Maria Fernanda Lemus Carbajal

Cromatografa en columna

Introduccin

La cromatografa por columna se emplea para la separacin de mezclas o purificacin de

sustancias, reteniendo en su fase estacionaria (en este caso la slica gel) a algunos
compuestos por su propiedad de adsorcin, por la que a travs de ella se har pasar una
corriente de disolventes o mezcla de disolventes (fase mvil: eluyente) que arrastrar a
los compuestos constituyentes de la mezcla, hacindoles avanzar a travs de la columna.
Este tipo de cromatografa se utiliza para saber en que recipientes se encuentra un
componente buscado y para determinar la cantidad de este cuantitativamente, contrario
a la cromatografa por capa fina donde solo se puede hacer un anlisis cualitativo.

Anlisis Experimental

Eluyente : AcOet

Principio activo : Paracetamol

Se realizaron 7 eluatos de la cual para cada una de ellas se hizo una cromatografa en capa
fina para verificar que se trataba del principio activo separado y se pudo ver que si al
poner la muestra testigo esto con el fin de sepralo de excipiente y quedara puro el
principio activo, en las primeras 4 muestras se vio una mancha con mayor color lo cual nos
deca que haba ms principio activo en estas muestras y en las dems se vea ms tenue
el color lo cual nos dice que hay menos, despus por medio de una destilacin simple
pudimos obtener el producto deseado el cual no se pudo pesar por cuestiones de tiempo.

Conclusiones

En esta prctica se realiz la separacin por columna de dos pastillas de paracetamol, para
obtener fracciones (eluatos) colectadas y despus por cromatografa en capa fina
compararlas con una muestra testigo para poder identificar los eluatos que contenan el
principio activo y por destilacin simple obtener la muestra deseada. Lo cual se puede
concluir que la cromatografa en columna es mejor para separar cantidades mayores y
mayor pureza como fue el caso del paracetamol.
CUESTIONARIO

1. Indique algunas de las aplicaciones de la cromatografa de adsorcin.

Capa fina : identificacin de sustancias, separacin de aminocidos, etc.

Columna : Separacin de colorantes, protenas, separa mayores cantidades de producto

principal.

2. Diga cul es la diferencia entre una cromatografa en capa fina y la de columna.

En la CCF la separacin se realiza por distancias mientras que en columna se hace por
tiempos o volmenes. En cromatografa en columna la separacin de varias muestras se
realiza de forma secuencial, separando la sustancia en fracciones o eluatos y en CCF por el
contrario, la separacin de varias muestras se realiza de forma simultnea, siendo todas
ellas sometidas al mismo tiempo al proceso separativo. Otra diferencia es el tipo de
material que se emplea en ambas cromatografas, en la CCF se utilizan placas.

3. Qu debe hacerse para encontrar el eluyente adecuado para un compuesto que

se purificara en cromatografa en columna?

Escoger al eluyente en base a la polaridad que tenga la sustancia, es decir, que sus
polaridades sean afines, para que el adsorbente, como la slica gel que es muy polar, no
retenga a la muestra. Para esto se hacen pruebas de cromatografa en capa fina.

4. Por qu es necesario realizar una cromatografa en capa fina a los eluatos

obtenidos de la columna cromatogrfica?

Para poder identificar en qu fraccin de la cromatografa realizada o en qu eluato se

encuentra la sustancia que intentamos separar del resto, para posteriormente destilar la
disolucin y secar el producto que se obtenga.

5. Escriba una lista de eluyentes utilizados en cromatografa en columna en orden de

polaridad creciente. Anote su bibliografa.

9.Hexano

8.Tolueno

7.Cloroformo

6.Diclorometano

5.Acetona
4.Acetato de etilo

3.Etanol

2.Metanol

1.Agua

Bibliografa: DOMINGUEZ, Xorge Alejandro, Experimentos de Qumica Orgnica, Editorial

Limusa, 1 Edicin,Mxico 1980.