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INTRODUCCION
El uso de antibiticos es sin lugar a dudas una de las principales herramientas en el control y erradicacin
de numerosas enfermedades infecciosas de origen bacteriano en animales de produccin y compaa.
Una vez producido el diagnostico de una afeccin y establecido el tratamiento, adems de seguir el curso
clnico de los animales afectados se debe prestar especial atencin a los periodos de descarte de leche
para poder enviar al mercado la leche con niveles de inhibidores por debajo de los mximos residuales
permitidos.
El trmino residuos, se refiere a pequeas concentraciones de estos frmacos que quedan en leche o
carne despus de finalizado un tratamiento, independiente de la va de administracin del producto
(parenteral, intrauterina o intramamaria).
Los riesgos de estos frmacos en la poblacin humana se centran fundamentalmente en los siguientes
aspectos: reacciones de hipersensibilidad, efectos txicos especficos, aparicin de cepas resistentes y
susceptibles de ser transmitidas al hombre y alteraciones de la flora intestinal.
Actualmente, con el gran incremento.
En el caso particular de la leche, al riesgo toxicolgico se suma el riesgo tecnolgico, es decir el efecto
que las concentraciones de antibiticos pueden tener sobre los procesos fermentativos dirigidos a la
obtencin de productos de alto valor agregado. Es importante destacar, que estos residuos causan
graves daos en la industria lechera, ya que la elaboracin de derivados lcteos como queso y yogurt
necesitan el desarrollo de la flora cido lctico. Esta flora, es inhibida por la presencia de concentraciones
pequeas de antibiticos, razn por la cual las industrias realizan rutinariamente un control interno, para
separar la leche ausente de estos residuos y destinarla a la elaboracin de estos productos.
Por ello en la actualidad se debe conocer las concentraciones mximas permitidas, y como herramienta
para su deteccin existen diversos mtodos para estimar las concentraciones mximas permitidas en la
leche. Ahora se encuentran tcnicas como la de tipo ensayo de receptor de Beta s.t.a.r. (UCB-
Bioproducts, Blgica), la tcnica de ensayo de unin a receptor ligado a enzima de Snap (IDEXX
Laboratories INC.,EEUU), tcnicas microbiolgicas como la de CH ATK Single Test P&S (Copan Italia) ,
Charm Farm Test Vial (Charm Sciences Inc., EEUU) y el Test cuali o Delvotest SP NT.
El mtodo Test cuali o Delvotest SP - NT es una prueba de difusin estndar para la deteccin de los
residuos de sustancias antibacterianas (tales como antibiticos y sulfonamidas). La prueba consiste de
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ampolletas que contienen al medio slido agar sembrado de un nmero estandarizado de las esporas de
Bacillus stearothermophilus var. Calidolactis, junto con nutrientes requeridos para el crecimiento y un
antifolate trimethoprim. El medio es coloreado en prpura por el indicador de pH prpura de bromocresol.
La sensibilidad de Delvotest SP-NT dada en la hoja de especificacin de este producto, aparte de las
sensibilidades especificadas para la Penicilina G y Sulfadiazina, muestra los rangos de sensibilidad para
otros antibiticos y sustancias inhibitorias que pueden ser detectados, tales como aquellos definidos por
el Nivel Mximo de Residuo (MRL). La tabla 1, da una visin de los niveles de deteccin de Delvotest
SP-NT para residuos de diferentes antibiticos y sulfonamidas. El Nivel de deteccin se refiere a la
concentracin ms baja en la cual una droga es todava detectada por la prueba, al tiempo control o al
tiempo de lectura fijo de 3 horas.
Tabla 1: Datos indicativos sobre el nivel de deteccin con Delvotest SP - NT en ppb (partes por billn o
ng/ml) en la leche bovina cruda mezclada. Las drogas enlistadas son una seleccin de la muestra del
espectro de deteccin.
Las muestras de leche que estn libres de sustancias antibacterianas o las que contienen por debajo de
niveles especificados, cuando se les hace la prueba aadiendo 0,1 mL de leche e incubadas a 64C
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permite la germinacin y el crecimiento de la bacteria. Esto conducir a un cambio en color del indicador
de prpura a amarillo. Cuando la muestra de leche contiene sustancias antibacterianas por encima de la
sensibilidad de la prueba, el crecimiento es inhibido y como resultado el color del agar permanece
prpura.
Esta tcnica detecta al antimicrobiano por debajo del lmite de tolerancia fijada por FDA, USDA. Los
niveles de deteccin para Cloxacilina, Neomicina y Cefalosporinas son 20, 100 200 y 25 - 50 partes
por billon (ppb) respectivamente.
Metri-Cef 3 est indicado para el tratamiento y la prevencin de las metritis (clnica y subclnica) y
piometra de bovinos, causadas por grmenes sensibles a alguno de los antibiticos de la frmula. La
asociacin de sus tres antibiticos le otorga una efectividad completa contra las bacterias causantes de
problemas infecciosos en el tero:
Cefalexina: su efectividad es inmediata, ejerciendo su accin durante las primeras 24 horas de aplicado el
producto. Elimina la primera barrera bacteriana. Es activo contra la mayora de las bacterias Gram
positivas (entre ellas los estafilococos) y algunas Gram negativas, incluyendo E.coli, Proteus; Klebsiella,
salmonella, Shigella y Enterobacter, adems de los estafilococos penicilinasa positivos, sin embargo no
posee actividad contra Enterobacter spp., P.aeruginosa y Serratia spp, entre otros. La resistencia
adquirida se presenta en bacterias gramnegativas y es de particular importancia en las Enterobacterias.
Neomicina Sulfato: Asociada al excipiente de larga duracin presente en la frmula, extiende su accin
hasta por 3 semanas. La neomicina es el antibitico ms utilizado en combinaciones de drogas debido a
su amplio espectro antibacteriano. Su actividad bactericida abarca un gran nmero de bacterias
Gramnegativas, incluyendo E.coli, Klebsiella pneumoniae, Haemophilus sp., Enterobacter sp.,
Pasteurella, Serratia sp., Neisseria sp., Proteus sp. Salmonella spp, Shigella spp, y Pseudomona
aeruginosa y su espectro abarca tambin un nmero reducido de bacterias Gram positivas como el
Staphylococcus aureus. La resistencia mediada por plsmidos ocurre mediante una variedad de enzimas.
Tal resistencia, la cual a menudo es mltiple, es relativamente comn en los comensales y patgenos
entricos pero menos frecuente entre otros patgenos oportunistas. La resistencia por mutacin
cromosomal carece de importancia.
Adems, Metri-Cef 3 contiene Vitamina A, que funciona como regenerador epitelial. La adicin de
Vitamina A, reduce las consecuencias del proceso infeccioso y participa manteniendo la integridad del
tejido.
Metri-Cef 3, se administra mediante infusin intrauterina. La dosis utilizada es una jeringa de 30 mL por
animal, la cual debe ser introducida en el tero utilizando la pipeta anexa. En casos severos el tratamiento
puede ser repetido despus de 48 horas. Para vacas repetidoras administre una jeringa 24 horas
despus de la inseminacin artificial.
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Antes de la administracin intrauterina de Metri-Cef 3 las personas que efecten el tratamiento deben
lavarse y secarse las manos previamente. Dada la naturaleza del empaque y la no-reabsorcin del
principio activo, Metri-Cef 3 presenta un amplio margen de seguridad, imposibilitando una sobredosis.
OBJETIVO
MATERIALES Y METODOS
Lugar de Ejecucin:
Materiales:
Metodologa:
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Una vez aplicado el producto se tomaron muestras de leche de ambos grupos a las 12, 24,
36, 48, 60 y 72 horas que contengan una mezcla de los cuatro cuartos de cada vaca.
Se trabaj con el Kit Devotest SP NT de acuerdo con la metodologa descrita por el
fabricante.
RESULTADOS
CUADRO 1: Resultados de muestras de leche con kit Delvotest SP- NT del grupo tratado con
Metri-Cef 3
GRUPO A (TRATADO)
VACA 00 h 12 h 24 h 36 h 48 h 60 h 72 h
03/02 (T) 04/02 (M) 04/02 (T) 05/02 (M) 05/02 (T) 06/02 (M) 06/02 (T)
LINDA - - - - - - -
NITA - - - - - - -
LULU - + - - - - -
GLADIS - - - - - - -
LIDIA - - - - - - -
11 - - - - - - -
12 - - - - - - -
13 - + - - - - -
14 - - - - - - -
15 - - - - - - -
CUADRO 2: Resultados de muestras de leche con kit Delvotest SP- NT del grupo no tratado.
GRUPO B (CONTROL)
VACA 00 h 12 h 24 h 36 h 48 h 60 h 72 h
03/02 (T) 04/02 (M) 04/02 (T) 05/02 (M) 05/02 (T) 06/02 (M) 06/02 (T)
1 - - - - - - -
2 - - - - - - -
3 - - - - - + -
4 - - - - - - -
5 - - - - - - -
6 - - - - - - -
7 - - - - - - -
8 - - - - - - -
9 - - - - - - -
10 - - - - - - -
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DISCUSION
Los resultados mostrados en el Cuadro 1 del Grupo A (Tratado) muestra que todas las vacas, se
encuentran negativos a presencia de antibiticos en leche desde el primer muestreo (12 h) post-
tratamiento y permanecen negativas hasta el muestreo final que fue hasta las 72 horas. Las
excepciones a estos resultados fueron las vacas Lul y N 3, que tuvieron resultados positivos al
primer muestreo (12 h), los cuales se pueden considerar que se trataran de reacciones cruzadas
o probables contaminaciones con desinfectantes a la hora de la toma de muestras, ya que
estas vacas en el muestreo pre-tratamiento (00 h) estuvieron negativas y considerando la alta
sensibilidad de la prueba es muy fcil la deteccin elementos extraos a los buscados en la
prueba. La interpretacin de un resultado negativo a residuos de antibiticos es que, las
muestras tienen niveles de concentracin que estn por debajo de los niveles de deteccin,
siendo el caso para Cefalexina la cual se encuentra por debajo de las 50 a 100 ppb, para
Cloxacilina 20 a 30 ppb, y, para Neomicina 300 a 600 ppb respectivamente (Tabla 1).
En el Cuadro 2 de los resultados del Grupo B (Control) sin tratamiento, se observa que todas las
vacas se mostraron negativas a residuos de antibiticos en leche, tanto en el muestreo de hora
cero (00 h) como en los siguientes muestreos, hasta el muestreo final de 72 horas; lo cual
demuestra que todas las vacas utilizadas en el experimento en ambos grupos, se mantuvieron
durante el periodo de prueba, sin tener contacto con ninguna fuente de antimicrobianos o
desinfectante que hubieran podido influenciar en los resultados obtenidos.
CONCLUSION
Se concluye que la residualidad en leche de una Infusin Antibitica Intrauterina sobre la base de
Cefalexina, Neomicina, Cloxacilina y Vitamina A (Metri-Cef 3) en vacas lecheras en lactacin
es nula; dado a que, los resultados como negativos por el mtodo utilizado en el presente trabajo
se interpretan como valores de antibiticos por debajo de los niveles de deteccin y estos a su
vez son valores considerados menores al LMR.
BIBLIOGRAFIA CITADA
1. Manual Merck de Veterinaria. Quinta Edicin. Ocano Grupo Editorial. Espaa. 2000.
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4. http://www.capraispana.com/enfermedades/mastitis/secado.htm. El tratamiento y
prevencin de mastitis durante el perodo de secado.
6. http://www.westfalia.com/mx/es/what_is_new/news/2007/dryoffnoticia.aspx. Control de
mastitis en vacas en seca. GEA Farm Technologies.
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Introduccin de la suspensin
Metricef 3
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Muestra de leche
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Boletn Tcnico
Delvotest SP 5 PACK - NT
Instrucciones de uso
Con el mejor de nuestro conocimiento, la informacin contenida adjunto es exacta y completa. Sin embargo, no se interpretara que el contenido
adjunto implique una garanta o caucin.
Delvotest SP - NT
Test Sensitivity or Detection levels
Introduction
Delvotest SP-NT, SP MINI NT and SP 5 PACK NT are broad spectrum antibiotic residue test systems
offering the possibility to verify the presence of a multitude of different antimicrobial substances in milk.
An indication of the sensitivity of Delvotest SP-NT has been given in the specification sheet of this product.
However, apart from the specified sensitivities for Penicillin G and Sulphadiazine, a substantial number of
other antibiotics and inhibitory substances can be detected at or close to the levels such as those defined by
the Maximum Residue Level (MRL). Table 1 gives an overview of the indicative detection levels of Delvotest
SP -NT for different antibiotic residues and sulphonamides.
Table 1
Indicative data on detection levels with Delvotest SP - NT in ppb (parts per billion or ng/ml) in commingled
raw bovine milk. Drugs listed are a sample selection only of the total detection spectrum of Delvotest SP -
NT.
-lactams
penicillin 1-2 2-3
ampicillin 4 6-7
amoxicillin 2-3 3-5
ceftiofur 25 - 50 50 - 100
cephapirin 4-6 6-8
cloxacillin 20 20 - 30
dicloxacillin 10 10 - 20
oxacillin 10 10
Sulphonamides
sulphadiazine 25 - 50 100 -150
sulphamethazine 25 - 100 100 - 250
Tetracyclines
tetracycline 250 - 500 800
oxytetracycline 250 - 500 800
Macrolides
Tylosin 30 50
Spiramycin 400 - 600 800 - 1000
Erythromycin 40 - 80 200
Others
Trimethoprim 50 - 100 200 - 300
Dapsone 0.5 - 1 1 2.5
Aminoglycosides
Gentamycin 50 200
Neomycin 100 - 200 300 - 600
The data indicated in the table are based upon readings judged as being yellow/purple to purple and are to be
regarded as an indication. It is recommended that positive test results are always confirmed. Variations in
incubation times and temperatures, operators and storage conditions may have an influence on the reading
result found.
Definitions
Drug : Active ingredient of cattle medication such as antibiotics and sulphonamides.
Spectrum : Total number of different active ingredients that can be detected by Delvotest SP - NT
at or below the required detection level.
Detection level : The lowest concentration at which a drug is still detected by the test, at control time or at
a fixed reading time of 3 hours.
Control time : Time at which the test agar containing the negative control sample has just changed to
yellow.
"To the best of our knowledge, the information contained herein is accurate and complete.
However, nothing contained herein shall be construed to imply any warranty or guarantee".