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En aos anteriores, aprendiste que en las clulas eucariontes el ADN se encuentra en el ncleo,
mitocondrias y cloroplastos. Tambin que el ADN contiene la informacin gentica, que debe ser copiada y
transmitida de una clula a otra durante un ciclo celular, puesto que dirige la construccin y organizacin de la
clula, con lo que influye en el fenotipo del organismo.
2. ADN o protenas?
En 1915, con la confirmacin de la teora cromosmica de la herencia, se estableci que eran los
cromosomas los que portaban la informacin gentica. Sin embargo, durante mucho tiempo, se supuso que
eran las protenas cromosmicas las molculas responsables de transportarla.
En 1928, el misterio comenz a resolverse, cuando el microbilogo britnico Frederick Griffith inicia sus
investigaciones en bsqueda de la vacuna contra la neumona. Griffith nunca encontr la vacuna, pero su
experimento abri la puerta para investigaciones que luego demostraron que el ADN es la molcula de la
herencia.
1
Lo que Griffith descubri fue la
transformacin bacteriana, es decir, las
molculas de la herencia podan pasar de una
bacteria a otra modificando el fenotipo. Sin
embargo, esto no esclareci si las molculas
correspondan a protenas o al ADN. En 1944, el
bilogo canadiense Oswald Avery y su equipo de
investigadores se propusieron identificar cul
era la molcula de la herencia. Para conseguirlo,
aislaron las protenas y el ADN de la cepa S y los
aadieron a cultivos de la cepa R, luego
analizaron el efecto de cada una sobre el
fenotipo de las clulas de la cepa R. El resultado
fue que solo el ADN produjo la transformacin
bacteriana observada por Griffith, lo que
permiti identificar al ADN como la molcula
responsable de la herencia.
El ADN o cido desoxirribonucleico es un cido nucleico y, como tal, es un polmero formado por molculas
ms pequeas llamadas nucletidos.
Una vez que se determin la composicin qumica del ADN, faltaba conocer cmo se organizaban los
nucletidos para formar la estructura del ADN, fundamental para comprender el funcionamiento de la
molcula. Diferentes investigadores competan por ser los primeros en descubrir la estructura del ADN.
Finalmente, en 1953, el norteamericano James Watson y el britnico Francis Crick propusieron un modelo del
ADN, gracias al que obtuvieron el Premio Nobel en 1962, junto con Maurice Wilkins. Watson y Crick basaron su
modelo en otras investigaciones, entre ellas:
Investigacin de
Rosalind Franklin y
Maurice Wilkins:
usando difraccin de
rayos X obtuvieron
imgenes que
mostraban la forma
helicoidal de la
molcula.
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Las principales caractersticas de la molcula de ADN, establecidas por Watson y Crick en su modelo son:
El ADN est compuesto por dos cadenas de nucletidos enrolladas que forman una doble hlice. Los
nucletidos de una misma cadena, se unen entre s con enlaces covalentes entre el carbono 3 de la
pentosa de un nucletido con el grupo fosfato unido al carbono 5 del siguiente nucletido.
Las pentosas y los grupos fosfato forman el esqueleto externo de la hlice y las bases nitrogenadas se
disponen hacia el interior.
Las bases nitrogenadas de ambas cadenas se unen con puentes de hidrgeno. La adenina se une
siempre con la timina, con dos puentes de hidrgeno, mientras que la guanina lo hace con la citosina
con tres de estos enlaces. Por lo tanto, las secuencias de nucletidos son complementarias, por
ejemplo, la secuencia complementaria de GCATT es CGTAA.
Las dos cadenas de nucletidos son antiparalelas. Los extremos de cada una de las cadenas son
denominados 5-P (fosfato) y 3-OH (hidroxilo) y las dos cadenas se alinean en direcciones opuestas,
como si una estuviera de pie y la otra de cabeza, quedando el grupo OH del extremo 3 de una de
ellas enfrentado al grupo fosfato del extremo 5 de la cadena complementaria.
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II. REPLICACIN DEL ADN
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1. Importancia del proceso de replicacin
La divisin celular (etapa M) es la fase del ciclo celular en la que se originan dos nuevas clulas idnticas
entre s, gracias a que cada una de ellas recibe una copia del material gentico original. Por
lo tanto, antes de dividirse la clula debe copiar o replicar su ADN; de esta manera, cada clula hija recibe un
duplicado. La divisin celular es importante para los organismos unicelulares pues es su forma de reproducirse,
mientras que gracias a ella los organismos pluricelulares se desarrollan, crecen y reparan sus tejidos.
En el perodo S ocurre la replicacin del ADN, para ello se necesita: una hebra de ADN patrn o molde;
enzimas que aceleren y regulen el proceso; ATP que aporta la energa; muchsimas molculas de diferentes
tipos de nucletidos, con los que se construir la nueva molcula.
Antes de la fase S, el ADN eucaritico junto con las histonas forman la cromatina. Mientras el ADN est
condensado, no se replica. Por lo tanto, el ADN se debe separar de las histonas para iniciar la descondensacin
de la cromatina. Una vez libre de las histonas, comienza el proceso de replicacin, para lo cual es necesario
conocer la estructura del ADN.
1 Se separan las cadenas de nucletidos, gracias a la ruptura de los puentes de hidrgeno que unen las bases
nitrogenadas de ambas cadenas.
2 A l separarse las cadenas, se forma la horquilla de replicacin, estructura en forma de Y, por la que se
desplazan las enzimas que catalizan la replicacin del ADN.
3 El lugar donde se inicia la replicacin se llama origen de la replicacin. Es una secuencia especfica de
nucletidos a la que se unen las enzimas que iniciarn el proceso. En el ADN de eucariontes, existen muchos
orgenes de replicacin, mientras que en el de procariontes, hay solo uno.
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horquillas que avanzan en direcciones opuestas.
5 En la burbuja de replicacin, las enzimas especficas van uniendo los nucletidos complementarios a las
bases nitrogenadas libres de la cadena original. La elongacin de la nueva cadena complementaria siempre es
en direccin 5 3, ya que solo en el extremo 3-OH se puede unir un nuevo nucletido.
6 Como las cadenas son antiparalelas, una vez formada la horquilla solo una de ellas tiene su extremo 3-OH
libre y su cadena complementaria puede ser sintetizada sin interrupciones a medida que se abre la horquilla; a
esta se le llama hebra continua, adelantada o conductora. A la cadena complementaria, de aquella hebra
original que tiene 5-P libre, se le conoce como discontinua o retrasada porque se sintetiza produciendo
fragmentos cortos (fragmentos de Okazaki), que luego sern unidos por enzimas. Es por esto que la replicacin
es semidiscontinua.
7 Cuando las enzimas encargadas de la replicacin llegan cerca de los extremos de la cadena molde, se
encuentran con una secuencia de trmino, que indica el final del proceso.
8 Ahora, cada una de las molculas de ADN resultantes contiene una de las cadenas del ADN de origen y otra
nueva, por eso se dice que la replicacin es semiconservativa.
9 Cada molcula de ADN resultante se convertir en una de las dos cromtidas que formarn un cromosoma
durante la mitosis.
La divisin celular (etapa M) es la fase del ciclo celular en la que se originan dos nuevas clulas.
Las enzimas, por su accin cataltica, aumentan la rapidez del proceso de replicacin. La ADN
polimerasa es una enzima encargada, principalmente, de unir los nucletidos, la mayora de ellas lo hace en
direccin 5 a 3 y lo hacen segn la complementariedad de las bases (A-T; G-C). La de procariontes une 500
nucletidos por segundo y la de eucariontes une 50 nucletidos por segundo.
Debido a la especificidad de sustrato de las enzimas, la fidelidad del proceso de replicacin es muy alta,
especialmente en eucariontes, disminuyendo la tasa de mutaciones. Se estima que se produce un error cada
109 pares de bases aadidas. La fidelidad tambin se logra gracias a que la ADN polimerasa tiene actividad de
exonucleasa; es decir, corrige sus propios errores eliminando los nucletidos mal apareados.
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Ejercicios
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3. Anlisis del experimento de Meselson y Stahl
6. Completa la interpretacin parcial del experimento de Meselson y Stahl, dibujando las molculas de
ADN de la segunda generacin.
4. Responde las siguientes preguntas a partir del grfico de variacin de de la cantidad de ADN en el ciclo
celular.
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5. Responde las siguientes preguntas relacionadas con el proceso de replicacin de ADN.
Frmacos genotxicos El cncer es la segunda causa de muerte en Chile y puede ser provocado por mltiples
sustancias llamadas agentes carcingenos, como el alcohol y algunas contenidas en el humo del tabaco. Estos agentes
desencadenan una divisin celular descontrolada y con ello, el cncer. Los frmacos genotxicos daan el ADN de las
clulas cancerosas o impiden la accin de las enzimas que lo replican. Sin embargo, estos frmacos tienen efectos
adversos, ya que tambin pueden daar a las clulas saludables, especialmente a aquellas de rpida reproduccin como
las intestinales. Asimismo, pueden provocar mutaciones y cnceres secundarios como la leucemia. Fuente: www.
cancerquest.org/index. cfm?lang=spanish&page=482
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6. Desarrollas la siguiente actividad:
La transcripcin consiste
en la sntesis de una
molcula de RNA a partir
de una de las cadenas del
DNA; esta cadena se
denomina
complementaria, molde,
no-codificadora o
templado; la otra hebra
del DNA se denomina no
complementaria o
codificadora.
Es importante destacar que los RN A que se sintetizan a partir de un fragmento de hebra molde o
templada de DNA puede terminar como: RNA mensajero, RNA de transferencia y/o RNA ribosomal;
estos dos ltimos no llevan informacin gentica para la sntesis de una protena, pero son
imprescindibles en el proceso.
-La sntesis se produce por complementariedad de bases. La cadena de RNA que se forma es
complementaria a un fragmento de una de las cadenas de DNA. En la cadena de RNA no aparecer la
base timina que ser sustituida por uracilo.
1. Etapas de la transcripcin:
A) Iniciacin
La RNA polimerasa se une fuertemente cuando entra en contacto con una secuencia especfica de
DNA, llamada promotor. En el promotor se encuentran dos cortas secuencias situadas entre -35 y -10
nucletidos del inicio (0) de la transcripcin. La misin de las secuencias promotoras es indicar dnde
se inicia la transcripcin, en cul de las dos hebras del DNA y en qu lugar.
Fig Centros promotores y sitio de inicio de la transcripcin en la hebra molde o templado de DNA.
B) Elongacin
Despus de unirse al promotor, la RNA polimerasa abre una regin localizada de la doble hlice, de
forma que expone los nucletidos de ambas cadenas de una pequea zona del DNA. Una de las dos
cadenas expuestas del DNA acta como patrn para el apareamiento de las bases complementarias y
se inicia la formacin de una cadena de RNA. De esta forma, la cadena de RNA va creciendo
nucletido a nucletido en direccin 5 a 3. El proceso de elongacin de la cadena contina hasta
que la enzima encuentra una segunda secuencia especial del DNA, la seal de terminacin.
Inicio de la transcripcin
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Fig Sntesis de una molcula
de mRNA.
C) Terminacin
Existen diversas seales de terminacin en el DNA molde que son secuencias que desencadenan la
separacin de la enzima RNA polimerasa de la cadena molde y del RNA transcrito.
D) Maduracin
Los distintos RNA transcritos en los eucariontes presentan una serie de especializaciones no
encontradas en procariontes. A medida que transcurre la transcripcin, las molculas de mRNA,
llamadas transcritos primarios, son modificadas. Esto ocurre antes de que sean transportadas al
citoplasma, que es el sitio donde ocurre la traduccin. Las modificaciones son varias e incluyen:
1. Adicin del CAP: Un nucletido modificado (CAP) se aade al extremo 5 del mensajero. Este
casquete es imprescindible para la unin del mRNA al ribosoma y protege al mRNA de la
degradacin.
2. Poliadenilacin: En el extremo 3 del mRNA hay una secuencia seal (AAUAAA) a la que se
unen factores especficos y la enzima poli-A polimerasa. Esta enzima estimula la escisin en un
sitio ubicado 10 a 35 nucletidos hacia el extremo 3 de la seal. Luego, la enzima agrega, de a
uno, una cola de ribonucletidos de adenina (cola de poli-A) y as se genera el extremo 3 del
mRNA maduro. Esta cola de poli-A, contiene 200-250 nucletidos y parecera que influyen en
la estabilidad y en la capacidad de que los mRNA sean traducidos en el citoplasma.
Adems de desempear funciones de reconocimiento de esas secuencias, las snRNP llevan a cabo
funciones catalticas.
El proceso de splicing, catalizado por spliceosomas, ocurre slo en organismos eucariotas. Las
secuencias que se eliminan son los intrones, mientras que las secuencias que permanecen y forman
parte del mRNA maduro son los exones.
En muchos casos, un mismo transcrito primario o pre mRNA (RNA heteronuclear) puede ser
procesado por splicing en ms de una forma. Este empalme alternativo permite obtener molculas
de mRNA maduro diferentes a partir de molculas de mRNA inmaduro originalmente idnticas, lo
cual da por resultado polipptidos con distintas funciones; un mismo gen puede producir una
protena en un tejido y otra distinta en otro tejido. Esto es posible porque algunos genes producen
molculas de pre-mRNA que tienen mltiples patrones de empalme. Se ha observado que estos pre-
mRNA presentan un segmento que puede ser Intrn o Exn. Este procesamiento diferencial del RNA
nuclear permite, a las clulas de cada tejido, producir su propia versin de mRNA correspondiente al
gen especfico.
Figura Procesamiento
diferencial del RNA mensajero.
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El investigador Thonas R. Cech y sus colaboradores, en los Estados Unidos, estudiando el
splicing del rRNA en un ciliado de agua dulce llamado Tetrahymena, encontraron que en estos
organismos unicelulares eucariontes el propio intrn del rRNA inmaduro acta como catalizador de la
escisin y el empalme, es decir, se produce un empalme autocataltico. Esta secuencia de RNA se
pliega formando una estructura compleja que funciona como enzima, que se ha denominado
ribozima. Se han encontrado otros ejemplos de empalme autocataltico en varios organismos, en
RNA codificados por genes mitocondriales o de cloroplastos, en algunos genes nucleares de
eucariontes unicelulares y en algunos genes de bacterifagos, pero no en eucariontes multicelulares.
De gran importancia es el hecho que los genes eucariontes poseen en su estructura exones e
intrones, situacin no observada en procariontes. El nmero de intrones vara para cada gen, sin
embargo, su nmero aumenta a medida que el organismo es ms complejo y de reciente evolucin.
Se ha propuesto que los intrones promueven la recombinacin gentica (va crossingover), y por lo
tanto aumentan la velocidad de evolucin (de cambio).
2. CDIGO GENTICO
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La sntesis de las cadenas polipeptdicas es la segunda etapa observada en el dogma central, y es el
proceso por el cual la informacin lineal, escrita con cuatro letras (A, U, G, C), se traduce en
informacin tridimensional, escrita con 20 letras (20 aminocidos). Si bien esta etapa es, en sus
fundamentos, similar entre procariontes (bacterias) y eucariontes, existen diferencias que sern
mencionadas a medida que se avance en el desarrollo del tema.
Fig Un ribosoma.
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El aminocido se une a su correspondiente tRNA por la accin de una enzima llamada aminoacil
tRNA sintetasa.
Cada aminocido se activa por su aminoacil-tRNA sintetasa correspondiente. Hay 20 enzimas
distintas para cada aminocido.
Algunos investigadores se refieren a esta reaccin como la carga del tRNA. La energa usada
en la carga del aminocido a su correspondiente tRNA, queda depositada en la unin qumica entre el
aminocido y el tRNA. Esta energa ser utilizada posteriormente por la actividad de la peptidil
transferasa presente en la subunidad mayor del ribosoma para la formacin del enlace peptdico.
A) Iniciacin.
Es la unin de la subunidad menor a la
regin del mRNA que contiene el codn de
inicio AUG. Posteriormente se une el tRNA
iniciador cargado con el residuo N-
formilmetionina. Por este motivo, el
primer aminocido incorporado durante la
sntesis de muchas protenas bacterianas
es una metionina modificada, la N-
formilmetionina.
B) Elongacin.
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El proceso de elongacin de la cadena
polipeptdica sobre un ribosoma se puede
considerar como un ciclo de tres etapas:
C) Terminacin.
En esta etapa, el sitio A del ribosoma es abordado por alguno de los codones de trmino y ocupado
por un factor de terminacin, RF en las bacterias y eRF (eucaryotic releasing factor) en eucariontes.
La cadena polipeptdica terminada se libera del ltimo tRNA. Se disocian las subunidades ribosomales
y el mRNA, quedando disponibles la subunidades ribosomales para ser utilizados en una nueva
sntesis.
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Traduccin y Polirribosomas
Tanto en las clulas procariontes y eucariontes las molculas de mRNA se traducen por la accin de
mltiples ribosomas, las estructura resultante un mRNA con varios ribosomas se denomina
polirribosa o polisoma.Cada ribosoma se une sucesivamente al sitio que une ribosomas en el extremo
5 del mensajero y se mueve hacia el extremo 3; el polipptido asociado con cada ribosoma
progresivamente se torna ms largo a medida que el ribosoma se mueve sobre el mRNA.
En las clulas procariontes la transcripcin y traduccin son simultneas; por tanto, pueden unirse
mltiples ribosomas al extremo 5 del mRNA, mientras que la transcripcin aun est en proceso en el
extremo 3.
En las mutaciones gnicas se afecta la secuencia de pares de bases de un gen, estas mutaciones
pueden ser consecuencia de: sustituciones, adiciones o deleciones.
Sustituciones: se cambia una base por otra, segn sea el problema causado, se clasifican como:
neutras, con sentido errneo y sin sentido.
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Ejercicios
1. En la representacin del experimento de pulso y caza, qu molcula representan los puntos grises?
El experimento de pulso y caza, consistente en mantener clulas en un medio de cultivo con nucletidos de
uracilo, base exclusiva del ARN, marcados con radiactividad.
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III. Completa la siguiente tabla que compara los procesos de transcripcin y replicacin.
IV. La siguiente es parte de la secuencia de bases de un gen que codifica una protena humana. Con ayuda
del cdigo gentico.
CTC AAT GTA TAC AAG GGC TGG TAG TAC GGC GAC AGG GCA GAC AAG CTG TTG ATC CGT TAT
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V. Describe como es la estructura de un gen en eucariotas, a partir de la siguiente imagen utilizando los
conceptos que corresponden.
I) Mitocondrias
II) Clulas procariontes
III) Ribosomas
A) Slo I
B) Slo II
C) Slo III
D) Slo I y II
E) Slo II y III
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4. En clulas eucariontes el ARN maduro a diferencia del transcrito primario presenta
I) solamente intrones.
II) cola de poli-A en el extremo 3`
III) capuchn CAP en el extremo 5`
A) Slo I.
B) Slo II.
C) Slo III.
D) Slo II y III.
E) I, II y III.
5. La sntesis de una cadena polipeptdica en clulas eucariontes requiere de varios procesos o etapas.
A) Solo I y II. B)
Solo II y III. C)
Solo II y IV. D)
Solo III y IV. E)
I, II y III.
A) enzimas.
B) protenas.
C) DNA nucleolar.
D) RNA ribosomal.
E) RNA de transferencia.
A) enzimas.
B) ribosomas.
C) nucleosomas.
D) cidos ribonucleicos.
E) retculo endoplasmtico.
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9. Si el cdigo gentico estuviese especificado por codones constituidos por secuencias de dos
nucletidos, cuntos aminocidos, como mximo, podran ser especificados en tal lenguaje
gentico?
A) 64 aminocidos.
B) 61 aminocidos.
C) 20 aminocidos.
D) 16 aminocidos
E) 4 aminocidos.
10. El siguiente esquema muestra etapas de la transcripcin del DNA. Se seala la hebra molde
(no codificante) de DNA que es transcrita por la enzima RNA polimerasa. El orden correcto
para este proceso es
A) A,B,C,D
B) C,D,A,B
C) B,A,D,C
D) B,A,C,D
E) C,D,B,A
A) continuidad.
B) ambigedad.
C) degeneracin.
D) universalidad.
E) no sobreposicin.
GLOSARIO
Codn (triplete): Secuencia de tres nucletidos en el mRNA que codifica para un aminocido.
Expresin gnica: Proceso por el cual la informacin codificada en los genes se convierte en las
estructuras operacionales presentes en las clulas. Los genes expresados incluyen a aquellos que han
sido transcritos a mRNA y luego traducidos a protenas y aquellos que han sido transcritos a RNA pero
no traducidos a protenas (p.ej. tRNA y rRNA).
Exn: Porcin de una molcula de DNA en eucariontes que codifica parte de un polipptido.
Genes: Unidades hereditarias que conforman los cromosomas. Estos segmentos especficos de DNA
controlan las estructuras y funciones celulares; la unidad funcional de la herencia. Secuencia de bases
de DNA que usualmente codifican para una secuencia polipeptdica de aminocidos.
Insercin: Tipo de mutacin en la cual se intercalan una o ms bases de DNA en una secuencia de
bases de DNA preexistente. Esto produce un corrimiento del marco de lectura en el proceso de
sntesis proteica dando, por lo general, como resultado una protena alterada.
Intrn: La secuencia de bases de DNA en eucariontes que interrumpe la secuencia de un gen que
codifica para una protena, esta secuencia se transcribe al mRNA pero en un proceso de "corte y
empalme" se separa del mismo antes que el mRNA sea traducido a protena.
Mutacin: El cambio de un gen de una forma allica a otra, cambio que resulta heredable.
Modificacin hereditaria del material gentico espontnea o inducida.
Mutgeno: Agente desencadenante de mutaciones.
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Polimerasa (DNA o RNA): Enzimas que catalizan la sntesis de cidos nucleicos en base a templados
preexistentes, utilizando ribonucletidos para el RNA y desoxirribonucletidos para el
DNA.Promotor: Sitio del DNA donde se unir la RNA polimerasa para iniciar la transcripcin.
RNA (cido ribonucleico): cido nucleico formado por una cadena polinucleotdica. Su nucletido,
consiste en una molcula del azcar ribosa, un grupo fosfato, y una de estas cuatro bases
nitrogenadas: adenina, uracilo, citosina y guanina.
RNA mensajero: "Molde" para la sntesis proteica que es copiado de una de las hebras de DNA y que
se traduce en los ribosomas en una secuencia proteica. Se abrevia mRNA.
RNA polimerasa: Complejo enzimtico que cataliza la sntesis de RNA (transcripcin) utilizando como
molde la cadena de una molcula de DNA. En eucariontes existen tres RNA polimerasas: la I sintetiza
rRNA de gran tamao; la II es la que forma al mRNA; y la III se encarga de transcribir rRNA pequeos y
tRNA.
Secuencia de bases: el orden de las bases de los nucletidos en una molcula de DNA.
Traduccin: La sntesis de una protena sobre un "molde" de mRNA, consiste en tres etapas:
iniciacin, elongacin y terminacin.
Transcripcin: sntesis de RNA.
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