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FEDERICO VILLARREAL
Facultad de Oceanografa, Pesquera, Ciencias
Alimentarias y Acuicultura
CROMATOGRAFA
INGENIERIA DE ANALISIS
INTRUMENTAL
Por:
- Bustos Coronado, Joel
- Huiza T, Rafael
ANALISIS INTRUMENTAL
Trabajo bimestral:
Cromatografa
Elaborado por:
Huiza T, Rafael
Docente:
Ing. Hinojosa
2017
RESUMEN
ABSTRACT
Imagen N1 cromatografa
FUNDAMENTO TEORICO
Cromatografa
Las reas de aplicacin son muy diversas y abarcan prcticamente todas las
actividades en las que interviene la qumica, por ejemplo: se emplea en:
1. Cromatografa en papel
=
En la cromatografa en papel se utiliza como fase estacionaria una hoja de papel
de celulosa de elevada pureza recubierta de una capa de agua asociada a las
fibras de celulosa. La fase mvil, en la que ir disuelta la muestra, se forma por
disolventes cuya naturaleza se elige en funcin de los componentes que se
pretenden separar.
Hidrocarburos < olefinas < flor < cloro < nitro < aldehdo
Aldehdo < ester < alcohol < cetonas < aminas < cidos < amidas
Precio.
Pureza.
No utilizar mezclas de eluyentes (reproducibilidad).
No utilizar compuestos muy voltiles.
Evitar que contengan trazas de metales (catalizadores).
Bajo este entendido, las molculas de mayor tamao no caben dentro de los
poros y son arrastrados alrededor de la fase estacionaria, por lo que son
excluidas y eluyen en el volumen de cama de vaco de la fase mvil. Por el
contrario, las partculas de menor tamao eluyen hasta el final porque tiene ms
espacio de columna que recorrer debido a un fenmeno de difusin haca los
poros que tienen accesibles. Las molculas de tamaos intermedios tardan
diferentes tiempos en eluir, debido a la cantidad de poros por los que puedan
pasar.
Resina, H + K+ Resina, K+ + H+
Fases estacionarias. En SFC se emplean tanto las columnas abiertas como las
columnas rellenas, aunque las primeras son las ms empleadas. Las columnas
abiertas son similares a las columnas de slice fundida con recubrimientos
internos de varios tipos de siloxanos enlazados y de enlaces cruzados. Las
columnas tienen una longitud de 10 a 20 m y un dimetro interno de 0,05 a
0.10mm. El espesor de la pelcula vara entre 0.05 1 micrmetro.
Fases mviles. La fase mvil ms utilizada en SFC es el CO2. Es un disolvente
excelente par un conjunto de molculas orgnicas no polares. Adems, es una
sustancia transparente en el ultravioleta, es colora, no txica, fcilmente
disponible y muy barata cuando se compara con otras fases mviles
cromatografas.
7. Cromatografa de afinidad
Los puntos rojos representan la protena de inters, los negros, el ligando y las
bolas beige unidas a los puntos negros, representan el ligando acoplado con el
polmero.
Anlisis Cualitativo
1. Calibracin absoluta
2. Mtodo del estndar interno.
3. Normalizacin de rea (con y sin factor de respuesta) Cada mtodo tiene sus
ventajas y desventajas.
Campos de aplicacin: