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RESUMEN
INTRODUCCION
"n esta #r$ctica se logr identi%icar cualitativamente los di%erentes ti#os de macromolculas,
#resentes en las clulas eucariotas, tambin se conocieron algunos mtodos de identi%icacin
(coloracin de com#uestos es#ec%icos)/ *as macromolculas tienen masas moleculares elevadas
(gran gru#o de $tomos), las cuales %orman #olmeros/ Pueden ser tanto org$nicas como
inorg$nica, un eem#lo de estos en %orma sinttica son los #l$sticos/ "s necesario la inclusin de
%ueras de van der 1aals, #uentes de idrogeno, interacciones idro%bicas & enlaces covalentes/
*as macromolculas m$s im#ortantes & comunes en los sistemas vivos son3 #olisac$ridos
com#uestos #or subunidades de acar, #rotenas %ormadas #or cadenas lineales de amino$cidos,
$cidos nucleicos %ormados #or bases nucleotidicas & l#idos %ormados #or glicerol $cidos grasos
o colesterol/
"l organismo utiliado #ara llevar a cabo el #roceso es la levadura, ongos microsc#icos
unicelulares con organiacin eucariota, 'ue #resentan caractersticas es#ec%icas 'ue %acilitan
ser obeto de estudio como es su %$cil & r$#ida re#roduccin, %$cil de modi%icar genticamente,
Una de las #ruebas 'ue se utili #ara obtener resultados cualitativos es la reaccin de biuret,
#rueba 'ue detecta la #resencia de enlaces #e#tdicos/ "l sul%ato de cobre es el reactivo utiliado,
este reacciona con el enlace #e#tdico & cambia de color cuando entra en contacto/ "l color
verde, es el color #ositivo #ara la #rueba/
METODOLOGA
*a #rimera #arte de la #r$ctica inicio con la trituracin de la levadura de #anadera con $cido
tricloroactico, #osteriormente se de re#osar durante algunos minutos & se agregaron
e5actamente 20g de la sus#ensin de #rotenas a la centri%uga/ *uego se obtuvieron sedimentos
con #rotenas & $cidos nucleicos 'ue %ueron agregados en un ba6o ielo, mientras el
sobrenadante %ue decantado & luego #reci#itado con alcool etlico, nuevamente se agregaron
20g de esta sus#ensin & se #as a la centri%uga, #or ltimo se reali la #rueba del *ugol 'ue
consisti en com#arar la coloracin entre el sedimento de glucgeno obtenido de la
centri%ugacin & una solucin de almidn/
*a siguiente #arte consisti en la se#aracin de las #rotenas & los $cidos nucleicos, & esto se
reali mediante la adicin de una solucin de -aCl & un ba6o de agua irviendo, luego se
#asaron 20g de esta sustancia a la centri%uga, el sobrenadante con $cidos nucleicos %ue decantado
a otro tubo & el #reci#itado de #rotenas %ue deado en un ba6o de ielo/
*a #reci#itacin del $cido nucleico se llev a cabo mediante alcool etlico & la utiliacin de la
centri%uga, #osteriormente se reali la #rueba con el orcinol, en la cual se agregaban 7 m* de
esta sustancia, 2 m* de amortiguador salino #8 9 a tres tubos de ensa&o con +-, +.- & los
$cidos nucleicos obtenidos de la levadura de #anadera, & %inalmente se realiaba un ba6o de
agua irviendo asta el cambio en la coloracin de estas sustancias/
*a #arte %inal del laboratorio consisti en la #rueba de Biuret, donde se tom el sedimento de
#rotenas anteriormente obtenido & se le agregaron 2 m* de solucin -aCl, %inalmente se agreg
m* de sul%ato c#rico & 2m* de idr5ido de sodio, al realiar esto, se observ un cambio en la
coloracin de la muestra #ara las #rotenas/
RESULTADOS Y DISCUSIN
Para la #rueba realiada sobre las #rotenas, denominada #rueba de Biuret, se io uso de
#rotenas #rovenientes de clulas maceradas de levadura de #anadera ( Saccharomyces spp), &
Cu:;4 en solucin salina de -a;8, las #rotenas se obtuvieron #or el tratamiento con $cido
tricloroactico, centri%ugado de las clulas maceradas, & %inalmente una resus#ensin en una
solucin de -aCl #ara centri%ugarse nuevamente< des#us de esto %ue a6adido el Cu:; 4 lo 'ue
dio como resultado una solucin de color violeta, *o 'ue indica el #ositivo de esta #rueba <
tambin se observaron algunos grumos blancucos como #reci#itado, esto no ocurri #ara el tubo
de ensa&o 'ue contiene solucin salina sola , a la 'ue tambin se le a6adi Cu:; 4/
=eniendo en cuenta lo anterior, se #uede a%irmar 'ue la reaccin ocurre debido a las #rotenas de
la solucin, & no a las sales #resentes en ella, en este caso las sales nicamente desestabilian las
%ueras elctricas dbiles de las #rotenas #ara 'ue ad'uieran una %orma no globular & menos
soluble en agua< de a'u se tiene tambin 'ue la solucin cambia de color debido a la %ormacin
de un com#leo coordinado entre los electrones de los -itrgenos del enlace #e#tdico de las
#rotenas & el ion Cu>2 liberado #or la disociacin del sul%ato c#rico/
"sta #rueba %unciona nicamente #ara molculas 'ue contengan 2 o m$s enlaces #e#tdicos &a
'ue el Cu>2, re'uiere de 4 interacciones coordinadas de -itrgenos de este ti#o #ara estabiliarse/
CONCLUSIONES
Para la e5traccin de las di%erentes macromolculas #resentes en la levadura es necesario
modi%icar el medio de reaccin como la tem#eratura, rom#imiento mec$nico de molculas,
reaccin con otros reactivos, etc/
REFERENCIAS
[1]Guarnizo, A y Martnez, P. 2009. Experimentos de qumica orgnica con enfoque
en ciencias de la vida. Ediciones Elizcom. Armenia.