Culturi de celule si tesuturi

Sef lucrari, dr. biol. Maria Butnaru

Cultura de celule si tesuturi

este o metoda de laborator, prin care celule izolate

sau fragmente de tesut (animal sau vegetal), sunt
transferate intr-un mediu artificial, controlat, in care
acestea isi pastreaza viabilitatea si functii specifice.

1907 Ross Harrison (zoolog, America). Prima

culturaa de tesut in picatura de plasma coagulata. A
observat cresterea prelungirilor nervoase din
fragmentul de tesut.
 Alte evenimente importante
1916 metode de dezintegrare tisulara cu enzime hidrolitice
1940 introducerea antibioticileor in tehnica de lucru
1952 transplant de nucleu
1955 medii artificiale complexe
1964 celule stem de soarece (pluripotente)
1966 primul factor de crestere (NGF)
1970 aparitia primelor hote cu flux laminar
1976 medii sintetice, compozitie definita, fara extracte naturale
1980 dezvoltarea tehnicilor de inginerie genetica si inginerie
tisulara
1996 prima clonare reusita la animale (oaia Dolly)
1998 cultura de celule stem umane
2000+ .
 Aplicatii
Cercetari fundamentale in biologie si medicina
Obtinerea de vaccinuri si inteferoni
Testarea medicamentelor si a dispozitivelor
medicale
Toxicologie
Terapie celulara si inginerie tisulara
Analize citogenetice pentru evidentierea
aberatiilor cromosomiale
Notiuni cheie in cunoasterea domeniului
Celula:
structura si ultrastructura,
functii,
mecanisme moleculare in realizarea functiilor
Conditii tehnice:
asepsie
medii de cultura
tehnici standard si tehnici speciale de lucru
Aplicatii
 Structura cursului:
Curs 1. Introducere
Curs 2. Compozitia chimica a celulei. Structura membranei celulare
Curs 3. Citoplasma si organitele celulare
Curs 4. Interactiunea celulei cu mediul extracelular (semnalizarea celulara ,
jonctiunile intercelulare si jonctiunile celula-matrice extracelulara)
Curs 5. Elemente de biologie moleculara (ciclul celular, replicatia, transcriptia,
translatia)
Curs 6. Apoptoza celulara
Curs 7. Tipuri de celule si sursa de celule, utilizate in tehnicile de cultura celulara
Curs 8. Metode de izolare a acelulelor. Cultura primara si cultura de linii celulare
Curs 9. Stabilitatea genetica a celulelor in cultura. Transformarea si imortalizarea
culturilor de celule in vitro. Conservarea si stocarea celulelor.
Curs 10. Clonarea celulara si selectia clonelor
Curs 11. Aplicatiile culturilor de celule in biotehnologiile farmaceutice, Cultura de
celule la scara industriala.
Curs 12. Cultura de celule in tesatrea bio-medicala.
Curs 13. Cultura de celule in ingineria celulara.
Curs 14. Cultura de celule in ingineria tisulara. Sisteme de cultura 2D, 3D si in
bioreactoare
 CELULE ACTUALE

Celula procariota

Celula eucariota animala Celula eucariota vegetala

Celula eucariota de origine animala
 COMPOZIIA CHIMIC A CELULEI
Apa - 80% din volumul celulei (variz n funcie de vrst i funciile celulei)
Rol n celul:
solvent
mijloc de transport pentru substanele solvite
mediu de desfurare a reaciilor chimice
Substane anorganice
Rol n celul:
meninerea echilibrului hidroelectrolitic (Na, K, Cl, Ca),
rol structural (Ca, P),
susinerea reaciilor enzimatice (Fe, Mg, Mn, Cu, Si, Br, Al etc),
generarea i transmiterea impulsurilor nervoase (Na, K, Cl, Ca, Mg),
respiraie (Fe, Cu, S),
fotosintez (Mg),
detoxificare (S, O),
sinteza de energie (H)
altele
Substane organice reprezentate de cele 3 clase majore de macromolecule:
Proteine (aproximativ 20% n celula animal i vegetal)
Glucide (sub 10% celula animal si peste 20% celula vegetal)
lipide (10-12% celula animal si sub 2% celula vegetal)
 PROTEINE
structura primara
 PROTEINE
structura secundara
Principiul de organizare al alfa-helixului
Principiul de organizare al lanturilor pliate-beta

Antiparalel

Paralel
Principiile de asamblare ale structurilor secundare
Interactiuni covalente
Plierea (impachetarea) proteinelor in structuri
complexe cu minimizarea energiei libere
 PROTEINE
structura tertiara si cuaternara
 LIPIDE
Rol in celula: Molecule cu structur variat,
- alctuiesc structura de simpl sau complex
baz a membranelor
celulare (fosfolipidele,
glicolipidele i
colesterolul)
- au rol de rezervor
energetic (trigliceridele,
acizii grasi)
- alctuiesc structura unor
hormoni i vitamine
(derivai de colesterol
i acizi grai)
 GLUCIDE
Lanturi polimerice liniare sau ramificate, alcatuite din
monomeri cu structura ciclica, frecvent cu 5 i 6 atomi
de carbon (pentoze si hexoze)
Mono-, di- sau polyzaharide
 ACIZI NUCLEICI
Macromolecule alctuite din nucleotide (dezoxiriboze sau oxiriboze)

Un nucleotid = o baza azotata + o pentoza + radical tri-fosfat

5' 5'
H O H2C OH H O H2C OH
O O
3' 3'

OH OH OH

Dezoxiriboza Riboza
OH OH
__ __
O __ P OH O __ P OR
2
OH OR 1

Radical fosforic Fosfodiester

Rol n celul: Tipuri de acizi nucleici

- Baza material a ereditii
- Codifica informaia genetica Acid dezoxiribonucleic (ADN)
la eucariote, procariote si
virusuri Acid ribonucleic (ARN)
Structura primara si secundara a moleculei de ADN