Vitor Stabile Garcia RA: 4171211

Artigo: Yeasts in sustainable bioethanol production: A review

O presente artigo elucida os processos da cadeia de produo do bioetanol,
enfatizando sua importncia como fonte energtica alternativa, mostrando as
diversas maneiras com que essa produo pode ser realizada, dando o enfoque
principal para a produo a partir da fermentao de leveduras, especialmente as
da espcie Saccharomyces cerevisiae.

A importncia da busca por fontes energticas alternativas se d no sentido de

reduzir a dependncia do mercado dessas fontes finitas, bem como a preocupao
com o meio ambiente. Os biocombustveis representam 40% da energia
consumida no mundo hoje em dia e seu desenvolvimento traz diversos benefcios
como a reduo de gases na atmosfera, oportunidade de empregos com o
consequente desenvolvimento regional.

85% do bioetanol do mundo produzido pelos Estados Unidos e pelo Brasil.

conhecido como lcool etlico (C2H5OH ou EtOH, quimicamente).

Pode ser usado puro ou misturado gasolina e outros combustveis, diminuindo o

poder poluente dos mesmos.

Diversas so as vantagens do bioetanol em relao gasolina: maior nmero de

octanagem, melhores limites de inflamabilidade, maior velocidade de chama,
menos emisso de gases poluentes e biodegradvel.

classificado em:
1 gerao: matria-prima rica em sacarose e amido.
2 gerao: matria-prima a biomassa lignocelulsica.
3 gerao: matria-prima a biomassa de algas (micro e macro algas).

As leveduras so imprescindveis no processo de produo do bioetanol devido

sua alta capacidade de fermentao de acares, proporcionando uma alta
produtividade de combustvel s plantas industriais. Alm disso, so
microorganismos de crescimento em meio barato e simples, que conferem alta
resistncia contaminantes e agentes inibitrios do processo.

O poder de produo de etanol das leveduras provm de sua capacidade de

catabolizar um composto de seis carbonos em um de dois carbonos, sem que o
processo de fermentao chegue ao produto final, o CO2. Esse processo
denominado diauxic shift, que o crescimento em duas fases e acontece quando
 mais de uma substncia degradada como fonte de carbono e energia. A clula
degrada primeiro uma substncia e, quando esta se esgota do meio, degrada a
segunda. Esse processo dependente da enzima lcool desidrogenase (ADH), que
codificada em ADH1locus. ADH catalisa a reduo de acetaldedo para etanol
durante o processo de fermentao da glicose, bem como a reao reversa, porm
com menos eficincia.

A Saccharomyces cerevisiae possui dois genes que codificam ADH: ADH1, que
expresso constitutivamente, e ADH2, que induzido pela reduo da
concentrao de glicose intracelular e cujo substrato o etanol. A expresso desse
gene est ligada a fatores de transcrio e os avanos da biologia molecular j
permitem manipular essa expresso para melhoria dos processos de fermentao
e produo de bioetanol.

Devido resistncia dessa espcie altas variaes de pH, e, por consequncia

menor risco a contaminaes, ela tem sido grandemente empregada nos diversos
processo de fermentao industrial.

Existem diversas espcies de leveduras, que diferem entre si principalmente pelo

tamanho e formato de suas clulas, o que interfere diretamente no processo de
produo do bioetanol.

As altas temperaturas, alta concentrao de etanol no meio e estrese osmtico so

alguns fatores que impossibilitam a sobrevivncia das leveduras durante o
processo de produo do bioetanol. Leveduras floculantes j foram utilizadas no
processo devido sua alta resistividade a esses fatores, o que diminui o custo de
produo, j que no demanda de processo de reposio.

Um grande desafio do uso de leveduras nesse processo sua capacidade de

fermentar hexoses em etanol, mas no pentoses. Apenas algumas espcies restritas
de leveduras so capazes de fermentar pentoses em etanol.

Quanto mais resistente for a levedura s condies de estresse da fermentao e

de acordo com sua capacidade de fermentar tambm pentoses, melhor ser o
processo de produo do bioetanol. Nesse sentido, algumas cepas termo
resistentes so isoladas e selecionadas para melhoria desse processo, enquanto que
espcies hbridas geneticamente modificadas e co-culturas so utilizadas para
fermentar tambm pentoses em etanol.

Alguns estudos sugerem que espcies selvagens de leveduras Saccharomyces

cerevisiae possuem melhor capacidade para fermentao de acares em etanol,
o que traz uma melhor rentabilidade para o processo.
 A matria-prima de um processo deve ser previamente tratada e otimizada afim
de facilitar os processos subsequentes, que no caso da produo de etanol so:
Obteno de soluo rica em acares fermentveis, converso desses acares
para etanol atravs do processo de fermentao e subsequente separao e
purificao desse produto. O tratamento dessa matria prima visa aumentar o
nmero de acares fermentveis disponvel na matria-prima, otimizando o
processo. Os mtodos utilizados so fsicos, qumicos, biolgicos e fsico-
qumicos.

Aps o tratamento da matria-prima realizada a hidrlise, cujo mtodo pode ser

cido (1) ou enzimtico (2):

1: a) Hidrlise cida diluda: Altas temperaturas e baixa concentrao de

cido ( o mtodo mais comum);
b) Hidrlise cida concentrada: Temperaturas mais baixas e alta
concentrao de cido (gera menos compostos inibidores).
A grande desvantagem desse processo a dificuldade de recuperao do
cido, o que aumenta os custos de produo.

2: As enzimas mais comumente usadas nesse processo so: endo-1,4-

glucanases, celobiohidrolases e -glucosidases. A eficincia desse processo depende
da concentrao enzimtica no meio e das condies da reao, como temperatura,
pH, tempo etc. A desvantagem do processo o alto custo.

O processo de fabricao do bioetanol pode ser feito de trs formas diferentes:

a) Hidrlise e fermentao separadamente: Melhora o processo devido
utilizao da temperatura ideal para cada etapa.
b) Sacarificao e fermentao simultneas: Fermentao de glicose e pentoses
so feitas de forma separadas.
c) Sacarificao e co-fermentao simultneas: Glicoses e pentoses so
fermentadas juntas em um mesmo tanque.
As vantagens dos dois ltimos processos, que so preferveis ao primeiro, so
o menor custo, menor tempo de processo e maior produtividade.

A fermentao de bioetanol pode ser realizada em lote (1), lote alimentado (2),
lote repetido (3) ou contnuo (4).
1: o mtodo mais simples e consiste em um nico lote de substrato acrescentado
no incio do processo. Garante a esterilidade do produto, mas possui baixa
rentabilidade devido s altas concentraes de acar no meio e alto custo com
mo de obra.
2: Consiste na adio de substrato no reator sem a remoo do meio. uma
combinao do mtodo em lote com o mtodo contnuo. Esse mtodo evita que a
alta concentrao de acares no meio leve inibio do crescimento celular. o
mtodo que contm maior produtividade, menor tempo de fermentao e menor
 efeito txico dos componentes. Entretanto, a produtividade dependente da
alimentao do meio com os substratos.
3: Mtodo estratgico que aumenta a produtividade de bioetanol. Clulas de
levedura imobilizadas e acares so usados para separar clulas para reciclagem.
A utilizao em materiais lignocelulsicos muito difcil pois seu resduo
permanece no meio junto com as clulas das leveduras.
4: Adio constante de substrato, cultura e nutriente em um reator repleto de
microorganismos ativos. As vantagens consistem em maior produtividade,
biorreatores menores e menor custo operacional. Entretanto, o risco de
contaminao grande, bem como a capacidade reduzida das leveduras de
fermentar devido constante mobilizao.

Diversos fatores interferem no processo de produo do bioetanol, como:

temperatura (em geral altas temperaturas prejudicam o processo, portanto a
mesma deve ser finamente regulada), pH (a entrada de nutrientes nas clulas
dependente da quantidade de H+ no meio, bem como a sobrevivncia e
crescimento das leveduras), concentrao de acares (baixas concentraes de
acares levam uma menor produtividade, enquanto que altas concentraes
levam uma estabilizao da taxa de fermentao), tempo de fermentao (incide
diretamente na taxa de crescimento dos microorganismos), taxa de agitao
(interfere na permeabilidade de nutrientes, bem como a retirada do etanol de
dentro da clula) e tamanho no inoculo (afeta a taxa de consumo do acar e a
produtividade do etanol).

Esses fatores devem ser adequados sempre ao tipo de levedura que se est
utilizando, para que o mtodo seja realmente efetivo.

A utilizao de clulas livres no vivel, visto que as mesmas promovem uma

ineficincia do processo, bem como substratos ou produtos inibidores no meio.
Para corrigir esse problema realiza-se a imobilizao celular, cujo mtodo mais
utilizado para a produo de bioetanol a adsoro, tendo visto que as clulas no
so afetadas e a levedura pode ser adicionada ou retirada do meio de fermentao.
No mtodo de adsoro a atrao inica utilizada para imobilizar as clulas. O
alginato de clcio o carreador preferido para esse processo devido alta
biocompatibilidade, baixo custo e alta disponibilidade.

Perguntas:

Segundo o artigo, o mtodo de fermentao contnuo eficaz em termos de

produtividade. Entretanto, o risco de contaminao grande devido constante
adio de substncias no reator. De quais formas seria possvel minimizar essa
contaminao e aprimorar esse processo com relao diminuio da efetividade
de fermentao das leveduras?
 De que forma a manipulao da expresso gnica de algumas espcies de
leveduras pode ser utilizada afim de aumentar a produtividade na sntese de
bioetanol?