Deficiencia de GLRX5 causa anemia, pero no afecta significativamente a los tejidos no eritroides.

En eritroblastos
normales, ALAS2 y FECH (ferroquelatasa) en las mitocondrias contribuyen a la sntesis de hemo, que se incorpora en la
hemoglobina (Hb). Eritroblastos son las nicas clulas que expresan ALAS2, que contiene un IRE en su 5 'UTR. Todas las
dems clulas expresan ALAS1, que no est regulada por el sistema IRE-IRP. Eritroblastos codifican dos formas de la
ferroportina (FPN1) transcripcin, IRE-FPN1a y no IRE-FPN1B. Ambos codifican una protena FPN1 idntico que
funciona como el exportador de hierro. Tras la diferenciacin eritroide, tanto la expresin y la expresin ALAS2 FECH
son upregulated, aumentando as el nivel de sntesis de hemo y la hemoglobina, mientras que la expresin FPN1 es
downregulated (65). Por el contrario, Fe-S clster biognesis es defectuoso en eritroblastos-GLRX5 deficiente, el hierro
se acumula en las mitocondrias, y la deficiencia de hierro asociada en el citosol activa protenas IRP. El nivel de
expresin ALAS2 es disminuido por IRP represin de su 'IRE 5. El nivel de expresin FECH tambin disminuye, muy
probablemente porque FECH no adquiere el cluster Fe-S que necesita para la estabilizacin (69). Juntos, la sntesis de
hemo y posterior hemoglobinizacin se inhiben. Los niveles de expresin de ambas transcripciones FPN1, incluyendo
tanto FPN1a y FPN1B, se incrementan, tal vez en respuesta a la tensin causada por la sobrecarga de hierro
mitocondrial. Debido a que carece de la FPN1B IRE, la expresin de FPN1B evade la represin IRP y aumenta el nivel de
expresin de FPN1, que puede exacerbar la deficiencia de hierro citoslico. Como resultado, los eritroblastos-GLRX5
deficiente no pueden producir suficiente heme para hemoglobinizacin a la diferenciacin. Aunque no eritroblastos-
GLRX5 deficiente tambin demuestran la sobrecarga de hierro en las mitocondrias y deficiencia de hierro citoslico,
expresan ALAS1, que no tiene IRE y no est reprimida por IRP. Por lo tanto, la sntesis de hemo no se vea afectada de
manera significativa en tipos de clulas no eritroides. Adems, las clulas no expresan solamente FPN1a eritroblastos,
que pueden ser reprimidos por IRP clulas se desarrollan como el agotamiento de hierro citoslico
La deficiencia en la biognesis mitocondrial Fe-S clster provoca la sobrecarga mitocondrial hierro, deficiencia relativa
de hierro citoslico, y la activacin del sensor de protenas citoslicas de hierro, IRP1 y IRP2. La deficiencia en muchas
de las principales protenas implicadas en mitocondriales Fe-S resultados biognesis clster en la biognesis
mitocondrial defectuoso Fe-S clster, lo que a su vez se traduce en la remodelacin de la transcripcin, la sobrecarga
de hierro mitocondrial, y la deficiencia de hierro citoslico. Protenas IRP se activan para ser protenas reguladoras de
ARN, que aumentan la tasa de traduccin de 3 'IRE-mRNA, tales como TfR1 (aumenta el ingreso de hierro para
aumentar el nivel citosolico), mientras que inhiben la traduccin de mRNAs que contienen IREs en el 5' UTR, tales
como ferritina (disminuye la formacin de depsitos) y ferroportina. (disminuye liberacin de hierro al no presentarse)
Paper 1

Functional Analysis of GLRX5 Mutants Reveals Distinct

Functionalities of GLRX5 Protein (junio 22, 2015)
Liu G, Wang Y, Anderson GJ, Camaschella C, Chang Y, Nie G.

Glutaredoxina 5 (GLRX5) es una protena mitocondrial 156 aminocido que juega un papel esencial en la transferencia
de clster de hierro-azufre mitocondrial. Se inform de mutaciones en esta protena para dar lugar a anemia
sideroblstica y hiperglicinemia no cetnico variante en humanos. Recientemente, hemos caracterizado un paciente
sideroblstica congnita chino anemia que tiene dos mutaciones compuesto heterocigotos missense (c. 301 A> C y c.
443 T> C) en el gen GLRX5. En esto, hemos desarrollado una lnea celular K562 nocaut GLRX5 y estudiamos las
funciones bioqumicas de las mutaciones patgenas identificados y otros aminocidos conservados con funciones
esenciales previstos. Hemos observado que la mutacin K101Q (debido a c. 301 A> C mutacin) puede impedir la
unin de [Fe-S] para GLRX5 protena, mientras que L148S (debido a c. 443 T> C mutacin) puede interferir con [Fe- S]
traslado desde GLRX5 planchar protena reguladora 1 (IRP1), aconitasa mitocondrial (m-aconitasa) y ferroquelatasa. Se
demostr adems que L148S es funcionalmente complementario al mutante K51del respecto de Fe / S-ferroquelatasa,
Fe / S-IRP1, Fe / S-succinato deshidrogenasa y la biosntesis de Fe / Sm-aconitasa y lipoylation de piruvato
deshidrogenasa -cetoglutarato complejo y complejo deshidrogenasa. Adems, hemos demostrado que las
mutaciones de los residuos de aminocidos altamente conservadas en la protena GLRX5 pueden tener diferentes
efectos sobre las protenas downstream Fe / S. En conjunto, nuestro trabajo actual demuestra que la protena GLRX5
es multifuncional en [Fe-S] la sntesis de protenas y la maduracin y los defectos de los diferentes aminocidos de la
protena dar lugar a efectos distintos sobre aguas abajo biosntesis Fe / S.

Paper 2

The crystal structure of human GLRX5: iron-sulfur cluster co-

ordination, tetrameric assembly and monomer activity. (Julio,
2011)
Johansson C, Roos AK, Montano SJ, Sengupta R, Filippakopoulos P, Guo K, von Delft F,
Holmgren A, Oppermann U, Kavanagh KL.

GLRX5 Humano (glutarredoxina 5) es una oxidorreductasa-tiol disulfuro conservadas evolutivamente que tiene un
papel directo en el mantenimiento de la homeostasis normal y citoslica de hierro mitocondrial, y su expresin afecta
a la biosntesis de hemo y la eritropoyesis. Hemos cristalizado el GLRX5 humano unido a dos [2Fe-2S] clusters y cuatro
molculas de GSH. La estructura cristalina revel una organizacin tetramrica con los [2Fe-2S] racimos enterrados en
el interior y blindados del disolvente por el bucle-1 2 conservada, Phe y las molculas de GSH. Cada cluster [2Fe-
2S] se liga por la cistena ActiveSite N-terminal (Cys tioles) presentadas por dos protmeros y dos tioles de cistena a
partir de dos GSH. Las dos subunidades coordinar el grupo estn en una conformacin ms extendida en comparacin
con destino a hierro-azufre GLRX2 humana, y las interacciones entre subunidades son ms amplios e involucran
residuos conservados entre GLRXs monotilicas. Cromatografa de filtracin en gel y el apoyo ultracentrifugacin
analtica una organizacin tetrmera de holo-GLRX5, mientras que la apoprotena es monomrica. MS anlisis
glutationilacin de los residuos de cistena revela en la ausencia del cluster [2Fe-2S], lo que protegerlos de la oxidacin
adicional y posiblemente facilitar la transferencia de cluster / aceptacin. Apo-GLRX5 glutatin reducido disulfuros
mixtos con una tasa de 100 veces menor que hizo GLRX2 y era activo como donante de electrones glutatin-
dependiente para la ribonucletido reductasa de mamferos.

Paper 3

Glutaredoxin 5 deficiency causes sideroblastic anemia by

specifically impairing heme biosynthesis and depleting
cytosolic iron in human erythroblasts. (mayo, 2010)
Ye H1, Jeong SY, Ghosh MC, Kovtunovych G, Silvestri L, Ortillo D, Uchida N, Tisdale
J, Camaschella C, Rouault TA.

Glutaredoxina 5 (GLRX5) deficiencia ha sido previamente identificado como una causa de la anemia en un modelo de
pez cebra y de la anemia sideroblstica en un paciente humano. Aqu mostramos que GLRX5 es esencial para el hierro-
azufre biosntesis de cluster y el mantenimiento de la homeostasis del hierro mitocondrial y citoslica normales en las
clulas humanas. GLRX5, una protena mitocondrial que es altamente expresado en clulas eritroides, puede
homodimerize y ensamblar [2Fe-2S] in vitro. En las clulas-GLRX5 deficiente, [Fe-S] biosntesis grupo se deteriora, el
elemento vinculante (IRE vinculante) la actividad de hierro de respuesta de la protena reguladora del hierro 1 (IRP1)
fue activado, y el aumento de los niveles de IRP2, indicativo de hierro citoslico relativa agotamiento, se observaron
junto con sobrecarga de hierro mitocondrial. Rescate de los fibroblastos de pacientes con el gen WT GLRX5 por
transfeccin o transduccin viral revirti un fenotipo lento crecimiento, revoc la sobrecarga de hierro mitocondrial, y
el aumento de la actividad aconitasa. Disminucin del delta aminolevulinato, 2 niveles sintasa (ALAS2) atribuible a la
represin de traduccin IRP mediada se observaron en las clulas eritroides en la que la expresin GLRX5 haba
downregulated utilizando siRNA junto con marcada reduccin en los niveles de ferroquelatasa y el aumento de la
expresin de ferroportina. Eritroblastos expresan tanto ALAS2-IRP represible y no IRP-represible ferroportina 1b. La
combinacin nica de objetivos IRP probablemente representa el fenotipo especfico de tejido de la deficiencia de
GLRX5 humano.