UNIVERSIDAD DE MURCIA

GRADO EN INGENIERA QUIMICA

ANLISIS QUMICO APLICADO. 3er CURSO (Cuatrimestre 1)

DEPARTAMENTO DE QUMICA ANALTICA
DISTRIBUCIN DE PRCTICAS

Prctica 1 Prctica 2 Prctica 3

Da 1 G 1-3 G 4-6 G 7-9
Da 2 G 4-6 G 7-9 G 1-3
Da3 G 7-9 G 1-3 G 4-6

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 PRCTICA 1
DETERMINACIN DE CALCIO EN AGUAS MEDIANTE
ESPECTROFOTOMETRA DE ABSORCIN ATMICA CON
ATOMIZACIN EN LLAMA

INTRODUCCIN
La espectrofotometra de absorcin atmica implica la absorcin de radiacin
por parte de tomos que se hallan en estado gaseoso. En esta prctica la obtencin de
la nube de tomos tiene lugar en una llama, formada por una mezcla de aire y
acetileno cuyos caudales son constantes y controlados. La fuente de radiacin utilizada
es una lmpara de ctodo hueco que emite radiacin de la longitud de onda
caracterstica del elemento a determinar. La intensidad de la radiacin absorbida por la
nube de tomos es funcin de la concentracin del analito, en este caso calcio.
La presencia de fosfatos, aluminio y/o silicio en la muestra constituye una
interferencia qumica, ya que estas especies pueden interaccionar con calcio formando
sales lo suficientemente estables como para disminuir la poblacin de tomos neutros
de calcio en la llama. La interferencia de estas especies puede evitarse con el empleo
de agentes liberadores. Dichos agentes son cationes que reaccionan preferentemente
con la interferencia, impidiendo su interaccin con el analito. El lantano es
comnmente usado como agente liberador.

OBJETIVOS
Familiarizarse con los procedimientos instrumentales de anlisis de sustancias
activas en muestras industriales.
Determinar el contenido de calcio en aguas mediante espectrometra de absorcin
atmica con atomizacin en llama.
Obtener una recta de calibrado que nos permita calcular el contenido de calcio en
la muestra.

REACTIVOS

Carbonato clcico, nitrato de lantano hexahidratado y cido clorhdrico

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PREPARACIN DE DISOLUCIONES
Disolucin de cido clorhdrico 1:1. Aada alrededor de 20 mL de HCl concentrado
sobre 20 mL de agua previamente colocados en un vaso de precipitados.
Homogeneice con ayuda de una varilla.
Disolucin estndar de calcio 0,01 M. Se pesa en balanza de precisin la cantidad
adecuada de CaCO3 -secado previamente a 110 C durante cuatro horas- para
preparar 100 mL de concentracin 0,01 M. Aada unos pocos militros de agua
sobre el slido y, seguidamente, el mnimo volumen de cido clorhdrico 1:1 para
que se disuelva completamente el slido. Se transfiere cuantitativamente la
disolucin al matraz aforado enrasndose con agua destilada.
Disolucin de nitrato de lantano hexahidratado de concentracin 50 g/L. Pese en
granatario 25 g de La(NO3)26H2O, disuelva y transfiera a un matraz de 500 mL
enrasando con agua destilada.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1. Construccin de la recta de calibrado

Prepare una disolucin intermedia de calcio, tomando 10 mL de la disolucin
estndar 0,01 M, con pipeta de doble enrase, y enrasando con agua destilada a 100
mL en matraz aforado.
A partir de la disolucin estndar 0,001 M de calcio se preparan disoluciones
conteniendo 0; 4; 6; 10 y 16 mL de la misma, 2 mL de disolucin de La(NO3)26H2O de
50 g/L y 1 mL de cido clorhdrico 1:1, enrasando cada una de ellas a 50 mL con agua
destilada, en matraz aforado.
A continuacin se construye una grfica de calibrado midiendo la absorbancia, a
la longitud de onda de 422,7 nm, de cada una de las disoluciones en el espectrmetro
de absorcin atmica y representando concentracin de calcio frente a absorbancia.
Calcule la ecuacin de la recta.

2. Preparacin de la muestra de agua

En un matraz de 50 mL aada 10 mL de la disolucin de agua, 2 mL de
disolucin de La(NO3)26H2O de 50 g/L y 1 mL de cido clorhdrico 1:1, enrasando
finalmente con agua destilada. Una vez homogeneizada la disolucin, medir su
absorbancia en el espectrmetro.

3
RESULTADOS
1. Determinacin de la concentracin de CaCO3
Determinar la concentracin de la disolucin estndar primario de CaCO3
teniendo en cuenta la cantidad real pesada
CaCO3, g 0,1083
Concentracin Ca, M 0,001083

2. Medida de la absorbancia de las disoluciones estndar y la muestra

CaCO3 0,001 M, mL [Ca], M [Ca], mg/L Absorbancia

4 8E-05 3,2 0,107

6 1,2E-04 4,8 0,225
10 2E-04 8 0,385
16 3,2E-04 12,8 0,600
Muestra 2,552E-04 10,207 0,480

3. Obtencin de la recta de calibrado

Una vez medida la absorbancia de las disoluciones estndar, se representa
grficamente la concentracin de calcio (mg/L) frente a la absorbancia. Calcular la
ecuacin de la recta de calibrado.

Parmetro

Ordenada en el origen 0,6958

Pendiente 19,755
Coeficiente de correlacin 0,9921

Concentracin de calcio (mg/L) frente a absorbancia

14.00
Concentracin de calcio (mg/L)

12.00
10.00
8.00
y = 19.755x + 0.6958
6.00 R = 0.9921
4.00
2.00
0.00
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7

Absorbancia

4
4. Determinacin de calcio en la muestra de agua
Con el valor de A medido para la muestra, calcule el contenido de calcio en el
agua utilizando la ecuacin de la recta de calibrado obtenida.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
[1] Harris, D.C. Anlisis Qumico Cuantitativo. 3 Edicin (6 Edicin original), Ed.
Revert. 2007.

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 PRCTICA 2
DETERMINACIN DE ANIN FLUORURO CON ELECTRODO SELECTIVO
EN PRODUCTOS DENTALES

INTRODUCCIN
Los colutorios son lquidos que sirven para realizar enjuagues y tienen
prcticamente la misma composicin de los dentfricos, aunque en concentraciones ms
bajas, y no llevan abrasivos. Los colutorios de flor son muy eficaces durante la
calcificacin del diente. Los principales compuestos fluorados usados en dentfricos y
colutorios son fluoruro sdico, monoflor fosfato de sodio, fluorhidrato de nicometanol
(fluorinol), fluoruro de estao, flor de aminas o fluoruro potsico.
El electrodo selectivo de fluoruro es un sensor electroqumico empleado para la
determinacin de la concentracin del ion F- en disolucin. Es un electrodo de
membrana que consiste en un monocristal de LaF3 convenientemente dopado con
Eu(III) que responde a la actividad de ion F-. Su conexin al circuito electroqumico se
consigue a travs de un electrodo de referencia interna Ag/AgCl.
La IUPAC (Unin Internacional de Qumica Pura y Aplicada) define los
electrodos selectivos de iones como sensores electroqumicos cuyo potencial depende
logartmicamente de la actividad en disolucin de una especie cargada (ion), de
acuerdo con la siguiente ecuacin:

E = k + 0.059 log a
z
donde z representa la carga del in y a su actividad.

La determinacin se basa en la medida de la diferencia de potencial que se

establece entre el electrodo indicador, en este caso selectivo a ion fluoruro, y un
electrodo de referencia cuyo potencial permanece constante. La clula de medida
puede representarse como:
Ag/AgCl, Cl- (0,3 M), F- (0,001 M)/LaF3 Disolucin problema Eref
De forma que el potencial de dicha clula viene dado por la expresin:
E=E indicador - EReferencia = k - 0,059 log [F-] - EReferencia
reordenando resulta:
E = k 0,059 log [F-]
Por tanto, puede apreciarse que variando la [F-], la representacin grfica de E
en funcin de log [F-] es una lnea recta de pendiente 59 mV.

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 La prctica consiste en la construccin de una recta de calibrado con patrones
conocidos de ion fluoruro empleando este electrodo selectivo.

OBJETIVOS
Familiarizarse con los procedimientos potenciomtricos de anlisis.
Evaluar el empleo de un electrodo selectivo de iones para el anin fluoruro.
Determinar el contenido de anin fluoruro en un locutorio dental.
Verificar que los resultados obtenidos estn en concordancia con los certificados en
el producto dental.

REACTIVOS
Fluoruro sdico, cloruro sdico, cido actico glacial, acetato sdico y citrato
monosdico dihidratado.

PREPARACIN DE DISOLUCIONES
Disolucin estndar de fluoruro sdico 0,01 M. Se pesa la cantidad adecuada de
NaF slido -secado previamente a 110 C durante cuatro horas- en balanza de
precisin para preparar 100 mL de concentracin 0,01 M. Se aade agua destilada
y se enrasa en matraz aforado de dicho volumen.
Disolucin reguladora TISAB (Total Ionic Streng Adjustement Buffer). Disolver 58,5
g de NaCl, 15 mL de cido actico glacial, 102,06 g de acetato sdico trihidratado o
61,53 g si es anhidro y 0,3 g de citrato monosdico dihidratado. Comprobar que el
pH est comprendido entre 5,0 y 5,5, ajustndolo si fuera preciso, y enrasar
finalmente a un litro.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
1. Construccin de la recta de calibrado
A partir de la disolucin estndar 0,01 M se preparan disoluciones conteniendo
1; 2; 5 y 10 mL (medidos con bureta) a las que se aaden 20 mL de TISAB. Se enrasa
a 100 mL en matraz aforado y se vierte de nuevo en un vaso etiquetado con nmeros
del 1 al 5 una vez homogeneizada la disolucin.
A continuacin se construye una grfica de calibrado midiendo cada una de las
disoluciones en el potencimetro, y representando E (milivoltios) frente a log [F-.
Calcule la ecuacin de la recta.

7
2. Preparacin de la muestra a analizar
En un matraz de 100 mL aadir 5 mL de la disolucin a analizar (colutorio
bucal) con una pipeta de doble enrase, 20 mL de disolucin de TISAB y enrasar con
agua destilada. Una vez homogeneizada, medir su potencial.

Manejo del potencimetro

1. Comprobar que los electrodos estn conectados adecuadamente:

ESI conexin I.S.E.
Electrodo de referencia (ECS) conexin pequea
2. Encender el potencimetro
3. Una vez que el potencimetro realiza su autochequeo aparece la palabra
select en la pantalla; a continuacin con la tecla mode seleccionamos volt ,
presionando varias veces hasta que aparezca dicha palabra; se introduce el modo con
enter y el aparato ya est preparado para medir.
4. Introducir en la disolucin estndar n1, los electrodos previamente lavados
con agua destilada y secos, esperar a que se estabilice la seal (sta es estable
cuando, aunque vare la ltima cifra decimal, permanece durante varios segundos
constante); tomar nota del valor del E medido. Realizar la misma operacin con todos
los estndares.
5. Introducir los electrodos en la muestra problema y medir el valor del E.

RESULTADOS
1. Determinacin de la concentracin de NaF
Determinar la concentracin de la disolucin estndar primario de NaF teniendo
en cuenta la cantidad real de NaF pesada

g NaF
Concentracin
NaF (M)

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2. Medida de los potenciales de las disoluciones estndar y la muestra

mL NaF [NaF], M log [NaF] ppm F- E, mV

1
2
5
10
Muestra

3. Obtencin de la recta de calibrado

Una vez medido el potencial de las disoluciones estndar, se representa
grficamente el potencial frente al logaritmo de la concentracin de fluoruro. Calcular
la ecuacin de la recta de calibrado. Si la pendiente de la recta de calibrado estuviera
por debajo del intervalo 40-50 mV, indicara que el electrodo habra perdido
sensibilidad y debera ser sustituido por otro.

Parmetro
Ordenada en el origen
Pendiente
Coeficiente de correlacin

4. Determinacin de anin fluoruro en el colutorio dental

Con el valor de E medido para la muestra de colutorio, calcule la concentracin
de fluoruro utilizando la ecuacin de la recta de calibrado obtenida.

* Encontrado mediante la recta de calibrado:

* Especificado por el fabricante:

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 PRCTICA 3
CROMATOGRAFA LQUIDA DE ALTA RESOLUCIN PARA LA
DETERMINACIN DE STERES

INTRODUCCIN
La cromatografa es un mtodo de separacin que permite la identificacin y
determinacin de los componentes qumicos en mezclas complejas. Se basa en el uso
de una fase estacionaria y una fase mvil. Los componentes de una mezcla son
transportados a travs de la fase estacionaria por el flujo de una fase mvil, y las
separaciones se basan en las diferencias de velocidad de migracin entre los distintos
componentes de la mezcla. Aquellos componentes que son retenidos con fuerza por la
fase estacionaria se mueven lentamente con el flujo de la fase mvil; por el contrario,
los componentes que se unen dbilmente a la fase estacionaria, se mueven con
rapidez. Como consecuencia de la distinta movilidad, los componentes de la muestra
se separan en bandas discriminadas que pueden analizarse cualitativa y/o
cuantitativamente.
La Figura 1 muestra cmo se resuelven mediante elucin dos componentes de
una muestra, A y B, en una columna. Si un detector que responde a la concentracin
de soluto se coloca en el extremo final de la columna durante la elucin y se
representa grficamente su seal en funcin del tiempo (o del volumen de la fase
mvil aadida), se obtiene una serie de picos. Ese diagrama, conocido como
cromatograma, es til tanto para el anlisis cualitativo como para el anlisis
cuantitativo. La posicin de los picos sobre el eje tiempo puede usarse para identificar
los componentes de la muestra; las reas bajo los picos proporcionan una medida
cuantitativa de la cantidad de cada especie.

Figura 1. Cromatograma que muestra la separacin de una mezcla de dos compuestos A y B

por cromatografa de elucin en columna

La cromatografa lquida se basa en el empleo de una fase mvil lquida e

incluye la cromatografa tradicional en columna, capa fina, papel y la moderna
cromatografa lquida. La cromatografa lquida moderna (HPLC o LC) ofrece mayores

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ventajas en comodidad, exactitud, velocidad y la posibilidad de llevar a cabo
separaciones difciles. Las grandes posibilidades de la cromatografa de gases para
separar y analizar mezclas complejas son ampliamente reconocidas. Sin embargo,
muchas muestras no pueden ser analizadas utilizando esta tcnica, debido a que no
son suficientemente voltiles o a que son inestables trmicamente y se descomponen
bajo las condiciones de separacin. La cromatografa lquida, sin embargo, no est
limitada por la volatilidad de la muestra o la estabilidad trmica; por ello, es un mtodo
ideal para la separacin de una gran variedad de compuestos menos estables o de alto
peso molecular.

PARMETROS BSICOS EN CROMATOGRAFA

Tiempo de retencin
La Figura 2 es un cromatograma sencillo que tiene slo dos picos. El pico
pequeo de la izquierda corresponde a una especie que no es retenida por la fase
estacionaria. Al tiempo tM o t0 entre la inyeccin de la muestra y la aparicin del primer
pico se le denomina tiempo muerto y proporciona una medida de la velocidad media
de migracin de la fase mvil. El segundo pico en el lado derecho de la Figura 2
corresponde a un analito. El tiempo requerido para que esta zona llegue al detector,
despus de la inyeccin de la muestra, se conoce como tiempo de retencin y se
representa con el smbolo tR. El analito ha sido retenido porque pasa un tiempo ts en la
fase estacionaria. Entonces, el tiempo de retencin es

Figura 2. Cromatograma que muestra la retencin de un compuesto por cromatografa de

elucin en columna

As, el tiempo muerto t0 es el tiempo que una especie no retenida tarda en pasar a
travs de una columna cromatogrfica. El tiempo de retencin tR es el tiempo

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transcurrido entre la inyeccin de una muestra y la aparicin de un pico de soluto en el
detector de un sistema cromatogrfico. La diferencia entre el tiempo de retencin y el
tiempo muerto representa la interaccin del soluto con la fase estacionaria y recibe el
nombre de tiempo de retencin corregido, tR' :

t R '= t R - t0

Factor de retencin, k
El factor de retencin es un parmetro experimental importante que se usa
mucho para comparar las velocidades de migracin de solutos en columnas. Para el
soluto A, el factor de retencin kA se define como

Como muestra la Figura 2, tR y tM se pueden obtener fcilmente de un

cromatograma. Un factor de retencin mucho menor que la unidad significa que el
soluto sale de la columna en un tiempo prximo al tiempo muerto. Cuando el factor de
retencin es mayor que 20 o 30, los tiempos de elucin se vuelven excesivamente
largos. En el caso ideal, las separaciones se realizan en condiciones en las que los
factores de retencin de los solutos de una mezcla estn dentro del intervalo de 1 a 5.
El factor de retencin k para un soluto est relacionado con la velocidad a la
que migra a travs de una columna. Representa la cantidad de tiempo que pasa un
soluto en la fase estacionaria en relacin con el tiempo que pasa en la fase mvil.

Factor de selectividad
El objetivo de la cromatografa es separar analitos de una mezcla compleja. As,
el factor de selectividad indica la posicin relativa de dos picos adyacentes. El factor de
selectividad de una columna para los dos solutos A y B se define como

donde KB es el factor de retencin para la especie ms fuertemente retenida B y KA es

el factor de retencin para la especie A, retenida con menos fuerza o cuya elucin es
ms rpida. Segn esta definicin, siempre es mayor que la unidad. En la prctica,
se consiguen buenas separaciones analticas cuando el factor de selectividad se
encuentra en el intervalo de 1 a 3. Es importante resaltar que el factor de selectividad

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indica la posicin relativa de dos picos adyacentes en una columna, pero no
proporciona una medida de la eficacia con que la columna puede separarlos.

Resolucin de la columna
La resolucin Rs de una columna constituye una medida cuantitativa de su
capacidad para separar dos analitos. En la Figura 3 se ilustra el clculo de este trmino
para las especies A y B. La resolucin de una columna se define como

Figura 3. Clculo de la resolucin entre dos picos A y B

Nmero de platos de la columna

El nmero de platos tericos, N, y la altura del plato, H, se emplean muy a
menudo en la bibliografa como medidas del rendimiento de una columna. Para
determinar N a partir de un cromatograma se miden el tiempo de retencin de un pico
tR y su anchura en la base W (en unidades de tiempo). Se puede calcular el nmero de
platos mediante la relacin:

N = 16 ( tR )2
w

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

SAWYER, D. HEINEMAN, W.R. AND BEEBE, J.M.: Chemistry Experiments for

Instrumental Methods, John Wiley & Sons, New York 1984, pp. 345-347.

VIAS, P., LPEZ ERROZ, C. y HERNNDEZ CRDOBA, M., Chromatographia, 35,

1993, 9-12.

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