Microbiologa General ESIQ FAIN UNJBG - 2016

CUANTIFICACIN DE HONGOS
I. INTRODUCCIN
Los hongos presentan diversas estructuras, cuando se reproducen lo hacen por esporas. Las esporas fngicas son
componentes normales de ambientes externos e internos. Actualmente, se conoce que el aire presente en los
ambientes exteriores puede ser la fuente de esporas fngicas contaminantes de los ambientes internos. A su vez,
muchos de estos ltimos pueden servir como sitios de amplificacin para el crecimiento de los hongos. As,
cuando se presenta una alta humedad, las esporas pueden germinar y el hongo puede crecer produciendo miles
de nuevas esporas que utilizan la materia orgnica de esos sitios (Yang & Johanning, 1993). La mayora de los
hongos presentes en los ambientes internos son saprofticos, porque, ellos obtienen lo que necesitan para su
metabolismo de materiales muertos, materia orgnica o sustratos como madera, papel, pintura, suelo, polvo,
piel y alimentos (Albright, 2001). No hay un cierto nivel de los hongos ambientales que puede ser considerado
como seguro. Esto depende de la concentracin fngica en los ambientes externos y de los tipos de esporas
presentes en el ambiente interno. Cada oficina, cada edificio o cada casa deben ser considerados como un caso
separado y nico. Generalmente, la concentracin fngica de los ambientes internos es menor que la presente
en los externos (Berlongieri, 1999). Klanova (2000) estableci que la concentracin de hongos en ambientes
internos por encima de 2,000 UFC/m3 , puede ser considerada como un factor de riesgo serio para la salud de
los ocupantes.

El aire es el portador de aerosoles biolgicos como polvo, gotitas de agua y microorganismos. Las esporas de
hongos encontrados proceden principalmente del suelo, de la vegetacin y del mar. Los gneros ms
comnmente aislados del aire son Penicillium, Aspergillus, Rhizopus, Mucor y Cladosporium, entre otros. Todos
los hongos se reproducen por esporulacin. Cuando la espora se encuentra en un medio nutritivo adecuado, se
hincha y germina emitiendo uno o ms tubos germinativos que se alargan distalmente hasta constituir
filamentos delgados y largos (HIFAS), las cuales pueden ramificarse despus. En algunas especies hay presencia o
no septos a lo largo de la hifa. El crecimiento de hifas en forma algodonosa entrelazadas llamado MICELIO. El
conjunto de micelio se conoce como TALO. Algunos hongos tambin producen esporas sexuales formadas como
resultado de la reproduccin sexual. Las que estn encerradas en una especie de saco (Asca) se llaman
ASCOSPORAS y las que se forman en el extremo de una hifa o basidio se denominan BASIDIOSPORAS. Los hongos
constituyen tres grupos importantes: Los mohos: hongos filamentosos, ampliamente distribuidos en la
naturaleza y son habituales en pan viejo, queso o frutas. Las levaduras: hongos unicelulares, mayora son
Ascomicetos. Tienen forma oval o cilndrica y su principal forma de reproduccin es la gemacin, se desarrollan
en hbitats con abundante azcar tales como frutas, flores y corteza de rboles. Tienen gran importancia
biotecnolgica en industria cervecera, panificacin y produccin de protena unicelular (Biomasa). Las setas:
hongos filamentosos, (Basidiomycetes) que forman cuerpos fructferos denominados setas y que producen
basidiosporas como esporas sexuales. Una actividad ecolgica muy importante de los Basidiomycetes, es la
descomposicin de la madera, papel, ropa y otros derivados de productos naturales (producen celulasas).

II. OBJETIVOS
Cuantificacin de hongos del aire en ambientes internos.
Cuantificacin de hongos de alimentos contaminados.
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III. MATERIALES
- Placas de Petri, agar Sabouraud, agua destilada, solucin salina fisiolgica estril, cmara de Neubauer,
microscopio, etc.

IV. PROCEDIMIENTO
A) Aislamiento de hongos del aire
1. Tomar una placa con medio agar Sabouraud.
2. Abrir la placa y exponerla al aire en cualquier sitio por media hora y colocar de nuevo la tapa en su sitio.
3. Incubar por 48-72 horas o ms a temperatura ambiente.
4. Observar la presencia de colonias filamentosas de diversos tipos y colores.
5. Describir las observaciones hechas.
6. Anotar las caractersticas de las colonias seleccionadas para hacer los microcultivos, ya que esta informacin
es un criterio importante para la identificacin del moho.

B) Observacin directa
1. De las colonias de hongos aislados, tomar nota de sus caractersticas: Forma, aspecto del micelio
(algodonoso, aterciopelado u otro), pigmentacin, elevacin, consistencia, etc.
2. Seleccionar una de las colonias aisladas y con el asa bacteriolgica con un pequeo ganchito en la punta,
desprender una pequea porcin.
3. Extender el material obtenido en una gota de agua puesta sobre un portaobjetos y colocar con cuidado un
cubreobjetos sobre ste.
4. Examinar al microscopio con objetivo seco dbil buscando estructuras representativas.
5. Dibujar las observaciones hechas.
6. Cambiar al objetivo seco fuerte para observar mejor las estructuras seleccionadas, procurando que stas
presenten la arquitectura completa del hongo para facilitar su identificacin.
7. Dibujar las observaciones hechas: Seco dbil. Seco fuerte.

C) Cuantificacin de hongos
1. Colocar 100 ml de agua en un vaso de precipitados.
2. Tomar una muestra de hongos de un sustrato o alimento con hongos y colocarlos en el agua.
3. Agitar con una varilla durante 5 minutos
4. Colocar una gota aproximadamente sobre la lamina y laminilla de la cmara de Neubauer.
5. Llevar la cmara con la muestra a observar en el microscopio con objetivo de 40X.
6. Realizar el conteo, dando el resultado de N de esporas por ml.

V. CUESTIONARIO
1. Dibujar las estructuras de 5 hongos de diferente gnero.
2. Describir otra tcnica de aislamiento de hongos.
3. Mencionar la importancia de los hongos en procesos industriales
4. Que hongos se utilizan en la produccin de alimentos.