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SISTEMA DE GESTIN DE CALIDAD DE LOS LABORATORIOS

DE DOCENCIA

MANUAL DE LABORATORIO DE EVALUACIN DE FRMACOS


Y MEDICAMENTOS Il
Cdigo Fecha de elaboracin o revisin Versin Pgina

SGC-FESZ-QFB-ML17 04/05/2016 2016 1/4

PRCTICA 2. BLOQUEADORES DE LA PLACA NEUROMUSCULAR


Objetivo
Demostrar el bloqueo neuromuscular de la succinilcolina manifestado por parlisis
espstica en la pata de ratn al administrarle este frmaco.
Marco Terico
El msculo esqueltico voluntario est inervado por neuronas motoras cuyos axones son
capaces de conducir potenciales de accin a altas velocidades. Al rea del msculo
adyacente a la terminacin axnica se conoce como placa motora y a la sinapsis qumica
que existe entre ambas como unin neuromuscular. La contraccin de una fibra muscular
ocurre en respuesta a uno o ms potenciales de accin que se propagan por el sarcolema y
el sistema de tbulos T. El potencial de accin de una clula muscular se inicia en la unin
neuromuscular (sinapsis entre una motoneurona somtica y una fibra muscular). Cuando
llega un impulso nervioso a la neurona se libera acetilcolina difundiendo a travs del
espacio sinptico hasta unirse con los receptores nicotnicos localizados sobre la superficie
de la membrana de la clula muscular. Al activarse el receptor nicotnico, se abren canales
inicos asociados al mismo, permitiendo la entrada principalmente de Ca2+ y Na+1,
favoreciendo adems la liberacin de calcio por el retculo endoplsmico; el aumento de la
concentracin de Ca intracelular facilita la contraccin muscular y el sodio por su parte
inicia la despolarizacin de la clula cuyo impulso se trasmite al resto de la fibra muscular.
El efecto termina cuando la acetilcolina es metabolizada por la acetilcolinesterasa. En el
espacio sinptico.
Los frmacos que actan en la unin neuromuscular se conocen como frmacos
colinrgicos y cuando inhiben o bloquean la despolarizacin de la placa neuromuscular, ya
sea directa o indirectamente, se conocen como Bloqueadores Neuromusculares y se
clasifican en dos grupos de acuerdo al sitio y mecanismo de accin:
Presinpticos:
Frmacos que inhiben la sntesis de acetilcolina. Por ejemplo, hemicolinio.
Frmacos que inhiben el almacenamiento de la acetilcolina en las vesculas. Por
ejemplo, el AH5183.
Frmacos que inhiben la liberacin de acetilcolina. Por ejemplo, la estreptomicina.

Postsinpticos
Frmacos no despolarizantes, competitivos. Antagonistas de los receptores
nicotnicos de la acetilcolina. Ejemplo la D-tubocurarina.
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Frmacos despolarizantes, no competitivos. Activan los receptores nicotnicos


produciendo una despolarizacin inicial, pero bloquean la accin subsecuente de los
receptores. Ejemplo la succinilcolina.

Metodologa.
Fundamento del mtodo empleado. Consistir en medir el desempeo de un ratn en dos
pruebas (de escalamiento y de nado) antes y despus de producir parlisis de tipo espstico
en la pata de un ratn al administrarle succinilcolina va intraperitoneal.
Material y equipo.
Material biolgico:
o 4 ratones
2 contenedores con rejilla para ratones.
4 jeringas de 1mL
Vaso de precipitados de 1L
Mechero Bunsen y Tripi
Toalla o trapo absorbente
Balanza granataria con canastilla para pesar animales
Cronometro
Reactivos:
Solucin de succinilcolina
Solucin salina

Procedimiento:
I. Prueba de escalada.
1. Tomar 4 ratones por equipo, marcarlos del 1 al 4 y pesarlos. Registrar su peso y
colocarlos en un contenedor con rejilla.
2. Tomar la rejilla del
contenedor e inclinarlo en
un ngulo de 80 con
respecto a la mesa de trabajo
y colocar cada uno de los
ratones en la parte inferior
de la rejilla para escalarla
(no permitir que el ratn
regrese a la mesa de trabajo,
de ser necesario, levante la
rejilla con el ratn).
Registrar el tiempo que
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tarda el ratn en caer por no poder sujetarse ms. Dejarlos reposar


aproximadamente 10 minutos y realizar la prueba de nado forzado.
II. Prueba de nado forzado.
1. En un segundo contenedor se vierte agua hasta la mitad. Posteriormente se
agrega agua caliente hasta obtener una temperatura entre 35C y 38C.
2. Tomar el ratn nmero 1, que previamente ya escal la reja, e introducirlo
con cuidado al agua para que nade 30 segundos aproximadamente. Sacarlo
del contenedor y secarlo con una toalla, tratando de mantenerlo caliente para
evitar que muera por hipotermia. Se deja descansar al ratn
aproximadamente 5 minutos.
3. Se repite la prueba las veces que sea necesario hasta que el ratn manifieste
signos de cansancio y no pueda nadar ms evitando que se ahogue el ratn.
Anotar el tiempo en que ocurre lo anterior.
III. Administracin del frmaco.
1. Una vez realizadas las dos pruebas anteriores, se administra succinilcolina a
cada ratn por va IP de acuerdo a la tabla siguiente:

Ratn Succinilcolina*
(mg/Kg)
1 0.7
2 0.9
3 1.1
4 (Control) 0.1 ml Soln
salina
*Ver concentracin y realizar los clculos para
adminstrar la dosis correcta a cada ratn.

2. Una vez administrada la succinilcolina, inmediatamente cada ratn repetir las


dos pruebas descritas anteriormente y se registran los tiempos correspondientes
para cada una de ellas (en la prueba de nado registrar el tiempo que tarda el
ratn para nadar sin dificultad tener cuidado de que el ratn no se ahogue).
Repetir las pruebas de escalamiento y de nado para cada ratn a intervalos de 5
minutos (o ms si es necesario) hasta que los tiempos de escalamiento y de nado
regresen a su basal.
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Resultados.

Reportar los resultados en la siguiente tabla:

Ratn Tiempos Basales Succinilcolina* Tiempo de Duracin Tiempo de


(min.) (mg/Kg) Latencia del efecto recuperacin
Escalamiento Nado (min.) (min.) (min.)
1 0.7
2 0.9
3 1.1
4 0.1 ml Soln
(Control) salina

Cuestionario
1. Cmo se clasifican los frmacos que actan en la unin neuromuscular? Describa
cada uno de los grupos.
2. Haga un esquema del mecanismo de accin de la succinilcolina y descrbalo
brevemente.
3. Explique el perfil farmacocintico de la succinilcolina.
4. De acuerdo al experimento realizado, explique el tipo de parlisis producida
(espstica o flcida).
5. Describa los principales usos clnicos y efectos adversos de los bloqueadores
neuromusculares.

Referencias:
1. Brunton LL, Chabner BA, Knollman BC (Editores). Goodman & Gilman. Las
bases farmacolgicas de la teraputica. 12 Edicin (espaol). Mc Graw Hill
Interamericana Editores, Mxico, 2012, pp. 255-276.
2. Bertrand G. Katzung BG, Master SB, Trevor AJ (Editores). Farmacologa
Bsica y Clnica, 12 Edicin, Mc Graw Hill Interamericana Editores, Mxico,
2013, pp.115-128.
3. Raffa RB, Rowls SM, Beysarov EP. Netter. Farmacologa ilustrada. Elsevier-
Masson, 1 Edicin (Espaol), Barcelona, Espaa, 2008, pp. 39-44.