PRCTICA 4: ESTUDIO DE AMINOCIDOS DE MUESTRA VEGETALES

MATERIALES Y EQUIPO

Tubos de ensayo
Estufa
Soluciones salina y acuosa de la practica 2
Reactivos
Beakers de 100 ml
Probeta
Pipetor.

METODOLOGA

Hidrolisis cida de protenas

a. Coloque 8 ml de extracto acuoso en tubo de ensayo.
b. Agregue 12 ml de HCL (6N).
c. Identificar el tubo de ensayo con la letra A.
d. Repetir paso con el extracto salino.
Identificar el tubo de ensayo con extracto salino con la letra b.

Neutralizacin de los hidrolizados:

a. Las pruebas de caracterizacin deben realizarse a un PH neutro o no mayor a 8.

b. Indentificar hidrolizado acuoso con la letra A, el hidrolizado salino acido B, hidrolizado

acuoso bsico C, e Hidrolizado salino D.

c. Los cuatro tubos deben tener 20 ml de contenido.

Figura 2. Beakers con 8 ml y 12 ml de HCL (6N)

Fuente propia.
Figura 1. Neutralizacin de pH.
Fuente propia.
Figura 3. Coloracin de los extractos tanto acido como bsico despus de la aplicacin de
Triptfano, Fenilalanina, Tirosina. Adems de la coloracin de los patrones. Fuente propia.

PRCTICA No. 5 ESTUDIO DE AMINOCIDOS, CROMATOGRAFA DE

AMINOCIDOS Y ESPECTROFOTOMETRA.

1. MATERIALES Y EQUIPO

Cromatoplaca de aluminio con slica gel

Extraccin acuosa
Extraccin salina
Un lpiz o un portaminas de grafico
1 regla graduada
1 gradilla de metal
1 beacker de 50 ml
3 tubos capilares
1 pinza /tubo de ensayo
2 probetas de10 ml
Muestra problema
1 cromatografa
9 tubos de ensayo
2 pipetas Mohr (1ml y 5 ml)
1 Kleenex
1 caja de placas cromatografas de aluminio con: Slica
Gel como medio de sostn.
Tubos capilares
Cono(s) de hilo
1 Objeto puntiagudo (navaja, clavo, etc) y/o ganchos plsticos de ropa
Papel filtro
Espectrofotmetro de Bausch y Lomb Modelo Epectronic 20
2 Cubetas (recipientes para lectura en espectrofotmetro)
1 mechero bunsen
 Solucin n-butanol, acido actico, agua
1 nebulizador de vidrio
1 manguera de hule
1 caja de Kleenex.

METODOLOGA

El instructor de laboratorio tomara una cromatoplaca de aluminio con clicagel y

cprtara secciones para cada grupo de laboratorio.
Seleccione que muestras va a utilizar para realizar la cromatografia.
Trace, con un lpiz, una lnea muy suave, paralela a la base de la
croamatoplaca, a una distancia de 1.0 cm de separacin.
Sobre esta lnea marque cuatro smbolos separados uniformemente entre si y de
los bordes laterales.
Coloque en su cuaderno de laboratorio un smbolo por muestra a analizar e
identifquelo en la placa cromatografa.

Discusin de resultados.

Por falta de tiempo no se pudo llevar a cabo la prctica completa, pero se nos dio una explicacin
de parte de la instructora del laboratorio del uso y como realizar esta tcnica. Se nos explic que
e s una tcnica donde la separacin ocurre sobre una capa delgada de adsorbente que est
adherida a un soporte inerte. Se nos explic que es una tcnica donde la separacin ocurre sobre
una capa delgada de adsorbente que est adherida a un soporte inerte. La realizacin de esta
tcnica es muy fcil, pero que a su vez es muy cara, se nos dijo que el paquete de 20 placas est
valorada alrededor de Q5,000.00 aproximadamente.

Figura 1. Explicacin de la tcnica de cromatografa por parte de la instructora de laboratorio.

Fuente propia.
Discusin de resultados

Tabla no. 1

Como se puede observar en la tabla de resultados para la prueba de sulfuro, la muestra 1 dio
positivo con seis gotas de NaOH, no as para las muestras 2,3 y 4. Se observa que la muestra
con cristeina con seis gotas de NaOH (hidrxido de sodio) y diez gotas de cido actico
(CH3COO) dio positivo. Ya que donde acta empricamente como fijador de nucleoprotenas, y
no as de protenas plasmticas, ya sean globulares o fibrosas.

Tabla no.2: Prueba de xahtroprotehina

Tal como se muestran los resultados positivos en la tabla, es uno de los 20 aminocidos que
forman las protenas por lo que los aminocidos Tyrisina estn presentes en la muestra de
semilla de soya.

Tabla no. 4: Prueba de aminocidos.

En este caso los resultados para aminocidos, dieron todas la muestras, por lo que la semilla de
soya es contenedora de alta protena variadas, tanto como la histeidina como tyrosina , estas
muestras dieron positivo con 15 gotas de ninhidrina, que fue el reactivo que se utilizo para la
prueba de aminocido.

Conclusiones.

Es el nivel de organizacin ms sencillo y simple, el nivel de organizacin qumico o

molecular est formado por microorganismos formados biolgicamente por molculas
orgnicas, presentes en la harina de soya.

Como se muestra en tabla no, 3, la muestra dio positivo y a la prueba de Biuret, lo que
indica que la muestra tiene alto contenido de protenas y pptidos. Las pruebas a este
tipo de reactivo nos es de gran utilidad en el campo.

El uso de este tipo de tcnicas es de gran ayuda a detectar la presencia de las

protenas especficas, pero no se pudo concluir.
Es una tcnica que se tiene que realizar con cuidado ya que realizarla sale con un alto
costo.