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Vol.

1(1),2015

CARACTERIZACION FISICOQUIMICA DEL ACEITE ESENCIAL


DE Mentha spicata (hierbabuena)
Alfaro L.1, Crdenas J1, De la Cruz R1, Flores M1, Sandoval N1, Vera J1, Yupanqui Gil N.1*

1
Facultad de Ingeniera Qumica, Universidad Nacional de Trujillo, Trujillo, Per
* nyupanqui@unitru.edu.pe

RESUMEN

Los aceites esenciales tienen una importante demanda en la industria de


alimentos, farmacutica y de cosmticos. Este trabajo describe la extraccin y
caracterizacin del AE de Mentha spicata (hierbabuena) obtenido, mediante
arrastre con vapor, a partir de desechos agroindustriales. Se evalu su
rendimiento, caractersticas organolpticas, densidad, tensin superficial, ndice de
refraccin, poder rotatorio, poder calorfico, residuo de evaporacin, y viscosidad
del AE.

PALABRAS CLAVE: Aceites esenciales, Mentha spicata, hierbabuena

ABSTRAC

Essential oils have an important request at the foods industry, druggist and of
cosmetics. This paper describes the extraction and characterization of Mentha
spicata (hierbabuena) EO obtained through steam distillation, of agroindustrial
waste. His surface tension, density, rotatory power, refractive index and calorific
power were evaluated, on the performance and the OE quality.

KEYWORDS: Essential oils, Mentha spicata, hierbabuena

1. INTRODUCCION

El gnero Citrus parece que proviene de la zona este del Himalaya, Pakistn y
Birmania. En Europa Teofrasto describe una especie de Citrus introducida en el
S.III por los bizantinos; a continuacin aparecen el naranjo amargo, el limonero
y el naranjo dulce (Drouet, 1982). Cristbal Coln tras su segundo viaje lo
introduce en Amrica en 1493, e ingleses y holandeses en frica del Sur. El
proceso de extraccin se resea en el 1700, en dos escritos del abad
Domenico Sestini publicados en Florencia en 1780 (Di Giacomo y Mincione
1994).
Dentro de la tribu botnica de las Aurantoideas, en la familia de las Rutceas,
se encuentra el gnero Citrus, al que pertenece el limonero, que tras el acuerdo
tomado en 1964 en Edimburgo en el X Congreso Internacional de Botnica con
vistas a unificar la nomenclatura recibe el nombre de: Citrus limon (Linneo) N.L.
Burman (Drouet, 1982).

En general, el fruto es la principal fuente de obtencin del aceite esencial de los


ctricos, en algunos casos se elaboran esencias procedentes de otras partes
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vegetales especialmente de hojas, flores y tallos jvenes. El mtodo de


extraccin ms generalizado es la destilacin por arrastre con vapor de agua,
junto con la extraccin por disolventes orgnicos. En actuales investigaciones
se aplica nuevos mtodos de extraccin como el empleo de gases en
condiciones supercrticas.

Para la caracterizacin del aceite esencial de limn se llevan a cabo estudios


de la composicin fisicoqumica, as como de su perfil cromatogrfico
representativo de la fraccin voltil responsable de la calidad organolptica y
de su valor comercial.

Los objetivos establecidos para el desarrollo de este trabajo son:


1.- Estudio de las caractersticas organolpticas de muestras de aceites
esenciales de limn.
2.- Estudio de las caractersticas fsico-qumicas del aceite esencial de limn.
Para ello se consideran los siguientes parmetros: Tensin Superficial, ndice
de refraccin, rotacin ptica, peso especfico, poder calorfico, ndice de
carbonilo, solubilidad en etanol y residuo seco.
3.- Anlisis mediante espectrofotometra Ultravioleta - Visible (UV-VIS), para la
obtencin del espectro caracterstico.
4.- Anlisis por cromatografa de gases y espectrometra de masas (GC-MS),
para la identificacin del mayor nmero posible de componentes de la fraccin
voltil del aceite esencial.
5. Anlisis por cromatografa de lquidos y espectrometra de masas (LC-MS)
para la identificacin del mayor nmero posible de componentes de la fraccin
acuosa de la extraccin del AE por la tcnica de arrastre con vapor.
6.-Analisis por Resonancia Magntica Nuclear, para completar la elucidacin
estructural de los metabolitos secundarios.

2. MATERIAL Y METODOS

2.1 Materia prima


La estructura del fruto ctrico (Limon) se constituye de tres partes bien
diferenciadas. El epicarpio o flavedo que contiene las glndulas esenciales, el
mesocarpio o albedo y el endocarpio constitudo por varios segmentos o gajos
que contienen las vesculas repletas de zumo y donde estn tambin las
semillas El tamao de los frutos es de mediano dimetro (54mm) y una altura
media de 69mm; la corteza es muy adherente, delgada -espesor medio de
3.9mm- y representa el 30% del peso del fruto (Coll, 1992).

2.2 Obtencin del aceite esencial.

La extraccin del aceite esencial de las partes vegetales se realiz usando el


mtodo de destilacin por arrastre con vapor de agua, la muestra vegetal
fresca y cortada en trozos pequeos, se coloc en un tanque cerrado con malla
interior y fue sometida a una corriente de vapor de agua sobrecalentado, la
esencia as arrastrada es posteriormente condensada, recolectada y separada
de la fraccin acuosa.
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Tiempo de extraccin = ..

Rendimiento = (peso de la planta en gramos / peso del aceite extrado en


gramos) x 100

El Rendimiento se determina como la razn del peso del aceite respecto el


peso del flavelo medido al inicio del proceso.

Clculo del rendimiento de aceite esencial

Wf - W o
% Rendimiento = (------------------) X 100
Wm

Donde:
Wf = peso final del aceite esencial en el vial (g)
Wo = peso del vial vaco (g)
Wm = peso de la materia prima o flavelo (g)

2.3 Caractersticas organolpticas: color, aspecto y olor.

El aceite esencial de limn es un lquido ligeramente coloreado, que puede


variar de amarillo plido a amarillo-verdoso, algunas veces presenta incipiente
turbidez y olor caracterstico del pericarpio fresco de limn.

2.4 Peso especfico

Determinacin de la Densidad:
El principio en que se basa es en la determinacin de la masa de la unidad de
volumen, expresada en g/mL, a una temperatura dada (20 C). La densidad se
representa por "d". La temperatura se ha de controlar exactamente ya que la
densidad de estas materias vara aproximadamente 0,00068 unidades por
grado. La temperatura de la determinacin no debe diferir de la de referencia
en ms de 5 C (ISO 279, 1981).
Por densidad absoluta de un aceite esencial a 20 C, se entiende el cociente
de la masa de un cierto volumen de ste aceite esencial por su volumen, a sta
temperatura. Esta magnitud se expresa en g cm-3, y su smbolo es 20C.
Por densidad relativa de un aceite esencial a 20 C se entiende el cociente
entre las densidades absolutas del aceite esencial y del agua, ambas a 20 C.
Esta magnitud no tiene dimensiones y su smbolo es 20 20 , o bien d 20 20 .

Mtodo picnomtrico:
Se utiliza un picnmetro normal, o con el termmetro acoplado. El picnmetro
ha de estar a la temperatura ambiente. Se llena el picnmetro hasta el borde
superior del tubo capilar y se introduce el termmetro, se pesa y se anota la T
de la determinacin. As se calcula la densidad expresada en g/mL y referida a
una T de 20 C
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Densidad = [ ( P" - P) / ( P' - P) ] x D (g / mL)

P = peso en g del picnmetro vaco.


P' = peso en g del picnmetro lleno con agua a 20 C.
P" = peso en g del picnmetro lleno con aceite a 20 C.
D = densidad del agua a 20 C.

El valor de la densidad calculado anteriormente puede corregirse del efecto del


empuje del aire por la frmula:

Densidad corregida = d + 0,0012 x (1- d)

Donde d es la densidad sin corregir.

La temperatura de la determinacin y la T de referencia se relacionan en la


siguiente forma:

d' = d + (t - t') x 0,00068 si t > t'

d = d + (t' - t) x 0,00068 si t < t'

d = densidad a la temperatura de la determinacin t.


d' = densidad a la temperatura de referencia t'.

2.5 Tensin superficial

Dentro del cuerpo de un lquido alrededor de una molcula actan atracciones


casi simtricas. En la superficie, sin embargo, dicha molcula se encuentra slo
parcialmente rodeada por otras y, en consecuencia, experimenta una atraccin
hacia el cuerpo del lquido. Esta atraccin tiende a arrastrar las molculas
superficiales hacia el interior, y al hacerlo el lquido se comporta como si
estuviera rodeado por una membrana invisible. Esta conducta se llama
Tensin Superficial, y es el efecto responsable de la resistencia que un
lquido presenta a la penetracin superficial, observable en la forma casi
esfrica de las gotas de lluvia, la forma esfrica de las partculas de mercurio
situadas en una superficie liza.

Desde el punto de vista puramente termodinmico, la tensin superficial


puede considerarse como la tendencia de un lquido a disminuir su
superficie hasta un punto en que su energa de superficie potencial mnima,
condicin necesaria para que el equilibrio sea estable. Puesto que una esfera
presenta un rea mnima para un volumen dado, la tendencia de una partcula
lquida deber ser la de adquirir forma esfrica bajo la accin de la tensin
superficie, como acontece en la realidad.
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La tensin superficial es una propiedad caracterstica de cada lquido y difiere


considerablemente de unos lquidos a otros.

Para medir la Tensin Superficial ( ) por el mtodo Tensiomtrico se


sumerge una horquilla o anillo de platino en el lquido de prueba, midindose la
fuerza necesaria para separar dicha horquilla o anillo de la superficie lquida.
Esta fuerza se relaciona con la tensin superficial.

La tensin superficial fue determinada mediante la utilizacin de un


Tensimetro Cenco - DuNouy 70545.

El Tensimetro CENCO DuNouy N 70545, es un instrumento de precisin


que usa el mtodo del anillo en la medicin de la tensin superficial y de la
tensin interfacial de lquidos, sueros, aceites y suspensiones coloidales.

Medicin de la Tensin Superficial:

Para medir la tensin superficial agarre el anillo limpio con la pinza de mano.
Poner el lquido cuya tensin superficial va a ser medida en un recipiente
limpio, como un sisco evaporado, luna de reloj, o un vaso de boca ancha de por
lo menos 4,5 cm de dimetro. Poner el recipiente en el tablero de prueba. Con
el tornillo B en la posicin ms alta, levantar todo el tablero de prueba hasta
que el anillo este sumergido aproximadamente 5 mm dentro del lquido, bajar
todo el equipo hasta que el anillo este justamente por debajo de la superficie
del lquido y este aproximadamente centrado con respecto al recipiente. Bajar
el nivel del lquido usando el tornillo B hasta que el anillo este justo en la
superficie del lquido e indique aproximadamente cero.

Incrementar la tensin del alambre girando la perilla A y al mismo tiempo,


bajando el tablero de prueba mediante el tornillo B para mantener la lectura en
cero. La lectura debe ser mantenida en cero a pesar de que la superficie del
lquido est distendida. Continuar ajustando la perilla y el tornillo
simultneamente hasta que la pelcula se rompa.

La escala leda en el momento del punto de ruptura de la pelcula es la fuerza


ejercida sobre el anillo, o la Tensin Superficial Aparente p

Factor de Correccin:

El valor de la tensin superficial dado por la escala del Tensiometro da la


tensin superficial aparente y puede diferir del valor verdadero por un mximo
de 30 %.

Para obtener la Tensin Verdadera es necesario corregir la Tensin


Aparente p
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En donde el Factor de Correccin F depende de la circunferencia del anillo, el


tamao del alambre en el anillo, la fuerza total hacia abajo en el anillo, y la
densidad del lquido. Zuidema y Waters, han publicado una frmula que calcula
este factor. Algunas curvas han sido dibujadas para facilitar la determinacin
del factor de correccin F (Fig. )

Para usar estas curvas, es necesario conocer la razn la razn R / r , el valor


de p , el valor de D y el valor de d , en donde:

R = radio del anillo


r = radio del alambre
D = densidad del lquido usado en la medicin de la tensin superficial o
densidad del lquido de la parte de abajo usado en la medicin de la
tensin interfacial
d = densidad del aire saturado en la medicin de la tensin superficial o
densidad del lquido superior usado en la medicin de la tensin
interfacial.

En el caso de la tensin superficial la densidad el aire d es muy pequea en


comparacin con la densidad de los dems lquidos por lo que puede ser
ignorada. Adems, para determinar el factor de correccin F indicamos el
valor de p dividido por la diferencia de D - d en la abscisa de la curva. Luego
leemos la curva en la ordenada de la izquierda, donde indica el factor de
correccin. (Yupanqui,2013)

= pF

Tensin Verdadera = (Tensin Aparente) (Factor de Correccin)

2.6 ndice de refraccin

El ndice de refraccin de una sustancia dada es la relacin entre la velocidad


de un rayo de luz en el vaco y la velocidad de la luz a travs de la sustancia.
Por conveniencia prctica se refiere a la relacin aire sustancia. Es igualmente
la relacin del seno del ngulo de incidencia al seno del ngulo de refraccin
(ISO 280, 1976).
Este parmetro, vara con la longitud de onda del rayo de luz refractado y con
la temperatura. Salvo indicacin contraria el ndice de refraccin viene referido
a la longitud de onda correspondiente a la lnea D 589,3 nm de la luz del sodio.
El ndice de refraccin se indica con la notacin n' para t C y longitud de onda
de la lnea D del sodio. Para otra radiacin de distinta longitud de onda a t C,
la rotacin ser n'.
Con los refractmetros usuales la observacin se hace en luz difusa, provistos
de un dispositivo de acromatismo de la radiacin D de la luz de sodio. Se utiliza
un refractmetro de precisin, que permite apreciar las diezmilsimas, con
prismas calentados por circulacin de lquido termostatado 0,1C.
Puede usarse luz blanca si el refractmetro utilizado posee un dispositivo de
compensacin cromtica.
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Se llena con una gota del aceite esencial el espacio comprendido entre los dos
prismas, y se lee despus de cinco minutos, al menos, de contacto. La T de
lectura es de 20 C no debe sobrepasar en 2 C la temperatura de
referencia-.

Se utiliz el Refractmetro Jena

2.7 Rotacin ptica

Como poder rotatorio (rotacin ptica) de un aceite esencial se denomina al


ngulo expresado en milirradianes y/o grados sexagesimales de ngulo, que
gira el plano de polarizacin de una radiacin luminosa de longitud de onda
589,3 nm 0,3 nm, correspondiente a la radiacin D del sodio, al atravesar un
paso de luz de 100mm de muestra a 20C de temperatura (ISO 592, 1981,
AENOR 159, 1984).

Si la medida se efecta con un espesor distinto se debe hacer el clculo para


referirla a un espesor de 100 mm. Se utilizaron dos polarmetros uno manual
con una lmpara de luz de sodio, y un polarmetro semiautomtico ATAGO
Polax-D. La longitud de los tubos utilizados en unas muestras es de 20 mm y
en otras de 100 mm.

La medida se efecta a T = 20 C, se introduce en el tubo adecuado la muestra


de aceite esencial, procurando no dejar ninguna burbuja de aire. Se coloca en
el polarmetro, y se lee el ngulo de rotacin en la escala que lleva el aparato.
Se realizan tres medidas de cada muestra y obtenemos la media siempre que
no difieran ms de 0,08, , 1,4 mrads, que sern rechazadas-.
La expresin aplicada es la siguiente:

= ( A / l ) x 100

A = Angulo de rotacin en milirradianes en grados


l = Longitud del tubo en mm

Se debe medir con una precisin de 0,17 o 0,3 mrads

2.8 Poder calorfico

Para un combustible es la cantidad de calor desarrollada durante la


combustin de 1 gramo de una muestra del mismo , expresado en caloras
gramo ( cal / g ) o tambin en ( Kcal / Kg ).

Umuestra = (mCT)H2O + C0 T - UHNO3 - Ufusible

C = capacidad calorfica del agua


C0 = constante del calormetro
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Poder Calorfico Superior (PCS) (determinado en la bomba calorimtrica)

Umuestra
PCS = ------------------------------ , en cal/g
masa de la muestra

Poder Calorfico Inferior (PCI) (en la prctica)

PCI = PCS - 572 cal/g

2.9 Residuo de evaporacin

La determinacin del residuo de evaporacin se lleva acabo mediante el


mtodo descrito en la norma ISO 4.715 de 1978, para aceites esenciales. El
residuo de evaporacin es el porcentaje de masa que se obtiene tras la
eliminacin de la fraccin voltil por calentamiento de la muestra al bao mara
y posterior enfriamiento en un desecador. El resultado se expresa como
porcentaje de masa del residuo respecto de la masa inicial.

Primeramente con un da de anticipacin, se prepar los crisoles


sometindoles en la mufla a 550 grados centgrados, con la ayuda de pinzas se
coloc en el desecador, para evitar que absorban humedad. Posteriormente se
marc los crisoles a ser utilizados con un lpiz y se pes cada uno, con la
micro pipeta se tom 2 ml de aceite esencial y se deposit en el crisol, se pes
en la balanza electrnica, la muestra se coloc nuevamente en el desecador,
se procedi a desecar en la estufa a 110 grados centgrados durante 24 horas,
transcurrido este tiempo se pes y se determin el residuo no voltil por
diferencia de pesos. Se utiliz la siguiente formula:

Residuo no voltil (g) = [(Peso del crisol + residuo) (peso del crisol)] (g)

2.10 Viscosidad

Se utiliz el viscosmetro de Ostwald de 5 ml el mismo que se sumergi en


agua destilada gracias a una bureta de 1 litro de capacidad, esto se realiz
para que se mantenga el viscosmetro a una temperatura ambiente de 20
grados centgrados.
Luego se coloc la muestra de 5 ml en el viscosmetro, con la ayuda de una
jeringuilla se absorbi hasta el nivel superior del baln de cristal del
viscosmetro, y con un cronometro se tom el tiempo que se demor en
descender hasta el nivel inferior del baln de cristal. El clculo de la viscosidad
se realiz de la siguiente manera: las unidades de la viscosidad () vienen
dadas en centipoise o Pascal. s
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Viscosidad agua x Densidad aceite x Tiempo aceite


(centipoise) = ---------------------------------------------------------------------
Densidad agua x Tiempo agua.

= viscosidad en centipoise
Tiempo aceite = El tiempo que se tarda en descender el aceite en el
viscosmetro
Tiempo agua = El tiempo que se tarda en descender el agua en el
viscosmetro.

3. RESULTADOS Y DISCUSION

3.1 Caractersticas Botnicas


rbol de talla media o grande, ramas con espinas fuertes. Hojas de color verde
plido. Flores de color rosa - violceo. Frutos alargados o ms o menos
redondeados de corteza ligeramente rugosa. Pulpa de tono amarillo rica en
zumo de sabor cido. Presenta semillas.

3.2 Aceite esencial de limn


La compleja mezcla de componentes del aceite esencial de limn est
representada mayoritariamente por estructuras derivadas del isopreno, de
naturaleza terpnica (Guenther, 1949; Pinder, 1960), entre las que el
hidrocarburo limoneno es el ms abundante como en el resto de los aceites
esenciales de ctricos. Los derivados oxigenados de dichos terpenos no son
mayoritarios, sin embargo tienen gran importancia en el caracterstico aroma
del aceite esencial (Laencina et al., 1980; Prager y Miskiewicz, 1982; Sattar et
al., 1986).

Incluye, por tanto, mezclas de hidrocarburos terpnicos, sesquiterpnicos,


alcoholes, aldehdos, cetonas, esteres, cidos, residuos no voltiles, incluido
alcanfor (Hunter y Brogden, 1965; Keffor y Chandler, 1970; Sinclair, 1984;
Lawrence, 1989). Di Giacomo en 1973 propone para el aceite esencial de limn
la composicin cualitativa recogida en la Tabla 2.1.

3.3 Tiempo de extraccin y Rendimiento

3.4 Peso especfico


La densidad absoluta obtenido por el mtodo picnometrico del aceite esencial
de la hierbabuena fue de 20C = 0.0000 g/ml
El peso especfico nos indica la fraccin no voltil que vamos a encontrar en el
aceite esencial y que suele estar directamente relacionada con el mtodo
utilizado en la extraccin.
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3.5 Tensin Superficial


La tensin superficial del aceite esencial de la hierbabuena obtenido fue de
0.0000 dinas /cm

3.6 ndice de refraccin


El ndice de refraccin del aceite esencial de la hierbabuena obtenido fue de
20 = 0.0000
Del ndice de refraccin del aceite esencial de limn se han dado determinados
valores, desde la norma ISO 855 (1981) para limn italiano, que da valores
semejantes al que el FCC (1981) determina para la esencia destilada de limn,
o los valores que Kesterson et al. (1971) encuentran en limn procedente de
California y para destilados, y que no cumplen las especificaciones del FCC.
Estos mismos autores encuentran para aceites esencial de limn procedente
de California e Italia el mismo rango de valores lmites.
As mismo otros autores como Di Giacomo y Mincione (1994) determinan los
valores para aceite esencial de limn producido en Italia, y para destilados y
deterpenados, y Liberti et al. (1973) lo determinan en aceite esencial de limn
producido en la Regin de Murcia.
Las diferencias entre los distintos autores, salvo las del FCC, no se consideran
significativas ya que segn Sinclair (1984) es normal que existan diferencias
con el mnimo y el mximo de aproximadamente 0,0007 unidades. El ndice de
refraccin adems disminuye cuando aumenta la temperatura y es
directamente proporcional a la densidad.

3.7 Rotacin ptica


La rotacin ptica del aceite esencial de la hierbabuena obtenido fue de 20 =
0.0000
La rotacin ptica en el aceite esencial de limn se produce por la relacin de
las proporciones entre sus dos componentes mayoritarios (limoneno de
naturaleza dextrgira y -pineno de naturaleza levgira). Autores como Stanley
et al. (1961) observan que las rotaciones pticas de los aceites esenciales
procedentes del interior de USA, son ms altos que los producidos en la zona
de costa; otros (Lodge et al., 1977), encuentran diferencia de valores de
rotacin ptica en frutos de madurez similar y de similares propiedades fsico-
qumicas pero de distinta procedencia -Italia y USA-.
Otros autores (Di Giacomo y Mincione, 1994, entre ellos) realizan las
determinaciones a temperatura de 15C, para limn italiano as como para el
destilado, deterpenados y desesquiterpenados. El FCC (1981) determina que
para la esencia de limn destilada el poder rotatorio oscila entre +55 y +75.
Los valores de rotacin ptica a lo largo de una campaa varan de forma que
al inicio -noviembre/diciembre- son ms elevados que al final -mayo-
(Calvarano et al. 1988).
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3.8 Poder calorfico


El Poder Calorfico Superior (PCS) (determinado en la bomba calorimtrica) del
aceite esencial de la Hierbabuena fue de 0000 cal / g

3.9 Residuo de evaporacin


El residuo de evaporacin fue de 00 %
La determinacin del residuo de evaporacin se lleva acabo mediante el
mtodo descrito en la norma ISO 4.715 de 1978, para aceites esenciales. El
residuo de evaporacin es el porcentaje de masa que se obtiene tras la
eliminacin de la fraccin voltil por calentamiento de la muestra al bao mara
y posterior enfriamiento en un desecador. El resultado se expresa como
porcentaje de masa del residuo respecto de la masa inicial.

3.10 Viscosidad

La viscosidad fue de 20 = 00 centipoise


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4. CONCLUCIONES

4.1 El tiempo de extraccin de la Mentha spicata fue de 0 h, 00 min, 00 seg


4.2 El rendimiento fue de 1.2 %
4.3 La densidad fue de 20C = 0.0000 g/ml
4.4 La tensin superficial fue de 20 = 0.0000 dinas /cm
4.5 El ndice de refraccin fue de 20 = 0.0000
4.6 La rotacin ptica fue de 20 = 0.0000
4.7 El Poder Calorfico Superior (PCS) fue de 0000 cal / g
4.8 El residuo de evaporacin fue de 00 %
4.9 La viscosidad fue de 20 = 00 centipoise

5. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

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Cte dIvoire et au controle des medicaments aromatices au citron. Thse
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DI GIACOMO, A. y MINCIONE, B. 1994. Gli olii essenziali agrumari in Italia.
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GUENTHER, E. 1949. The essential oils. Vol I. Nostrand Co.N.Y.
PINDER,A.R. 1960. The Chemistry of the Terpenes. Chapman and Hall.
LAENCINA, J.; CALVARANO, M. y MICALI, G. 1980. El aceite esencial de
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PRAGER,M.J. y MISKIEWICZ,M.A. 1982. Gas Chromatographic- Mass
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ANEXOS