Universidad

Agraria del Ecuador

Gua de laboratorio
Enzimologa
Tercer Semestre A
Docente: Roberto Ordoez


Prctica N1 2

Tema: Funcionamiento de la catalasa y el efecto de la temperatura en su actividad enzimtica

Objetivos:

Comprobar la presencia de la catalasa en los tejidos animales y vegetales.

Comprobar el efecto de la temperatura en las actividades enzimticas de la catalasa.

Introduccin:

La catalasa es una enzima que se encuentra en organismos vivos y cataliza ladescomposicin
del perxido de hidrgeno (H202) en oxgeno y agua.
El perxido de hidrgeno es un residuo del metabolismo celular de muchos organismos vivos,
pero dada su toxicidad debe transformarse rpidamente encompuestos menos peligrosos.
Para ello se usa con frecuencia esta enzimaque cataliza su descomposicin en agua y oxgeno.
Adems la catalasa se usa en la industria textil para la eliminacin del perxido de hidrgeno,
as como en menor medida se emplea en la limpieza de lentes de contacto que se han
esterilizado en una solucin de perxido de hidrgeno.

Esta enzima est presente en casi todas las clulas aerbicas y acta descomponiendo
perxido de hidrgeno (agua oxigenada) en agua y oxgeno, segn la siguiente reaccin:









La deficiencia en catalasa produce acatalasia. Esta enfermedad estcaracterizada por la
ausencia de actividad de la catalasa en los glbulos rojos yse asocia con las lesiones orales
ulcerantes.La catalasa es una enzima que se encuentra en las clulas de los tejidosanimales y
vegetales.La funcin de esta enzima en los tejidos es necesaria porque durante elmetabolismo
celular, se forma una molcula txica que es el perxido dehidrgeno, H2O2 (agua
oxigenada).Esta enzima, la catalasa, lo descompone en agua y oxgeno, por lo que sesoluciona
el problema.







1. Funcionamiento de la enzima catalasa en varios organismos


Materiales:

Perxido de hidrgeno

Hgado

Espinaca

Pipeta

Mortero o licuadora

Tubos de ensayo

Vaso de precipitado

Procedimiento:

En este ejercicio se preparar un homogenado de hgado para obtener partculas pequeas y

uniformes al mezclarlas con el agua.

1. Para preparar el homogenado, corte en pedazos por separado la muestra de hgado.

2. Usando un mortero, muela el material hasta diluir parte de la muestra; no muela
excesivamente para que no queden pedazos muy pequeos del material.
3. Colocar en el homogenado 3 ml de perxido de hidrgeno
4. En otra vaso precipitado colocar espinaca. Rompa este pedazo con un bistur en
pedazos ms pequeos. Aada tres ml de perxido de hidrgeno.

Anotar los resultados obtenidos

Material Reaccin al aadir Perxido de Hidrgeno

Agua

Hgado

Espinaca

2. Efecto de la temperatura sobre el funcionamiento de la enzima catalasa

Materiales:

Homogenado de hgado

Tubos de ensayo

Gradilla de tubos de ensayo

Termmetro

Reactor trmico

Hielo

Procedimiento:

3. Rotular cinco tubos de ensayo del 1 al 5 y caliente un bao de agua hasta 37 C y otro hasta
80C.
4. Aadir 5 mL de hgado homogenado a cada tubo.
5. Mantener los tubos a las siguientes temperaturas:
Tubo 1 = 80 C por 15 minutos
Tubo 2 = 37 C por 15 minutos
Tubo 3 = Temperatura ambiental
Tubo 4 = Hielo por 30 minutos
Tubo 5 = Congelador a 4 C por 30 minutos
6. Aadir 2 mL de perxido de hidrgeno al tubo 1.
7. Mida el tiempo transcurrido desde que se aadi el perxido hasta que se comienzan a
producir burbujas, y anotar.
8. Repita con los dems tubos.

Anotar los resultados obtenidos

Bibliografa

Acua, F. 2006. Qumica orgnica. EUNED. Costa Rica. 312.

Brown, T., Bursten, B. y LeMay, H.2004. Qumica.La ciencia central. Pearson.
Mxico. 559-560