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Floresta e Ambiente 2016; 23(2): 237-244

http://dx.doi.org/10.1590/2179-8087.107614
ISSN 2179-8087 (online)

Artigo Original

Trichoderma spp. na Produo de Mudas


de Espcies Florestais
Emanuele Junges1, Marlove Ftima Muniz2, Ricardo Mezzomo2, Bruna Bastos2,
Rodrigo Tascheto Machado2
1
Setor de Defesa Fitossanitria, Instituto Federal Farroupilha, So Vicente do Sul/RS, Brasil
2
Departamento de Defesa Fitossanitria, Universidade Federal de Santa Maria, Santa Maria/RS, Brasil

RESUMO
Sementes sadias e rpido desenvolvimento de plntulas de espcies florestais nativas so
fundamentais para o seu estabelecimento. Este trabalho avaliou o efeito de Trichoderma spp.
sobre sementes e o desenvolvimento de plntulas de Parapiptadenia rigida (angico), Cedrela fissilis
(cedro) e Pelthophorum dubium (canafistula). O fungo foi aplicado em diferentes momentos da
produo de mudas. Sua ao foi diferenciada entre as espcies, bem como, entre as variveis
analisadas. O cedro foi menos responsivo aplicao de Trichoderma spp. em qualquer momento
da produo de mudas. A associao de Trichoderma spp. com angico, via tratamento de
sementes, favoreceu a incidncia de alguns patgenos, entretanto a aplicao mais tardia do
fungo favoreceu o desenvolvimento da parte area. Sobretudo, em canafstula, o tratamento de
sementes proporcionou controle de patgenos associados semente e favoreceu a emergncia e
a produo de folhas nas mudas, apresentando potencial para ser usado tratamento de sementes
desta espcie.
Palavras-chave: promotor de crescimento, sementes, tratamento de sementes.

Trichoderma spp. in the Production of Seedling of Forest Species

ABSTRACT
Seeds healthy and rapid development of seedlings of native species may be critical to the success
of your establishment. This study evaluated the effect of Trichoderma spp. on seed and seedling
development of Parapiptadenia rigida (angico), Cedrela fissilis (cedro) and Pelthophorum dubium
(canafistula). The fungi was applied at different times of the production of seedlings. The fungi
action was different between species and between the variables. Cedro was less responsive to
application of Trichoderma spp. at any time of the seedlings production and the association of
Trichoderma spp. With angico as the seed treatment favored the incidence of some pathogens,
however the application later favored only the leaves development. In canafstula, the seed
treatment provided control of pathogens associated and stimulated the emergence and production
of leaves in seedlings, have potential to be used for seed treatment of this species.
Keywords: growth promoter, seeds, seeds treatment.
238 Junges E, Muniz MF, Mezzomo R, Bastos B, Machado RT Floresta e Ambiente 2016; 23(2): 237-244

1. INTRODUO plntulas e das podrides radiculares a introduo


de bioprotetores por meio da microbiolizao, definida
Espcies florestais que possuem madeira com como a aplicao de micro-organismos vivos ou de
importncia na construo civil ou de interesse seus metablitos na proteo de sementes, sendo este
paisagstico, esto com sua preservao ameaada, devido mtodo j utilizado na promoo de germinao e
a explorao de forma extrativista, ao desmatamento, s crescimento e, no controle de diferentes patgenos
queimadas e a expanso de cultivos agrcolas, Estudos (Faria et al., 2003). Muitos micro-organismos tm
sobre manuteno da viabilidade das sementes aps sido estudados, bem como a tcnica utilizada para
a colheita e a potencializao da produo de mudas incorporao dos esporos dos fungos junto s sementes
so prticas fundamentais para a manuteno dessas (Harman, 2000).
espcies (Sarmento & Villela, 2010). Trichoderma spp. tm se destacado como bioprotetor,
Parapiptadenia rigida (Benth.) Brenan (angico) por atuar como antagonista de alguns fitopatgenos
uma espcie recomendada para recuperao de solos de importncia econmica e tambm por promover
de baixa fertilidade natural e revegetao de reas o crescimento e florescimento de plantas. Alm disso,
degradadas. de fcil identificao devido ao seu Trichoderma spp. so fungos simbiontes endofticos de
porte, ao tronco com casca escamante e, pela madeira plantas amplamente utilizados no tratamento de sementes
vermelha e dura. uma espcie bastante agressiva, para controle de doenas e promover o crescimento e
cresce espontaneamente ao longo de estradas, em produtividade das plantas (Mastourietal., 2010) por
beira de rios ou capoeiras (Backes & Irgang, 2002). meio da solubilizao de micronutrientes insolveis no
Apesar de produzir grande quantidade de sementes, solo e proporcionando maior absoro e translocao
ela possui caracterstica recalcitrante, perdendo a de minerais pouco disponveis.
viabilidade rapidamente o que dificulta sua propagao Devido importncia da produo de mudas das
via sexuada (Carvalho, 2003). espcies mencionadas, o trabalho teve como objetivo
As sementes de Pelthophorum dubium (Spreng.) avaliar a influncia do antagonista Trichoderma spp.
Taub (canafstula) apresentam dificuldade em germinar sobre a sanidade de sementes e aspectos da qualidade de
devido presena de tegumento rgido que impede a mudas de angico, cedro e canafstula quando aplicado
penetrao da gua e o desencadeamento dos processos em diferentes momentos da produo.
metablicos inerentes germinao (Salernoetal., 1996).
O mximo potencial de germinao apresentado no 2. MATERIAL E MTODOS
incio do processo de disperso, quando predominam
sementes duras, ocorrendo declnio aps isso Foram utilizadas sementes de Pelptophorum dubium
(Nakagawaetal., 2010). (Spreng.) Taub (canafstula), Parapiptadenia rigida
Cedrela fissilis Vell. (cedro) uma espcie arbrea (Benth.) Brenan (angico) e Cedrela fissilis Vell (cedro),
nativa que produz madeira de alta qualidade e que adquiridas do banco de sementes do Laboratrio de
vem sendo dizimada pela explorao extrativista Anlise de Sementes da Fundao Estadual de Pesquisa
na busca por madeiras nobres. Borges et al. (1990) Agropecuria - FEPAGRO, localizado em Santa Maria,
demonstraram que a viabilidade das sementes de cedro RS. Foi realizada superao de dormncia nas sementes
est relacionada com a reserva de carboidratos e com de canafstula, por meio de imerso em gua fervente
a permeabilidade da membrana. por cinco minutos, seguida de 24 horas de imerso em
Portanto, deve-se manejar as sementes, visando gua em temperatura ambiente (Oliveiraetal., 2003).
aumentar a viabilidade destas e a produo de mudas Para cedro e angico nenhuma forma de superao de
com maior qualidade, assim como reduzir a populao dormncia foi adotada.
de fungos associados s sementes, para que as reservas A determinao da germinao das sementes a
no sejam destrudas e essas no se tornem veculos serem utilizadas foi conduzida com quatro repeties
de disseminao de patgenos. de 25 sementes para cada espcie, distribudas em
Um eficiente sistema de controle de patgenos rolos de papel filtro umedecido com gua destilada e
em sementes, causadores de tombamento e morte de esterilizada, equivalente a 2,5 vezes o peso do papel seco,
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e mantidos em germinador (20-30C, fotoperodo 12 h). expressos em percentagem de emergncia; avaliao


A contagem foi realizada aos 15 dias aps a semeadura. final da qualidade das mudas feita aos 60 dias aps
Os resultados foram expressos em percentagem mdia a semeadura, quando as mudas foram arrancadas
de sementes germinadas (Brasil, 2009). e avaliadas conforme: nmero de folhas, onde foi
Na avaliao da sanidade, sementes sem tratamento contabilizado o nmero de folhas verdadeiras em cada
e com aplicao de formulado em p de Trichoderma muda, expressando-se os resultados em nmero mdio
spp. foram colocadas em caixas gerbox contendo de folhas por planta; comprimento da muda, medida
trs folhas de papel filtro umedecidas com herbicida da distncia entre a base do caule e o pice do feixe
(2.4Damina) para inibir a germinao, incubadas a de folhas, feita com o auxlio de rgua milimtrica, e
25C por sete dias, com fotoperodo de 12 h. Foram expressa em centmetros; dimetro do colo, medido
utilizadas 100 sementes por tratamento, para cada espcie, com paqumetro digital e expresso em milmetros;
divididas em quatro repeties de 25 sementes. Apso comprimento e massa seca das razes e parte area
perodo de incubao, as sementes foram analisadas de mudas, estas foram acondicionadas em sacos de
sob microscpio estereoscpio e tico para a deteco papel e mantidas em estufa com ventilao forada a
e identificao dos fungos associados s mesmas. 60C por 48h e ento pesadas. Os resultados foram
Aidentificao dos fungos foi feita em nvel de gnero expressos em gramas/planta1.
e os resultados foram expressos em percentagem de Foi utilizado o delineamento experimental
sementes colonizadas por fungos (Macieletal., 2012). inteiramente casualizado com quatro repeties para
O antagonista Trichoderma spp. foi repicado para todos os ensaios. Para a avaliao da emergncia,
arroz estril, mantido a 25C e fotoperodo de 12h por os tratamentos foram arranjados em um esquema
15 dias, o arroz colonizado foi seco e triturado at fatorial 5X3 (tratamentos X dias aps a semeadura).
produo de p. Cada grama de p obtido continha Para as demais avaliaes no houve arranjo fatorial.
106 UFC (Unidades Formadoras de Colnias). Os valores percentuais foram transformados por raiz
Otratamento das sementes foi realizado aplicando-se quadrada com k=100 e as mdias foram comparadas
1g do p em 100 sementes, homogeneizando levemente. pelo teste de Duncan a 1% de significncia. Utilizou-se
A aplicao no substrato foi realizada misturado o p o Programa Estatstico SISVAR 5.3 (Ferreira, 2010).
em gua destilada afim de se obter uma suspenso
de esporos na proporo de 1 g para cada 200 mL de 3. RESULTADOS E DISCUSSO
gua. A cada 500g de substrato1 padro da Fepagro
para produo de mudas foram adicionados 200 mL As sementes das trs espcies apresentaram baixa
da suspenso. qualidade fisiolgica inicial, com percentuais de
Trichoderma spp. foi testado em diferentes momentos germinao de 68, 7 e 26% para canafstula, cedro e
do processo de produo das mudas, conforme os angico, respectivamente. Mesmo com esses resultados
seguintes tratamentos: T1- rega do substrato com a iniciais de germinao, optou-se pela realizao dos
suspenso de esporos 20 dias antes da semeadura; tratamentos, por tratar-se da real situao de qualidade
T2aplicao nas sementes no momento da semeadura; das sementes de espcies florestais comercializadas
T3- rega do substrato com a suspenso de esporos feita e disponibilizadas para semeadura. Carvalho et al.
no momento da semeadura; T4- rega do substrato (2000) enfatizam que as melhores respostas a testes e
com a suspenso de esporos 20 dias aps a semeadura; tratamentos que visam melhoria no desempenho das
T5- Testemunha. sementes, so obtidos em sementes de baixa qualidade.
Foi realizado um ensaio para avaliao da qualidade As variveis no seguiram comportamento
das mudas, as sementes das espcies em estudo foram semelhante para todos os tratamentos e em todas as
semeadas em tubetes, utilizando 100 sementes de cada espcies. Na avaliao da sanidade de sementes de
espcie para cada tratamento. Foram realizadas as canafstula (Tabela 1), o bioestimulador apresentou
seguintes avaliaes: emergncia aos dez, 30 e 60dias: elevado potencial de associao s sementes, colonizando
contagem do nmero de mudas emergidas aos dez, 100% destas, com esporulao abundante, controlando
30e aos 60 dias aps a semeadura. Os resultados foram todos os fungos associados.
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Tabela 1. Sanidade de sementes de Pelptophorum dubium (canafstula), Cedrela fissilis (cedro) e Parapiptadenia
rigida (angico) submetidas a tratamento com Trichoderma spp.
Table 1. Health of seeds of Pelptophorum dubium (canafstula), Cedrela fissilis (cedro) and Parapiptadenia rigida
(angico) submitted the treatment with Trichoderma spp.
Micoflora da espermosfera (%)

Cladosporium spp.

Trichotecium spp.

Chaetomium spp.
Rhizoctonia spp.
Penicillium spp.

Curvularia spp.
Alternaria spp.

Aspergillus spp
Fusarium spp.

Rhizopus spp.
Botrytis spp.

ST 94a* 49a 05a 12a 04a 08a ** ** ** ** **


Canafstula

T 00b 01b 00b 00b 00b 00b ** ** ** ** **


CV (%) 0,2 0,7 0,3 0,3 0,3 0,3
ST 95a* 04a 11a ** ** 32a 09a 29a 08a 14a 01a
Cedro

T 02b 00b 06a ** ** 00b 03a 00b 00b 22a 00a


CV (%) 0,7 0,3 2,0 0,3 2,0 0,3 0,3 5,0 0,3
ST 73a* 0 02b ** ** 04a 53b 39a 04a 02b **
Angico

T 19b 0 21a ** ** 00b 86a 00b 00b 08a **


CV (%) 3 3 0,3 3 0,2 0,3 1
* Mdias seguidas pela mesma letra nas colunas no diferem pelo teste de Duncan a 1% de probabilidade de erro. ** No houve
incidncias destes gneros. ST: sem Trichoderma spp. T: com Trichoderma spp.

A desuniformidade de resposta das variveis e das apenas 65% das sementes foram colonizadas e da
espcies para os tratamentos pode ser explicado pelos mesma forma, o controle dos patgenos associados
relatos de que Trichoderma spp. exibe variabilidade entre tambm foi menos eficiente (Tabela 1). Foram
as linhagens com relao a atividades de biocontrole, controlados os fungos Penicillium spp., Fusarium spp.,
espectro de ao contra os hospedeiros, propriedades Trichotecium spp. e Chaetomium spp. J Cladosporium
fisiolgicas e bioqumicas e adaptabilidade ecolgica spp., Rhizopus spp. e Aspergillus spp. incidiram mais
e ambiental influenciando seu desempenho como sobre as sementes tratadas.
bioprotetor e promotor de crescimento de plantas O uso de Trichoderma spp. para microbiolizao
(Silva, 2000). Bernardo & Bettiol (2010) destacaram de sementes foi eficiente no controle dos fungos
que o isolado de T. harzianum, isolado do solo, no associados e esta eficincia de controle foi maior quando
foi eficiente no controle da pinta preta dos citrus em a associao com a semente foi mais expressiva, assim
laranja Pra devido a no adaptao ao ambiente de como Howell et al. (1997), aplicando Trichoderma
parte area que foi aplicado, ou ainda, que o isolado virens na forma granular em sementes de algodo,
no apresenta eficincia para aquele patossistema obtiveram colonizao das razes, reduzindo a
que foi testado. colonizao destas por Fusarium spp. e promoveu
Para cedro (Tabela 1), a microbiolizao foi a supresso da murcha em algodo causada por
eficiente no controle de Penicillium spp., Alternaria F.oxysporum f. sp. vasinfectum. Sivan & Chet (1989)
spp., Fusarium spp., Trichotecium spp. e Chaetomium constataram que a adio de condios de Trichoderma
spp. porm no obteve o mesmo desempenho para harzianum (T-35) no solo ou em sementes reduziu a
Cladosporium spp., Rhizopus spp., Aspergillus spp. e taxa de germinao de clamidsporos de Fusarium
Curvularia spp. Todas as sementes foram colonizadas, oxysporum f. sp. Vasinfectum e F. oxysporum f. sp.
mas a esporulao foi menos favorecida. Melonis em algodoeiro e meloeiro, respectivamente.
J a associao de Trichoderma spp. e angico foi Na avaliao da emergncia (Tabela 2), no foi
menos expressiva do que para as outras espcies, identificada interao entre os tratamentos e os
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perodos de avaliao. Para canafstula, a aplicao O aumento da emergncia de plntulas de


via semente apresentou o melhor resultado, apesar de canafstula (Tabela2), cujas sementes foram tratadas
ter diferenciado apenas da aplicao 20 dias antes da com Trichoderma spp., pode ter sido favorecida pelo
semeadura, promoveu elevao de 7,3% em relao controle de patgenos associados. Segundo Mafiaetal.
testemunha. Para cedro, a aplicao 20 dias antes (2003), a veiculao de Trichoderma spp. em grnulos
promoveu 3% a mais de plntulas emergidas em relao de alginato de sdio com farelo de trigo como fonte
testemunha, porm diferiu apenas da aplicao via alimentar, permitindo 18 dias de competio, exerceu
substrato. Para angico, a aplicao de Trichoderma spp. controle sobre Rhizoctonia solani na propagao
via semente prejudicou a emergncia das plntulas, clonal de Eucalyptus spp. Takada (2004) aplicando
reduzindo 35,9% em relao s sementes sem tratamento.
Trichoderma spp. formulado em p, no substrato
estril de cultivo de Eucaliptus urograndis, obteve a
Tabela 2. Mdia das trs avaliaes de emergncia menor mortalidade de plntulas, possivelmente por
de plntulas de Pelptophorum dubium (canafstula), sua ao antagnica Rhizoctonia sp. J para angico
Cedrela fissilis (cedro) e Parapiptadenia rigida (angico) e cedro no houve melhoria na emergncia.
submetidas a tratamento com Trichoderma spp.
Table 2. Average of the three evaluations of emergency Na avaliao da qualidade das mudas de canafstula
of seedling Pelptophorum dubium (canafstula), Cedrela (Tabela3) ocorreu diferena entre os tratamentos para
fissilis (cedro) and Parapiptadenia rigida (angico)
o nmero de folhas por muda, quando a aplicao
submitted the treatment with Trichoderma spp.
via semente produziu maior enfolhamento da parte
Emergncia (%)
Tratamentos area das mudas, diferindo entre si com a aplicao
Canafstula Cedro Angico
T1-Substrato
mais tardia do bioestimulador. De mesma maneira,
20 dias antes da 31,7b* 9,0a 44,3a Pratesetal. (2006), observaram que, em condies de
semeadura campo, a aplicao do fungo antagonista no substrato
T2-Substrato
de mudas de citrus, refletiu em produo de mais folhas,
20 dias aps a 33,7ab 6,7ab 43,4a
semeadura estas com colorao verde mais intensa e tambm, com
T3-Semente 43,5a 6,2ab 16,3b maior desenvolvimento da raiz pivotante e de radicelas.
T4-Substrato 34,8ab 3,1b 45,a
Para cedro (Tabela4) apenas foi verificada ao
T5-Testemunha 36,2ab 6,0ab 52,2a
dos tratamentos sobre o comprimento da parte area,
CV % 3 2 4
* Mdias seguidas pela mesma letra nas colunas no diferem
onde a aplicao mais tardia produziu mudas com
pelo teste de Duncan a 1% de probabilidade de erro. parte area maior, j a aplicao via substrato foi

Tabela 3. Qualidade de mudas de Pelptophorum dubium (canafstula) tratadas com Trichoderma spp. em diferentes
momentos do processo de produo de mudas, avaliadas 60 dias aps o plantio.
Table 3. Quality of seedling of Pelptophorum dubium (canafistula) submitted the treatment with Trichoderma spp. at
different moments of the process of production of seedling, evaluated 60 days after the plantation.
Comprimento (cm) Dimetro Fitomassa seca (mg)
Nmero
Parte de colo Parte
Raiz Total de folhas Raiz Total
area (mm) area
T1-Substrato
20 dias antes da 8,1a* 12,5a 20,7a 4,3ab 1,6a 97,0a 53,0a 150,0a
semeadura
T2-Substrato
20 dias aps a 7,6a 12,4a 20,0a 4,1b 1,5a 80,0a 40,0a 120,0a
semeadura
T3-Semente 7,9a 12,7a 20,7a 4,7a 1,5a 89,5a 41,0a 130,5a
T4-Substrato 7,8a 12,4a 20,2a 4,4ab 1,6a 93,5a 45,5a 139,0a
T5-Testemunha 8,1a 12,2a 20,4a 4,4ab 1,6a 89,0a 42,0a 131,0a
CV % 9 7 5 8 9 20 21 18
* Mdias seguidas pela mesma letra nas colunas no diferem pelo teste de Duncan a 1% de probabilidade de erro.
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responsvel por mudas menos desenvolvidas. A ao maior comprimento e superfcie total de razes, o
dos tratamentos foi compensada pelo crescimento que refletiu em maior absoro de gua, nutrientes
radicular, uma vez que o comprimento total no e maior vigor.
diferiu entre os tratamentos.
A presena do bioprotetor pode ser fundamental
Para angico (Tabela5) a aplicao via semente aps o transplante, quando as mudas estaro mais
produziu melhor desempenho do crescimento da
expostas a patgenos. Segundo Harmanetal. (2004),
parte area, j para comprimento radicular, o melhor
Trichoderma spp. estimula a expresso de genes
resultado ocorreu na aplicao feita mais cedo, mas no
relacionados com a defesa da planta, processo similar
houve diferena no comprimento total. Fortesetal.
ao de resistncia adquirida. Patekoski & Pires-Zottarelli
(2007), verificaram que isolados de Trichoderma spp.
aplicados ao substrato aumentaram a porcentagem (2010) observaram que o produto Biotrich, a base de
de enraizamento e sobrevivncia de microestacas Trichoderma spp., na concentrao de 0,2 mL L1 no
de Eucalyptus sp. Segundo Prates et al. (2007) o promoveu o crescimento de alface in vitro e in vivo,
tratamento do substrato de mudas de laranja Pra/ porm controlou o patgeno Pythium aphanidermatum
Limo cravo com Trichoderma spp., proporcionou potencialmente destrutivo a cultivos hidropnicos.

Tabela 4. Qualidade de mudas de Cedrela fissilis (cedro) tratadas com Trichoderma spp. em diferentes momentos do
processo de produo de mudas, avaliadas 60 dias aps o plantio.
Table 4. Quality of seedling of Cedrela fissilis (cedro) submitted the treatment with Trichoderma spp. at different
moments of the process of production of seedling, evaluated 60 days after the plantation.
Comprimento (cm) Dimetro Fitomassa seca (mg)
Nmero
Parte de colo Parte
Raiz Total de folhas Raiz Total
area (mm) area
T1-Substrato 20 dias
3,8ab* 7,2a 10,9a 2,0a 4,3a 38,7a 17,4a 56,1a
antes da semeadura
T2-Substrato 20 dias
4,4a 8,6a 13,0a 2,1a 4,2a 54,1a 21,8a 75,9a
aps a semeadura
T3-Semente 3,6ab 6,6a 10,2a 1,9a 4,5a 37,1a 17,1a 54,1a
T4-Substrato 2,1b 4,6a 6,6a 1,3a 3,2a 18,0a 7,6a 25,6a
T5-Testemunha 2,7ab 5,9a 8,6a 1,4a 2,7a 32,6a 12,5a 45,1a
CV % 39 49 45 35 35 63 72 64
* Mdias seguidas pela mesma letra nas colunas no diferem pelo teste de Duncan a 1% de probabilidade de erro.

Tabela 5. Qualidade de mudas de Parapiptadenia rigida (angico) tratadas com Trichoderma spp. em diferentes
momentos do processo de produo de mudas, avaliadas 60 dias aps o plantio.
Table 5. Quality of seedling of Parapiptadenia rigida (angico) submitted the treatment with Trichoderma spp. at
different moments of the process of production of seedling, evaluated 60 days after the plantation.
Comprimento (cm) Dimetro Fitomassa seca (mg)
Nmero
Parte de colo Parte
Raiz Total de folhas Raiz Total
area (mm) area
T1-Substrato 20 dias
5,8ab* 13,6a 19,3a 1,2a 4,1a 66,5a 25,0a 91,5a
antes da semeadura
T2-Substrato 20 dias
5,9ab 12,3ab 18,2a 1,2a 4,3a 68,0a 26,0a 94,0a
aps da semeadura
T3-Semente 6,3a 11,9ab 17,9a 1,2a 4,1a 62,9a 27,0a 89,7a
T4-Substrato 5,1b 11,4ab 16,5a 1,1a 4,0a 51,0a 21,0a 72,0a
T5-Testemunha 5,8ab 11,1b 16,9a 1,3a 3,8a 59,0a 21,5a 80,5a
CV % 17 12 10 17 13 26 35 27
* Mdias seguidas pela mesma letra nas colunas no diferem pelo teste de Duncan a 1% de probabilidade de erro.
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4. CONCLUSES Ferreira DF. SISVAR - Sistema de anlise de varincia.


Verso 5.3. Lavras: UFLA; 2010.
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AUTOR(ES) PARA CORRESPONDNCIA Howell CR, De Vay JE, Garber RH, Batson WE. Field
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