MANEJO DE MICROPIPETAS AUTOMTICAS Y PRECISION DE SUS

MEDIDAS

Almanso Plaza Yisela ; Jaime Moya Natalia ; Miranda Gomez Jose; Parejo Tovar
Miguel
1,
Universidad de Crdoba. Facultad de Ciencias Bsicas, Departamento de Biologa,
Montera, Colombia

Resumen

Las micrpipetas son dispositivos que se caracterizan por carecer de depsito y

que se utilizan para medir o transvasar pequeos volmenes de lquido de un recipiente
a otro con gran exactitud. Inicialmente se fabricaron en vidrio pero hoy en da existe una
gran variabilidad de opciones. Objetivo Determinar las recomendaciones bsicas y
tcnicas para el uso y manejo de micropipetas automticas y la determinacin de la
precisin de sus medidas Metodologa: para realizar esta prctica se seleccion el
modelo adecuado para medir el volumen, de manera que est dentro del rango
especificado para la pipeta. Resultados: se obtuvieron valores del w del agua mediante
el micropipeteo que fueron analizadas por medio de una grfica. Discusin: la grfica
obtenida mostro una relacin directamente proporcional entre el volumen agregado al
tubo y su peso, teniendo as, que por cada 100L de agua agregados al tubo, su peso
aumentaba; siendo un valor constante para cada volumen. Conclusin: el manejo de
micropipetas se hizo de manera cuidadosa, evitando inclinaciones y formaciones de
burbujas. Por otro lado es de destacar la exactitud que posee este instrumento, el cual es
capaz de medir volmenes considerablemente pequeos.

Palabras claves: Precisin, liquido, microlitros,tubo eppendortf.

Abstract: He micrpipetas devices are characterized by lack of deposit and used to

measure or transfer small volumes of liquid from one container to another with great
exactitud.Inicialmete were manufactured in glass but today there is great variability of
options.Objective: To determine the basic and technical recommendations for the use
and management of automatic pipettes and determining the accuracy of your
measurements Methodology: To perform this practice was selected the right model for
measuring the volume, so that it is within the specified range for the pipette. Results:
water w values were obtained by micropipettor which were analyzed by means of a
graph. Discussion: the graph obtained showed a direct relationship between the amount
added to the tube and weight, thus having, for every 100l of water added to the tube, his
weight increased; It is a constant value for each volume. Conclusion: handling
micropipettes are made carefully, avoiding inclinations and formation of bubbles. On
the other hand it is noteworthy that the accuracy has this instrument, which is capable of
measuring small volumes considerably.
Keywords: Accuracy, liquid, microliter tube eppendortf.
Introduccin
Las pipetas son dispositivos que se
caracterizan por carecer de depsito y
que se utilizan para medir o transvasar
pequeos volmenes de lquido de un
recipiente a otro con gran
exactitud.Inicialmete se fabricaron en
vidrio pero hoy en da existe una gran
variabilidad de opciones. Los volmenes
captables por estos instrumentos
varan segn el modelo: los ms
habituales, denominados p20, p50 y p100,
admiten un mximo de 20, 50 y100 l,
respectivamente.
Las podemos encontrar de dos tipos:
manuales y automticas. En ambas el
volumen deseado se selecciona
haciendo girar una rueda que se
encuentra en el extremo superior,
aunque tambin existe el volumen fijo.
La automtica se diferencia ms
moderna y exactas (Casado et.al 2012).
Las Micropipetas ms comunes son
0.1-1 L, 0.5-10 L, 10- 100 L, 20-
200 L, 100- 1.000 L, 1.000- 5.000
L. Como dijimos anteriormente,
algunas de ellas solo trasvasan
volmenes fijos pero la gran mayora
permiten un intervalo de microlitros a
seleccionar. Lo ideal sera tener una
mayor cantidad, ya que sufren menos
degaste y no pierden la calibracin con
tanta facilidad. Pero en la prctica,
saber el volumen exacto que
necesitamos para todas las operaciones
es imposible. Por eso, se recurre a
aquellas que permiten transferir
diferentes cantidades, otra caracterstica
son las puntas plsticas desechables,
que permiten pipetear diferentes
reactivos en menor tiempo, ya que solo
es necesario cambiar la punta y no
cambiar o lavar la pipeta. Las puntas
que no se extraen de forma manual, sino
en la parte superior la micropipetas
existe un botn explsalas (Casado et.al
2012).
MATERIALES
Micropipetas de 0.5 10 l.
Micropipetas de 10 100 l.
Micropipetas de 100 1.000 l.
Tubos eppendortf.
Puntas amarillas, azules y
blancas.
Beaker de 500 ml.
Balanza analtica.
Metodologa
Se procedi a identificar las partes de la
micropipetas y el funcionamiento de
esta como es el caso del embolo, cuando
el mbolo se presiona sentir un punto
de resistencia. ste es el primer alto o
"tope". Si contina presionando
encontrar un punto donde el mbolo ya
no se mueve hacia abajo, este
corresponde al segundo alto o
"tope". Oprimir el mbolo hasta el
primer tope y colocar la punta dentro
del lquido hasta una profundidad de 2 a
3 mm, de una manera lenta y
controlada, disminuir la presin de este,
para permitir que se desplace hacia
arriba, no suelte el mbolo
abruptamente, al permitirlo causar que
el lquido pueda salpicar dentro de la
punta produciendo volmenes inexactos
y generando contaminacin de la
pipeta. Utilizando la balanza analtica
 se pudo obtener el peso del tubos
eppendorf, y se extrajo determinadas
Varianza:
cantidades de agua destilada (0-1000)
por medio de la micropipeta de 1000ul, Dato media (al cuadrado)
se pes nuevamente el tubo con el agua, Suma de resultado de Dato media
de esta manera se hizo con cada uno de entre el nmero de datos
los volmenes a trabajar.
(0,9197-1.,179)2 = 0.067
Resultados y anlisis (0,9747- 1,4179)2 = 0.196
(1,1155 1,4179)2 =0.091
Tabla 1. Volumen y peso de la muestra.
(1,2272 1,4179)2 = 0.036
Volum W W W agua (1,3262 1,4179)2 = 0.008
en (l) tubo tubo + (1,4412 1,4179)2 = 0.0005
(g) w (1,5223 1,4179)2 = 0.010
agua (1,6316 1,4179)2 = 0.045
0 0,9172 0,9197 0,002578 (1,7228-1,4179)2 = 0.092
100 0,9172 0,9747 0,0575 (1,8255-1,4179)2 = 0.166
200 0,9172 1,1155 0,1958 (1.8908- 1,4179)2 = 0.223
300 0,9172 1,2272 0,31
400 0,9172 1,3262 0,409
500 0,9172 1,4412 0,524
600 0,9172 1,5223 0,6051 Varianza: 0.084
700 0,9172 1,6316 0,7144
800 0,9172 1,7228 0,8056
900 0,9172 1,8255 0,9083
1000 0,9172 1.8908 1.0049
Desviacin estndar:
Los resultados nos muestran una relacin
directamente proporcional con respecto al
volumen del agua, para esto se realiz una Varianza
diferencia entre el peso del tubo de
Eppendorf con un volumen de agua, menos
el peso del tubo vaco, obteniendo el peso
0.084 = 0.291
del agua por volmenes desde los 100 L
hasta los 1000 L.

Media: nmero de datos/N

N = 11
0,9197+ 0,9747+ 1,1155+ 1,2272+
1,3262+ 1,4412+ 1,5223+ 1,6316+1,7228+
1,8255+1.8908 = 15,5975
15,5975/ 11 = 1,4179
Hay que tener en cuenta varios factores
que pueden intervenir en el porcentaje de
error de los datos dentro de los cuales se
pueden mencionar:
La descalibracin de la micropipeta
o de la balanza analtica utilizada:
esto se pudo deber a errores como
tomar volmenes por encima o por
el mnimo de dicho instrumento,
por ello es necesario asegurarse que
 est usando la micropipeta correcta
para el volumen que necesita.
Errores al momento del pipeteado,
por ello es recomendable pipetear
siempre en posicin vertical y
utilizar la punta especfica de la
micropipeta, adems de evitar
volmenes de agua que queden en
la punta y luego afecten el
volumen que la persona quiera
tomar.
Volumen (l)
1200
1000
AVolumen (l)
instrumento de laboratorio empleado
para succionar y transferir pequeos
volmenes de lquidos, la utilizacin de
micropipetas de volumen fijo nos
permitir tener un mayor control dentro
de los volmenes exactos que se deben
tomar, los volmenes captables por
estas varan segn el modelo: las
utilizadas se encuentran en un rango de
0.5, 10, 100 y hasta 1000 l,
respectivamente. Es destacable que el
uso de micropipetas permite emplear
distintos lquidos sin tener que lavar
estas porque para ello se emplean
puntas desechables, de plstico, que
habitualmente son estriles. Existen
varios tipos de puntas dependiendo del
volumen que se desee tomar por tal

800 razn se puede decir que las

600 micropipetas son muy tiles y
400 necesarias para los laboratorios de la
Volumen
200
(l)
biologa molecular.
0

PREGUNTAS DE CONSULTA
W agua
1. Consulte los siguientes conceptos:
exactitud y precisin.

Volumen (l) Precisin se refiere a la dispersin del

1000 conjunto de valores obtenidos de
mediciones repetidas de una magnitud.
800
Volumen (l)

La precisin es la capacidad de un
600
instrumento de obtener el mismo
400 Volumen resultado en mediciones diferentes,
(l)
200 desarrolladas bajo las mismas
0 condiciones. Se conoce como mquina
00.2
0.4
0.6
0.811.2
1.4
1.6
1.822.2
2.4
2.6
2.83 de precisin a un aparato construido con
W agua + W tubo el objetivo de obtener resultados
exactos. La diferencia entre el valor
medido y el valor real recibe el nombre
CONCLUSION
de error de medicin.
Despus de haberse realizado la prctica
Exactitud se refiere a cun cerca del
se puede decir que la micropipeta es un
valor real se encuentra el valor medido.
As pues una medicin es ms exacta
cuanto ms pequeo es el error de
medida.

2. Calcula la media, varianza y la

desviacin estndar para los datos
obtenidos en la prctica.

Media de w agua: 1,4179

Varianza de w agua:

Desviacin estndar de w agua:

Bibliografa

Casado, E; Duran, P; Miro, T;

Paredes, A. 2012. Operaciones
bsicas de laboratorio. Ediciones
paraninfo, SA. Madrid, p34- 35