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This assay was carried out to extract bixine, a colorant attached to achiote
seeds, widely used in food industry, by a method which may offer besides good
yields, a toxin free product. The process is based on the use of cellulolytic
microorganisms able to degrade the seeds cellular wall, where the pigment is
attached, in order to facilitate the pigments liberation in a watery medium. 81% of
the pigment was recovered, this percentage is higher than the one offered by the
aqueous treatment and lower than the one offered by the acid-basic procedure, not
well accepted by the European community. The final paste obtained showed peaks
near to 1600 cm-1 representative of the carbonyl groups characteristic of the bixine
structure.
Key words: Bixine, achiote, cellulolytic microorganisms
Introduccin
El color de los alimentos es un atributo que tiene mucho peso dentro del
juicio del consumidor, este puede llegar a ser determinante para que un comestible
sea aceptado o rechazado. (Badui, 1993). La industria alimentaria utiliza una serie
de sustancias , mejor conocidas como aditivos; que tienen como funcin primordial
impartir alguna coloracin en particular o simplemente resaltar la que por la
naturaleza tienen las materias primas o, en su caso, de los procesos tecnolgicos
en la coloracin del producto final.
Los aditivos que son utilizados como sustancias colorantes pueden ser
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1 Universidad Autnoma Agraria Antonio Narro, 2 Universidad Autnoma de Coahuila
obtenidos
por sntesis qumica en la industria (colorantes sintticos) o provenir de fuentes
naturales como los vegetales (colorantes o pigmentos naturales). En los ltimos
tiempos los colorantes sintticos han sido cuestionados debido a sus efectos
toxicolgicos, inclusive algunos han sido eliminados de algunas legislaciones. Lo
anterior aunado a la tendencia que tienen los consumidores, sobre todo en los
pases desarrollados, a consumir alimentos con un mnimo o nulo contenido de
sustancias sintticas; ello ha provocado que el uso de colorantes naturales vaya
en aumento y sustituyendo a los sintticos (Salas, 2003).
Para abastecer la creciente demanda de colorantes naturales sin problemas
de legislacin, se procede a la extraccin de los pigmentos presentes en los
tejidos vegetales o animales por medio de diferentes mtodos, cada uno presenta
sus limitantes y ventajas.
El colorante obtenido de las semillas de achiote (Bixa orellana), esta
compuesto en su mayora por el carotenoide bixina, que se utiliza en la industria
lctica, crnica, condimentara, cosmtica, farmacutica, etc.; es un colorante
natural exento de certificacin. La extraccin ms rudimentaria se basa en un
lavado con agua en ebullicin y a escala industrial se ha implementado un proceso
de extraccin alcalino que es de fcil aplicacin, pero que tiene el inconveniente
de que el producto final contiene al mximo 30 a 40% de pigmentos (Vzquez,
2001).
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Las posibilidades de incrementar el rendimiento y la pureza del colorante
obtenido del achiote siguen siendo tema de estudio, se debe buscar un mtodo de
extraccin de fcil aplicacin, que eleve el grado de rendimiento, dando como
resultado un extracto exento o con un mnimo de impurezas qumicas, que
disminuya los riesgos que implica al consumidor el uso de solventes o los
tratamientos cido alcalinos.
Metodologa experimental
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esterilizacin se recuper el colorante mediante tratamientos en medio acuoso por
calentamiento, prensado y filtrado, hasta obtener la mayor cantidad de colorante
posible.
El material obtenido en las operaciones antes citadas, fue sometido a
un proceso final de evaporacin en horno a una temperatura entre 60-65C hasta
la eliminacin completa de la humedad residual. La determinacin del rendimiento
se realiz por anlisis gravimtrico.
Los datos arrojados por el anlisis gravimtrico fueron sometidos a un
anlisis de varianza factorial con p>0.05, esto, para determinar las condiciones
que ofrecen una mayor liberacin de colorante.
A fin de determinar la pureza del extracto recuperado, se procedi a aplicar
un anlisis por espectroscopia infrarroja (IR) a los extractos obtenidos, mediante la
preparacin de la pastilla de KBr con la muestra del colorante en polvo y se
analiza en un espectrofotmetro Perkin Elmer.
Resultados y discusin
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El anlisis de medias permite concluir que la cepa con mayor produccin de
celulasas es la cepa 7, ya que en el anlisis estadstico fue la mejor, existiendo
diferencia significativa con el resto. Por otro lado, la cepa 5 y la cepa 2 resultaron
estadsticamente iguales, presentando menor actividad que la cepa 7, pero mayor
que el resto de las cepas.
Las cepas 7 y 5 fueron identificadas como genero Aspergillus ssp. y la 2
como una mezcla entre Aspergillus y Penicilium por lo cual solo las dos primeras
fueron probadas en el proceso de biocatlisis.
Finalmente fue posible establecer que las mejores condiciones para
degradar la pared celular de la semilla del achiote fue la interaccin presentada
entre la cepa 7 a pH 7 y temperatura de 35C, ya que as se manifest en el
monitoreo de azcares el cual mostraba constante formacin y consumo de los
mismos a diferencia de las dems interacciones.
En la figura 1 se pueden observar los pesos de pasta de achiote obtenidos
despus de terminado el tiempo en cada tratamiento. Se observa que la cepa 7
ofrece los mayores rendimientos bajo todas las condiciones de trabajo.
80 m 'b' esporas
70
2927.12
1266.98 772.05
%T
60
3271.00
1373.24
50 1598.96
40 74
30 1048.10
25.0
4000.0 3000 2000 1500 1000 600.0
cm-1
representativo de los grupos carbonilos, as como un pico en el intervalo de los
1700 a 1880 cm-1 aproximadamente, representativo de los dobles enlaces
presentes en las estructuras orgnicas, caractersticas de la bixina.
Figura 2 Espectro de Infrarrojo para pasta obtenida.
Conclusiones
Literatura citada
AOAC. 1980. Oficial Methods of Anlisis of the Association of Official Alytical Chemists. Thirteenth
edition. 353 p.
Badui, D. S. 1993. Qumica de los alimentos. Addison Wesley Longman de Mxico, S. A. DE C. V.
Mxico D. F., Mxico.
Dubois, M., Guilles, K. A., Hamilton, J. K., Rebers, P. A. and Smith, F. 1956. Colorimetric meted for
determination of sugars and related substances. Anal. Chem. 28:530.
Ilin A. 2002. Manual de Prcticas de crdito 1 Introduccin a la Biotecnologa U. A. de C. 38 p.
Lynch, M. J. R., S. S. Mellor, D. L. Spare, D. P. Inwood, H. M. J. 1987. Mtodos de Laboratorio. 2
ed. Vol 2. Ed. Nueva editorial interamericana. Mxico, D. F. pp. 1446-1447.
Salas, G. L. 2003. Educacin Alimentaria, manual indispensable en educacin para la salud. Ed.
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determinacin de lignina, celulosa y silicio por el mtodo de permanganato. J. Anal. Chem.
51: 780 p
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Vzquez, H. C. 2001. Estudio preliminar de la degradacin de bixina en polvo en los diferentes
tipos de empaques y temperaturas establecidas. Tesis ING. Instituto Tecnolgico de Villahermosa.
Villahermosa, Tabasco, Mxico.
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