fitokimia pada ekstrak kulit batang tumbuhan
Rhizophora mucronata
Kode METABOLIT SEKUNDER
Sampel Fenolik / Terpen / Steroid Alkaloid Saponin
Flavonoid / Tanin
Pereaksi Hasil Pereaksi Hasil Pereaksi Hasil Pereaksi Hasil
H FeCl3 (-) Liberman- (-) Bouchardat (-) Ekstrak (-)
Bouchard Wagner (-) + Aqua
Cerium sulfat (-) Mayer (-) + HCl
(CeSO4)/TLC Dragendorf (-)
ET FeCl3 (-) Liberman- (+) Bouchardat (-) Ekstrak (+)
Bouchard Wagner (-) + Aqua
Cerium sulfat (+) Mayer (+) + HCl
(CeSO4)/TLC Dragendorf (+ +)
M FeCl3 (+) Liberman- (+) Bouchardat (-) Ekstrak (+ +)
Bouchard Wagner (-) + Aqua
Cerium sulfat (+) Mayer (-) + HCl
(CeSO4)/TLC Dragendorf (+ +)
Keterangan :
H = Ekstrak dengan pelarut n-Heksana (+ +) = Kuat
ET = Ekstrak dengan pelarut Etil asetat (+) = Sedang
M = Ekstrak dengan pelarut Metanol (-) = Tidak ada

(a) (b) (c) (d) (e)

Gambar 3. Hasil uji fitokimia; (a) ekstrak metanol (kiri) dan ekstrak etil asetat (kanan) positif saponin (b)
ekstrak metanol (kiri) dan ekstrak etil asetat (kanan) positif alkaloid dengan pereaksi
Dragendorf (c) ekstrak metanol positif tanin (d) ekstrak etil asetat positif alkaloid dengan
pereaksi Mayer (e) ekstrak metanol dan etil asetat positif steroid/terpen pada uji TLC.

Ekstraksi menggunakan pelarut n-heksana, etil

Ekstraksi dilakukan dengan asetat dan metanol. Hasil ekstraksi kulit
metode maserasi/perendaman serbuk batang R. mucronata tersaji dalam
kulit batang R. mucronata Tabel 2 di bawah ini.

Tabel 2. Hasil ekstraksi kulit batang tumbuhan Rhizophora mucronata.

No. Hasil Metanol Etil asetat n-Heksana
1. Berat sampel (g) 300 300 870
2. Berat ekstrak (g) 5,0505 1,2183 0,87
3. Bentuk Pasta Pasta kering Pasta agak cair
4. Warna Merah kehitaman Cokelat kemerahan Hijau kekuningan

Uji Toksisitas dengan Metode Brine heksana dari kulit batang R. mucronata
Shrimp Lethality Test disajikan pada Tabel 3 berikut ini:
Data hasil uji BSLT ekstrak etil
asetat, ekstrak metanol dan ekstrak n-
 84

Tabel 3. Data hasil uji BSLT ekstrak etil asetat, ekstrak metanol dan ekstrak n-heksana dari
kulit batang Rhizophora mucronata
Perlakuan Konsentrasi Total Jumlah Persen LC50
(ppm) Populasi Kematian Mortalitas (%) (ppm)
Etil asetat 1000 30 30 100 21,06
100 30 20 66,66
10 30 13 43,33
Metanol 1000 30 30 100 24,59
100 30 16 53,33
10 30 13 43,33
N-heksana 1000 30 30 100 27,38
100 30 19 63,33
10 30 10 33,33

Uji aktivitas antimikroba hambat ekstrak kulit batang R.

Aktivitas antibakteri mucronata terhadap pertumbuhan
ditunjukkan dengan terbentuknya zona bakteri A. hydrophila dan bakteri S.
bening di sekitar kertas cakram. Zona agalactiae disajikan pada Tabel 4,
bening dan Rata-rata diameter zona Gambar 4 dan Gambar 5 di bawah ini.

Tabel 4. Diameter rata-rata zona hambat ekstrak kulit batang R. mucronata terhadap bakteri
A. hydrophila dan bakteri S. Agalactiae
Bakteri Ekstrak dengan pelarut Rata-rata diameter zona hambat (mm)
60% 40% 20% Kontrol
A. hydrophila Metanol 0 0 0
N-heksana 10,91 7,36 0
Etil asetat 10,58 7,65 7,21
Kloramfenikol 34,88
DMSO 0
S. agalactiae Metanol 15,5 14,2 14,45
N-heksana 0 0 0
Etil asetat 23,81 18,56 19,25
Kloramfenikol 43,4
DMSO 0

(a) (b) (c) (d) (e)

Gambar 4. Hasil pengujian antibakteri terhadap bakteri A. hydrophila; (a) ekstrak dengan pelarut n-
heksana (b) ekstrak dengan pelarut metanol (c) ekstrak dengan pelarut etil asetat (d) kontrol
positif/kloramfenikol (e) kontrol negatif (DMSO)
 85

(a) (b) (c) (d) (e)

Gambar 5. Hasil pengujian antibakteri terhadap bakteri S. agalactiae; (a) ekstrak dengan pelarut n-
heksana (b) ekstrak dengan pelarut metanol (c) ekstrak dengan pelarut etil asetat (d) kontrol
positif/kloramfenikol (e) kontrol negatif (DMSO)

Daya hambat ekstrak kulit hifa jamur yang terhambat oleh ekstrak.
batang R. mucronata terhadap Jari-jari zona hambat rata-rata ekstrak
pertumbuhan jamur Saprolegnia sp. kulit batang R. mucronata terhadap
dapat diketahui dengan menghitung jamur Saprolegnia sp. dapat dilihat
jari-jari pertumbuhan normal hifa jamur pada Tabel 5 dan Gambar 6 di bawah
dikurangi dengan jari-jari pertumbuhan ini.

Tabel 5. Zona hambat rata-rata ekstrak kulit batang R. mucronata terhadap jamur Saprolegnia sp.
Hari ke Konsentrasi Zona hambat (mm) ekstrak R. mucronata dengan
berbagai pelarut
Metanol N-heksana Etil asetat Nistatin DMSO
1 60% 4,4 1 4
40% 3,4 0 3,7
20% 3,4 0 3
Kontrol 2 0
2 60% 21 2,6 21,7
40% 20,6 2,6 20
20% 19,6 1,3 19,4
Kontrol 2 0
3 60% 19 0 30,7
40% 8,7 0 29,4
20% 4,4 0 20
Kontrol 0 0

(a) (b) (c) (d) (e)

Gambar 6. Hasil pengujian antibakteri terhadap jamur Saprolegnia sp.; (a) ekstrak dengan pelarut n-
heksana (b) ekstrak dengan pelarut metanol (c) ekstrak dengan pelarut etil asetat (d) kontrol
positif/kloramfenikol (e) kontrol negatif (DMSO).

Pembahasan kulit batang R. mucronata. Sedangkan

Dari hasil uji fitokimia (Tabel 1) untuk senyawa golongan fenolik hanya
diketahui bahwa senyawa alkaloid, terdapat pada ekstrak metanol.
terpen/steroid dan saponin terkandung Flavonoid dan tanin merupakan bagian
di dalam ekstrak metanol dan etil asetat dari senyawa fenolik. Diduga senyawa

fenolik yang tertarik dalam ekstrak
metanol adalah tanin karena pada saat
pengujian dengan FeCl3 1% ekstrak
metanol menunjukkan reaksi positif
dengan berubahnya warna ekstrak
menjadi hitam kehijauan. Marlinda dkk.
(2012) menyatakan dalam penelitiannya
bahwa ekstrak etanol biji buah alpukat
(Persea americana Mill.) positif
mengandung tanin yang ditandai
dengan perubahan warna ekstrak
menjadi hitam kehijauan setelah
penambahan 2 3 tetes larutan FeCl3
1% yang bereaksi dengan salah satu
gugus hidroksil yang ada pada senyawa
tanin.
Hasil positif alkaloid pada uji
Dragendorff ditandai dengan
terbentuknya endapan coklat muda
sampai kuning. Endapan tersebut terjadi
akibat atom nitrogen yang mempunyai
pasangan elektron bebas pada alkaloid
membentuk ikatan kovalen koordinat
dengan ion logam K+ dari kalium
tetraiodobismutat membentuk kompleks
kalium-alkaloid yang mengendap.
Sedangkan hasil positif alkaloid pada
uji Mayer ditandai dengan terbentuknya
endapan putih yang diperkirakan
nitrogen pada alkaloid bereaksi dengan
ion logam K+ dari kalium
tetraiodomerkurat (II) membentuk
kompleks kalium-alkaloid yang
mengendap (Marliana dkk., 2005).
Uji senyawa saponin diperoleh
hasil positif pada ekstrak metanol dan
etil asetat (Gambar 3 (a)). Saponin
adalah senyawa polar yang
keberadaanya dalam tumbuhan dapat
diekstraksi dengan pelarut semi polar
dan polar (Oesman dkk., 2010).
Senyawa terpen/steroid positif
terkandung di dalam ekstrak metanol
dan etil asetat yang ditandai dengan
perubahan warna ekstrak yang
menyerupai warna standar triterpenoida
dan -sitosterol. Diastuti dan Suwandri
(2009) melaporkan dalam penelitiannya
86
bahwa fraksi kloroform ekstrak metanol
kulit batang R. mucronata positif
terhadap terpenoid.
Uji fitokimia terhadap ekstrak n-
heksana didapatkan hasil yang negatif
(Tabel 1). Namun tidak menutup
kemungkinan terdapatnya senyawa-
senyawa nonpolar lainnya yang tidak
diujikan dalam penelitian ini. Seperti
yang diungkapkan oleh Lisdawati dkk.
(2006), bahwa senyawa metabolit
sekunder yang larut dalam pelarut
nonpolar adalah golongan minyak atsiri,
asam lemak tinggi, terpen/steroid dan
karotenoid.
Hasil ekstraksi menunjukkan
bahwa ekstrak metanol kulit batang R.
mucronata merupakan ekstrak dengan
hasil tertinggi sedangkan ekstrak n-
heksana merupakan ekstrak dengan
hasil terendah yang menggunakan
sampel dengan jumlah yang paling
banyak. Hapsari dan Partomuan (2010)
menyatakan bahwa banyaknya senyawa
kimia yang tersari ke dalam pelarut
sangat berpengaruh terhadap jumlah
ekstrak yang dihasilkan. Elya dkk.
(2009) menambahkan bahwa perbedaan
kandungan pada ekstrak disebabkan
karena perbedaan sifat kepolaran dari
golongan senyawa-senyawa kimia
tersebut.
Hasil pengujian toksisitas
menunjukkan bahwa semakin tinggi
konsentrasi yang diujikan semakin
banyak A. salina yang mati (Tabel 3).
Meyer dkk. (1982) menyatakan bahwa
hasil uji BSLT bersifat toksik/aktif
terhadap A. salina bila ekstrak
tumbuhan tersebut memiliki nilai LC50
< 1000 g/ml. Berdasarkan hal itu maka
hasil uji BSLT ekstrak kulit batang R.
mucronata semuanya dikategorikan
toksik/aktif terhadap A. salina dengan
toksisitas yang paling tinggi pada
ekstrak etil asetat dan yang paling
rendah pada ekstrak n-heksana.
Perbedaan tingkat toksisitas tersebut

disebabkan oleh senyawa metabolit
sekunder yang terkandung di dalam
ekstrak tersebut. Cahyadi (2009)
menjelaskan bahwa cara kerja senyawa-
senyawa tersebut adalah dengan
bertindak sebagai stomach poisoning
atau racun perut. Oleh karena itu, bila
senyawa-senyawa ini masuk ke dalam
tubuh larva, alat pencernaannya akan
terganggu. Meilani (2006)
menambahkan bahwa keadaan
membran kulitnya yang sangat tipis
memungkinkan terjadinya difusi zat
dari lingkungan yang mempengaruhi
metabolisme dalam tubuhnya.
Hasil uji aktivitas antimikroba
kontrol negatif (DMSO) terhadap
bakteri A. hydrophila dan bakteri S.
agalactiae tidak menunjukkan adanya
aktivitas antibakteri (zona bening/zona
keruh = 0 mm). Sementara zona hambat
yang terbentuk dari kontrol positif
(kloramfenikol) memiliki diameter yang
sangat besar yaitu sebesar 34,88 mm
untuk bakteri A. hydrophila dan 43,4
mm untuk bakteri S. agalactiae.
Berdasarkan zona hambat yang
terbentuk maka aktivitas antibakteri
dapat digolongkan menjadi beberapa
golongan yaitu antibakteri yang
aktivitasnya tergolong lemah (zona <
5mm), sedang (zona hambat antara 5
10 mm), kuat (zona antara 10 20 mm)
dan tergolong sangat kuat (zona hambat
> 20 mm) (Suryawiria, 1978 diacu oleh
Indriani, 2007). Dari kriteria tersebut
maka zona hambat yang terbentuk oleh
kontrol positif (kloramfenikol) termasuk
ke dalam golongan antibakteri yang
memiliki aktivitas sangat kuat.
Mekanisme penghambatannya yaitu
dengan cara memblokir ikatan asam
amino pada rantai peptide yang mulai
timbul pada uni 50S ribosom dengan
mengganggu kerja peptidyl transferase.
Akibatnya proses pertumbuhan dari
mikroorganisme terganggu (Brooks
dkk, 2005).
87
Aktivitas antibakteri ekstrak etil
asetat pada bakteri A. hydrophila
tergolong kuat (zona bening berkisar
antara 10 20 mm) sedangkan pada
bakteri S. agalactiae tergolong kuat
(konsentrasi 40% (18,56 mm) dan 20%
(19,25 mm)) sampai sangat kuat
(konsentrasi 60% (23,81 mm)).
Sementara ekstrak metanol hanya
mampu menghambat bakteri S.
agalactiae dengan aktivitas antibakteri
tergolong kuat karena berkisar antara 10
20 mm sedangkan ekstrak n-heksana
hanya mampu mengganggu aktivitas
pertumbuhan bakteri A. hydrophila
karena zona yang terbentuk bukan zona
bening melainkan zona keruh pada
konsentrasi 60% (10,91 mm) dan 40%
(7,36 mm) (Gambar 4).
Perbedaan sensitifitas
antibakteri juga disebabkan oleh
perbedaan dinding sel pada kedua
bakteri. Dinding sel bakteri Gram
positif relatif lebih sederhana, hanya
terdiri dari komponen peptidoglikan dan
asam teikoat (Mulyani, 2009). Menurut
Mulyadi (2013) rusaknya dinding sel
Gram positif yang menyebabkan
terhambatnya pertumbuhan bakteri
Gram positif karena berlaku prinsip like
dissolved like. Komponen peptidoglikan
yang terdiri atas protein dan karbohidrat
yang bersifat polar akan lebih mudah
untuk ditembus oleh senyawa polar.
Sementara bakteri Gram negatif
lebih banyak mengandung lipid, sedikit
peptigoglikan, membran luar berupa
bilayer. Membran luar terdiri dari
fosfolipid (lapisan dalam), dan
lipopolisakarida (lapisan luar) tersusun
atas lipid A, yang bersifat nonpolar. Hal
ini yang menyebabkan senyawa
antibakteri lebih sulit untuk masuk ke
dalam sel sehingga aktivitas
antibakterinya lebih lemah
dibandingkan pada bakteri Gram positif
(Dewi, 2010). Berdasarkan hal tersebut
maka zona keruh yang terbentuk pada

bakteri A. hydrophila dengan ekstrak n-
heksana diduga karena senyawa
nonpolar lainnya yang terkandung di
dalam ekstrak n-heksana bersifat
lipofilik dan hanya mampu merusak
membran luar A. hydrophila (lapisan
lipopolisakarida) yang tersusun atas
lipid A yang bersifat nonpolar. Keadaan
ini menyebabkan bakteri tersebut
mampu memperbaiki kembali
kerusakan membran luar dan
melanjutkan pertumbuhannya sehingga
menimbulkan zona keruh pada
pengujian tersebut.
Alkaloid memiliki kemampuan
sebagai antibakteri serta efek
farmakologi sebagai analgesik dan
anaestetik. Mekanisme penghambatan
bakteri oleh senyawa ini diduga dengan
cara mengganggu komponen penyusun
peptidoglikan pada sel bakteri sehingga
lapisan dinding sel tidak terbentuk
secara utuh dan menyebabkan kematian
sel tersebut (Robinson, 1995).
Saponin akan mengganggu
tegangan permukaan dinding sel, maka
saat tegangan permukaan terganggu zat
antibakteri akan dengan mudah masuk
ke dalam sel dan akan mengganggu
metabolisme hingga akhirnya terjadi
kematian bakteri. Mekanisme
penghambatan tanin yaitu dengan cara
dinding bakteri yang telah lisis akibat
senyawa saponin dan flavonoid,
menyebabkan senyawa tanin dapat
dengan mudah masuk ke dalam sel
bakteri dan mengkoagulase protoplasma
sel bakteri (Karlina dkk., 2013).
Senyawa steroid/triterpenoid
menghambat pertumbuhan bakteri
dengan mekanisme penghambatan
terhadap sintesis protein karena
terakumulasi dan menyebabkan
perubahan komponen-komponen
penyusun sel bakteri itu sendiri (Siregar
dkk., 2012).
Pengujian ekstrak kulit batang
R. mucronata dengan variasi ekstrak
88
dan konsentrasi pada jamur Saprolegnia
sp. menunjukkan hasil bahwa
peningkatan konsentrasi berbanding
lurus dengan peningkatan zona hambat
ekstrak terhadap jamur Saprolegnia sp.
selama masa inkubasi 3 hari.
Pengamatan pada hari pertama
didapatkan hasil hambatan tertinggi
pada ekstrak metanol dengan
konsentrasi 60% (4,4 mm), dan
hambatan terkecil pada ekstrak n-
heksana dengan konsentrasi 40% dan
20% (0 mm). Pengamatan pada hari
kedua masing-masing ekstrak
menunjukkan peningkatan zona hambat
rata-rata dari hari pertama pada semua
konsentrasi uji (Tabel 5).
Zona hambat pada ekstrak
metanol dan etil asetat sudah terlihat
jelas dengan adanya zona terang
disekitar cakram dan pembelokan hifa
pada pertumbuhan jamur Saprolegnia
sp. karena menghindari antifungi yang
terkandung di dalam ekstrak metanol
dan etil asetat tersebut. Sementara itu
pada kontrol positif (nistatin) dan
ekstrak n-heksana tidak mengalami
pembelokan namun tetap
mempengaruhi perkembangan hifa
Saprolegnia sp. sehingga tumbuh lebih
lambat dari perkembangan hifa normal
(tanpa perlakuan ekstrak). Hal ini
dijelaskan oleh Yuniarti (2010) dalam
penelitiannya yang menerangkan bahwa
walaupun secara makroskopis tidak
menunjukkan adanya penghambatan,
ternyata secara mikroskopis ekstrak
metanol kulit mangium pada
konsentrasi 10 mg/ml telah mampu
mempengaruhi perkembangan hifa
Ganoderma sp. tetapi tidak sampai pada
tahap yang mematikan jaringan seperti
perkembangan hifa Ganoderma sp.
yang abnormal (ujung hifa berbentuk
keriting) sehingga seiring dengan
hilangnya efek antifungi, hifa tersebut
dapat melanjutkan pertumbuhannya.

Besarnya zona hambat kontrol
positif (nistatin) pada hari kedua tidak
mengalami peningkatan/stabil dari hari
pertama yaitu sebesar 2 mm.
Pengamatan pada hari ketiga didapatkan
hasil bahwa semua perlakuan kecuali
ekstrak etil asetat mengalami penurunan
zona hambat. Ekstrak n-heksana dan
kontrol positif (nistatin) pada hari ketiga
sudah tidak menunjukkan aktivitas
antifungi (zona hambat = 0 mm)
sedangkan ekstrak metanol masih
menunjukkan adanya hambatan
terhadap jamur Saprolegnia sp., namun
luas zona hambatannya mengalami
penurunan. Kemampuan ekstrak yang
semakin menurun ini karena
pertumbuhan jamur terus meningkat
sehingga ekstrak tidak dapat membunuh
tetapi hanya bersifat fungistatik. Zat
antimikrobial fungistatik bersifat
menghambat kerja enzim tertentu yang
mengakibatkan terganggunya
metabolisme sel fungi, sehingga proses
pemanjangan hifa fungi menjadi
terhambat dan fragmentasi hifa pun
menjadi terganggu dan menyebabkan
sel fungi tidak dapat berkembangbiak
dalam waktu tertentu (Putri, 2013).
Zona hambat sebesar 0 mm pada
kontrol negatif (DMSO) mulai dari hari
pertama sampai dengan hari ketiga
menunjukkan bahwa DMSO tidak
memiliki aktivitas antifungi.
Sementara itu ekstrak etil asetat
mengalami peningkatan karena zona
hambat yang terbentuk stabil walaupun
hifa normal telah tumbuh penuh hingga
ujung/batas cawan petri (Tabel 5).
Kemungkinan ekstrak etil asetat
memiliki keseimbangan hidrofilik dan
lipofilik sehingga lebih optimal
menembus dinding sel jamur
Saprolegnia sp. sesuai dengan uji
aktivitas antibakteri yang
pertumbuhannya lebih dihambat oleh
ekstrak semi polar (etil asetat) dari pada
ekstrak polar (metanol). Senyawa yang
89
bersifat fungistatik misalnya senyawa
fenolik dapat mendenaturasi protein.
Terdenaturasinya protein dinding sel
jamur akan menyebabkan kerapuhan
pada dinding sel tersebut sehingga
mudah ditembus zat aktif lainnya yang
bersifat fungistatik. Jika protein yang
terdenaturasi adalah protein enzim
maka enzim tidak dapat bekerja yang
menyebabkan metabolisme dan proses
penyerapan nutrisi terganggu (Septiadi
dkk., 2013). Senyawa alkaloid bekerja
dengan menghambat biosintesis asam
nukleat jamur sehingga jamur tidak
dapat berkembang dan akhirnya mati
(Wulandari, 2012).
Menurut Lutfiyanti dkk. (2012)
terpenoid, termasuk triterpenoid dan
steroid merupakan senyawa bioaktif
yang memiliki fungsi sebagai antijamur.
Senyawa ini dapat menghambat
pertumbuhan jamur, baik melalui
membran sitoplasma maupun
mengganggu pertumbuhan dan
perkembangan spora jamur. Septiadi
dkk. (2013) menjelaskan bahwa
senyawa saponin berkontribusi sebagai
antijamur dengan mekanisme
menurunkan tegangan permukaan
membran sterol dari dinding sel jamur
sehingga permeabilitasnya meningkat.
Permeabilitas yang meningkat
mengakibatkan cairan intraseluler yang
lebih pekat tertarik keluar sel sehingga
nutrisi, zat-zat metabolisme, enzim,
protein dalam sel keluar dan jamur
mengalami kematian.
KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan
1. Hasil uji fitokimia menunjukkan
bahwa kulit batang R. mucronata
mengandung senyawa alkaloid,
tanin, terpen/steroid, dan saponin.
2. Hasil uji antimikroba terhadap
bakteri A. hydrophila, S. agalactiae
dan jamur Saprolegnia sp.
menunjukkan ekstrak etil asetat
 90

kulit batang R. mucronata memiliki Cahyadi, R. 2009. Uji toksisitas akut

aktivitas antibakteri dengan ekstrak etanol buah pare
spektrum luas karena mampu (Momordica charantia L)
menghambat ketiga mikroba uji. Terhadap larva Artemia salina
3. Ekstrak metanol hanya mampu Leach dengan metode Brine
menghambat bakteri S. agalactiae shrimp lethality test (BST).
dan jamur Saprolegnia sp., Laporan Akhir Penelitian Karya
sedangkan ekstrak n-heksana hanya Tulis Ilmiah. Fakultas
dapat mempengaruhi pertumbuhan Kedokteran. Universitas
bakteri A. hydrophila dan jamur Dipenogoro. Semarang.
Saprolegnia sp..
4. Ketiga ekstrak kulit batang R. Dewi F. K. 2010. Aktivitas Antibakteri
mucronata bersifat toksik terhadap Ekstrak Etanol Buah Mengkudu
A. salina L dengan LC50 21,06 ppm (Morinda citrifolia,
pada ekstrak etil asetat, 24,59 ppm Linnaeus) terhadap Bakteri
ekstrak pada metanol dan 27,38 Pembusuk Daging Segar.
ppm pada ekstrak n-heksana. [Skripsi]. Jurusan Biologi
Saran Fakultas Matematika dan Ilmu
Ekstrak etil asetat kulit batang Pengetahuan Alam.
R. mucronata merupakan ekstrak yang Universitas Sebelas Maret.
paling aktif dalam menghambat A. Surakarta.
hydrophila, S. agalactiae dan jamur
Diastuti H dan Suwandri. 2009.
Saprolegnia sp. secara in vitro namun
Fraksinasi dan Identifikasi
sebaiknya dilakukan pengujian lebih
Senyawa Antikanker Ekstrak
lanjut secara in vivo dengan langsung
Kulit Batang Rhizopora
menguji ekstrak kulit batang R.
mucronata serta Uji
mucronata terhadap ikan yang terserang
toksisitasnya Terhadap Larva
oleh bakteri dan jamur patogen tersebut.
Udang (Artemia salina Leach).
Selain itu perlu juga dilakukan isolasi
Jurnal Molekul. 4(2): 54
terhadap senyawa metabolit sekunder
61.
kulit batang R. mucronata untuk
mengetahui senyawa apa atau Elya B., Atiek S. dan Farida. 2009.
kombinasi senyawa apa yang memiliki Antibakteri Ekstrak Kulit
potensi antimikroba. Batang Manggis Hutan
(Garcinia rigida Miq.). Majalah
DAFTAR PUSTAKA Ilmu Kefarmasian. 6(1): 9 17.
Andrews J. M. 2008. BSAC
Standardized Disc Susceptibility Hapsari Y. dan Partomuan S. 2010.
Testing Method (version Study Senyawa Kimia dalam
7). Journal of Antimicrobial Fase Ekstrak Etil Asetat
Chemotherapy. 62: 256 278. Simplisia Cinnamomum spp.
Secara KCKT dan GC-MS.
Brooks G. F., Janet S. Butel. dan Jurnal Kima Mulawarman.
Stephen A. Morse. 2005. 8(1): 23 27.
Mikrobiologi Kedokteran.
Salemba Medika. Jakarta. Indriani N. 2007. Aktivitas Antibakteri
Daun Senggugu (Cleodendron
serratum [L] Spr.).
 91

[Skripsi]. Program Studi Toksisitas Ekstrak Etanol Biji

Biokimia, Fakultas Matematika Buah Alpukat (Persea
dan Ilmu Pengetahuan Alam, americana Mill.) Jurnal MIPA
Institut Pertanian Bogor. Bogor. Unsrat Online. 1(1): 24 28.
Karlina C. Y., Muslimin I. dan Guntur Meilani S. W. 2006. Uji Bioaktivitas
T. 2013. Antibakteri Aktivitas Zat Ekstraktif Kayu Suren
Antibakteri Ekstrak Herba (Toona sureni Merr.) dan Ki
Krokot (Portulaca oleracea L.) Bonteng (Platea latifolia BL.)
terhadap Staphylococcus Menggunakan Brine Shrimp
aureus dan Escherichia coli. Lethality Test (BSLT).
Jurnal LenteraBio. 2(1): 87 93. Departemen Hasil Hutan,
Fakultas Kehutanan. Institut
Kordi G. H. 2004. Penanggulangan Pertanian Bogor. Bogor.
Hama dan Penyakit Ikan. Rineka
Cipta. Jakarta. Meyer B.N., N. R. Ferrigni, J. E.
Putnam, L. B. Jacobsen, D. E.
Kordi G. H. 2012. Ekosistem Nichols and J. L.
Mangrove: Potensi, Fungsi, dan McLaughlin. 1982. Brine
Pengelolaan. Rineka Cipta. Shrimp: A Convenient General
Jakarta. Bioassay for Active Plant
Constituents. Journal of
Lisdawati V., Sumali W., L. Broto S.,
Medicinal Plant Research. 45:
dan Kardono. 2006. Brine
31 34.
Shrimp Lethality Test dari
Berbagai Fraksi Ekstrak Daging Mulyadi M., Wuryanti,
Buah dan Kulit Biji Mahkota Purbowatiningrum R. S. 2013.
Dewa (Phaleria macrocarpa). Konsentrasi Hambat Minimum
Buletin Penelitian Kesehatan. (KHM) Kadar Sampel Alang
34(3): 111 118. Alang (Imperata cylindrica)
dalam Etanol Melalui Metode
Lutfiyanti R., Widodo F. M., Eko N.
Difusi Cakram. Jurnal Chem.
Dewi. 2012. Aktivitas Antijamur
Info. 1(1): 35 42.
Senyawa Bioaktif Ekstrak
Gelidium latifolium terhadap Mulyani S., Susilowati dan Maslan M.
Candida albicans. Jurnal H. 2009. Analisis GC-MS dan
Pengolahan dan Bioteknologi daya anti bakteri minyak
Hasil Perikanan. 1(1): 1 8. atsiri Citrus amblycarpa (Hassk)
Ochse. Majalah Farmasi
Marliana S. D., Venty S., dan Suyono.
Indonesia. 20(3): 127 132.
2005. Skrining Fitokimia dan
Analisis Kromatografi Lapis Oesman F., Murniana, M. Khairunnas
Tipis Komponen Kimia Buah dan N. Saidi. 2010. Antifungal
Labu Siam (Sechium edule Jacq. Activity of Alkaloid From
Swartz.) dalam Ekstrak Etanol. Bark of Cerbera odollam. Jurnal
Jurnal Biofarmasi. 3(1): 26 31. Natural. 10(2): 18 21.
Marlinda M., Meiske S. S., Audy D. W. Pratiwi S.T. 2008. Mikrobiologi
2012. Analisis Senyawa Farmasi. Penerbit Erlangga.
Metabolit Sekunder dan Uji Jakarta.
 92

Putri A. U. 2013. Uji Potensi Antifungi Wiyanto D. B. 2010. Uji Aktivitas

Ekstrak Berbagai Jenis Lamun Antibakteri Ekstrak Rumput
terhadap Fungi Candida Laut Kappaphycus alvarezii
albicans. [Skripsi]. Jurusan Ilmu dan Eucheuma denticullatum
Kelautan. Fakultas Ilmu Terhadap Bakteri
Kelautan dan Perikanan. Aeromonas hydrophila dan
Universitas Hasanuddin. Vibrio harveyii. Jurnal Kelautan.
Makassar. 3(1): 1 17.

Robinson T. 1995. Kandungan Organik Wulandari A. R. 2012. Uji Daya

Tumbuhan Tinggi. Penerbit ITB. Efektivitas Antifungi Ekstrak
Bandung. Biji Tanjung (mimusops elengi
linn.) terhadap Pertumbuhan
Septiadi T., D. Pringgenies., O. K Candida albicans secara In Vitro
Radjasa. 2013. Uji Fitokimia dengan Metode Difusi. [Skripsi].
dan Aktivitas Antijamur Fakultas kedokteran. Program
Ekstrak Teripang Keling studi sarjana kedokteran.
(Holoturia atra) dari Pantai Universitas Pembangunan
Bandengan Jepara Terhadap Nasional Veteran. Jakarta.
Jamur Candida albicans. Journal
Yuniarti. 2010. Kajian Pemanfaatan
of Marine Research. 2(2):
Ekstrak Kulit Acacia mangium
76 84.
Willd. sebagai Antifungi
Siregar A. F., Agus S., Delianis P. 2012. dan Pengujiannya terhadap
Potensi Antibakteri Ekstrak Fusarium sp. dan Ganoderma
Rumput Laut Terhadap sp. Jurnal Sains dan Terapan
Bakteri Penyakit Kulit Kimia. 4(2): 190 198.
Pseudomonas aeruginosa,
Staphylococcus epidermidis, dan
Micrococcus luteus. Journal Of
Marine Research. 1(2):
152 160.
Suryanto D., N. Irawati dan E. Munir.
2011. Isolation and
Characterization of Chitinolytic
Bacteria and Their Potential to
Inhibit Plant Pathogenic Fungi.
Jurnal Microbiology Indonesia.
5(3): 144 148.
Tirtana E., Nora I., Warsidah dan
Afghani J. 2013. Analisa
Proksimat, Uji Fitokimia
dan Aktivitas Antioksidan pada
Buah Tampoi (Baccaurea
macrocarpa). Jurnal JKK. 2(1):
42 45.