Manual QA INSTRUM BQD 2018-1 Completo PDF

Facultad
de Estudios Superiores Cuautitln

Departamento de Ciencias Qumicas
Seccin de Qumica Analtica

MANUAL DE PRCTICAS
ANLISIS INSTRUMENTAL
LICENCIADO EN BIOQUIMICO DIAGNSTICO

Clave de la Carrera: 105-39
Clave de la asignatura: 1439
M.C. Miriam A. Castillo Rodrguez

M.C. Pablo Hernndez Matamoros
M.C. Enrique Ramos Lpez
Q.F.B. Elia Granados Enrquez
Q.F.B. Ivn Santilln Cano
Q. Ma. Del Carmen Campo-Garrido
Revisin y Correccin: 2018- I
Introduccin
Con la amplia gama de tcnicas instrumentales de anlisis con las que se cuenta en la
actualidad y a su incesante desarrollo, el dominio de todos ellas es difcil de abordar en
su totalidad en un curso de licenciatura, por lo tanto es necesario adquirir conocimiento
de una manera general, que nos permita interpretar y manejar datos obtenidos con
cualquiera de ellas.
La gran variedad de tcnicas instrumentadas de anlisis se basan en una relacin que
existe entre la propiedad (absorbancia, ndice de refraccin, pH, rea de pico, potencial,
conductancia, intensidad de corriente, etc.) con la composicin del sistema (anlisis
cualitativo) o bien la cantidad de alguno de sus componentes (anlisis cuantitativo).
Generalmente algunas de las tcnicas se utilizan bsicamente para el anlisis cualitativo,
otras ms en el anlisis cuantitativo y un buen grupo de ellas es capaz de cumplir con
ambas funciones.
La propiedad (P) , no es solamente afectada por la composicin del sistema tambin por
variables como temperatura, presin, tiempo, perturbaciones ocasionadas al realizar la
medicin, presencia de sustancias qumicas interferentes, etc. es por esta razn en este
curso se estudia la relacin entre la propiedad y la composicin; relacin en donde es
necesario ejercer un control efectivo sobre las dems variables que adems de la
composicin afectan la propiedad, todo esto a fin de obtener informacin til desde el
punto de vista analtico de esta manera P ser funcin de la composicin. Pudiendo as
proponer mtodos basados en esta relacin para poder conocer la composicin de cierta
sustancia(s) en muestras de inters.
Este enfoque contribuye a la formacin profesional en anlisis instrumental y al perfil
profesional en su rea.
OBJETIVOS
OBJETIVO(S) GENERALES DE LA ASIGNATURA
Que el alumno conozca las tcnicas y mtodos ms utilizados en el Anlisis Instrumental al
obtener y utilizar informacin obtenida con estos para en la cuantificacin de sustancias en
muestras de inters en el mbito farmacutico para que desarrolle habilidades, actitudes y
criterio apropiados a fin de resolver problemas en su rea.
OBJETIVOS DEL CURSO EXPERIMENTAL

PRCTICAS CONVENCIONALES: Reafirmar los conocimientos tericos en la aplicacin
de las metodologas analticas empleando un equipo instrumental para identificar y
cuantificar una sustancia en una muestra de inters en el rea bioqumica clnica
1) Conocer e identificar las partes bsicas del equipo utilizado para su manejo adecuado a
fin de obtener resultados confiables.
2) Conocer la informacin que el equipo genera y su uso para anlisis cuantitativo.
3) Interpretar y relacionar variables a utilizar para efectuar el clculo de contenido de una
sustancia en una muestra real.
PRCTICA DE DISEO: Elaborar un formato experimental fundamentado qumica e
instrumentalmente para cuantificar sustancias de inters en su rea a travs de las
siguientes etapas
1) Realizar una investigacin respecto a un procedimiento base y con ello:
2) Estructurar un diseo experimental (protocolo).
3) Consultar la metodologa propuesta con el asesor con la finalidad de mejora.
4) Desarrollar en laboratorio el diseo propuesto para la cuantificacin de una muestra.
5) Contrastar los resultados obtenidos con el diseo propuesto a fin de identificar fuentes
de error tanto de diseo como experimental a fin de optimizar el protocolo.
6) Desarrollar nuevamente el experimento corregido y cuantificar.

II

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLN
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS QUMICAS
SECCIN DE QUMICA ANALTICA
CODIGO: FPE-CQ-DEX-01-02
FPE-CQ-DEX-03-02
CALENDARIZACIN FPE-CQ-DEX-04-02.
No de REVISIN: 00
Asignatura: ________________________________________________ Grupo:_________________
Carrera: ______________________ Perodo: _______________ No. de equipos: ___________
SEMANA/
ACTIVIDAD FECHA OBSERVACIONES
ETAPA
a)Presentacin
b) Informacin sobre el Sistema de Gestin de

1
Calidad (SGC).
c) Organizacin para trabajo en equipo.
a) Aplicacin del examen diagnstico, Resolucin y

-Examen diagnstico
evaluacin de este.
evaluado.
2 b) Preparacin de soluciones y Manejo de material y
-Clculos y soluciones
equipo comn en el laboratorio de Anlisis
etiquetadas.
Instrumental.
Prctica 1 Determinacin de Azul Timol

3 C. Previo 1
por Espectrofotometra UV/VIS.
Prctica 2 Determinacin de cido C. previo 2

4
Ascrbico por curva de calibracin Informe prctica 1

III

Prctica 3 Determinacin de Fe (II) y Zn(II) C. previo 3

5
por Absorcin Atmica. Informe prctica 2
Entrega y discusin de los Ejercicios Unidad I
Primer Examen escrito Informe prctica 3

6
Asignacin del proyecto para Diseo
Experimental
7 Prctica 4. Determinacin de fenilefrina por HPLC C. previo 4
C. previo 5
Prctica No. 5 Determinacin de etanol por
8
Informe prctica 4
Cromatografa de Gases en enjuague
C. previo 6
Prctica No.6 Determinacin de plata en un
9
Informe prctica 5
desinfectante
Prctica no. 7 Determinacin C. previo 7
10
potenciomtrica de Fe(II) en tabletas. Informe prctica 6
Entrega y discusin de los de Ejercicios Unidad 2

11 Informe prctica 7
/segundo Examen escrito.
Revisin del Formato de Diseo Experimental (FDE) y

12 Avances de diseo
experimentos preliminares.
13 1 Sesin prctica de Diseo Experimental.
14 2 Sesin prctica de Diseo Experimental.
Presentacin oral del Diseo Experimental Informe de Trabajo del

15
Aplicacin de la encuesta FPG02-FESC-01 Diseo Exp.
16 Entrega de Promedios finales (desocupar gavetas)
___________________________
Elabor*

IV


SECCIN QUMICA ANALTICA
CRONOGRAMA ESPECFICO DEL CODIGO: FPE-CQ-DEX-01-01

LABORATORIO FPE-CQ-DEX-02-01
FPE-CQ-DEX-03-01
FPE-CQ-DEX-04-01
No. de REVISIN: 00
ASIGNATURA: Anlisis Instrumental CARRERA: BQD
NO. DE NO. ACTIVIDADES TCNICAS DIDCTICAS EVALUACIN NO. DE

SEMANA SESIONES/ETAPA SUGERIDAS * SUGERIDAS SUGERIDA HORAS/SESIN
1 1/Presentacin del Formar equipos. Explicar 3

curso metodologa de trabajo y
evaluacin.
2 Revisin de cclulos de Ejercicios Examen 3

preparacin de diagnstico
1/Desarrollo del disoluciones
curso
3 1/Desarrollo del Leer la prctica Realizar diagrama de flujo. Examen previo 3

curso previamente y explicar los
objetivos Estudiar temas de
absorcin molecular y
curvas de calibracin

objetivos Estudiar tema de curvas
de calibracin indirectas

objetivos Estudiar tema de
espectrofotometra de
absoricn atmica
6 1/Evaluacin Aplicacin de primer Resolucin de serie de Primer parcial 3

examen parcial. ejercicios. Asesora del
proyecto.
NO. DE NO. ACTIVIDADES TCNICAS DIDCTICAS EVALUACIN NO. DE

SEMANA SESIONES/ETAPA SUGERIDAS * SUGERIDAS SUGERIDA HORAS/SESIN
7 1/Desarrollo del Leer la prctica Estudiar el tema de Examen previo 3

curso previamente y explicar los cromatografa de lquidos
objetivos de alta resolucin

curso previamente y explicar los cromatografa de gases
objetivos

curso previamente y explicar los potenciometra
objetivos
10 1/Desarrollo del Leer la prctica Estudiar el tema de curvas Examen previo

curso previamente y explicar los de titulacin
objetivos potenciomtricas 3
11 1/Evaluacin Aplicacin de segundo Resolucin de serie de Segundo 3

examen parcial. ejercicios. Asesora del parcial
proyecto.
12 1/Desarrollo del Revisin del proyecto Redaccin del protocolo 3

curso
13 1/Desarrollo del Realizacin del proyecto Anlisis de los resultados Evaluar avance 3
curso y adecuaciones del proyecto
experimentales
14 1/Desarrollo del Realizacin del proyecto Conclusin del proyecto Anlisis de 3

curso resultados del
proyecto
15 1/Evaluacin Aplicacin del tercer Presentacin oral de los Aplicacin de la 3

parcial resultados del proyecto encuesta de
calidad
16 1/Fin de curso Realizacin de promedios Balance del semestre 3

y entrega de calificaciones

II

SISTEMA DE EVALUACIN
La puntuacin concreta en base 10 para cada punto del informe es:
1) Nombre del experimento, fecha y Datos completos como contenidos (1.0 punto).
del producto analizado (en caso tenerlo) pesadas, preparacin de
soluciones y estndares, concentraciones de estos
2) Resultados grfica, tablas, volmenes utilizados para punto de 2.0 puntos
equivalencia
3) Anlisis de resultados incluyendo: reacciones y constante de equilibrio 5.0 puntos
condicional, en caso de que se efecte, regresiones lineales y clculos de
contenido
4) Conclusiones justificadas qumica e instrumentalmente 1.5puntos
5) Referencias consultadas 0.5puntos
I II.-En prctica de Diseo Experimenta
VALOR
Formato del diseo experimental (FD). Se evala si el proyecto planteado (40%)
por el equipo de alumnos se llevar de manera adecuada a la solucin
del problema planteado
Informe de Diseo (ID) (se evalan los mismos puntos que el Informe de (60%)
prctica convencional)

III

La puntuacin en una escala de 100 puntos se presenta en la siguiente tabla:
TIPO DE ACTIVIDAD ASPECTO A NMERO DE ACTIVIDADES % FINAL

EVALUAR REALIZADAS
Prctica Convencional TL,EP, IT 7 52
Prctica de Diseo FD, IT 1 12
Examen destreza y 3* 36
habilidades de
manejo de equipo (dos escritos y uno oral)
y clculos de
contenido
individual
TOTAL 100
FINALMENTE, ES NECESARIO QUE SE ACREDITE AL MENOS UNO DE LOS

EXMENES ESCRITOS PARA PODER OBTENER EL PROMEDIO FINAL.

IV

Facultad de Estudios Superiores Cuautitln

Departamento de Ciencias Qumicas
Seccin de Qumica Analtica
REGLAMENTO INTERNO DE LABORATORIO

1.- En todas las sesiones es obligatorio el uso de bata, lentes de seguridad y zapato
cerrado en el laboratorio.
2.- Se debern conservar limpias las instalaciones (en especial las campanas de extraccin,
canaletas y tarjas de las mesas de laboratorio), el material y el equipo de trabajo (incluyendo
las balanzas analticas) al inicio y al final de cada sesin experimental.
3.- Se deber guardar orden y disciplina dentro del laboratorio y durante la sesin
experimental, quedando prohibida la entrada a personas ajenas al mismo, incluyendo los
inter-laboratorios.
4.- Queda estrictamente prohibido fumar, consumir alimentos y bebidas dentro del
laboratorio, ya que muchas de las sustancias qumicas que se emplean son inflamables y/o
txicas.
5.- Es importante que antes de trabajar, el estudiante conozca las caractersticas de las
sustancias qumicas que va a utilizar para que pueda manipularlas adecuadamente (se
deber apoyar en la consulta de las fichas de seguridad).
6.- Para la extraccin de reactivos lquidos, se debern emplear perillas de hule y nunca
succionar con la boca.
7.- Los reactivos qumicos no debern ser manipulados directamente, se debern usar
implementos como pipetas, esptulas, cucharas, etc.
8.- Despus de manipular sustancias qumicas es necesario lavarse las manos con agua y
jabn.
9.- Si se utilizan mecheros, parrillas o cualquier otro aparato, se deber estar atento en su
manejo para evitar un accidente.
10.- En caso de ingestin, derrame o inhalacin de algn reactivo por parte de algn
estudiante, deber ser notificado al asesor del grupo, el cual tomar las acciones
pertinentes, previa consulta de las fichas de seguridad.
11.- Al trmino de la sesin experimental, el asesor de grupo, deber regresar las
disoluciones empleadas a su lugar de resguardo ubicado en el anaquel.
12.- Todas las personas que elaboren disoluciones y/o generen residuos deben etiquetar
correctamente los frascos que se utilicen para este propsito utilizando la etiqueta del
Sistema de Gestin de Calidad.
13.- Los residuos de cada experimento debern tratarse y eliminarse adecuadamente por
los alumnos, previa consulta del diagrama ecolgico incluido en el manual de prcticas y
con el apoyo del asesor.
14.- Cuando el residuo no pueda ser eliminado, el alumno deber resguardarlo, en un
contenedor, debidamente etiquetado y cerrado, y colocarlo en el anaquel destinado para
ello.
15.- Antes de iniciar las actividades experimentales se le solicitar al laboratorista el material
y equipo necesarios, para ello, una persona responsable del equipo dejar su credencial
(nicamente de la UNAM) en depsito y firmar un vale por el material y equipo recibidos.
En caso de que existiera un defecto en el material o equipo recibido, ste deber ser
anotado en el vale.
16.- Es responsabilidad del alumno revisar el estado en que recibe el material, ya que al
trmino de la sesin experimental lo debe regresar en las mismas condiciones en las que
lo recibi y perfectamente limpio.

VI

17.- En caso de extravo o dao del material o equipo de laboratorio, se resguardar el vale
de solicitud de material y la credencial del estudiante responsable del dao o extravo hasta
su reposicin con iguales caractersticas.
18.- Los alumnos que adeuden material de laboratorio, debern reponerlo a la mayor
brevedad posible o a ms tardar el ltimo da de realizacin de prcticas, de lo contrario los
deudores sern reportados al Departamento de Servicios Escolares y no podrn inscribirse
en el siguiente semestre.
19.- El nmero mximo de alumnos que podrn permanecer en el cuarto de balanzas ser
el mismo que el nmero de balanzas disponibles.
20.- Cuando sea asignada, una gaveta a los alumnos y por razones de olvido o prdida de
la llave, queda prohibido forzarla. En tal situacin los alumnos debern solicitar su apertura,
por escrito, al responsable del laboratorio, previa autorizacin del profesor del grupo.
21.- La gaveta podr usarse hasta la semana 15 del semestre por lo que, el grupo de
estudiantes debern desocuparla a ms tardar en la semana 16.
22.- No se permitir el uso de balanzas y equipos a personas ajenas al laboratorio o fuera
del horario de su sesin experimental.
Vo.Bo.: Comit de Calidad del Depto. de Ciencias Qumicas.
Cuautitln Izcalli, Agosto del 2017.

VII

PROTECCION PERSONAL
CUANDO EMPIECES A TRABAJAR EN EL LABORATORIO: Te indicarn cmo se
deben utilizar los instrumentos que vayas a usar. Adems, debers saber dnde se
encuentran los extintores, el botiqun, la ducha, los aparatos lavaojos, y las salidas de
emergencia.
ANTES DE EMPEZAR UNA REACCIN: Debers conocer la peligrosidad de los reactivos
que vayas a usar, as como de los productos que se obtienen de la propia reaccin
(toxicidad, inflamabilidad, riesgo de explosin, riesgos biolgicos) y tomars las
precauciones apropiadas (por ejemplo, trabajar en la campana extractora). En cualquier
caso.
AL TERMINAR UNA SESIN: Tendrs que tratar los residuos para eliminar su peligrosidad
o los almacenars adecuadamente clasificados y etiquetados hasta que se retiren.
AL ABANDONAR EL LABORATORIO: Te asegurars de que no queda encendida la
campana extractora y ningn foco de peligro: gases, agitadores, calentadores, etc.
DISEO EXPERIMENTAL
Recomendaciones para realizar el diseo experimental:
Objetivos: Proponer experimentos fundamentados qumica e instrumentalmente para
cuantificar una sustancia de inters en su rea y para esto debe:
Estructurar y justificarlo en base a reacciones qumicas conocidas de uso comn.
Consultar la metodologa propuesta con el asesor con la finalidad de mejorarlo.
Aplicar el diseo para la cuantificacin de una muestra real.
Contrastar los resultados con el diseo propuesto a fin de identificar fuentes de error
tanto de diseo terico como experimental.

VIII

Para poder evaluar adecuadamente el desarrollo de los estudiantes en el diseo de
experimentos; se debe elaborar un formato que debe considerarse como una gua para
presentarlo a revisin con el asesor en la fecha sealada en el calendario
El formato de diseo experimental debe contener al menos los siguientes puntos:
Los objetivos que se persiguen con la experimentacin.
Listado de actividades generales. Desglosadas en cada parte (material y
reactivos, preparacin de soluciones, procedimiento experimental, etc.)
Programa desglosado por cada actividad general.
distribucin equitativa del trabajo para cada integrante del equipo de trabajo.
Tratamiento que darn a los resultados experimentales despus de obtenerlos
mediante un anlisis estadstico.
Referencias consultadas
El informe de Actividades Final (despus de efectuar la experimentacin
correspondiente) debe incluir los puntos anteriores as como el anlisis de resultados y los
clculos de contenido de sustancia en la muestra.
Por ltimo, es necesario hacer una recomendacin. La naturaleza misma del diseo
experimental es dinmica ya que durante su desarrollo se requiere una retroalimentacin
continua y consciente para afinar los aspectos del diseo que se han contemplado. El
hecho de que en esta asignatura se presente una gua para presentarlo a revisin no niega
su dinmica intrnseca, esto es, aunque durante su elaboracin cada estudiante debe
retroalimentarse con la informacin que poco a poco va obteniendo para ir modificando
cada aspecto del diseo en forma lgica y armnica.

IX

Los alumnos deben
1) Cubrir las prcticas que comprende este manual.
2) Elaborar una bitcora; la cual debe contener nombre de la prctica o sesin de
trabajo, fecha, todos los clculos y las mediciones (pesadas, preparacin de
disoluciones, cambios de procedimiento, observaciones, etc.) resultados (medidas
de propiedad, grficas), anlisis de resultados (clculos de contenido,
identificaciones, reacciones efectuadas) conclusiones y referencias consultadas.
3) En caso de error NO BORRAR NADA solo cruzar con una lnea y escribir lo
corregido abajo o a un lado.
NOTA: Es requisito contar con:
El 80% de asistencia al curso (10 minutos de tolerancia). La falta anula la calificacin
del reporte correspondiente.
Entrega puntual y en tiempo de los productos a evaluar (IT, ID, CP, etc.)
ACTIVIDADES CONTEMPLADAS PARA LA SEMANA No.1
1. El profesor expondr una introduccin sobre el curso de laboratorio, explicando las
actividades por realizar, el reglamento y la forma de evaluacin (ver apartado
evaluacin) e Informar sobre el Sistema de Gestin de Calidad (SGC).
2. Se incluirn las fechas en las actividades calendarizadas en el manual de prcticas.
3. Se le dar formato a la hoja de inscripcin (anotar el nombre de las prcticas).
4. Se formarn equipos (4-5 personas) de trabajo entre los alumnos del grupo.
5. Se les solicitar el siguiente material a los estudiantes, el cual estar bajo su propiedad
en gaveta por grupo que retirarn concluido el curso:
INDIVIDUAL POR EQUIPO (3-4 POR GRUPO

ESTUDIANTES)
Bata blanca y lentes de Bitcora de trabajo 1 candado con 3
proteccin llaves
Libreta y Manual de prcticas 2 frascos de plstico de 100 mL Servitoallas
8 frascos de plstico de 10 mL
1 Marcador o etiquetas Perilla de hule o propipeta Detergente lquido
pequeas Franela y escobilln
1 barra magntica Muestras por analizar en cada
prctica (ver manual) de acuerdo a
las fechas calendarizadas.

XI

ACTIVIDADES CONTEMPLADAS PARA LA SEMANA No.2
1 Se recordar el uso y manejo del material y reactivos que se utilizarn durante el curso
de laboratorio realizando clculos y pesadas en la balanza Analtica de algunas
soluciones de las prcticas que durante el semestre se utilizarn.
2 Recomendar a alumnos con nfasis a leer antes de cada prctica la introduccin y
parte experimental debido a que el cuestionario previo es individual y se aplica antes de
iniciar la sesin experimental.
3 Revisar el material solicitado asignando la gaveta que se ocupar por el grupo,
colocando este material en ella y etiquetando correctamente (Grupo, carrera, profesores,
semestre, etc.)
4 El profesor organizar y repartir el tratamiento, a los equipos de trabajo, de los
residuos generados en cada prctica.
5 Se avisar a los alumnos dnde y cundo se entregar la bitcora calificada cada
semana (de preferencia en un mismo lugar y da aunque la califique un profesor diferente
ya que son dos).
6 Se aplicar y resolver el examen diagnstico.
NOTA al Profesor: ver la bitcora de asignatura, en ella se encontrarn las soluciones a
preparar de cada grupo.

XII
PRCTICA No. 1
DETERMINACIN CUANTITATIVA DE AZUL DE TIMOL EN UNA MUESTRA DE
RESIDUOS MEDIANTE UNA CURVA DE CALIBRACIN ESPECTROFOTOMTRICA A
pH ALCALINO.

I. OBJETIVOS
Cuantificar azul de timol en una muestra mediante una Curva de Calibracin.
Evaluar la calidad y validez de los resultados experimentales mediante algunos
parmetros estadsticos.
II. INTRODUCCIN
El uso de curvas de calibracin para la cuantificacin de analitos es un recurso de gran
importancia en la qumica analtica, sin embargo, existen varios tipos de curvas
dependiendo de las caractersticas particulares del problema a tratar como ejemplo
tenemos a las curvas de calibracin, adiciones patrn, uso de estndar interno, valoracin,
etc.
El mtodo o curva de calibracin se utiliza particularmente para analizar mezclas sencillas,
cuando no existen interferencias fsicas o qumicas entre la matriz y el analito de inters en
la muestra problema, en general la respuesta analtica es debida exclusivamente a ste.
El mtodo consiste en preparar una solucin mediante pesada directa de un patrn
primario, con esta solucin patrn se preparan una serie de soluciones estndar que
cumplan con las siguientes caractersticas:
a) La concentracin del analito se incremente proporcionalmente (por ejemplo 2, 4, 6,
8, 10 ppm).
b) Se deben preparar al menos 5 sistemas (de diferentes concentraciones).
c) Los incrementos de concentracin entre los sistemas se recomienda que sean
constantes.
d) Que la matriz donde se preparan los estndares sea semejante a la del problema.
1
Prctica No. 1. Curva de calibracin espectrofotomtrica
Una vez preparados estos estndares, se procede a medir la propiedad o respuesta de los
sistemas en el instrumento adecuado y se obtienen una serie de valores con los que se
construye el grfico de P (propiedad o respuesta) en funcin de Cs (concentracin
estndar). La Figura 1, muestra un ejemplo donde el eje x corresponde a la concentracin
y en el eje y la respuesta o propiedad medida de cada estndar. Se observa que existe
una ecuacin matemtica que relaciona el comportamiento entre las dos variables. En la
mayora de los casos se ajusta a la ecuacin de una recta (y=mX+b) y mediante una
regresin (mnimos cuadrados) se obtiene la dispersin mnima entre los datos y su
ecuacin.
2.00
1.80
1.60
1.40
1.20
Propiedad
1.00
0.80
0.60
0.40
0.20
0.00
0 0.0002 0.0004 0.0006 0.0008 0.001 0.0012
Cstd
Figura 1. Ejemplo de una curva de calibracin
Por ltimo se realiza la lectura directa o de una dilucin apropiada para la cuantificacin del
analito problema (punto azul), que posteriormente se interpola en la grfica y se obtiene la
concentracin correspondiente, tambin se obtener mediante la resolucin de la ecuacin
obtenida de la regresin. La validez y calidad del resultado est relacionado con la
dispersin de los datos obtenidos, donde una mayor dispersin implica menor precisin.
2
Para evaluar la dispersin y por lo tanto, la calidad del valor que se reportar, se hace uso
de los parmetros estadsticos como: la desviacin estndar o el coeficiente de variacin,
entre otros.
Finalmente, para medir la respuesta de la propiedad P = Absorbancia, en este caso se
utilizar espectrofotometra de ultravioleta-visible (UV/Vis), una tcnica que se revisar ms
a fondo posteriormente y donde la relacin es A= K*C
III. EQUIPO(S), REACTIVO(S) Y MATERIAL(ES)
Material y Equipo Reactivos y Soluciones

Agua destilada
6 matraces volumtricos de 10 mL Solucin Estndar de azul de timol

1 matraz volumtrico de 25mL
Muestra problema de azul de timol
12 tubos de ensaye medianos con gradilla
2 vasos de precipitados de 50 mL Solucin de NaOH
1 Pipeta volumtrica de 1,2,3,4,5, mL
1 esptula pequea
1 piseta
Espectrofotmetro con celdas
Las soluciones se encontrarn preparadas en el anaquel de la asignatura
IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Tabla 1. Preparacin de la curva de Calibracin y problema (por duplicado)

Sistemas BCO 1 2 3 4 5 6
Soln. de NaOH 0.01 M 4 4 4 4 4 4 4
Soln. Problema (mL) 0 0 0 0 0 0 1
Solucin patrn de azul de timol aprox. 0 1 2 3 4 5 0
40 ppm (mL)
Aforo con agua destilada 10 10 10 10 10 10 10
Solucin de NaOH R-1
Reunir los sistemas del 1-6 (R-2)
3
Tabla 2.-Prueba de Adecuabilidad del sistema.
Sistema 1 2 3 4 5 6
Soln. de NaOH 0.01 M 4 4 4 4 4 4

Solucin patrn de azul de timol 3 3 3 3 3 3
aprox. 40 ppm (mL)
Aforo con agua destilada 10 10 10 10 10 10
2. Lectura de la propiedad para cada sistema utilizando el espectrofotmetro
2.1 Calibracin del instrumento
Realizar la calibracin del instrumento de acuerdo a instructivo anexo y siga las
indicaciones de los profesores.
2.2 Obtencin del espectro de absorcin. Determinacin de la longitud de onda
ptima ()
Con el sistema 5 que es el ms concentrado (en estndar) en relacin al analito de
inters (azul de timol) tomar las lecturas del espectrofotmetro de absorbancia (Abs) y
porcentaje de transmitancia (%T) en el intervalo de 500 a 700 nm con incrementos de
10 nm.(Nota: por cada cambio de se debe calibrar nuevamente el equipo).
Con los datos obtenidos se anotan en la Tabla 3 y construya la grfica 1. Por ltimo,
indique la longitud de onda ptima que seleccionara para cuantificar el azul de timol.
2.3 Lectura de absorbancia para cada sistema a la longitud de onda ptima.
A la ptima calibre el espectrofotmetro como se le indic anteriormente.
Una vez calibrado el equipo obtenga las lecturas de todos los sistemas (1-6) inicie
con l sistema ms diluido hasta terminar con el ms concentrado, enjuagando la
4
celda con el sistema siguiente.
Llene la tabla 4 y obtenga los valores promedio del factor de respuesta, la desviacin
estndar y el coeficiente de variacin (CV).
Concluya sobre la respuesta obtenida.
Calcule la concentracin de Azul de timol de cada sistema estndar y grafique
(Grfica 2) estos datos en relacin con el valor promedio de la absorbancia (Aprom),
obtenga la regresin lineal y concluya sobre la linealidad de la grfica.
Realice las lecturas para la Prueba de Adecuabilidad del sistema y concluya.
2.4 Determinacin de la concentracin de Azul de Timol Problema.
Determine la concentracin de la dilucin de la solucin problema por interpolacin en la
grfica (recuerde que se efecta una dilucin).
V. ANALISIS DE RESULTADOS
5
Tabla 4. Datos experimentales para el anlisis estadstico

Sistema Concentracin Azul A1 A2 Aprom
K = Aprom/ C
de Timol (C)
1
2
3
4
5
6
Problema desconocida
Kprom
STD
% RSD
Kprom = Factor de Respuesta promedio (constante de proporcionalidad)
Si la respuesta es lineal el factor de respuesta ser constante cualesquiera que sean los valores de A y C
STD = Desviacin estndar (por sus siglas en ingls)
% RSD = Porcentaje de desviacin estndar relativa* (por sus siglas en ingls) o coeficiente de variacin, un
valora bajo (menor al 2%) de este permite afirmar casi con certeza que el grfico A= f(C) es una recta.
Grfica 2. Absorbancia en funcin de la concentracin de azul de timol
Tabla 5.- Prueba de adecuabilidad del sistema permite verificar que el sistema de
medicin funciona apropiadamente, independientemente de las condiciones ambientales)
Sistema 1 2 3 4 5 6 Aprom STD %RSD

Absorbancia
%RSD un valora bajo (menor al 2%) de este permite afirmar con certeza que el sistema de medicin funciona
apropiadamente a pesar de variaciones ambientales.
6
VI. INFORME DE TRABAJO
ESQUEMA Y PUNTOS MNIMOS A EVALUAR PARA LA REALIZACIN DEL INFORME
DE TRABAJO.
1.- Datos Generales
I) CARTULA. Incluir en este orden: Nombre de la Universidad, nombre de la Facultad,
nombre de la Seccin, nombre de la asignatura comenzando con Laboratorio de,
Nmero y nombre de la prctica, Nmero de equipo, Nombre de los integrantes., solamente
de aquellos que participaron en su realizacin, se dar por entendido que los que no
aparezcan no recibirn calificacin correspondiente a esa prctica. Tambin es importante
recordar que aquellas personas que faltaron a la parte experimental de la prctica no
tendrn calificacin de reporte y por ende no se colocar su nombre, a menos que haya
repuesto la prctica en otro grupo bajo autorizacin de los profesores y su informe lo
realizar de manera individual), Nombre de los profesores (incluir grado: QFB, Q, M en C,
Dr., etc.), Fecha de realizacin de la prctica y Fecha de entrega de reporte.
II) NMERO Y NOMBRE DE LA PRCTICA.
III) OBJETIVOS PARTICULARES. Con base al objetivo general del Manual y a las
actividades realizadas en la prctica redactar 2-3 objetivos particulares recordando que
deben responder el Qu?, Cmo? y Para qu?.
IV) INTRODUCCIN. Incluir solamente aplicaciones de la Tcnica instrumental en las

diferentes reas que contempla su carrera, incluyendo ejemplos (recordar que deben citar
las referencias).
7
V) DIAGRAMA DE FLUJO. Incluir:

v Preparacin del STD; indicando los volmenes, masas y/o concentraciones reales
que se emplearon en caso de una modificacin a la parte experimental reportada
en el Manual. Si se emplean reactivos comerciales incluir la pureza y densidad (en
caso de reactivos lquidos).
v Preparacin de la muestra; indicando los posibles cambios realizados. Mencionar
la marca y presentacin de la muestra empleada en caso que el alumno la halla
proporcionado.
v Preparacin de los sistemas de la curva de calibracin; en forma de tabla
incluyendo nmero y nombre. Especificar la concentracin real de la solucin de
NaOH que se emple.
v Calibracin del equipo; paso a paso en forma de diagrama de flujo, puede incluir
imgenes o dibujos y ser con base a la explicacin del profesor no a lo reportado
en el Manual.
v Realizacin del espectro de absorcin; mismas consideraciones del punto anterior.
v Lectura de los sistemas de calibracin; mismas consideraciones del punto anterior.
v Disposicin de residuos; mencionar cmo se dispusieron los residuos en la sesin
experimental.
2) RESULTADOS. Incluir:
Tabla No. 3.- Datos experimentales del espectro de absorcin, completa.
Grfico del espectro de absorcin indicando nmero y nombre CORRECTO (el
nombre correcto de un espectro de absorcin incluye el nombre del analito, la
composicin de la matriz, as como las condiciones de amortiguamiento impuestas,
pH por ejemplo, y la concentracin del analito, la cual es bien conocida ya que se
emplea un sistema de la curva de calibracin para su realizacin), considerar que
se incluirn 2 grficos, uno en funcin de Absorbancia y otro en % Transmitancia.
Incluir tabla: con nmero y nombre.
No. Sistema Concentracin (unidades) Absorbancia promedio
Grfico de la curva de calibracin indicando nmero y nombre CORRECTO (el
nombre correcto del grfico de una curva de calibracin se puede indicar bajo el
modelo: PROPIEDAD=f[analito]UNIDADES).
Adems, debe incluir forzosamente: Ecuacin de la recta bajo el modelo:
PROPIEDAD = (valor de la pendiente) [analito]UNIDADES +/- (valor de la ordenada al origen)
8
No indicar la propiedad y la concentracin del analito como x y y, y tambin debe

incluir Coeficiente de determinacin (r2). Recordar que se tienen que incluir 2
grficos, uno con unidades de concentracin Molar y otro con unidades de
concentracin en ppm, cada uno con las especificaciones citadas anteriormente.
Muestra empleada (nombre comercial)

Presentacin
Lote y fecha de caducidad (u origen)
Marbete (enfocndose slo al analito que se cuantific experimentalmente)
Resultado experimental (reportado como en el marbete: por cpsula, por
100ml, etc.)
% de principio activo con respecto al marbete
3) ANLISIS DE RESULTADOS. Incluir:

Tabla No. 4.- Datos experimentales para el anlisis estadstico, adicionando una
columna final:
Sistema [analito]UNIDADES Abs1 Abs2 Abs3 AbsPROM STD %RSD Intervalo de
confianza
Realizar el anlisis e interpretacin correspondiente de stos datos, finalizando con

la justificacin del valor del coeficiente de determinacin y la validez de los
resultados de cuantificacin.
Analizar los criterios qumicos que se emplearon para elegir la ptima en los 2
espectros de absorcin.
Justificar porqu se consider ese rango de nm para realizar el barrido.
Analizar el efecto de la matriz (enfocndose en el pH) en la determinacin
ESPECTROFOTOMTRICA del azul de timol, emplee los valores del pKa del
analito para justificar su anlisis.
Analizar la relacin de las variables involucradas y contrastarlas con la Ley de
Lambert & Beer.
Calcular el Coeficiente de absortividad molar, incluyendo unidades correctas, la
manera de cmo se calcul con ambas grficas y su interpretacin.
9
Incluir los clculos de cuantificacin, en el siguiente orden: Clculo de la

concentracin del STD (debe coincidir con lo reportado en el diagrama de flujo en
Preparacin del STD), clculo de la concentracin de los sistemas de la curva,
Interpolacin de la propiedad de la muestra en la ecuacin de la curva, regresin a
las diluciones de la muestra (deben coincidir con lo reportado en el diagrama de flujo
en Preparacin de la muestra) y cambio de unidades a las similares al marbete as
como el % de principio activo; esto se debe reportar con los datos de ambas grficas,
al final discutir sobre los resultados obtenidos en ambas grficas.
Con base al % de principio activo (recordar que el comparativo entre el resultado
experimental y el reportado en el marbete) analizar los posibles errores que
condujeron a ese resultado, mencionando el tipo de error que cometi y las acciones
preventivas que sugieres para la mejora.
4) CONCLUSIONES. Con base al objetivo general del Manual y a los redactados por
ustedes (particulares).
5) REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS. Debern ser citadas ya sea en la introduccin o en

el anlisis de resultados en caso que se hallan empleado.
DATOS
Peso molecular de Azul de Timol = 466.6 g/mol.
pKa(s) de Azul de Timol = 2.0, 8.7 (rojo, amarillo, azul)
http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/b/bc/Thymolblau_skeletal.png
10
VIII. ORIENTACIONES PARA EL TRATAMIENTO DE LOS REACTIVOS UTILIZADOS
Nota. Mantener al azul de timol alejado de los siguientes reactivos:

Agentes Oxidantes fuertes, como Percloratos, Perxidos y Permanganatos (reaccin
rpida y violenta con riesgo de incendio y/o explosin).
Agentes Reductores fuertes, como Fosfuros, Estao II Cloruro e Hidruros Metlicos
(reaccin violenta y vigorosa)
11
PRCTICA No. 2
DETERMINACIN CUANTITATIVA DE CIDO ASCRBICO (VITAMINA C) EN
TABLETAS EFERVESCENTES MEDIANTE UNA CURVA DE CALIBRACIN
INDIRECTA ESPECTROFOTOMTRICA BAJO CONDICIONES DE
AMORTIGUAMIENTO.
I.-OBJETIVOS:
Cuantificar cido ascrbico en tabletas efervescentes mediante una curva de
calibracin indirecta bajo condiciones qumicas optimizadas.
Reconocer la sustancia que da la absorbancia al pH de trabajo, as como calcular el
coeficiente de absortividad a la longitud de onda seleccionada.
II.- INTRODUCCIN
Los principios de preparacin y trazo de una curva de calibracin ya fueron estudiados en
prcticas anteriores, donde se considera que la respuesta del instrumento es lineal respecto
a la concentracin de la sustancia a cuantificar, sin embargo debe considerarse que si la
curva es indirecta existe una o varias reacciones efectuadas en los sistemas de
preparacin, dado que la sustancia de inters da seal muy pobre o no da seal, este
reactivo que genera la reaccin debe encontrarse en exceso , considerando el siguiente
estado de equilibrio de manera general:
aX bY cZ Keq > 1
inicio Vst Cst
agrega V yC y
equilibrio a VyCy-b/a VstCst c/a VstCst
Cuando la propiedad la da Y el modelo matemtico que describe la respuesta grfica es:
P=KY Y
considerando el estado de equilibrio anterior entonces
12
Prctica No. 2. Curva de calibracin indirecta
Donde Vst, Vy, Vaforo, representan los volmenes de estndar, reactivo Y y de aforo
respectivamente. Cst , Cy corresponde a las concentraciones molares del estndar (stock) y
Y agregado para generar la reaccin.
Es importante sealar que el volumen de Y en todos los sistemas es constante y el que
cambia es de X.
Por lo que se puede graficar P=f (Vst Cst / V aforo), obtenindose una funcin de pendiente
igual a -Kyb/a y ordenada al origen igual a KyVyCy/Vaforo
En esta prctica se propone la cuantificacin indirecta de cido ascrbico en una forma

farmacutica, siguiendo las variaciones de una especie colorida (Y).
MATERIAL POR EQUIPO REACTIVOS
Agua destilada
8 tubos de ensaye con gradilla cido ascrbico estndar
6 matraces volumtricos de 10 mL Tabletas efervescentes (leer el marbete y
2 vasos de precipitados de 50 mL anotar el contenido de cido ascrbico)
1 pipeta volumtrica de 0.5 1, 2,3,4,5 mL 2,6 diclorofenol indofenol
3 matraz volumtrico de 25 mL
1 piseta
Buffer cido actico /Acetato 0.01 M pH=4.5
Esptula y mortero con pistilo
1 agitador magntico c/barra
1 embudo con papel filtro
Un espectrofotmetro con celdas.
13
IV.-PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
1. Preparacin de soluciones
a) Buffer de acetatos 0.01 M pH = 4.5
b) Solucin estndar de cido ascrbico: Se pesan 50 mg de cido ascrbico en un
vaso de precipitados de 50 mL se disuelven en aproximadamente 10 mL de Buffer
de acetatos pH= 5 y aforan a 25 mL con agua destilada (solucin A), de esta solucin
se toman 2 mL, y mezclan con 10 mL de Buffer pH=5 y se aforan a 25 mL con agua
destilada (solucin B stock 9 x10-4M)
c) Solucin de 2,6 diclorofenolindofenol (DFI) 0.04 M: Pesar 100 mg del reactivo en
un vaso de precipitados, adicionar 5 mL de buffer pH=4.5 agitar y trasvasar a un
matraz de 10 mL y aforar con agua destilada.
d) Solucin problema: Si la tableta contiene 1.0 g de ascrbico, se pesan 50 mg
de polvo de tabletas finamente pulverizadas y se afora a 10 mL con agua destilada.
Si la formulacin es de 2.0 g pesar 25 mg de polvo.
2. Preparacin de la curva de calibracin
Tabla 1 Preparacin de Sistemas (curva de calibracin y problema)

Sistema 0 1 2 3 4 5 6 7
Soln. Buffer de acetatos pH=4.5 2 2 2 2 2 2 2 2
-4
Soln. B (stock) de ascrbico (9x10 M) 0 1 2 3 4 5 0 0
Soln. de 2,6 diclorofenolindofenol 0.04 M 0 1 1 1 1 1 1 1
Soln. Problema 0 0 0 0 0 0 0.5 1
Aforo con agua destilada 10 10 10 10 10 10 10 10
R-3 Reunir los residuos de todos los sistemas (0-7)
3 Calibracin del espectrofotmetro: El procedimiento de calibracin se realizar de

acuerdo al instructivo utilizando al sistema cero como blanco reactivo.
4 Determinacin de (longitud de onda) de trabajo: Identifique cual es el sistema ms
concentrado en 2,6 diclorofenoindofenol y realice el espectro de absorcin, el cul
obtendr al variar la en el espectrofotmetro que en este caso en particular ser de
460 a 560 nm a intervalos de 10 nm (para cada cambio de se debe ajustar el
espectrofotmetro con el blanco nuevamente).
14
5 Registre los datos de absorbancia y % de Transmitancia en la tabla No. 1,

posteriormente se realizar el grfico correspondiente.
6 Obtenga la curva de calibracin: una vez que se ha elegido la longitud de onda, lea
los sistemas de la curva de calibracin registre los datos y graficar.
V. RESULTADOS EXPERIMENTALES
Tabla 2- Datos experimentales del espectro de absorcin.

Longitud de onda (nm) 460 470 480 490 500 510 520 530 540 550 560
Absorbancia
% Transmitancia
1.4
1.2
1
Absorbancia
0.8
0.6
0.4
0.2
0
460 470 480 490 500 510 520 530 540 550 560
Longitud onda /nm

Grfica 1.- Espectro de Absorcin A= f( Longitud de onda )
Tabla 3- . Curva de Calibracin Indirecta

Sistema 1 2 3 4 5 6 7
Concentracin M de
Ascrbico estndar
Absorbancia
15
1.4
1.2
1
Absorbancia
0.8
0.6
0.4
0.2
0
[cido Ascrbico]/M
Grafico 2.- Curva de Calibracin Indirecta de Ac. Ascrbico A = f([AA]/M)

DE TRABAJO.
1.- Datos Generales

I) CARTULA. Incluir en ste orden: Nombre de la Universidad, nombre de la Facultad,
Nmero y nombre de la prctica, Nmero de equipo, Nombre de los integrantes (solamente
16
VI) INTRODUCCIN. Incluir solamente aplicaciones del Mtodo de cuantificacin en las

las referencias).

Preparacin del STD; indicando los volmenes, masas y/o concentraciones
reales que se emplearon en caso de una modificacin a la parte experimental
reportada en el Manual. Si se emplean reactivos comerciales incluir la pureza y
densidad (en caso de reactivos lquidos).
Preparacin de la muestra; indicando los posibles cambios realizados. Mencionar
la marca, presentacin y gramaje de la muestra empleada en caso que el alumno
la halla proporcionado.
Preparacin de los sistemas de la curva de calibracin; en forma de tabla
incluyendo nmero y nombre. En el caso del buffer especificar la concentracin y
pH reales con las que se trabajaron, as como de la solucin DFI.
Calibracin del equipo; paso a paso en forma de diagrama de flujo, puede incluir
en el Manual.
Realizacin del espectro de absorcin; mismas consideraciones del punto
anterior.
Lectura de los sistemas de calibracin; mismas consideraciones del punto
anterior.
Disposicin de residuos; mencionar cmo se dispusieron los residuos en la sesin
experimental.
17
Tabla No. 2.- Datos experimentales del espectro de absorcin, completa.
Grfico del espectro de absorcin indicando nmero y nombre CORRECTO (el
nombre correcto de un espectro de absorcin incluye el nombre del analito, la
composicin de la matriz, as como las condiciones de amortiguamiento
impuestas y la concentracin del analito, la cual es bien conocida ya que se
emplea un sistema de la curva de calibracin para su realizacin), considerar que
se incluirn 2 grficos, uno en funcin de Absorbancia y otro en % Transmitancia.
Tabla No. 3.- Datos experimentales de la Curva de calibracin.
PROPIEDAD = (valor de la pendiente) [analito]UNIDADES +/- (valor de la ordenada
al origen)
No indicar la propiedad y la concentracin del analito como X y Y, y tambin
debe incluir Coeficiente de determinacin (r2).

Presentacin
Resultado experimental (reportado como en el marbete: por cpsula, por 100ml, etc.)
Realizar el anlisis e interpretacin correspondiente al valor del coeficiente de

determinacin para la validez de los resultados de cuantificacin.
Analizar los criterios qumicos que se emplearon para elegir la ptima en los 2
espectros de absorcin. Adems justificar porqu se consider ese rango de nm
para realizar el barrido.
Identificar y calcular las condiciones de amortiguamiento impuestas en los
sistemas de la curva; adems, proponer la reaccin representativa llevada a cabo
entre el cido ascrbico y el DFI, as como el clculo de la Keq considerando
18
que en los equilibrios redox el clculo de la Keq no es mediante Ley de accin

de masas, sino mediante la frmula general considerando los E
Lambert & Beer.
manera de cmo se calcul especificando de que analito corresponde y su
interpretacin.
concentracin del STD (debe coincidir con lo reportado en el diagrama de flujo
en Preparacin del STD), clculo de la concentracin de los sistemas de la curva,
Interpolacin de la propiedad de la muestra en la ecuacin de la curva, regresin
a las diluciones de la muestra (deben coincidir con lo reportado en el diagrama
de flujo en Preparacin de la muestra) y cambio de unidades a las similares al
marbete as como el % de principio activo; esto se debe reportar con los datos de
ambos sistemas problema (6 y 7), al final discutir sobre los resultados obtenidos
en ambos sistemas (6 y 7).
Con base al % de principio activo (recordar que el comparativo entre el resultado
experimental y el reportado en el marbete) analizar los posibles errores que
condujeron a ese resultado, mencionando el tipo de error que cometi y las
acciones preventivas que sugieres para la mejora.

DATOS
cido ascrbico(C6H8O6) pKas = 4.05, 7.25
2,6 diclorofenolindofenol (C12H7Cl2NO2) pKa= 5.758 (forma cida roja, bsica azul)
C6H7O6- C6H6O6 + H+ + 2e- Eo = 0.13 V (pH=4.5)
C12H7Cl2NO2 C12H7Cl2NO22- Eo = 0.43 V (pH=4.5)
(roja) (Incolora)
19
VII. ORIENTACIONES PARA EL TRATAMIENTO Y DISPOSICIN DE RESIDUOS

El cido actico glacial debe trabajarse en la campana extractora utilizando una perilla y
nunca cerca de algn mechero, aadir siempre el cido al agua, tener precaucin al
preparar la mezcla debido al desprendimiento de calor. La inhalacin de sus vapores es
altamente txico produce trastornos en las vas respiratorias. Cualquier contacto directo con
la piel u ojos debe de lavarse con abundante agua.
2,6-diclorofenolindofenol
(mezclado con ascrbico a
pH cido)
R-3
Neutralizar con bicarbonato
Almacenar para posterior

tratamiento
20
PRCTICA No. 3
DETERMINACIN CUANTITATIVA DE HIERRO Y ZINC EN UN MULTIVITAMNICO
MEDIANTE UNA CURVA DE CALIBRACIN POR ESPECTROFOTOMETRA DE
ABSORCIN ATMICA
I. OBJETIVOS
Conocer el fundamento, las partes bsicas y manejo del espectrofotmetro de
absorcin atmica, para obtener resultados confiables en este tipo de instrumento.
Interpretar y relacionar las variables a utilizar para efectuar el clculo de contenido
de dos analitos (hierro y zinc) en un multivitamnico comercial por una curva de
calibracin directa.
II. INTRODUCCIN
La curva de calibracin se prepara mediante diluciones de una solucin estndar (stock) de

la misma naturaleza del analito a determinar en la muestra, en un intervalo que pueda ser
trabajado en el instrumento y la muestra se prepara de manera tal que la concentracin del
analito en la muestra o en su dilucin se encuentre dentro de dicho intervalo.
Las soluciones preparadas se llevan al instrumento de medicin y se registra una respuesta
P para cada dilucin de estndar y de muestra. Los resultados se grafican P=
f(concentracin de cada dilucin del estndar). Se debe evaluar la linealidad de la respuesta
en relacin a la concentracin del analito mediante la inspeccin grfica y se efecta
adems la regresin lineal para determinar la mejor ecuacin que exprese el
comportamiento de la misma. La interpolacin de la seal de la muestra (o su dilucin) en
la recta permite conocer la concentracin de esta.
La Espectrometra de Absorcin Atmica (EAA) se utiliza habitualmente en la determinacin
cuantitativa de soluciones de iones metlicos Se ha aplicado a determinacin de hasta 70
elementos, en concentraciones trazas (ppb) y hasta 1%. Cabe mencionar que esta tcnica
no diferencia estados de oxidacin de los metales, por lo que solo se mide la cantidad de
metal total.
Previo a la cuantificacin por EAA es necesario realizar una digestin cida a fin de eliminar
la presencia de materia orgnica, an en muestras lquidas y adems para solubilizar los
metales, sobretodo en muestras slidas. Para ello se utiliza normalmente cido ntrico
concentrado y calor, hasta que no se generen humos amarillos, reflejo de que todava hay
una reaccin redox presente.
21
Prctica No. 3. Espectrofotometra de Absorcin Atmica
El zinc es un nutriente que nos aporta casi todas las enzimas de la piel, incluyendo aquellas
que se encargan de crear el colgeno y producir nuevas clulas, tanto el zinc como el hierro
son fundamentales en la produccin de clulas en los folculos capilares y en el transporte
de oxgeno, etc.
A continuacin, se presenta un esquema de un espectrofotmetro de absorcin atmica
con flama (EAA-F).
MATERIAL Y EQUIPO REACTIVOS

1 piseta Multivitamnico Fortimin (sol. oral infantil)
1 esptula Cloruro de Zn y Fe
1 Pipeta volumtrica de 1, 2, 3, 4, 5 mL
3 vasos de precipitados de 50 mL
1 micropipeta de 100 L (vol. Variable)
1 parrilla con agitador magntico c/barra
cido ntrico R.A.
6 tubos de ensaye con gradilla
1 Matraces volumtricos de 25 mL
6 Matraces volumtricos de 10 mL
22
1.1 Preparacin de soluciones (algunas soluciones se encontrarn preparadas en el

anaquel de la asignatura, revisar y solo preparar la que falte)
Solucin de cido ntrico 1 M.
Solucin estndar de Zn y Fe Se mide 1 ml de una solucin de Zn elemental 100
ppm con pipeta volumtrica y se mezclan con 3 ml de una solucin de Fe
elemental 250 ppm, aforar a 25 ml con solucin cida (soln. Stock).
Solucin problema del multivitamnico - Medir 0.1 mL del multivitamnico Fortimn
(sol. oral infantil) agregar con mucho cuidado 2 mL de cido ntrico concentrado,
mezclando con agitacin magntica y con calentamiento en parrilla a 100 oC
(colocarla dentro de la campana de extraccin), para eliminar el azcar, hasta que
no se generen humos amarillos. Enfriar y aforar a 10 mL con Soln. cida. (Soln.
Problema)1
1.2 Preparacin de sistemas para la curva de calibracin problemas

Tabla 1 Preparacin de los sistemas
Sistema 0 1 2 3 4 5 6Fe 7Zn
Soln. Acida (mL) 3 3 3 3 3 3 3 3
Soln. Stock Zn aprox. 4 ppm y Fe 0 1 2 3 4 5 0 0
aprox. 30 ppm (mL)
Soln. Problema (mL) 0 0 0 0 0 0 1 0.12
10 10 10 10 10 10 10 10
R-4 Reunir los residuos de todos los sistemas (0-7)
1.3 Obtencin de resultados

a) Optimizar las condiciones de medicin en el equipo (EAA-Fl).
Siguiendo el programa que controla el equipo, revisar que estn las siguientes condiciones:
muestreo manual, mezcla de gases = acetileno /aire, seal absorbancia, posicin correcta
de la lmpara, longitud de onda () 213.9 nm, ancho de banda = 0.7, voltaje de la lmpara
=15 A, etc. (para determinacin de zinc)

1
No sobrepasar la temperatura y tener paciencia hasta que la solucin quede lo ms transparente posible
23
b) Optimizacin de la lmpara de ctodo hueco.

El procedimiento se realizar siguiendo las indicaciones del profesor para alinear la lmpara
de ctodo hueco hacia el monocromador y la posicin del quemador.
c) Medicin de la Absorbancia.
Considerando las indicaciones del programa de trabajo del equipo, primero se emplea agua
destilada y despus el blanco reactivo (sistema blanco) para calibrar la seal a cero.
Despus se solicitan las soluciones estndar y problemas, anotar la lectura promedio de
las mediciones que realiza (Tabla 2) y graficar los resultados que se van obteniendo.
d) Se repite la operacin desde la optimizacin de condiciones de medicin

cambiando () 248.3nm, ancho de banda = 0.7, voltaje de la lmpara =5 A, etc.
para medir el contenido de Fe, los resultados se vierten en tabla 3
Tabla 2. Resultados experimentales obtenidos.

Sistema Fe (ppm) estndar Absorbancia
1
2
3
4
5
6
1
0.9
0.8
0.7
Absorbancia
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
[Fe]/ppm
Grfica 1. Absorbancia en funcin de la concentracin de Fe
24
Tabla 3. Resultados experimentales obtenidos.

Sistema Zn (ppm) estndar Absorbancia
1
1
0.9
0.8
0.7
Absorbancia
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
[Zn]/ppm
Grafica 2. Absorbancia en funcin de la concentracin de Zn
25
VI. INSTRUCCIONES PARA EL INFORME DE TRABAJO

DE TRABAJO.
1.- Datos Generales


las referencias).

Preparacin del STD; indicando los volmenes, masas y/o concentraciones reales
que se emplearon en caso de una modificacin a la parte experimental reportada en
el Manual. Si se emplean reactivos comerciales incluir la pureza y densidad (en caso
de reactivos lquidos).
26
Preparacin de la muestra; indicando los posibles cambios realizados. Mencionar la

marca y presentacin de la muestra empleada en caso que el alumno la halla
proporcionado. Incluir tabla:

Peso de polvo de tableta empleada (unidades):
Peso promedio por tableta (unidades):
Preparacin de los sistemas de la curva de calibracin; en forma de tabla incluyendo

nmero y nombre. En el caso de la solucin cida indicar la concentracin molar
empleada.
Optimizacin del equipo; paso a paso en forma de diagrama de flujo, puede incluir
en el Manual. Recuerde especificar la mezcla de gases, longitud de onda y voltaje
de la lmpara que realmente se emplearon.
Optimizacin de la lmpara de ctodo hueco; mismas consideraciones del punto
anterior.
Calibracin con el sistema blanco y lectura de los sistemas de la curva de
calibracin; mismas consideraciones del punto anterior. No olvidar mencionar qu
se debe hacer una vez que se termin de usar el equipo ya para apagarlo.
experimental.
Tabla No. 1.- Datos experimentales de la Curva de calibracin. Adicionando una
columna ms donde coloquen la concentracin molar (M) de cada sistema.
PROPIEDAD = (valor de la pendiente) [analito]UNIDADES +/- (valor de la ordenada
al origen)
No indicar la propiedad y la concentracin del analito como x y y, y tambin
debe incluir Coeficiente de determinacin (r2). Recordar que se tienen que incluir 2
grficos, uno con unidades de concentracin Molar y otro con unidades de
concentracin en ppm, cada uno con las especificaciones citadas anteriormente.
27

Presentacin
100ml, etc.)

Incluir la copia de la hoja del Manual del equipo de Absorcin atmica para la
medicin de Cobre.
Analizar los criterios qumicos que se emplearon para elegir la ptima, se puede
apoyar con la curva de calibracin terica de la hoja para medicin de Cobre por
absorcin atmica y al rango de concentraciones que se manejaron
experimentalmente en la curva de calibracin.
Mencionar la temperatura que alcanz la llama con la mezcla de gases que
emplearon.
Describir brevemente con sus propias palabras como funciona la lmpara de
ctodo hueco y como se lleva a cabo el proceso de nebulizacin y atomizacin.
Mencionar las posibles interferencias que se pueden llevar a cabo y cmo
evitarlas para que no afecten en la medicin y lectura de los sistemas, hablando
de manera particular para el Cobre.
Lambert & Beer.
manera de cmo se calcul con ambas grficas y su interpretacin.
Escribir la reaccin que se lleva a cabo en la Digestin cida con HNO3
concentrado, justificando el nombre de la entidad qumica que se genera en forma
de gas caf rojizo y el por qu se realiz en la prctica.
28

marbete as como el % de principio activo; esto se debe reportar con los datos de
ambas grficas, al final discutir sobre los resultados obtenidos en ambas grficas.
Con base al % de principio activo (recordar que es el comparativo entre el
resultado experimental y el reportado en el marbete) analizar los posibles errores
que condujeron a ese resultado, mencionando el tipo de error que cometi y las


29

La inhalacin de vapores de cido ntrico y sus productos de reaccin produce trastornos
en las vas respiratorias, usarlo siempre en la campana extractora.
La solucin cida sobrante de todo el grupo se debe mezclar y guardar bien etiquetada
indicando fecha de preparacin y concentracin aproximada en frasco de vidrio.
Mezcla de Zn y Fe (II)
en sol. cida
R-4
Agregar aproximadamente
de 100 a 150 mL de agua
Eliminar con abundante

agua
30
1 SESION DE EJERCICIOS
1 El coeficiente de Absortividad Molar de una solucin acuosa de fenol a 211 nm es

de 6170 M-1cuando se mide en celdas de 1 cm calcular el intervalo de
concentraciones en el cual la absorbancia no es menor a 0.15 ni mayor de 0.8.
2 Trazar la curva de Calibracin espectrofotomtrica de para Bi(III) de concentracin

1x10-3 M (solucin stock) a pH = 1.0, si el coeficiente de absortividad molar del Bi(III)
es 5300 M-1 a =265 nm por AA
3 Para determinar la glucosa en un suero sanguneo se prepararon los siguientes

Sistema 1 2 3 4 5 6 7 8
NaOH 0.1 M 3 3 3 3 3 3 3 3
-3
Estndar de glucosa 2x10 M 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0 0 0
3-
Sol. Fe(CN)6 0.01M 2 2 2 2 2 2 2 2
Suero sanguneo * 0 0 0 0 0 0.1 0.1 0.1
Aforo con agua destilada 10 10 10 10 10 10 10 10
Absorbancia a 420 nm 1.4 1.07 0.80 0.45 0.05 0.885 0.876 0.895

MM glucosa= 180.15 g/mol

a) Graficar y obtener la funcin, mencionando el color de la sustancia que da la seal
b) Calcular los mg promedio de glucosa / dL de suero.
c) Calcular la media, desviacin estndar y % CV del problema.
d) Calcular el coeficiente de absortividad molar de Fe(CN)63-
31
1 sesin de ejercicios
4. Resultados Obtenidos para evaluar la adecuabilidad del sistema en la determinacin

de Ampicilina/ Bromhexina en una formulacin por espectrofotometra, completar la
tabla
Sistema Bromhexina Ampicilina

1 0.5698 0.659
2 0.5841 0.676
3 0.6113 0.674
4 0.5817 0.677
5 0.5852 0.657
6 0.5398 0.664
Promedio
Desviacin Estndar
CV %
a) Decir si el sistema de medicin empleado funciona adecuadamente Por qu?
5. Los siguientes datos fueron obtenidos en la calibracin de un espectrofotmetro

para la determinacin de potasio en agua mineral
mg K /100 ml 1.1 1.95 2.9 3.85 4.6 4.95

Respuesta 14.2 28 37.3 48.4 62.7 69.4
a) Deducir la ecuacin de la mejor lnea recta

b) Si la muestra de agua da una seal de 30.3 Cul es el contenido de K en la
muestra?
32
PRCTICA No. 4
DETERMINACIN CUANTITATIVA DE CLORHIDRATO DE FENILEFRINA EN
UN PRODUCTO FARMACUTICO (TABLETAS Y/O GOTAS) MEDIANTE UNA
CURVA DE CALIBRACIN POR CROMATOGRAFA DE LQUIDOS DE ALTA
RESOLUCIN (HPLC).
I. OBJETIVOS
Conocer los componentes bsicos del cromatgrafo de lquidos de alta
resolucin (HPLC, por sus siglas en ingls), as como su manejo y cuidados.
Conocer un cromatograma y su uso para anlisis cualitativo y cuantitativo.
Interpretar y relacionar variables a utilizar para efectuar para efectuar el clculo
de contenido de clorhidrato de fenilefrina por una curva de calibracin en
productos comerciales.
II. INTRODUCCIN
La Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin (HPLC, por sus siglas en ingls) es la
tcnica de separacin ms ampliamente utilizada en la industria, debido a su sensibilidad.
Su fcil adaptacin a determinaciones cuantitativas es idnea para sustancias no voltiles
o termolbiles de aplicacin en la industria, en muchos campos de la ciencia y para la
sociedad en general.
En la Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin, se ponen en contacto dos fases
inmiscibles, una mvil y la otra estacionaria. Una muestra que se introduce en la fase mvil
es transportada a lo largo de la columna que contiene a la fase estacionaria distribuida. Los
componentes separados emergen en orden creciente de interacciones con la fase
estacionaria. La migracin depende de la solubilidad de los solutos en fase mvil o
estacionaria.
Los mtodos de evaluacin para las determinaciones cuantitativas por medio de HPLC son
variados. Entre ellos tenemos: 1) la calibracin con estndares, 2) utilizacin de un estndar
interno y normalizacin del rea.
Sin lugar a duda, la calibracin con estndares es el mtodo ms utilizado en HPLC .
El xito de la separacin para un compuesto dado depende de las condiciones de operacin
como son: tipo y longitud de columna, proporcin y tipo de fase mvil, velocidad de flujo de
la fase mvil, etc.
33
Prctica No. 4. Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin
Componentes bsicos que integran un equipo de HPLC

Equipo y material Reactivos y smbolo de peligrosidad
Metanol grado HPLC
Cromatgrafo de lquidos de alta resolucin

HPLC Trietanolamina
agitador magntico c/barra
2 matraces aforados de 25 mL
1 esptula
Piseta
6 matraces aforados de 10 mL (grupo) cido actico
2 vasos de precipitados de 50 ml
1 pipeta volumtrica de 1,2,3,4,5 mL
1 pipeta graduada de 2 y 6 mL
1 micropipeta de 10 a 100 microlitros Clorhidrato de Fenilefrina
Fenilefrina problema (puede utilizar producto

genrico solo verificando que no contiene
paracetamol)
34
PREPARACIN DE SOLUCIONES (verificar en el anaquel las soluciones ya preparadas)

1 FASE MOVIL [cido Actico-Trietanoamina-H2O (1.5:0.5:98)]
Se filtra al vaco a travs de una membrana con dimetro de poro 0.45mm.
Se coloca en un frasco perfectamente limpio y se lleva al ultrasonido 15 minutos.
2 SOLUCIN ESTNDAR DE FENILEFRINA
Se pesa en un vaso de precipitados de 50 mL, con balanza analtica, 20 mg del
estndar de fenilefrina, se disuelve en aproximadamente 20 mL de agua
desionizada con agitacin y se afora a 25 mL con fase mvil (Soln. A).
De la soln. A se toma una alcuota, con pipeta volumtrica, de 1 mL llevando a un
aforo de 25 mL con agua desionizada (Sol. Stock)
3 SOLUCIN PROBLEMA DE FENILEFRINA
Solucin Oftlmica: Se toma una alcuota de 20 L de la solucin oftlmica2, se
adicionan a aproximadamente 5mL de fase mvil y se afora a 50 mL con agua
desionizada (Soln.P1).
Tabletas Pesar 5 tabletas y obtener el peso promedio por tableta (Anotarlo).

2
De acuerdo al marbete: 10g de fenilefrina / 100 mL de solucin
35
3
Triturar 2 tabletas y pesar la cantidad de polvo equivalente a 1 mg de
fenilefrina.
Disolver el polvo en 5 mL de fase mvil.
Filtrar para eliminar los excipientes que hayan quedado sin disolver
Aforar a 10 mL, con agua desionizada (soln. P2.)
Solucin P2
R-6
4 Preparacin de la curva de calibracin y problemas
Tabla 1 Preparacin de los sistemas

Sistemas 1 2 3 4 5 6 7
Sol Stock de fenilefrina aprox. 32 ppm 1 2 3 4 5 0 0
Soln. P (1) soln. oftlmica 0 0 0 0 0 3 0
Soln. P (2) tabletas 0 0 0 0 0 0 1
Aforo a mL con agua desionizada 10 10 10 10 10 10 10
Trasvasar los sistemas debidamente etiquetados a frascos de plstico de aproximadamente
20 mL y Colocar las soluciones en el ultrasonido aproximadamente 5 minutos.

3
Calcular la cantidad de polvo a pesar de acuerdo al marbete del medicamento (que no debe
contener paracetamol)
36
Tabla 2 condiciones de la instrumentacin para la corrida cromatogrfica

Tipo de Flujo de fase Detector Longitud de Volumen de
columna Mvil onda Inyeccin
C-18 0.8 mL/min UV/VIS 272 nm 20 L
5. CONDICIONES DEL EQUIPO

a) Fijar el flujo de la fase mvil en la bomba
b) Ajustar la longitud de onda del detector
c) Iniciar el arranque del fluir de la fase mvil por la columna durante 15 min para
asegurar que no est contaminada la columna.
d) Inyectar 20L de las soluciones estndar, iniciando con el menos concentrado.
e) Finalizar con la inyeccin de las soluciones problema.
f) Despus de la ltima inyeccin, lavar la columna con una fase mvil Metanol/Agua
Llenar la siguiente tabla con los resultados obtenidos del cromatograma obtenido o en su
caso efectuar el clculo para cada una de las soluciones inyectadas.
Sistema Concentracin Tr (min) Wo rea Altura N AEPT
(ppm) W1/2
(s)
Tr= tiempo de retencin, W= ancho de pico a la base, N= Nmero de platos tericos, AEPT= altura
equivalente de un plato terico, ppm (partes por milln).
37

DE TRABAJO.
1.- Datos Generales


las referencias).

Preparacin del STD; indicando los volmenes, masas y/o concentraciones reales
que se emplearon en caso de una modificacin a la parte experimental reportada en
el Manual. Si se emplean reactivos comerciales incluir la pureza y densidad (en caso
de reactivos lquidos).
Preparacin de la muestra; indicando los posibles cambios realizados. Mencionar la
marca y presentacin de la muestra empleada en caso que el alumno la halla
38
proporcionado. Si trabajaron con tabletas y gotas se debe describir la preparacin

por separado de cada muestra. Mencionar la composicin y proporcin de la Fase
mvil que se emple y describir brevemente cmo y con qu se llev a cabo el
proceso de filtracin. No olvidar mencionar el proceso de sonicacin. Incluir tabla:
Peso de polvo de tableta empleada (unidades):
Preparacin de los sistemas de la curva de calibracin; en forma de tabla incluyendo

nmero y nombre. No olvidar mencionar el proceso de sonicacin.
Optimizacin y preparacin del equipo; paso a paso en forma de diagrama de flujo,
puede incluir imgenes o dibujos y ser con base a la explicacin del profesor no a
lo reportado en el Manual. Recuerde especificar el lavado previo de la columna
(Fase estacionaria) y con qu Fase mvil, tipo de columna empleada (Tipo, marca
y longitud), Velocidad de flujo impuesto en la bomba, tipo de detector y longitud de
onda empleada. No es necesario mencionar las condiciones impuestas en el
integrador.
Lectura de los sistemas de la curva de calibracin; mismas consideraciones del
punto anterior. Enfatizar cmo se debe cargar la jeringa con la muestra para inyectar
y propiamente el proceso de inyeccin de la muestra al equipo. No olvidar mencionar
qu se debe hacer una vez que se termin de usar el equipo ya para apagarlo.
experimental.
Incluir los cromatogramas con nmero y nombre, tanto de TODOS los sistemas de
la Curva de calibracin como de su(s) muestra(s). Recortar y pegar de forma limpia
y ordenada, no solamente engraparlos, y sombrear con marcatextos los datos del
pico de la fenilefrina.
Tabla No. 1.- Datos experimentales de la Curva de calibracin y parmetros
cromatogrficos. Recuerda que la altura ser medida con una regla ya que es un
39
dato que no da el cromatograma. Se incluir una columna adicional al final que diga
Intervalo de confianza para cada sistema.
o Adems, debe incluir forzosamente: Ecuacin de la recta bajo el modelo:
o PROPIEDAD = (valor de la pendiente) [analito]UNIDADES +/- (valor de la
ordenada al origen)
o No indicar la propiedad y la concentracin del analito como x y y, y
tambin debe incluir Coeficiente de determinacin (r2). Recordar que se
tienen que incluir 2 grficos, uno con rea como propiedad y otro con altura,
cada uno con las especificaciones citadas anteriormente.
Incluir tabla: con nmero y nombre. Si emple 2 muestras, sern 2 tablas, uno por
cada muestra.

Presentacin
100ml, etc.)

Analizar los criterios qumicos que se emplearon para elegir la ptima de lectura
en el equipo.
Analizar qu tipo de cromatografa se emple con base a las polaridades de la
Fase mvil y Fase estacionaria, y tambin con base a la proporcin de la Fase
mvil a lo largo de la corrida cromatogrfica, indicando el orden de separacin de
los analitos con base a su polaridad (quin saldra primero y al ltimo y porqu).
40
Analizar el efecto que tiene la trietanolamina de la Fase mvil en la separacin

de los analitos.
Mencionar que datos del cromatograma usaron para IDENTIFICAR el pico de la
fenilefrina y que datos usaron para CUANTIFICAR, indicando porqu.
Discutir cul es el motivo del porqu se les sugiere muestras farmacuticas sin
paracetamol.
Analizar si es posible relacionar las variables involucradas y contrastarlas con la
Ley de Lambert & Beer, as como calcular el Coeficiente de absortividad molar
de la fenilefrina con base a los grficos.
Incluir los clculos de N (# de platos tericos) y AEPT (o H) para cada sistema;
adems, calcular el tR promedio, N promedio y AEPT promedio y realizar el
anlisis correspondiente de estos parmetros cromatogrficos para justificar si la
separacin y corrida cromatogrfica fue eficiente.
marbete as como el % de principio activo; esto se debe reportar para cada una
de las muestras que se trabajaron y cada una empleando la curva con rea y con
altura, al final discutir sobre la variabilidad de ambos resultados.

41
Procurar generar y guardar la menor cantidad de residuos. Aquellas soluciones que puedan
ser re-utilizadas deben emplearse o bien ser desechadas adecuadamente.
Metanol en solucin acuosa CLORHIDRATO DE FENILEFRINA

(solucin cida)
R-6 R-5
Destilacin fraccionada para Agregar entre 100 a 150 mL

recuperar el metanol de agua
Aadir NaOH 5% hasta alcanzar un Aadir NaOH 5% hasta alcanzar un

pH=7 (solucin restante) pH entre 5-7
Verter al drenaje con Verter al drenaje con

agua abundante agua abundante
42
PRCTICA No. 5
DETERMINACIN CUANTITATIVA DE ALCOHOL ETLICO EN ENJUAGUE BUCAL MEDIANTE
EL MTODO DE ADICIN DE ESTNDAR INTERNO POR CROMATOGRAFA DE GASES

I. OBJETIVOS
Aplicar los conocimientos tericos adquiridos para emplear el mtodo de adicin del
estndar interno al realizar un anlisis cuantitativo.
Conocer e identificar las partes bsicas del cromatgrafo de gases para capacitarse
en su manejo a fin de obtener resultados confiables.
II. INTRODUCCION
En Cromatografa de Gases (CG) la muestra se inyecta y volatiliza en la cabeza de una
columna cromatogrfica. La elucin se produce por el flujo de una fase mvil, un gas inerte
(no interacciona con las molculas del analito) cuya nica funcin es la de transportar el
analito a travs de la columna (fase estacionaria). Al pasar por la columna los solutos son
separados y eluyen hacia el detector, cuya respuesta se visualiza en un integrador o una
computadora.
Los estndares internos tienen su mxima utilidad cuando hay prdidas inevitables de la
muestra, por ejemplo durante una inyeccin manual en CG. Si se agrega un estndar
interno a una mezcla antes de cualquier prdida, entonces la fraccin de estndar que se
pierde es la misma que la fraccin de la muestra que se pierde y el cociente (Cmta/Cstd)
permanece constante.
Un compuesto para ser utilizado como Estndar Interno (EI), debe reunir los siguientes
requisitos: a) que el pico de respuesta est cercanos pero resuelto de los componentes a
determinar, b) que sea estable y qumicamente inerte, c) tener estructura similar al
componente a determinar, d) no estar presente en la muestra original y e)tener alto grado
de pureza.
43
Prctica No. 5. Cromatografa de Gases
Los enjuagues bucales llevan la finalidad primordial de corregir el mal aliento de origen
bucal, tornndolo agradable. Para ello, deben controlar el desarrollo bacteriano y dejar la
boca agradablemente fresca, por eso integran en su composicin etanol.
1. Fase mvil (gas)

2. Puerto de inyeccin
3. Columna (FE)
4.Horno de la columna
5. Detector
6. Computadora
Esquema de un cromatgrafo de gases
REACTIVOS MATERIAL EQUIPOS
Alcohol etlico 6 tubos de ensaye de volumen Cromatgrafo de
pequeo con gradilla gases con detector
2 vasos de precipitado de 50 mL de ionizacin de
1piseta flama
Alcohol n-proplico 1 jeringa para CG de 10 L
1 micropipeta de 100 a 1000 L
44
V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
1. Preparacin de soluciones
Solucin estndar externo. Tomar 200 L de etanol y adicionar 800 L de agua
destilada en un tubo de ensaye (Soln. 1).
Solucin estndar interno. Tomar 100 L de n-propanol, colocarlos en un tubo de
ensayo y adicionar 900 L de agua destilada; (Soln. 2).
Mezcla de estndares. Colocar en un tubo de ensayo 100 L de la Soln. 1 y 100 L
de la Soln. 2 y adicionar 800 L de agua destilada.
Solucin problema. Colocar en un tubo de ensayo 100 L de la Soln. 2 y 100 L del
enjuague bucal y adicionar 800 L de agua destilada
2.- DESARROLLO EXPERIMENTAL
Conectar y verificar las conexiones elctricas del equipo
Abrir las vlvulas de los tanques de gas (nitrgeno e hidrgeno) y las llaves de paso.
Encender el equipo y dejarlo calentar.
a) Seleccionar las condiciones de medicin en el equipo (CG-FID).
Siguiendo la pantalla y el programa que controla el equipo, revisar que estn las siguientes
condiciones.
45
Tabla 1. Parmetros a emplear para la separacin de alcoholes por CG-FID
PARMETRO CONDICIONES
Columna DB-wax 30 m Megabore
Gas acarreador Nitrgeno, a 5 psi
Presin de aire 7 psi
Presin de hidrgeno 20 psi
Temperatura del inyector 200C
Temperatura del detector 250C
Encender el detector y verificar su encendido.
b) Obtencin de los cromatogramas.
1.- Inyectar 1.0 L de la Soln 1, esperar a que se registre el pico del alcohol. Hacer la
inyeccin por duplicado.
2.-Inyectar 1.0 L de la Mezcla de estndares, esperar a que se registren los picos. Hacer
la inyeccin por duplicado.
3.-Inyectar 1.0 L de la Solucin problema y esperar a que se registren los picos de los
alcoholes.
Una vez obtenidos los cromatogramas, anotar los datos promedio de cada inyeccin en la
Tabla 2.
NOTA:
Al terminar las inyecciones, llevar a cabo el proceso de lavado, que consiste en DEJAR 10
MINUTOS EL FLUJO DEL GAS DE ARRASTRE y luego apagar el equipo y cerrar los
gases.
46
Tabla 2. Resultados obtenidos con los cromatogramas correpondientes.
Inyeccin Soln. 1 Mezcla estndares Solucin Problema

Analito Etanol Etanol Propanol Etanol Propanol
Conc. % (v/v)
Tiempo retencin
rea de pico
Ancho de pico
Platos tericos
Resolucin
Calcular los parmetros asociados a la separacin (nmero de platos tericos y resolucin)
a partir de los datos de tiempo de retencin (Tr), ancho y rea de pico.
VII. INFORME DE TRABAJO

DE TRABAJO.
1.- Datos Generales

47


las referencias).

v Preparacin de los STDs y mezcla de STDs; indicando los volmenes, masas y/o
concentraciones reales que se emplearon en caso de una modificacin a la parte
experimental reportada en el Manual. Si se emplean reactivos comerciales incluir
la pureza y densidad (en caso de reactivos lquidos).
v Preparacin de la muestra + STDINTERNO; indicando los posibles cambios
realizados. Mencionar la marca y % etanol de la muestra empleada en caso que el
alumno la halla proporcionado.
v Optimizacin y preparacin del equipo; paso a paso en forma de diagrama de flujo,
puede incluir imgenes o dibujos y ser con base a la explicacin del profesor no
a lo reportado en el Manual. Recuerde especificar tipo de columna empleada (Tipo,
marca y longitud), Gas acarreador empleado y presin trabajada de ste,
temperatura del inyector, tipo de detector y la rampa empleada (en caso de utilizar
una cromatografa por gradiente de temperatura).
v Lectura de los sistemas; mismas consideraciones del punto anterior. Enfatizar
cmo se debe cargar la jeringa con la muestra para inyectar y propiamente el
proceso de inyeccin de la muestra al equipo. No olvidar mencionar qu se debe
hacer una vez que se termin de usar el equipo ya para apagarlo.
48

experimental.
Incluir los cromatogramas con nmero y nombre, recordar que se debe incluir el
cromatograma de la mezcla de STDs y TODOS los cromatogramas de las
muestras que se hallan empleado en el grupo, ya que se cuantificarn todas las
muestras por cada equipo. Recortar y pegar de forma limpia y ordenada, no
solamente engraparlos, y sombrear con marcatextos los datos del pico del Etanol
de un color y con otro los datos del pico del n-propanol.
Tabla No. 2.- Datos experimentales y parmetros cromatogrficos. Incluir dos filas
adicionales al final una para escribir la altura de pico y otra para el AEPT. Recuerde
que las unidades del tR es en minutos y W (ancho del pico) es en segundos para
que los considere en los clculos, ya que ambos datos deben estar en las mismas
unidades al aplicar las frmulas. Recordar que la resolucin es el nico parmetro
contemplado en la tabla que es compartido por 2 picos (etanol y n-propanol).
Incluir tabla: con nmero y nombre. El nmero de tablas ser el mismo que de
muestras empleadas en el grupo. Recordar que el Marbete (% de etanol en el
enjuage) hay productos que si lo mencionan y otros no y por ende se tienen que
investigar en la pgina web de la marca comercial.
Presentacin
100ml, etc.)

Analizar y discutir que dato(s) podran emplear para dar validez y confiabilidad de
sus resultados.
Describir brevemente el funcionamiento del detector empleado y que propiedad
es la que se registra.
Analizar qu tipo de cromatografa se emple con base a la polaridad de la Fase
estacionaria, y tambin con base a la variacin de la temperatura a lo largo de la
49
corrida cromatogrfica, indicando el orden de separacin de los analitos con base

a su punto de ebullicin.
Describir la importancia de emplear el mtodo de adicin de estndar interno
cuando se emplea a la cromatografa de gases como tcnica instrumental.
Mencionar la importancia que tiene realizar una rampa de temperatura para
mejorar la eficiencia en la separacin de los analitos.
Mencionar que datos del cromatograma usaron para IDENTIFICAR los picos de
ambos alcoholes y que datos usaron para CUANTIFICAR, indicando porqu.
Discutir cul es el motivo del porqu no se recomienda emplear 2-propanol como
estndar interno.
Incluir los clculos de N (# de platos tericos), AEPT (o H) y R (resolucin) para
cada analito en ambos sistemas; adems, calcular el tR promedio, N promedio,
AEPT promedio y R promedio y realizar el anlisis correspondiente de estos
parmetros cromatogrficos para justificar si la separacin y corrida
cromatogrfica fue eficiente.
concentracin de los STDs en la mezcla de STDs (debe coincidir con lo
reportado en el diagrama de flujo en Preparacin de los STDs y mezcla de
STDs), clculo del Factor Respuesta, clculo del % de etanol en el sistema de
muestra + STDINTERNO y regresin a las diluciones de la muestra, en caso que por
necesidad se hallan tenido que realizar (deben coincidir con lo reportado en el
diagrama de flujo en Preparacin de la muestra + STDINTERNO) y cambio de
unidades a las similares al marbete as como el % de principio activo; esto se
debe realizar empleando las reas y las alturas como propiedad, y para TODAS
las muestras que se trabajaron en el grupo.
50

DATOS DE LOS REACTIVOS Y DE LA COLUMNA PARA LA PRCTICA.
Columna DB-WAX
30 m x 0.53 mm DI, pelcula 1 m, fase estacionaria: columna tubular capilar de
polietilen glycol (PEG). POLAR
Temperatura mnima 20C. Lmite de mxima temperatura: 250 oC.
Gas acarreador: Nitrgeno de alta pureza.
Gases para el Detector de Ionizacin de Flama (FID): Hidrgeno alta pureza - Aire.
ETANOL, J. T. Baker, P.M. 46.0 g/mol, n-PROPANOL, J. T. Baker, P.M. 60.097 g/mol,
99.85 % de Pureza, densidad 0.79 g/ml, 99.0 % de Pureza, densidad 0.80 g/ml, Punto
VI. ORIENTACIONES
Punto de ebullicin: 78.3 o PARA EL TR
C de ebullicin: 97.2 oC
51
ATAMIENTO Y DISPOSICIN DE RESIDUOS
Los remanentes de la solucin se deben de almacenar para su tratamiento posterior dado
el poco volumen generado.
52

PRCTICA No. 6
DETERMINACIN CUANTITATIVA DE PLATA EN DESINFECTANTES DE VERDURAS
MEDIANTE UNA CURVA DE CALIBRACIN POTENCIOMTRICA EMPLEANDO ELECTRODOS
IN SELECTIVOS.
I. OBJETIVO
A) Conocer el funcionamiento de los Electrodos in-especficos mediante su empleo y
aplicacin en un mtodo analtico, y de esta manera adquirir la destreza en la
correcta forma de calibracin del potencimetro y su manejo adecuado en la
obtencin de resultados confiables al utilizar este tipo de instrumentos.
B) Cuantificar la cantidad de plata en un desinfectante por medio de una Curva de
calibracin potenciomtrica con uso de un Electrodo especfico a plata, para analizar
la aplicacin de ste tipo de mtodos analticos en el rea.
II. INTRODUCCIN
El mtodo empleado en esta prctica describe el procedimiento a seguir y el equipo
necesario para la determinacin de plata en un producto mediante la Tcnica
potenciomtrica de in selectivo en una Curva de calibracin.
Esta metodologa se fundamenta en el uso de un electrodo de in-especfico sensible a
plata. La diferencia de potencial desarrollada por este electrodo (con el de referencia) y la
concentracin de plata se ajustan a la ecuacin de Nernst,
E= Eo - 0.059 pAg+
la que permitir calcular la concentracin de soluciones incgnitas utilizando soluciones
estndar. La concentracin de plata en la muestra, se determina directamente por
interpolacin de la lectura obtenida en la curva de calibracin. Por lo tanto, cualquier especie
de plata que no se encuentre como plata, no ser detectada por el electrodo y necesitar
un procesamiento previo para su deteccin.
La plata se ha utilizado como conservador ya que impide el crecimiento de hongos y
bacterias en frutas, verduras, agua y el organismo as como sanitizacin de redes
53
Prctica No. 6. Curva de calibracin con electrodos selectivos

hidrulicas y uso mdico aunque su uso es restringido por provocar una condicin llamada
argiria. Tambin evidencia clnica seala su eficacia para erradicar infecciones vaginales
por levaduras de hongos con aplicacin tpica y duchas vaginales.
III.- PARTE EXPERIMENTAL
MATERIAL POR EQUIPO SOLUCIONES (ya se han preparado )

2 vaso de precipitados de 50 ml Muestra de inters: desinfectante microdyn
o limpiador con plata
1 pipeta volumtrica 0.5, 2, 3, 5, mL
2 pipetas volumtricas de 1 mL Solucin de cido ntrico al 10%
2 pipetas volumtricas de 4 mL
6vasos de volumen pequeo
(copas tequileras) Solucin de Nitrato de plata 0.01M *
5 matraces aforados de 10 mL Tampn de fuerza inica (nitrato de sodio)1.0 M
1 bureta de 10 mL
1 soporte con pinzas
1 parrilla con agitador magntico y barra
magntica Solucin de Cloruro de potasio 0.01 M *
1 perilla y una esptula pequea Puente de agar
potencimetro con electrodo selectivo a
plata y electrodo de calomel
A) LIMPIEZA DE MATERIAL
1.- Lavar perfectamente el material y enjuagar por varios minutos con HNO3 al 10%,
posteriormente enjuagar con agua de la llave y finalmente con agua destilada.
54

B) ESTANDARIZACIN DEL STOCK DE NITRATO DE PLATA (puede realizarlo
un solo equipo y compartir los datos)
Medir 4 mL de KCL 0.01M (patrn primario) con pipeta volumtrica y verter en un frasco
de volumen pequeo y agregar 5 gotas de K2CrO4 al 5% mezclar (ver figura de montaje
para esta valoracin).
Llenar la bureta con la Solucin de Nitrato de plata aproximada 0.01M (stock) y agregar
poco a poco esta solucin hasta el cambio de amarillo (turbio) a caf rojizo.
Realizar por triplicado y obtener el volumen promedio para calcular exactamente la
concentracin de la Solucin de Nitrato de plata 0.01M (stock), as como el promedio,
desviacin estndar y el % RSD*
*Conocido tambin como coeficiente de variacin (C.V.), se calcula con la frmula:
No debe ser mayor al 5% en el caso de mtodos volumtricos. Esto ayudar a que los
alumnos evalen la calidad de su trabajo experimental, adems de que el profesor pueda
ver avances con respecto al inicio del curso y al final de ste.
55

TRATAMIENTO DE LA MUESTRA
Se miden 1 mL del desinfectante microdyn o un producto de limpieza *(verificar que el
marbete indique contener plata) en un vaso de precipitados de 50 mL, se agregan 5 mL de
Tampn de fuerza inica (nitrato de sodio) 1.0 M y dos gotas de cido ntrico concentrado
con agitacin magntica y calentando a 100 oC, por 5 minutos. Trasvasar a matraz y aforar
a 10 mL con agua desionizada, se filtra (Solucin problema) en caso necesario.
C) PREPARACIN DE LA CURVA DE CALIBRACIN
Colocar en vasos de volumen pequeo (copas tequileras) los volmenes de reactivos y
solucin problema indicados en la siguiente tabla:
SISTEMAS 1 2 3 4 5 6 7
Solucin de Nitrato de plata 0.01M 0.25 0.5 1 2 4 8 0
(stock) (mL)
Tampn de fuerza inica (nitrato de 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0
sodio) 1.0 M (mL)
Solucin problema (mL) 0 0 0 0 0 0 5
Aforo con agua destilada (mL) 10 10 10 10 10 10 10
NOTA: En caso de registrar una lectura alta, en la muestra problema, preparar otro sistema
con mayor volumen de problema. Por el contrario, en caso de una lectura baja colocar
menor volumen de solucin problema
56

**; para el caso nico del sistema 7 (muestra problema)
E) DETERMINACIN POTENCIOMTRICA
1.- Efectuar el montaje experimental (pgina siguiente) con el potencimetro,
calibrar previamente (cerrando el circuito con el cable correspondiente).
2.- Introducir los electrodos en la solucin correspondiente y ajustar la posicin
del vaso que contiene Ag+ y su velocidad de agitacin.
3.-Situar el botn del potencimetro en el modo de milivoltios (mV) y una vez estabilizada
la lectura, proceder a su anotacin.
NOTA: Para la mayora de las muestras, la lectura se estabiliza en 1minuto. La
estabilizacin de las lecturas tarda ms a concentraciones bajas.
Se recomienda medir de la solucin ms diluida a la ms concentrada en este caso no es
necesario el lavado de los electrodos entre mediciones. Para el caso de las muestras
problema, lavar los electrodos con agua destilada y secar suavemente antes de proceder a
efectuar la siguiente determinacin.
57

NOTA Almacenar los reactivos restantes de trabajo debidamente etiquetados.
NO DESECHARLOS.
Las lecturas, en milivoltios (mV), obtenidas en la determinacin potenciomtrica de los
sistemas de calibracin se representan frente al -log de la concentracin de plata= (pAg).
IV.- RESULTADOS
Tabla No. 1 Estandarizacin de Solucin de Nitrato de plata 0.01M (stock)
Alcuota Concentracin Volumen (mL) Volumen de AgNO3
M exacta de exacto de KCl utilizado para llegar al
KCl medido punto de equivalencia
1 V1 =
2 V2 =
3 V3 =
Promedio =_______________
Desviacin estndar (STD) =_____________
% Desviacin estndar relativa (% RSD)* =_____________
58

Tabla No.2.- Curva de Calibracin
Sistemas 1 2 3 4 5 6
Concentracin M del stock de Ag+
-log de la concentracin (pAg)
Lectura en milivoltios (mV)
Tabla No. 3.- Resultados experimentales (muestra problema).
Lectura en mV de la muestra problema
(SISTEMA 7 )
Grfica No. 1.- E = f (-log [Ag+])
59

V.- INFORME DE TRABAJO

DE TRABAJO.
1.- Datos Generales

IV) INTRODUCCIN. Incluir solamente aplicaciones del Mtodo de cuantificacin y de los

electrodos in selectivos en las diferentes reas que contempla su carrera, incluyendo
ejemplos (recordar que deben citar las referencias).

NOTA: Describir de manera breve como se realiz el lavado de material.
v Estandarizacin del STD de Nitrato de plata; no olvidar indicar los posibles cambios
en volmenes o concentraciones que pudieron haberse realizado. Indicar la
concentracin correcta y real del KCl.
60


la marca y gramaje de la muestra empleada en caso que el alumno la halla
proporcionado.
v Preparacin de los sistemas de la curva de calibracin; en forma de tabla
incluyendo nmero y nombre. Especificar en la tabla la concentracin real del
estndar de Nitrato de plata (obtenido y calculado en el paso de la Estandarizacin)
y la concentracin y composicin real del Tampn de fuerza inica. En caso de
haber realizado sistemas adicionales, ya sea de la curva o de la muestra, indicarlos
igual en la tabla.
en el Manual.
v Montaje experimental; mismas consideraciones del punto anterior. Enfatizar bien
en lo que contiene cada uno de los vasos o copas tequileras y que electrodo se
sumergir en cada solucin (tipo y composicin).
v Lectura de los sistemas de la curva de calibracin; mismas consideraciones del
punto anterior. Mencionar que solucin se ir cambiando y cual permanecer
dentro de su vaso, as como la propiedad que se medir y en qu unidades. No
olvidar mencionar qu se debe hacer una vez que se termin de usar el equipo ya
para apagarlo.
experimental.
Tabla No. 1.- Datos experimentales de la estandarizacin del estndar de Nitrato
de plata. No olvidar colocar en una fila adicional al final de la tabla los datos de
Promedio, STD y %RSD para los 3 volmenes gastados de KCl obtenidos en ste
paso.
Tabla No. 2.- Datos experimentales de la Curva de calibracin. Considere que la
concentracin que debe reportar es de Plata no de Nitrato de plata. Adicionar una
columna ms al final de esta tabla para reportar la lectura de la muestra, si realiz
varias muestras o de una misma hizo varios sistemas coloque una columna para
cada sistema, de esta manera puede omitir colocar la Tabla No. 3. Esta tabla debe
61

coincidir con el mismo nmero de sistemas (tanto de la curva como de la muestra)

con la reportada en Preparacin de los sistemas de la curva de calibracin.
Adems debe incluir forzosamente: Ecuacin de la recta bajo el modelo:

PROPIEDAD = (valor de la pendiente) [analito]UNIDADES +/- (valor de la
ordenada al origen)
No indicar la propiedad y la concentracin del analito como x y y, y tambin

debe incluir Coeficiente de determinacin (r2). No olvidar que la propiedad la debe
graficar en funcin de -log[Plata]MOLAR.

Presentacin
Marbete (enfocndose slo al analito que se cuantific

experimentalmente)
Resultado experimental (reportado como en el marbete: por cpsula,
por 100ml, etc.)

Realizar el anlisis e interpretacin correspondiente del %RSD para determinar
si tiene validez los resultados de la estandarizacin para el clculo de la
concentracin del estndar de Nitrato de plata.
Plantear la reaccin de estandarizacin y la reaccin de deteccin del punto final
de valoracin, cada una con su valor de Keq.
62

Justificar el uso de K2CrO4 5% como indicador del punto final de estandarizacin

con base al clculo de las solubilidades molares.
Justificar el por qu se realiz el lavado con HNO3 10% del material empleado.
Investigar y describir qu es la fuerza inica y porqu hay que controlarla
justificando la funcin que tiene el tampn de fuerza inica en la matriz para la
lectura de los sistemas de la curva, as como la justificacin del uso de un puente
de agar entre los sistemas de la curva y la solucin de KNO3.
Mencionar brevemente el funcionamiento del electrodo in selectivo de plata.
Analizar la relacin de las variables involucradas y contrastarlas con la Ecuacin
de Nernst, justificando la obtencin de una pendiente negativa.
en Estandarizacin del STD de Nitrato de plata), clculo de la concentracin de
los sistemas de la curva, clculo del -log[Plata]MOLAR, Interpolacin de la
propiedad de la muestra en la ecuacin de la curva, regresin a las diluciones de
la muestra (deben coincidir con lo reportado en el diagrama de flujo en
Preparacin de la muestra) y cambio de unidades a las similares al marbete as
como el % de principio activo; esto se debe reportar con los datos de los sistemas
de la muestra que se hallan tenido que realizar para al final compararlos y
analizar.

63

DATOS
Ag+/ Ago Eo = 0.79 V Electrodo de Calomel E= 0.245 V
H2CrO4 pKa(s) = 0.8, 6.5 Ag2CrO4 pKs= 11.95 AgCl pKs= 9.75
+ - 2-
Ag AgOH Ag(OH)2 Ag(OH)3
pH
11.7 12.7 12.8
VI) ORIENTACIONES PARA EL TRATAMIENTO DE RESIDUOS

+
Residuos de AgCl Sol. Ag (en
medio cido)
R-9
R-10
Slido. Filtrar y llevar
a confinamiento
Se agrega HCl o NaCl
para precipitar AgCl
Lquido. Desechar con
abundante agua
Slido. Filtrar y Lquido.

llevar a Neutralizar con
confinamiento NaOH y
desechar con
abundante agua

64

PRCTICA No. 7
DETERMINACIN CUANTITATIVA DE SULFATO FERROSO EN TABLETAS MEDIANTE UNA
CURVA DE VALORACIN POTENCIOMTRICA BAJO CONDICIONES DE
AMORTIGUAMIENTO.

I. OBJETIVOS
Efectuar la cuantificacin de FeSO4 por medio de una Curva de valoracin
potenciomtrica.
Identificar las partes bsicas del potencimetro para reconocer su manejo a fin
de obtener resultados confiables.
II. INTRODUCCIN
El mtodo de titulacin potenciomtrica consiste en medir el potencial (voltaje) en una
solucin por medio de un electrodo como funcin de volumen de agente titulante. El
potencial que se mide se puede transformar a unidades de concentracin de una especie
en solucin. La ventaja de medir potencial es que ste se mide por medio de un electrodo
que es selectivo a la especie o analito que se quiere determinar. Por lo tanto, el voltaje que
se mide en la solucin es representativo de la concentracin de la especie en solucin. Este
alto grado de selectividad (seal analtica que puede mostrar un pequeo grupo de analitos
en una solucin que contiene mltiples especies qumicas) se debe a la propiedad fsica
del electrodo con que se mide el voltaje. La medida del potencial se puede emplear para
poner de manifiesto el punto final en reacciones cido-base, redox, precipitacin y
formacin de complejos; para ello se selecciona el electrodo indicador adecuado y un
electrodo de referencia que cierra la celda.
Para determinar el punto final se pueden utilizar varios mtodos; el ms directo se basa en
representar el potencial en funcin del volumen de valorante. Otro procedimiento ms exacto
consiste en representar el (DE= f(V)).
65
Prctica No. 7. Curva de valoracin potenciomtrica

En esta prctica el hierro presente se disuelve en cido se valora con dicromato de potasio
y las variaciones del potencial durante el proceso se siguen con un potencimetro, para
obtener una grfica de E = f(mL de valorante) mediante la cual se determinara el volumen
gastado para llegar al punto de equivalencia y as poder cuantificar el contenido de hierro.
El grado en que ocurre la reaccin (y por tanto del cambio de pendiente en el punto de
equivalencia) depende de la constante condicional de formacin, el efecto del pH en la
titulacin es un parmetro a considerar en el amortiguamiento del medio de reaccin.
MATERIAL REACTIVOS EQUIPOS
1 piseta cido fosfrico R.A. 1 agitador magntico
2 vasos de volumen pequeo
1 Pipeta graduada de 5 mL
1 bureta de 10 mL Potencimetro con
1 Pipeta volumtrica de 2 ,10 mL cido Ntrico R. A. electrodo de platino y
1 agitador magntico c/barra de calomel ( o
1 probeta de 25 ml combinado)
2 vasos de precipitados de 50 mL Soln. de Dicromato de
1 Soporte universal completo potasio 0.01M
Tabletas que contengan sulfato
ferroso (Hemobin o SSA)
66

1.-Preparacin de soluciones
-Solucin de cido fosfrico 1 M.(solucin cida)
-Solucin problema
Se pesan tres tabletas y se obtiene el peso promedio, se muelen y se pesa el polvo
equivalente a 25 mg de sulfato ferroso en un vaso de precipitados ( considerar el peso
promedio y el contenido segn em marbete del producto) y se agregan 10 mL de solucin
cida con agitacin mecnica.(soln. problema)
2.- Valoracin Potenciomtrica: Efectuar el montaje con el potencimetro, calibrando
previamente. Llenar la bureta con el valorante (dicromato de potasio 0.01 M), comenzar la
titulacin agregando 0.5mL consecutivamante a la solucin problema (hasta despus del
punto de equivalencia) VER MONTAJE ANEXO
67

Tabla 1: Datos experimentales de la valoracin potenciomtrica del Fe(II) en las

tabletas
K2Cr2O7 0.01 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
M (mL)
EECS(mV)
E ECS(mV)
Grfico 1. Curva de valoracin potenciomtrica E= f(Vol. De K2Cr2O7 0.01 M )
68

Grfico 2. Curva de valoracin potenciomtrica E= f(Vol. De K2Cr2O7 0.01 M )

DE TRABAJO.
1.-DATOS GENERALES

tendrn calificacin de reporte y por ende no se colocar su nombre, a menos que halla
69

IV) INTRODUCCIN. Incluir solamente aplicaciones del Mtodo de cuantificacin en las

las referencias).

la marca y presentacin de la muestra empleada en caso que el alumno la halla
proporcionado. Sealar la concentracin real de la solucin cida empleada. Incluir
tabla:
Peso de polvo de tableta empleada
(unidades):
en el Manual.
v Montaje experimental; mismas consideraciones del punto anterior. Enfatizar bien
en lo que contiene el vaso y la bureta (en este caso sealar la concentracin exacta
y real de la solucin valorante de K2Cr2O7 que se emple), as como de los
electrodos que se sumergirn en el sistema de valoracin (tipo y composicin).
v Lectura de la valoracin; mismas consideraciones del punto anterior. Mencionar
como sern las adiciones del valorante y en que volumen se detendr la valoracin,
as como la propiedad que se medir y en qu unidades. No olvidar mencionar qu
se debe hacer una vez que se termin de usar el equipo ya para apagarlo.
experimental.
70

Tabla No. 1.- Datos experimentales de la Curva de valoracin.
Grfico de la curva de valoracin indicando nmero y nombre CORRECTO (el
nombre correcto del grfico de una curva de valoracin se puede indicar bajo el
modelo: PROPIEDAD=f(V(ml)VALORANTE). Recordar que tienen que transformar los
valores de EECS a EENH sumndole 0.245 V o 245 mV, segn sea el caso, y con esta
grfica es con la que trabajarn para la cuantificacin y otros datos que se piden
en el anlisis de resultados.
Presentacin
Marbete (enfocndose slo al analito que se cuantific

experimentalmente)
Resultado experimental (reportado como en el marbete: por cpsula,
por 100ml, etc.)

Analizar y discutir que dato(s) podran emplear para dar validez y confiabilidad de
sus resultados.
Identificar y calcular las condiciones de amortiguamiento impuestas en el sistema
de valoracin; adems, proponer la reaccin de valoracin generalizada y
representativa empleando los Diagrama anexos en el Manual, as como el clculo
de la Keq considerando que en los equilibrios redox el clculo de la Keq no es
mediante Ley de accin de masas, sino mediante la frmula general
considerando los E y, en caso que alguna de las especies hayan cambiado por
el amortiguamiento, calcular los E de nuevos pares.
71

Con ayuda de la grfica de la Curva de valoracin con datos de EENH, calcular el

valor del E experimental del par Fe(II)/Fe(III) y el valor de E experimental del
par Cr(III)/Cr(VI), y con base a estos valores calcular la Keq experimental y
compararla con la Keq terica calculada en el punto anterior.
Obtener el valor del Volumen de Punto de Equivalencia (VPE) mediante el mtodo
de las tangentes (puede ocupar la grfica de los resultados o realizar otra y
colocarla en este punto). Obtener de igual forma el VPE con el mtodo de la 1ra
derivada graficando E/V, y finalmente comparar y analizar ambos resultados,
justificando con cul de los 2 realizarn la cuantificacin.
Si quisieran cuantificar el Hierro en la misma muestra, empleando al Dicromato
de potasio o no (sera opcional), con las diferentes tcnicas instrumentales
revisadas en las prcticas anteriores (Espectrofotometra, Espectroscopa de
Absorcin Atmica, HPLC y Cromatografa de gases), menciona para cada una
de ellas si es posible o no su medicin (justificando tu respuesta) y en caso de
ser posible mencionar cmo lo haras y mediante que mtodo de cuantificacin
lo propondras.
Incluir los clculos de cuantificacin, en el siguiente orden: Mencionar el VPE que
emplearn y de qu mtodo es (tangentes o 1ra derivada), obtener la
concentracin de hierro en el sistema de valoracin, regresin a las diluciones de
la muestra si es que hubo (deben coincidir con lo reportado en el diagrama de
flujo en Preparacin de la muestra) y cambio de unidades a las similares al
marbete as como el % de principio activo; recordar que aunque hallan justificado
que VPE es ms confiable, deben realizar la cuantificacin con ambos, y al final
compararlos.

72

DATOS: H3PO4 pKas = 2.2 , 7.2 , 12.3
Complejos de Fe(II)
Fe(OH)n+ Log 1= 4.5

Fe + H2PO4- Fe H2PO4+ log K = 2.7
2+
Fe2+ + HPO42- Fe HPO4 log K = 3.6
Complejos de Fe(III)
3-n
Fe(OH)n Log 1= 11.0 , Log 2= 21.7
Fe3+ + H2PO4- Fe H2PO42+ log K = 3.47
Fe3+ + HPO42- Fe HPO4+ log K = 8.3
Complejos de Cr(III)
Cr(OH)n3-n Log 1= 10.2, Log 2= 18.3
Cr3+ + H2PO4- Cr H2PO42+ log K = 2.56
Cr(OH)3 pKs = 30.3
DIAGRAMA pPO4 como funcin del pH para Fe(III)
pPO
15
Fe(OH) 2+
10
Fe 3+
Fe(OH)2 +
5
0 pH
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
-5
FeH2PO4 FeHPO4 +
2+
-10
-15
-20

DIAGRAMA pPO4 como funcin del pH para Fe(II)
73

PO4'
4
Fe 2+ Fe(OH)+
3
1
FeH2PO4+ FeHPO4
0 pH
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
-1
-2
-3
DIAGRAMA pPO4 como funcin del pH para Cr(III)
74

pCr(III)'
12
Cr(OH)2+
CrH2PO42+
7
Cr(OH)3
2
pH
0 2 4 6 8 10 12 14
-3
-8
-13
VIII. ORIENTACIONES PARA EL TRATAMIENTO Y DISPOSICIN DE RESIDUOS
Deber disponer de un frasco debidamente etiquetado como residuos de K2Cr2O7 y deber
mantenerse bien tapado, alejado de materiales combustibles y protegidos de calor, dao
fsico y flamas y en lugares secos (se almacena para su tratamiento)
El tratamiento posterior se realizar como sigue:
75

76

2 SERIE DE EJERCICIOS
1.- Completar la tabla, calculando los parmetros que se piden y explicar si esta separacin
es eficiente, dibujando el cromatograma correspondiente.
componente Tr w K N R
A 21.5 0.96
B 22.1 0.95
C 25.3 0.99
Tiempo muerto ( to ) es de 2.5 min.
2.-El anlisis de residuos de pesticidas en plantas se realiza por cromatografa 2.856g de
planta son triturados y colocados en un solvente apropiado y aforados a 20 mL, con fase
mvil. Se toman 20 l de esta solucin y se inyectan al cromatgrafo, obteniendo un rea
de 3587. Se cuenta con un estndar de concentracin de 52 g/ ml, y se obtienen los
siguientes resultados
sistema mL del mL de Tiempo de W rea
estndar fase mvil retencin (min) (min) (UA)
1 2 18 2.510 0.196 1168
2 4 16 2.505 0.197 2170
3 6 14 2.521 0.198 3214
4 8 12 2.513 0.197 4079
5 10 10 2.518 0.196 5392
77
2a serie de ejercicios

a) Graficar la curva y calcular los parmetros lineales.
b) Cul es el N promedio y AEPT de la columna si esta mide 30 cm.
c) Calcular el % en peso de pesticida en la planta.
3.- Se cuanta con los estndares de anfetamina (8x10-4 M) y metanfetamina (6 x10-4 M) ,
se toman 2 mL de cada uno de ellos se mezclan aforando a 10 ml (Sistema A ) Se inyecta
al C. Gases y produce las respuestas 25165 y 14487 respectivas.
Por otro lado 5 mL de una muestra de orina que contiene anfetamina se mezclan con 2 mL
del estndar de metanfetamina (6 x10-4 M) aforando a 10mL (Sistema B), se obtienen las
siguientes respuestas medidas en el C. de gases 26078 y 14494 respectivamente Calcular
el Factor Respuesta y los mg de anfetamina/L de orina.
4.- El mtodo para la determinacin de Fe(II) en suero se realiz, midiendo 5 mL de
electrolito soporte y en varias adiciones sucesivas de 0.2 ml de Fe(II) estndar 0.002M, se
tom la lectura de la corriente (i) se obtienen los siguientes resultados
ml de Fe(II)st 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
i ( mA) 2.0 3.4 4.8 6.4 7.6
a) Si 1mL de suero se afor a 5 mL con electrolito soporte se obtiene una corriente
(i) = 5.1 Calcular los mg de Fe(II)/100 mL de suero
78
2a serie de ejercicios

5.- Explique el tipo de sustancias que pueden ser analizadas en Cromatografia de Gases
y especficamente que compuestos dan seal utilizando un detector FID (ionizacin de
flama)
4.-En la Figura se muestra un cromatograma para los

compuestos A y B obtenido por cromatografa de gases
A
a) Que compuesto tiene el punto de ebullicin mayor
B b) Que pasara si se utiliza una mayor temperatura para la
medicin de esta mezcla
c) Si el w para A es de 0.35 s y el w para B es de 0.41,
adems que el tiempo muerto to es de 0.61 min .
Calcule la eficiencia de los picos (N), su factor de
capacidad (k) y la resolucin (Rs) entre los picos
79

ANEXOS
INSTRUCTIVO PARA EL MANEJO DEL ESPECTROFOTOMETRO
BAUSCH & LOMB SPECTRONIC 20
Este instrumento se utiliza para medir la radiacin absorbida por las molculas. Cuando una
onda electromagntica de longitud de onda definida incide sobre una sustancia dada, la
cual es una funcin de la concentracin de la sustancia en la trayectoria de la luz y del
espesor de la muestra. Este instrumento solo posee lmpara para el espectro visible, por lo
que si se desean hacer lecturas en el espectro ultravioleta o infrarrojo, es necesario cambiar
la lmpara.
pasos a seguir cuando se usa Spectronic 20.
Encender el instrumento usando la
perilla izquierda del frente. Permitir
unos 5 minutos para calentamiento
en el primer encendido.
80
ANEXOS

Seleccionar la longitud de de onda
apropiada para la muestra a analizar.
Con el porta muestra vacio y
cerrado, ajustar la aguja de lectura a
0%T usando la perilla de ajuste de
cero.
Llenar a la mitad una celda con
agua. Se conoce como blanco.
Colocarlo en el porta muestra y
cerrar la cubierta.
81
ANEXOS

Con el blanco en el porta muestra y la
cubierta cerrada, ajustar la aguja
meter a 100%T usando la perilla de
control de luz en el frente derecho del
instrumento.
Retirar el blanco y colocar la muestra
a analizar en el porta muestra y cerrar
la cubierta.
Registrar el valor de Absorbancia (o
%T) En este caso las lecturas son
20%T y 0.70 absorbancia.
Repetir este paso con estndares si
se esta realizando una curva de
calibracin o verificando
proporcionalidad (Ley de Beer).
Repetir este paso con una muestra de
concentracin desconocida.
82
ANEXOS

CUIDADOS GENERALES
CELDAS
Manipularlas solo por la parte superior.
Limpiarlas solo si se requiere, con papel suave
Llenarlas hasta la marca para asegurar lectura representativa
Introducirlas verificando que la marca de stas coincida con la muesca del equipo, para que
siempre entre en la misma posicin
No utilizar tubos de ensayo como sustitutos de celda, pues no estn hechos del vidrio
adecuado.
SOLUCIONES
Solo se realizan mediciones de soluciones translcidas en el instrumento, la presencia de
partculas suspendidas causara error muy grave.
Los valores de absorbancia que presentan un error relativo muy pequeo se encuentran
dentro de 0.2 y 0.8 (63 y 16% T, respectivamente), por lo que debe realizarse procedimiento
correcto para que las lecturas estn dentro de ese rango.
LAMPARAS
No trabajar a longitudes de onda mayores a 600nm o menores a 400 estn fuera del alcance
de la lmpara de espectro visible que es la que generalmente tiene este tipo de instrumento,
solo utilizar soluciones coloridas. Para trabajar en regin infrarrojo o ultravioleta, se tiene
que conseguir la lmpara adecuada.
83

REFERENCIAS.
1) Ramette, A. 1988. Equilibrio y Anlisis Qumico. Editorial Fondo Educativo
Interamericano. Mxico, DF. P.p. 72-74, 140-144, 148-155, 158-161
2) Harris, D. C. 1999. Anlisis Qumico Cuantitativo. Grupo Editorial Iberoamrica, SA
de CV. 3 edicin. Mxico, D. F. P.p. 327-330.
3) Christian G., Qumica Analtica. Editorial Limusa.2. Edicin cap. 15,17,22
4) Skoog, D. y West D. 1988. Qumica Analtica.. Ed. McGraw-Hill / Interamericana de
Espaa, SA. 4 edicin. Madrid, Espaa. P.p. 451, 452, 476 y 477.
5) Skoog, D. y West D. 2001.Principios de Anlisis Instrumental. Ed. McGraw-Hill /
Interamericana de Espaa, SA. 7 edicin. Madrid, Espaa. P.p. 251 y 252.
6) Smith, R. and Martell, A. 1989. Critical Stability Constants. Plenum Press. 2
edition. Volume 4: Inorganic Complexes. USA.
7) Rovessac Annick F., Mtodos y tcnicas Instrumentales Modernas Ed. McGraw-
Hill Capitulo 2,9,10,11,20,22
8) NOM-001-ECOL-1996 Norma Oficial Mexicana. Diario Oficial de la Federaci1997
9) SEDUE 1988 Reglamento de la Ley General de Equilibrio Ecolgico y la
proteccin al ambiente en materia de residuos peligrosos . Diario Oficial de la
Federacin.
10) Rubinson/Rubinson, Qumica Analtica Contempornea Editorial Pearson
Educacin
84
Referencias

Nombre Alcohol Etlico Frmula CH3CH2OH

Inhalacin Trasladar al aire fresco. Si no respira administrar respiracin artificial. Si respira con dificultad suministrar
oxgeno. Mantener la vctima abrigada y en reposo. Buscar atencin mdica inmediatamente.
Ingestin Lavar la boca con agua. Inducir al vmito. No administrar emticos, carbn animal ni leche. Buscar
atencin mdica inmediatamente (puede tratarse de alcohol desnaturalizado).
PRIMEROS Contacto Lavar con abundante agua, mnimo durante 15 minutos. Levantar y separar los prpados para asegurar
AUXILIOS con ojos la remocin del qumico. Si la irritacin persiste repetir el lavado. Buscar atencin mdica.
Contacto Lavar la piel con abundante agua. Retirar la ropa contaminada y lvela con abundante agua y jabn.
con piel
FUGAS Y Mantener alejadas fuentes de ignicin. Cubrir el rea de derrame con roco de agua para diluir el producto y
DERRAMES eliminar vapores. En caso de pequeos derrames utilizar material inerte absorbente. Evitar que el producto
sea conducido al drenaje.
DESECHOS Se puede realizar una incineracin controlada del material una vez ha sido absorbido o se puede dejar evaporar.
Nombre Hidrxido de sodio Frmula NaOH

PRIMEROS Inhalacin Trasladar al aire fresco. Si no respira administrar respiracin artificial. Si respira con
AUXILIOS dificultad suministrar oxgeno. Mantener a la persona abrigada y en reposo.
Ingestin Lavar la boca con agua. Si est consciente, suministrar abundante agua. No inducir el
vmito. Buscar atencin mdica inmediatamente.
Contacto Lavar con abundante agua, mnimo durante 15 minutos. Levantar y separar los prpados
con ojos para asegurar la remocin del qumico. Colocar una venda esterilizada. Buscar atencin
mdica.
Contacto Retirar la ropa y calzado contaminado. Lavar la zona afectada con abundante agua y jabn,
con piel mnimo durante 15 minutos. Si la irritacin persiste repetir el lavado. Buscar atencin
mdica.
FUGAS Y Evacuar o aislar el rea de peligro. Restringir el acceso a personas innecesarias y sin la debida
DERRAMES proteccin. Ubicarse a favor del viento. Usar equipo de proteccin personal. Ventilar el rea. No permitir
que caiga en fuentes de agua y alcantarillas. Los residuos deben recogerse con medios mecnicos no
metlicos y colocados en contenedores apropiados para su posterior disposicin.
DESECHOS Debe tenerse presente la legislacin ambiental local vigente relacionada con la disposicin de residuos
para su adecuada eliminacin. Los residuos de este material pueden ser llevados a un relleno sanitario
legalmente autorizado para residuos qumicos para su debida neutralizacin.
85
Referencias

Nombre cido actico Frmula CH3COOH

PRIMEROS Inhalacin Trasladar al aire fresco. Si no respira administrar respiracin artificial. Evitar la reanimacin
AUXILIOS boca a boca. Si respira con dificultad suministrar oxgeno. Mantener a la persona abrigada y
en reposo. Buscar atencin mdica inmediatamente
vmito. Mantener la vctima abrigada y en reposo. Buscar atencin mdica inmediatamente.
con ojos para asegurar la remocin del qumico. Si la irritacin persiste repetir el lavado. Buscar
atencin mdica.
Contacto Retirar la ropa y calzado contaminados. Lavar la zona afectada con abundante agua y
con piel jabn, mnimo durante 15 minutos. Si la irritacin persiste repetir el lavado. Buscar atencin
mdica inmediatamente. Extraer la sustancia con un algodn impregnado de Polietilenglicol
400.
FUGAS Y Evacuar o aislar el rea de peligro (entre 50 y 100 metros en todas las direcciones), marcar las zonas.
DERRAMES Restringir el acceso a personas innecesarias y sin la debida proteccin. Ubicarse a favor del viento. Usar
equipo de proteccin personal. Ventilar el rea. No permitir que caiga en fuentes de agua y alcantarillas..
Recoger con palas no metlicas u otro elemento que pueda producir chispas. Evitar el paso de la
sustancia de la alcantarillado, neutralizar con sosa. Recoger la sustancia utilizando los absorbentes
adecuados.
DESECHOS Neutralizar con sosa custica diluida, recoger el residuo y enterrar segn las leyes locales. Puede
considerarse su neutralizacin, dilucin y vertimiento al desage. Tenga en cuenta las leyes vigentes.
Disponga de acuerdo con las reglamentaciones ambientales locales.
Nombre cido clorhdrico Frmula HCl

PRIMEROS Inhalacin Trasladar al aire fresco. Si no respira administrar respiracin artificial (evitar el mtodo
AUXILIOS boca a boca). Si respira con dificultad suministrar oxgeno. Mantener a la persona
abrigada y en reposo. Buscar atencin mdica inmediatamente.
vmito. Si ste se produce de manera natural, inclinar la persona hacia el frente para
evitar la broncoaspiracin. Suministrar ms agua. Buscar atencin mdica.
con ojos para asegurar la remocin del qumico. Si la irritacin persiste repetir el lavado. Buscar
atencin mdica.
Contacto Retirar la ropa y calzado contaminados. Lavar la zona afectada con abundante agua y
con piel jabn, mnimo durante 15 minutos. Si la irritacin persiste repetir el lavado. Buscar
atencin mdica.
FUGAS Y Evacuar o aislar el rea de peligro. Restringir el acceso a personas innecesarias y sin debida
DERRAMES proteccin. Eliminar toda fuente de calor. Evitar que la sustancia caiga en alcantarillas, zonas bajas y
confinadas, para ello construya diques con arena, tierra u otro material inerte. Mezclar con sosa o cal
para neutralizar. Lavar la zona con agua.
DESECHOS Debe tenerse presente la legislacin ambiental local vigente relacionada con la disposicin de residuos
para su adecuada eliminacin. Considerar el uso del cido diluido para neutralizar residuos alcalinos.
Adicionar cuidadosamente ceniza de sosa o cal, los productos de la reaccin se pueden conducir a un
lugar seguro, la disposicin en tierra es aceptable.
86
Referencias

Nombre cido ntrico Frmula HNO3

PRIMEROS Inhalacin Evaluar los signos vitales: pulso y velocidad de respiracin; detectar cualquier trauma.
AUXILIOS En caso de que la persona no tenga pulso, proporcionar rehabilitacin cardiopulmonar;
si no hay respiracin, dar respiracin artificial y si sta es dificultosa, suministrar
oxgeno y sentarla.
Ingestin Proceder como en el caso de inhalacin en caso de inconciencia. Si la persona est
conciente, lavar la boca con agua corriente, sin que sea ingerida. No inducir el vomito
ni tratar de neutralizarlo. El carbn activado no tiene efecto. Dar a la persona 1 taza de
agua o leche, solo si se encuentra conciente. Continuar tomando agua,
aproximadamente una cucharada cada 10 minutos.
Contacto Lavarlos con agua tibia corriente de manera abundante, hasta su eliminacin total.
con ojos
Contacto Lavar cuidadosamente el rea afectada con agua corriente de manera abundante.
con piel
FUGAS Y Ventilar el rea dependiendo de la magnitud del siniestro. Mantener el material alejado de agua, para
DERRAMES lo cual construir diques, en caso necesario, con sacos de arena, tierra o espuma de poliuretano. Para
absorber el derrame puede utilizarse mezcla de bicarbonato de sodio-cal sodada o hidrxido de
calcio en relacin 50:50, mezclando lenta y cuidadosamente, pues se desprende calor. Una vez
neutralizado, lavar con agua. Tanto el material derramado, el utilizado para absorber, contener y el
generado al bajar vapores, debe ser neutralizado con cal, cal sodada o hidrxido de calcio, antes de
desecharlos.
DESECHOS Con cuidado (se genera calor y vapores) diluya con agua-hielo y ajuste el pH a neutro con
bicarbonato de sodio o hidrxido de calcio. El residuo neutro puede tirarse al drenaje con agua en
abundancia.
87


SECCIN QUMICA ANALTICA
CODIGO: FPE-CQ-DEX-01-06A,
SOLICITUD PARA PRSTAMO DE MATERIAL,
FPE-CQ-DEX-03-06A
REACTIVOS, EQUIPO MENOR Y DE APOYO
No de REVISIN: 2

Laboratorio No: Fecha:
Alumno: Equipo: No. de Cuenta:
Asignatura: Grupo: AB CD
Carrera: Semestre
Profesor: Prctica:

Cantidad Material, reactivo o equipo Especificacin Observaciones
Firma del Alumno

Manual QA INSTRUM BQD 2018-1 Completo PDF

Загружено:

Сведения о документе

Оригинальное название

Авторское право

Доступные форматы

Поделиться этим документом

Поделиться или встроить документ

Параметры публикации

Этот документ был вам полезен?

Это неприемлемый материал?

Авторское право:

Доступные форматы

Manual QA INSTRUM BQD 2018-1 Completo PDF

Загружено:

Авторское право:

Доступные форматы

Facultad

de Estudios Superiores Cuautitln

LICENCIADO EN BIOQUIMICO DIAGNSTICO

M.C. Miriam A. Castillo Rodrguez

Revisin y Correccin: 2018- I

actualidad y a su incesante desarrollo, el dominio de todos ellas es difcil de abordar en

su totalidad en un curso de licenciatura, por lo tanto es necesario adquirir conocimiento

La gran variedad de tcnicas instrumentadas de anlisis se basan en una relacin que

conductancia, intensidad de corriente, etc.) con la composicin del sistema (anlisis

cualitativo) o bien la cantidad de alguno de sus componentes (anlisis cuantitativo).

Generalmente algunas de las tcnicas se utilizan bsicamente para el anlisis cualitativo,

otras ms en el anlisis cuantitativo y un buen grupo de ellas es capaz de cumplir con

variables como temperatura, presin, tiempo, perturbaciones ocasionadas al realizar la

curso se estudia la relacin entre la propiedad y la composicin; relacin en donde es

punto de vista analtico de esta manera P ser funcin de la composicin. Pudiendo as

sustancia(s) en muestras de inters.

Este enfoque contribuye a la formacin profesional en anlisis instrumental y al perfil

OBJETIVO(S) GENERALES DE LA ASIGNATURA

Que el alumno conozca las tcnicas y mtodos ms utilizados en el Anlisis Instrumental al

obtener y utilizar informacin obtenida con estos para en la cuantificacin de sustancias en

muestras de inters en el mbito farmacutico para que desarrolle habilidades, actitudes y

criterio apropiados a fin de resolver problemas en su rea.

OBJETIVOS DEL CURSO EXPERIMENTAL

de las metodologas analticas empleando un equipo instrumental para identificar y

cuantificar una sustancia en una muestra de inters en el rea bioqumica clnica

fin de obtener resultados confiables.

2) Conocer la informacin que el equipo genera y su uso para anlisis cuantitativo.

3) Interpretar y relacionar variables a utilizar para efectuar el clculo de contenido de una

sustancia en una muestra real.

PRCTICA DE DISEO: Elaborar un formato experimental fundamentado qumica e

instrumentalmente para cuantificar sustancias de inters en su rea a travs de las

1) Realizar una investigacin respecto a un procedimiento base y con ello:

2) Estructurar un diseo experimental (protocolo).

3) Consultar la metodologa propuesta con el asesor con la finalidad de mejora.

4) Desarrollar en laboratorio el diseo propuesto para la cuantificacin de una muestra.

de error tanto de diseo como experimental a fin de optimizar el protocolo.

6) Desarrollar nuevamente el experimento corregido y cuantificar.

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

Asignatura: ________________________________________________ Grupo:_________________

Carrera: ______________________ Perodo: _______________ No. de equipos: ___________

b) Informacin sobre el Sistema de Gestin de

c) Organizacin para trabajo en equipo.

a) Aplicacin del examen diagnstico, Resolucin y

Prctica 1 Determinacin de Azul Timol

Prctica 2 Determinacin de cido C. previo 2

Prctica 3 Determinacin de Fe (II) y Zn(II) C. previo 3

Entrega y discusin de los Ejercicios Unidad I

Primer Examen escrito Informe prctica 3

7 Prctica 4. Determinacin de fenilefrina por HPLC C. previo 4

Entrega y discusin de los de Ejercicios Unidad 2

Revisin del Formato de Diseo Experimental (FDE) y

13 1 Sesin prctica de Diseo Experimental.

14 2 Sesin prctica de Diseo Experimental.

Presentacin oral del Diseo Experimental Informe de Trabajo del

16 Entrega de Promedios finales (desocupar gavetas)

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

CRONOGRAMA ESPECFICO DEL CODIGO: FPE-CQ-DEX-01-01

ASIGNATURA: Anlisis Instrumental CARRERA: BQD

NO. DE NO. ACTIVIDADES TCNICAS DIDCTICAS EVALUACIN NO. DE

1 1/Presentacin del Formar equipos. Explicar 3

2 Revisin de cclulos de Ejercicios Examen 3

3 1/Desarrollo del Leer la prctica Realizar diagrama de flujo. Examen previo 3

4 1/Desarrollo del Leer la prctica Realizar diagrama de flujo. Examen previo 3

Asignatura: ________________________________ Grupo:_

Carrera: ______________ Perodo: _ No. de equipos: _____