PRACTICA N 01

CRECIMIENTO MICROBIANO EN CONDICIONES AEROBIAS

I.-INTRODUCCION

La respiracin se acompaa de consumo de oxgeno y produccin de 2. La

respiracin puede definirse como el proceso mediante el cual los seres vivos
intercambian con el medio, oxgeno y 2. En los seres vivos ms evolucionado,
el intercambio de los gases se realiza ante el ambiente, los rganos
especializados que forman parte del aparato respiratorio y las clulas. En
algunos seres vivos el transporte de gases se realiza a travs de la sangre. El
oxgeno que se encuentra en el interior oxida las sustancias protoplasmticas.
En este proceso se libera la energa y se produce gas carbnico 2.
En presencia de oxgeno, el cido pirvico proveniente de la gluclisis, se oxida
totalmente en la mitocondria, este proceso se divide en dos fases. En la primera,
el cido pirvico ingresa a la mitocondria donde es fraccionado y oxidado
completamente hasta liberar 2 . Como oxidantes actan coenzimas, que a su
vez son reducidas. El hidrgeno unido a las coenzimas es transferido en la
segunda fase al oxgeno molecular, con formacin de agua.

II.-OBJETIVOS

o Determinar la cintica de crecimiento microbiano (saccharomyces

cerevicea) y los parmetros de: , de la ecuacin de Monod. En
condiciones aerobias.

III.- REVISION BIBLIOGRAFICA

3.1.- ORGANISMO AEROBIO: Se denominan aerobios o aerbicos a

los organismos que pueden vivir o desarrollarse en presencia de oxgeno
diatmico, mientras que si lo necesitan se denominan aerobios estrictos. El
adjetivo "aerbico" se aplica no slo a organismos sino tambin a los procesos
implicados ("metabolismo aerobio") y a los ambientes donde se llevan a cabo.
Un "ambiente aerobio" es aquel rico en oxgeno, a diferencia del anaerobio,
donde el oxgeno est ausente, o uno microaeroflico, donde el oxgeno se
encuentra en muy bajos niveles (CAMPOS, 2003).
IV.-MATERIALES Y METODOS

4.1.-Materiales y Equipos

o Balanza Analtica.
o Estufa.
o Pipeta.
o Vaso precipitado.
o Lavador.
o Botella.

4.2.-Reactivos e Insumos

o Uva negra.
o Levadura.
o Azcar.

4.3.-Procedimientos

PREPARACION DE LA MEZCLA AEROBIA

a) Pesar los pesos total y neto, luego empezamos a sacar el jugo de la uva
exprimindolos con nuestras manos.
b) Controlamos los Brix de las muestras de uva, y las concentramos en
diferentes concentraciones de (6, 10,14 y 18) en Brix. Las colamos y
medimos cuantos ml de jugo extrajimos y lo sumergimos en un reciente
con la parte superior abierta (aerobia).
c) Finalmente tomamos muestras diferentes de cada da de anlisis para ver
el peso hmedo y seco.

DETERMINACIN DE PESOS HUMEDO Y SECO, EN DIFERENTES

CONCENTRACIONES EN BRIX.

1. Los tubos de pruebas lavarlos, secarlos, pesarlos y rotularlos.

2. Para cada medicin tomar 15 ml de muestra representativa en un tubo
de prueba. Centrifugar a 1200RPM por 5 minutos (eliminar el agua).
3. Pesar (Peso hmedo).Llevar a la estufa a 25C por 5 horas.
4. Pesar (Peso Seco).

4.4.- Clculos
 CRECIMIENTO MICROBIANO EN CONDICIONES AEROBIAS

Peso de la Uva Negra (TOTAL):

= 1300 gr

Peso de la Uva Negra (NETO):

= 1278 gr

A. 330 gr (6 Brix).
B. 330 gr (10 Brix).
C. 318 gr (14 Brix).
D. 300 gr (18 Brix).

Peso de Levadura:

Al 1% = 10.12 gr 10

V.-RESULTADOS Y DISCUSIONES

CUADRO 01: DETERMINACION DE PESOS HUMEDO Y SECO EN UNA

CONCENTRACION DE [6] BRIX, EN UN MEDIO AEROBIO.

Peso Peso Peso Peso

Brix Brix Tiempo del tubo + hmedo tubo + Peso
Terico Experimental Da Tubo Peso Peso seco
Hmedo Seco
0 12.5568 13.1100 0.5532 12.7635 0.2067
6 6.4 3 12.5660 13.5416 0.9756 12.7079 0.2319
7 12.5466 13.5873 1.0407 12.8073 0.2607

En el cuadro 01, se muestra los pesos en seco y hmedo de muestras tomadas

de un sistema aerobio, analizadas en diferentes das, y en una concentracin [6],
en Brix. Y se estudiara su comportamiento en cuanto en pesos hmedo y seco,
en la figura 01 y 02 respectivamente.
FIGURA 01: TIEMPO VS PESO HUMEDO EN CONCENTRACION DE [6] EN
BRIX.

[6]
TIEMPO VS PESO HUMEDO
1.2
1 y = 0.0668x + 0.634
PESO HUMEDO

R = 0.7846
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
TIEMPO

Peso hmedo Linear (Peso hmedo)

En la figura 01, se observa un incremento del peso hmedo con el paso de los
das en una concentracin de [6] en Brix. Tambin observamos que nuestra
pendiente (velocidad) seria 0.0668.

FIGURA 02: TIEMPO VS PESO SECO EN CONCENTRACION DE [6] EN

BRIX.

[6]
TIEMPO VS PESO SECO
0.3
0.25 y = 0.0077x + 0.2075
R = 0.9981
PESO SECO

0.2
0.15
0.1
0.05
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
TIEMPO

Peso seco Linear (Peso seco)

En la figura 02, se observa un incremento del peso Seco con el paso de los das
en una concentracin de [6] en Brix. Tambin observamos que nuestra
pendiente (velocidad) seria 0.0077.
 CUADRO 02: DETERMINACION DE PESOS HUMEDO Y SECO EN UNA
CONCENTRACION DE [10] BRIX, EN UN MEDIO AEROBIO.

Brix Brix Tiempo Peso Peso Peso Peso Peso

Terico Experimental Da del tubo + hmedo tubo + seco
Tubo Peso Peso
Hmedo Seco
0 13.509 14.7359 1.2269 13.7441 0.2351
10 10.3 3 12.4791 13.8419 1.3628 12.9241 0.445
7 12.8495 14.2167 1.3672 13.470 0.6205

En el cuadro 02, se muestra los pesos en seco y hmedo de muestras tomadas

de un sistema aerobio, analizadas en diferentes das, y en una concentracin
[10], en Brix. Y se estudiara su comportamiento en cuanto en pesos hmedo y
seco, en la figura 03 y 04 respectivamente.

FIGURA 03: TIEMPO VS PESO HUMEDO EN CONCENTRACION DE [10] EN

BRIX.

[10]
TIEMPO VS PESO HUMEDO
1.4
y = 0.019x + 1.2556
PESO HUMEDO

1.35 R = 0.7012

1.3

1.25

1.2
0 1 2 3 4 5 6 7 8
TIEMPO

Peso hmedo Linear (Peso hmedo)

En la figura 03, se observa un incremento del peso hmedo con el paso de los
das en una concentracin de [10] en Brix. Tambin observamos que nuestra
pendiente (velocidad) seria 0.0190.
 FIGURA 04: TIEMPO VS PESO SECO EN CONCENTRACION DE [10] EN
BRIX.

[10]
TIEMPO VS PESO SECO
0.7
0.6 y = 0.0545x + 0.252
0.5 R = 0.9822
PESO SECO

0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
TIEMPO

Peso seco Linear (Peso seco)

En la figura 04, se observa un incremento del peso Seco con el paso de los das
en una concentracin de [10] en Brix. Tambin observamos que nuestra
pendiente (velocidad) seria 0.0545.

CUADRO 03: DETERMINACION DE PESOS HUMEDO Y SECO EN UNA

CONCENTRACION DE [14] BRIX, EN UN MEDIO AEROBIO.

Brix Brix Tiempo Peso Peso Peso Peso Peso

Terico Experimental Da del tubo + hmedo tubo + seco
Tubo Peso Peso
Hmedo Seco
0 11.5702 12.9035 1.3333 11.8702 0.3
14 14.2 3 118901 13.5005 1.6104 12.4718 0.5817
7 11.5713 13.0575 1.4862 12.0659 1.4946

En el cuadro 03, se muestra los pesos en seco y hmedo de muestras tomadas

de un sistema aerobio, analizadas en diferentes das, y en una concentracin
[14], en Brix. Y se estudiara su comportamiento en cuanto en pesos hmedo y
seco, en la figura 05 y 06 respectivamente.
 FIGURA 05: TIEMPO VS PESO SECO EN CONCENTRACION DE [14] EN
BRIX.

[14]
TIEMPO VS PESO HUMEDO
2
y = 0.019x + 1.4134
PESO HUMEDO

1.5 R = 0.2307

0.5

0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
TIEMPO

Peso hmedo Linear (Peso hmedo)

En la figura 05, se observa un incremento del peso hmedo con el paso de los
das en una concentracin de [14] en Brix. Tambin observamos que nuestra
pendiente (velocidad) seria 0.0190.

FIGURA 06: TIEMPO VS PESO SECO EN CONCENTRACION DE [14] EN

BRIX.

[14]
TIEMPO VS PESO SECO
1.6
1.4 y = 0.1738x + 0.2129
1.2 R = 0.955
PESO SECO

1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
TIEMPO

Peso seco Linear (Peso seco)

En la figura 06, se observa un incremento del peso Seco con el paso de los das
en una concentracin de [14] en Brix. Tambin observamos que nuestra
pendiente (velocidad) seria 0.1738.
 CUADRO 04: DETERMINACION DEL CRECIMIENTO MICROBIANO
AEROBIO EN MOSTO DE UVA NEGRA [18].

Brix Brix Tiempo Peso Peso Peso Peso Peso

Terico Experimental Da del tubo + hmedo tubo + seco
Tubo Peso Peso
Hmedo Seco
0 12.3964 13.8579 1.4615 12.5586 0.1622
18 18.3 3 13.2840 15.1285 1.8445 14.117 0.833
7 13.0440 14.8718 1.8278 13.9327 0.8887

En el cuadro 04, se muestra los pesos en seco y hmedo de muestras tomadas

de un sistema aerobio, analizadas en diferentes das, y en una concentracin
[18], en Brix. Y se estudiara su comportamiento en cuanto en pesos hmedo y
seco, en la figura 07 y 08 respectivamente.

FIGURA 07: TIEMPO VS PESO HUMEDO EN CONCENTRACION DE [18]

EN BRIX.

[18]
TIEMPO VS PESO HUMEDO
2
y = 0.0493x + 1.547
PESO HUMEDO

1.5 R = 0.6391

0.5

0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
TIEMPO

Peso hmedo Linear (Peso hmedo)

En la figura 07, se observa un incremento del peso hmedo con el paso de los
das en una concentracin de [18] en Brix. Tambin observamos que nuestra
pendiente (velocidad) seria 0.0493.
 FIGURA 08: TIEMPO VS PESO SECO EN CONCENTRACION DE [18] EN
BRIX.

[18]
TIEMPO VS PESO SECO
1.2
1 y = 0.0989x + 0.2982
R = 0.7383
PESO SECO

0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
TIEMPO

Peso seco Linear (Peso seco)

En la figura 08, se observa un incremento del peso Seco con el paso de los das
en una concentracin de [18] en Brix. Tambin observamos que nuestra
pendiente (velocidad) seria 0.0989.

CUADRO 05: EFECTO DE LA CONCENTRACION DE SUBSTRATO SOBRE

LA VELOCIDAD DE CRECIMIENTO PESO HUMEDO.

PESOS HUMEDO
CONCENTRACION VELOCIDAD
6 0.0668
10 0.019
14 0.019
18 0.049

En cuadro 05, Se observa la velocidad adquirida en Peso hmedo en las

diferentes concentraciones 6, 10, 14 y 18 todas en Brix, tambin observamos
que en la concentracin 6, tuvo un valor muy alto respecto a su velocidad. Y se
estudiara su comportamiento en cuanto en peso hmedo, en la figura 09.
 FIGURA 09: CONCENTRACION VS VELOCIDAD EN PESO HUMEDO EN
CONCETRACION DE [6], [10], [14] Y [18] EN BRIX.

PESO HUMEDO
CONCENTRACION VS VELOCIDAD
0.08

0.06
VELOCIDAD

0.04
y = -0.0013x + 0.0545
R = 0.0853
0.02

0
0 5 10 15 20
CONCENTRACION

VELOCIDAD Linear (VELOCIDAD)

En la figura 09, se observa un incremento de velocidad con las concentraciones

de [10], [14] Y [18] en Brix. Si no considerramos a la concentracin [6], la
pendiente seria (+) y si no (-). Parece que nos equivocamos en los datos de la
concentracin de [6]. Segn (SCRAGG, 1996), menciona en su libro
BIOTECNOLOGIA PARA INGENIEROS, que el peso hmedo es la
centrifugacin de muestras del cultivo seguida por el pesado directo. Aunque
este mtodo es extremadamente rpido, es importante estandarizar
correctamente el procedimiento ya que se mide el agua tanto intracelular como
extracelular, lo cual puede ocasionar errores considerables.

CUADRO 06: EFECTO DE LA CONCENTRACION DE SUBSTRATO SOBRE

LA VELOCIDAD DE CRECIMIENTO PESO SECO.

PESO SECO
CONCENTRACION VELOCIDAD
6 0.0077
10 0.0545
14 0.1738
18 0.0989
En cuadro 06, Se observa la velocidad en concentraciones diferentes 6, 10, 14 y
18 en Brix, adquirida en Peso seco. Observamos que la mxima velocidad se
presenta en una concentracin de 14 Brix y la menor velocidad en la
concentracin 6 Brix. Y se estudiara su comportamiento en cuanto en peso
seco, en la figura 10.

FIGURA 10: CONCETRACION VS VELOCIDAD EN PESO SECO EN

CONCETRACION DE [6], [10], [14] Y [18] EN BRIX.

PESO SECO
CONCENTRACION VS VELOCIDAD
0.2

0.15 y = 0.0098x - 0.0341

VELOCIDAD

R = 0.5153
0.1

0.05

0
0 5 10 15 20
CONCENTRACION

VELOCIDAD Linear (VELOCIDAD)

En la figura 10, se observa un incremento de velocidad con las concentraciones

de [10], [14] Y [18] en Brix. Segn (SCRAGG, 1996), menciona que este grafico
se denomina ciclo de crecimiento o cintica de crecimiento. Tambin menciona
que el PESO SECO, es el ms usado para medir el crecimiento microbiano, ya
que consiste en secar volmenes conocidos de cultivo celular lentamente hasta
obtener un peso constante. Cuando se trata de clulas que se sedimentan
rpidamente, como las levaduras, esto usualmente implica centrifugacin de
muestras del cultivo en tubos de centrifuga. Como los que realizamos en el
laboratorio en el anlisis del crecimiento microbiano en un sistema abierto.
 CUADRO 07: DETERMINACION DE LINEA DE WEARVER INVERSA
AEROBIO EN DIFERENTES CONCENTRACIONES 6, 10 14 Y 18; EN PESO
SECO.

LINEA DE WEARVER
PESO SECO
1/S 1/Vmax
0.166667 129.8701
0.1 18.34862
0.071429 5.75374
0.055556 10.11122

En el cuadro 07, se observa los datos PESO SECO para graficar la ecuacin de
Monod, linealizada, que muestra el efecto de la concentracin de substrato sobre
la velocidad de crecimiento. Denominada Rapidez especifica de crecimiento.

FIGURA 11: GRAFICA DOBLE RECIPROCA DE 1 1 PESO

SECO

DIAGRAMA DE MONOD PESO SECO

140
120 y = 1149.3x - 72.083
R = 0.8998
100
80
1/Vmax

60
40
20
0
0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14 0.16 0.18
-20
1/S

1/Vmax Linear (1/Vmax)

En la figura 11, observamos una grfica de 1 versus 1 , produce una linea

recta con pendiente , abscisa al origen 1 y ordenada al origen 1 .

 1 1
En donde es igual a 1149.3, es igual a 0.55555 y ser igual a
72.083.

CUADRO 08: DETERMINACION DE LINEA DE WEARVER INVERSA

AEROBIO EN DIFERENTES CONCENTRACIONES 6, 10 14 Y 18; EN PESO
HUMEDO.

LINEA DE WEAVER
PESO HUMEDO
1/S 1/Vmax
0.166667 14.97006
0.1 52.63158
0.071429 52.63158
0.055556 20.40816

En el cuadro 08, se observa los datos PESO HUMEDO para graficar la ecuacin
de Monod, linealizada, que muestra el efecto de la concentracin de substrato
sobre la velocidad de crecimiento. Denominada Rapidez especifica de
crecimiento.

FIGURA 11: GRAFICA DOBLE RECIPROCA DE 1 1 PESO

SECO

DIAGRAMA DE MONOD PESO HUMEDO

60

50

40
1/Vmax

30
y = -164.62x + 51.361
20 R = 0.1585

10

0
0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14 0.16 0.18
1/s

1/Vmax Linear (1/Vmax)

En la figura 12, observamos una grfica de 1 versus 1 , produce una linea

recta con pendiente , abscisa al origen 1 y ordenada al origen 1 .

1 es igual a 0.55555 y 1
En donde es igual a -164.62, ser igual
a 56.361. Con estos datos podemos decir que Los peso en hmedo son errores
porque no puede haber una rapidez especifica de crecimiento con el signo (-)

como lo es es igual a -164.62.

VI.-CONCLUSION

Podemos concluir que la cintica microbiana en un sistema abierto, se considera

como el aumento ordenado de todos los constituyentes qumicos de un
organismo, lo cual, para los organismos unicelulares, conduce a un aumento en
el nmero de individuos en la poblacin. En el caso de PESO SECO, se logr
satisfactoriamente medir el crecimiento microbiano en un sistema abierto, en la

ecuacin de Monod, en donde la velocidad respecto a un substrato es
1149.3, esto si nos demuestra que existe un CICLO DE CRECIMIENTO, con sus
cinco fases. Mientras que en el caso de PESO HUMEDO, no hubo un logro

satisfactoriamente ya que la velocidad respecto a un substrato es -164.62,
y esta misma no puede ser negativa. Esto se debi a que el peso hmedo aunque
sea rpido puede ocasionar errores considerables como estos.

VII.-BIBLIOGRAFIA Y WEBGRAFIA

o ALICIA CAMPOS, BIOLOGIA I, MEXICO (2003).

o ALAN SCRAGG, BIOTECNOLOGIA PARA INGENIEROS, MEXICO
(1996).