Ao del buen servicio al ciudadano

Universidad nacional de la amazonia peruana

Facultad de farmacia y bioqumica
Ctedra de qumica analtica 2

Informe de prctica N 05
Cromatografa en capa fina de medicamentos

Docente: Q.F. Mario Javier de la Cruz Flores

Integrantes:
Curto Arvalo Jhudy Stefany
Gngora Flores Rafael
Guerra Rivas Romel
Saboya vela Ibonny
Tello Gmez Katherine Hann

Horario de prctica: Mircoles 1.00pm 5.00pm

Fecha de entrega: martes 18 de julio del 2017

Iquitos Loreto Per

2017
 Cromatografa en Capa Fina de Medicamentos

CROMATOGRAFA

La cromatografa se define como la separacin de una mezcla de dos o

ms compuestos por distribucin entre dos fases inmiscibles: una fase
mvil, llamada tambin activa, que transporta las sustancias que se
separan y que progresa en relacin con la otra, denominada fase
estacionaria. La fase mvil puede ser un lquido o un gas y la
estacionaria puede ser un slido o un lquido.

Todas las tcnicas cromatogrficas dependen de la distribucin de los

componentes de la mezcla entre esas dos fases. Segn lo anterior, son
posibles varios tipos de cromatografa, dependiendo de la naturaleza de
las dos fases involucradas: pueden ser slido-liquido (capa fina, papel o
columna), o bien liquido-liquido o gases - liquido (fase vapor). Todos los
slidos finamente pulverizados tienen el poder de adsorber en mayor o
menor grado otras sustancias sobre su superficie; y, similarmente, todas
las sustancias pueden ser adsorbidas, unas con ms facilidad que otras.
Este fenmeno de adsorcin selectiva es el principio fundamental de la
cromatografa.

Rf

El smbolo Rf significa Relacin de frentes, es una relacin de

distancias, y se expresa como el cociente entre la distancia recorrida por
la sustancia y la distancia recorrida por el disolvente hasta el frente del
eluyente:

El valor de Rf depende de las condiciones en las cuales se corre la

muestra: tipo de adsorbente, eluyente, as como las condiciones de la
placa, temperatura, vapor de saturacin, etc. Tiene una reproducibilidad
de 20%, por lo que es mejor correr duplicados de la misma placa.

El eluyente (fase mvil) ascender por capilaridad por la placa y

arrastrar los componentes en forma diferenciada a lo largo de sta,
produciendo manchas de los componentes. El grado de elucin de
lassustancias depender tanto de su propia polaridad como de la
polaridad del eluyente utilizado.

Gel de slice.

Es una forma granular y porosa de dixido de silicio, hecho a partir de

silicato sdico. Es un gel slido y duro, de aspecto cristalino, poroso,
inerte, no txico e inodoro. Su frmula molecular es SiO2.nH2O, casi
insoluble en agua y en cualquier otro disolvente. Es qumicamente
estable, slo reacciona con cido fluorhdrico y con lcali.

El gel de slice, tambin conocido como Silicagel, es un producto

absorbente que puede diferenciar la adsorcin de diferentes molculas,
actuando como un adsorbente selectivo en procesos de cromatografa,
tanto en columna como en placa fina.

El gel de slice est catalogado como el de mayor capacidad de

absorcin de los que se conocen actualmente, y bajo diferentes mtodos
de fabricacin, se pueden conseguir diferentes tipos de gel de slice con
diversas estructuras de poro, pudiendo llegar a absorber hasta un 40%
de su propio peso en agua, por lo que es usado tambin para reducir la
humedad en espacios cerrados.

CROMATOGRAFA EN CAPA FINA

En este caso se utiliza una placa recubierta con fase estacionaria

manteniendo un pequeo espesor constante a lo largo de la placa. El
eluyente ascender, por capilaridad, por la placa y arrastrar los
componentes a lo largo de sta produciendo "manchas" de los
componentes.
En la cromatografa en capa fina (ccf), el grado de elucin de las
sustancias depende tanto de su propia polaridad como de la polaridad
del eluyente utilizado

El adsorbente se coloca en forma de una capa delgada adherida sobre

un soporte rgido, qu pueden ser placas de vidrio, aluminio o polister.
Los tamaos de la placa para ccf convencional son: 20 x 20; 10 x 20 y 5
x 2 cm.

Objetivos:

Aplicar cromatografa de capa fina a medicamentos.

Conocer el sistema de cromatografa de capa fina: fase
estacionaria, fase mvil, muestra.

Materiales y reactivos:

Muestra a analizar: Paracetamol 500mg

20 tb de paracetamol de 500 mg
Tabletas de referencia de paracetamol
Papel aluminio
Mortero
4 frascos de laboratorio de 50ml con tapa rosca
4 frascos de laboratorio de 25ml con tapa rosca
4 frascos de laboratorio de 100ml con tapa rosca
130 ml de metanol
Micropipeta de 1000l con tips
4 viales de 10ml con tapa rosca
Pipeta de 1ml
20 ml de tolueno
20 ml de acetona
5 ml de cido actico glacial
Hornilla elctrica
Lmpara UV 254 nm
Placas cromatogrficas recubiertas con gel de slice 60F 254
Pinzas
Tijeras
Papel filtro
Cmara de desarrollo para cromatografa de capa fina (frasco)
Lpiz
Marcador
 Microcapilares de 2l de capacidad
Vaso de precipitado de 250 ml
Agua destilada
Termmetro

Procedimiento:

I. Preparacin de la solucin madre del estndar:

a) Para la preparacin de la solucin madre del estndar se requiere

una tableta de referencia de 500 mg de paracetamol, la que se
tritura antes de realizar la extraccin. El procedimiento preciso es el
siguiente: envuelva una tableta en el papel aluminio y tritrela con el
pistilo hasta obtener un polvo fino. Transfiera todos los slidos en
un frasco de laboratorio de 50 ml y enjuague los residuos de solido
con 25 ml de metanol. Cierre el frasco y agtelo por 3 minutos hasta
que se haya disuelto el slido. Deje que repose la solucin por 5
minutos hasta que los residuos insolubles se sedimenten bajo del
lquido claro del sobrenadante.
b) Para las disoluciones subsiguientes, mezcle 1 ml del lquido claro
sobrenadante con 3 ml de metanol en un vial de 10 ml. cierre el vial
y agtelo. Identifique el vial como solucin madre del estndar de
paracetamol. La solucin madre debe contener 5mg de total de
droga por ml. prepare una solucin para cada prueba.

II. Preparacin de la solucin estndar de trabajo al 100% (lmite

superior de trabajo)

Pipetee 1 ml de la solucin madre del estndar clara en un vial de 10

ml y aada 3 ml de metanol. Cierre el vial y agtelo. Esta solucin
debe contiene 1.25 mg de la droga total por ml y se la identificara
como solucin estndar de trabajo de paracetamol al 100%. La
solucin estndar de trabajo representa un producto de buena
calidad conteniendo 100% de paracetamol.

III. Preparacin de la solucin estndar de trabajo al 800% (lmite

inferior de trabajo)

Pipetee 1 ml de la solucin madre del estndar clara en un vial de 10

ml y aada 4 ml de metanol. Cierre el vial y agtelo. Esta solucin
debe contiene 1.0 mg de la droga total por ml y se la identificara
como solucin estndar de trabajo de paracetamol al 80%. La
 solucin estndar de trabajo representa un producto de poca calidad
conteniendo 80% de paracetamol.

Para nuestro trabajo este nivel de la droga representa el lmite

inferior aceptable para un determinado producto.

IV. Preparacin de la solucin madre de la muestra, cuyo producto

declara una concentracin de 100 mg de paracetamol por unidad:

Para la preparacin se la solucin madre de la muestra se requiere

una tableta entera del producto apropiado que se encuentre en el
mercado. El procedimiento preciso es el siguiente: envuelva una
tableta en el papel aluminio y tritrela con el pistilo hasta obtener un
polvo fino. Transfiera todos los slidos en un frasco de laboratorio
de 25 ml y enjuague los residuos de solido con 20 ml de metanol.
Cierre el frasco y agtelo por 3 minutos hasta que se haya disuelto el
slido. Deje que repose la solucin por 5 minutos hasta que los
residuos insolubles se sedimenten bajo del lquido claro del
sobrenadante.
Esta solucin debe contiene 5 mg de la droga total por ml. el frasco
se la identificara como solucin madre de la muestra de
paracetamol. Prepare una solucin nueva para cada prueba.

V. Preparacin de la solucin madre de la muestra, cuyo producto

declara una concentracin de 300 mg de paracetamol por unidad:

a) Envuelva una tableta en el papel aluminio y tritrela con el pistilo

hasta obtener un polvo fino. Transfiera todos los slidos en un
frasco de laboratorio de 25 ml y enjuague los residuos de solido con
15 ml de metanol. Cierre el frasco y agtelo por 3 minutos hasta que
se haya disuelto el slido. Deje que repose la solucin por 5 minutos
hasta que los residuos insolubles se sedimenten bajo del lquido
claro del sobrenadante.
b) Para las disoluciones subsiguientes, mezcle 1 ml del lquido claro
sobrenadante con 3 ml de metanol en un vial de 10 ml. cierre el vial
y agtelo. Identifique el vial como solucin madre de la muestra de
paracetamol. La solucin madre debe contener 5mg de total de
droga por ml. prepare una solucin para cada prueba.

VI. Preparacin de la solucin madre de la muestra, cuyo producto

declara una concentracin de 500 mg de paracetamol por unidad:

c) Envuelva una tableta en el papel aluminio y tritrela con el pistilo

hasta obtener un polvo fino. Transfiera todos los slidos en un
 frasco de laboratorio de 50 ml y enjuague los residuos de solido con
25 ml de metanol. Cierre el frasco y agtelo por 3 minutos hasta que
se haya disuelto el slido. Deje que repose la solucin por 5 minutos
hasta que los residuos insolubles se sedimenten bajo del lquido
claro del sobrenadante.
d) Para las disoluciones subsiguientes, mezcle 1 ml del lquido claro
sobrenadante con 3 ml de metanol en un vial de 10 ml. cierre el vial
y agtelo. Identifique el vial como solucin madre de la muestra de
paracetamol. La solucin madre debe contener 5mg de total de
droga por ml. prepare una solucin para cada prueba.

VII. Preparacin de la solucin de trabajo de la muestra:

Pipetee 1 ml de la solucin madre clara en un vial de 10 ml y aada 3

ml de metanol. Cierre el vial y agtelo. Esta solucin debe contiene
1.0 mg de la droga total por ml y se la identificara como solucin de
trabajo de la muestra de paracetamol. La concentracin esperada en
la solucin va a ser de 1.25 mg/ml y debe ser equivalente a la
concentracin de paracetamol del estndar de concentracin alta.

VIII. Aplicacin de la prueba:

Marque una lnea (lnea de inicio) paralela a una distancia de 1.5 cm del
extremo inferior de la placa cromatogrfica y aplique con las pipetas
microcapilares 2microlitros (l) de la solucin de la prueba y del
estndar como se demuestra en la fotografa.

Se puede hacer hasta 5 manchas en la placa cromatogrfica. Compruebe

la uniformidad de las manchas usando una luz UV de 254 nm. Todas las
manchas deben ser circulares y estar localizadas a distancias iguales
sobre la lnea de inicio. La intensidad de ellas puede diferir pero sus
dimetros no. La diferencia en la intensidad se debe a la diferente
cantidad de los residuos de las tabletas o de las capsulas, o a la
diferente concentracin de la droga en la solucin de muestra. Una
diferencia en el tamao de la mancha es evidencia de una mala
aplicacin. Repita de nuevo el procedimiento si no se logra una
aplicacin homognea.

IX. Desarrollo:

Pipetee 10 ml de tolueno en la cmara de desarrollo para CCF. Aade 10

ml de acetona y 10 gotas de cido actico glacial. Cierre el recipiente y
mezcle cuidadosamente. Cubra las paredes del recipiente con papel
filtro y espere 15 minutos para asegurarla saturacin de la cmara con
los vapores del solvente. Coloque con cuidados la placa cargada en el
frasco. Cierre el frasco y desarrolle la placa cromatogrfica hasta que el
solvente haya alcanzado las 3 cuartas partes de la longitud de la placa
cromatogrfica, siendo el tiempo de desarrollo d aproximado 15
minutos. Remueva la placa cromatogrfica de la cmara, marque el
frente del solvente y deje que el resto del solvente se evapore usando la
hornilla elctrica si fuese necesario.

X. Deteccin:

Seque los residuos del solvente y observe la placa cromatografa con

una luz ultravioleta de 254 nm. Inspeccione la placa cromatogrfica
despus con la coloracin con yodo.