DESARROLLO DE PLANTAS DE MOSTAZA (Brassica juncea)

CULTIVADAS EN SUELOS y JALES MINEROS

Cruz Ruiz, E(1,2); Aguirre Gmez, A*(1); Nadal Ruiz, P (1).
(1) Laboratorio de Anlisis e investigacin de Qumica Agrcola Ambiental, FESC, Campo. 4,
Universidad Nacional Autnoma de Mxico. aag@unam.mx Apdo.Postal 54700 (52)-(55)-56231999-
(ext-39435).
(2) Posgrado en Ciencias de la Tierra Instituto de Geologa, Universidad Nacional Autnoma de
Mxico Ciudad Universitaria, 04510, Mxico, D.F.

RESUMEN
Los depsitos de jales de las zonas mineras presentan generalmente elevadas concentraciones de
metales pesados contaminantes, con graves efectos potenciales al ecosistema y al desarrollo de la
vegetacin en general. La existencia de plantas capaces, no slo de desarrollarse en estas
condiciones adversas de contaminacin, sino de absorber e hiperacumular dichos metales en sus
rganos de crecimiento (fitoextraccin), ofrece una tcnica eficaz para proteger de la erosin estos
ambientes mediante la creacin de una cubierta vegetal, adems de colaborar en el fitobeneficio
mineral y en el mejoramiento de la fertilidad del suelo.

Este trabajo tiene como objetivo evaluar el desarrollo de B. juncea como planta tolerante e
hiperacumuladora cultivada directamente sobre jales mineros cidos (Zimapn, Hidalgo, Mxico).
Para ello, se evaluaron distintos parmetros agronmicos de crecimiento (biomasa seca, altura de
planta, desarrollo de hojas, clorofila), as como la cintica de absorcin, medida en extractos celulares,
de los cationes nutrimentales (K+, Ca2+, Mg2+) de estas plantas cultivadas en diversas mezclas de jal y
suelo (p/p), ambos de las inmediaciones de la propia mina.

Los resultados obtenidos muestran como elevadas concentraciones de jal cido en las mezclas de
crecimiento limitan el desarrollo de las plantas de mostaza, provocando incluso su muerte. Sin
embargo la disminucin del nivel de contaminacin mediante la mezcla con suelo prstino, as como la
aplicacin de algunas prcticas agronmicas como el encalado, el abonado orgnico y los fertilizantes
de fosfatos eleva considerablemente las posibilidades de desarrollo de la planta.

Los resultados de este trabajo ponen de manifiesto la necesidad de implementar prcticas agrcolas
adecuadas que reduzcan las condiciones adversas del medio lo cual permitira el desarrollo de una
cubierta vegetal sobre los depsitos de jales mineros.

PALABRAS CLAVE: B. juncea; jales mineros; fitorremediacin

INTRODUCCIN
La actividad minera presenta efectos nocivos sobre el medio ambiente debido principalmente a la
deposicin no controlada de los residuos resultantes de la extraccin mineral (jales) (Dudka y
Adriano 1997). Dichos residuos suelen presentar caractersticas desfavorables para el
establecimiento de comunidades vegetales, como bajo pH, altas concentraciones de metales txicos,
alto contenido de sales (Norland y Veith 1995, Wong et al. 1998), baja retencin de agua (Henriques y
Fernandes 1991, Norland y Veith 1995), as como importantes deficiencias nutrimentales (Wong
2003). Adems, en ocasiones, dichas deposiciones se realizan en zonas de pendientes inestables y
propensas a la erosin (Henriques y Fernandes 1991).

Entre las tcnicas que se pueden emplear en la recuperacin in situ de estos desechos mineros, la
revegetacin es considerada una de las ms adecuadas a largo plazo (Tordoff et al. 2000). El
desarrollo de una cubierta vegetal proporciona una proteccin eficaz contra la erosin elica y la
hdrica, as como contra la dispersin de contaminantes, mientras que las races de la planta ayudan
a prevenir los procesos de lixiviacin (Mendez y Maier 2008), principalmente. Esto es posible gracias
a plantas que se han adaptado para crecer en climas ridos, en suelos con bajo contenido de
nutrientes y elevadas concentraciones de metales txicos (Conesa et al. 2007a). Adems, esta
cubierta vegetal puede mejorar las condiciones de nutrientes en el suelo (Cobb et al. 2000), pudiendo
servir de base para el establecimiento de una cubierta vegetal autosuficiente (Norland y Veith 1995).

La planta Brassica juncea, comnmente conocida como la planta de mostaza, es frecuentemente

citada en trabajos de fitorremediacin/fitoextraccin debido a su capacidad de tolerar y acumular
elevadas concentraciones de Cr, Pb, Zn, Cu, Au, Se y de otros elementos traza potencialmente
txicos (Clemente et al. 2005). Adems se ha observado que presenta rpido crecimiento, que
requiere de poca agua (importante en zonas ridas y semiridas con explotaciones mineras), adems
de presentar una elevada tasa de produccin de biomasa. (Singh et al. 2007; Nouairi y Ammar 2009,
Sharma et al. 2010, Bauddh y Singh 2012).

El pH de los suelos y de otros ambientes de crecimiento vegetal, incluyendo el de los rellenos de jales
mineros, es un factor fundamental en las actividades de fitorremediacin, que afecta de forma
decisiva la biodisponibilidad y la absorcin de metales (txicos y nutrimentales) por las plantas (Li et
al. 2003). Los jales con pH neutro parecen presentar menos limitaciones para el crecimiento de las
plantas, que aquellos que presentan elevada acidez (Conesa et al. 2007b).

MATERIALES Y MTODOS
Reactivos, materiales e instrumental

Flexmetro: Empleado para la determinacin de parmetros agronmicos como altura de planta y

ancho y alto de hoja, SPAD (Soil and Plant Analysis Development) 502 (Konica Minolta): medidor
porttil de clorofila, Medidor de pH, Conductividad Elctrica (CE) y temperatura Oakton 510
multiescala, Balanza analtica August Santer KG7470, precisin hasta 0.001 g, Refrigerador (4C) y
congelador (-3C) comercial General Electric, Estufa termostatada, Cromatgrafo de iones modelo
ICS-90 (Dionex, Sunnyvale, CA, USA). Para la determinacin de cationes se emple una columna
CS-12 y como eluyente cido sulfrico (H2SO4) 10 mM, as como hidrxido de tetrabutilamonio
(TBAOH, Sigma, 40% p/p en agua) 100 mM a un flujo de 1 ml min-1, como regenerante. El volumen
inyectado al anlisis fue de 10 l.

Muestreo y caracterizacin fsica y qumica de jales y suelos

Tanto el jal como el suelo empleado en el presente estudio se muestrearon en las minas El Monte y
Carrizal, explotadas por la empresa Cia. Minera Carrizal Mining, localizadas en el municipio de
Zimapn, Estado de Hidalgo (Mxico) (20 4358.1N, 99 2351.9W). Las muestras de suelo
prstino, se colectaron de los horizontes superficiales en las orillas del camino, aproximadamente a 1
km de distancia de la entrada a las instalaciones de la mina.

Una vez en el laboratorio, tanto las muestras de jal como de suelo, fueron secadas al aire y
pulverizadas con mazo de madera, hasta alcanzar el tamao de partcula de 2 mm que se empleara
posteriormente en el ensayo biolgico.

Ubicacin del experimento

El experimento se llev a cabo en un invernadero tipo tnel localizado en la Facultad de Estudios

Superiores Cuautitln Campo 4 de la Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Cuautitln-Izcalli,
Edo de Mxico, Mxico (19 4142.03N, 99 1133.46O).

Material vegetal: germinacin y trasplante

La especie vegetal seleccionada para el ensayo fue Brassica juncea L, comnmente conocida como
mostaza. La germinacin de las semillas se realiz en semillero (2 semillas por cavidad), los cuales
se rellenaron con peat moss y se regaron diariamente con cantidad suficiente para mantener el
sustrato constantemente hmedo. A los 40 das se realiz el trasplante a bolsas de polietileno, color
negro, con capacidad para 1.5 kg, aproximadamente, y se dejaron equilibrar por 30 das antes de
tomar lecturas y realizar muestreos de planta. Cada una de estas bolsas se rellenaron con distintas
mezclas jal:suelo en % (p/p), respectivamente: 100:0 (100% J); 75:25 (75% J); 50:50 (50% J); 25:75
(25% J); 0:100 (100% S).

Monitoreo de parmetros agronmicos

Durante el desarrollo del experimento se monitorearon semanalmente diversos parmetros

agronmicos: nmero de hojas, altura de la planta, ndice del rea foliar (largo y ancho mximo de
hoja por separado) e ndice SPAD (medida relativa al contenido de clorofila en hoja).

Obtencin y anlisis de extractos celulares

La obtencin de los extractos celulares se realiz siguiendo el procedimiento descrito por Silva-
Rabiela (2010). Se introdujo la planta completa sin raz en una jeringa de 5 ml. La jeringa fue
colocada en un congelador hasta el tiempo de anlisis. Para el anlisis qumico de cationes se
descongelaron las muestras, se presion el mbolo de la jeringa y el extracto celular obtenido se
diluy con agua desionizada hasta volmenes conocidos, para posteriormente ser inyectadas en el
cromatgrafo de iones, previamente filtradas por una malla de 0.45 m, cada medida se realiz por
duplicado o triplicado, segn el caso y segn se requiriera

RESULTADOS Y DISCUSIN

El suelo empleado en el ensayo fue usado en trabajos anteriores (Guzmn-Rangel 2012) y

caracterizado entonces siguiendo la metodologa indicada por la Norma Oficial Mexicana (NOM-021-
SEMARNAT-2000 y NOM-141-SEMARNAT-2003). Se trata de un suelo arcilloso, neutro (pH 7.07), no
salino (CE 340 S cm-1) y con un contendido medio de materia orgnica (MO 1.52%).

El material desechado (jal) se encuentra dispuesto en las inmediaciones de la mina en 9 presas, de

diferente antigedad de depsito. En el presente trabajo se emple un jal antiguo con un pH 2.31. Se
evaluaron distintas mezclas jal:suelo para emular distintos grados de contaminacin natural cuyos
valores de pH final se muestran en la tabla 1.

Tabla I. Valores de pH en las distintas mezclas jal:suelo empleadas en el ensayo

pH
Proporcin 100% 75% 50% 25%
SUELO 7.07
JAL 3 2.31 2.76 2.8 3.4

Monitoreo de parmetros agronmicos.

Las condiciones de elevada acidez de las mezclas con alto contenido de jal, no permiti el desarrollo
de las plantas de mostaza. Tan solo aquellas cultivadas sobre mezclas con un contenido mximo de
jal del 25% pudieron desarrollarse hasta el final del ensayo.

La Figura 2a) muestra el contenido de clorofila mediante la determinacin del ndice SPAD. Se
observa como el efecto de la contaminacin del suelo (25% jal) reduce significativamente la
produccin de pigmentos fotosintticos y por tanto la produccin de coloracin verde de las hojas.
Trabajos anteriores con B. juncea indican que la disminucin de la clorofila de plantas cultivadas
sobre suelos contaminados (Ebbs y Uchil 2008) se debe a la deficiencia de ciertos micronutrientes
(e.g., Fe, Mg) directamente relacionados con la sntesis de clorofila (Pahlsson 1989, van Assche y
Clijsters 1990).
 La Figura 2b) muestra la variacin de la altura (cm) de la planta a lo largo del ensayo, se nota
claramente que las plantas crecidas sobre suelo puro (100% S) presentaron un crecimiento continuo
a lo largo del tiempo mientras que en la 25% jal las plantas de B. juncea presentan una disminucin.

La misma tendencia puede observarse en la cintica de los indicadores de rea foliar, tanto para el
ancho de la hoja (Fig. 2c) como para el largo de la misma (Fig. 2d). Se observa como el ancho y largo
de la hoja se reduce notablemente con la proporcin de 25% jal.
100% S 25% J3
a) 10 100% S 25% J3 d)
40 b) 4 100% S 25% J3 c) 100% S 25% J3

9 R = 0.9976 8

35
Indice SPAD

7 R = 0.9931
R = 0.7842

Altura planta (cm)

3
8
6

Ancho hoja (cm)

30
R = 0.938

Largo hoja (cm)

5
7
25 2
4
R = 0.9343 R = 0.9799
6 R = 0.9633 3
20

1 2
5
15
1
R = 0.9884
10
4 0 0
28 35 42 49 56 63 69 77 84 28 35 42 49 56 63 69 77 84 28 35 42 49 56 63 69 77 84
28 35 42 49 56 63 69 77 84
Das tras trasplante Das tras trasplante Das tras trasplante Das tras trasplante

Figura 2. Monitoreo de parmetros agronmicos, efecto de la contaminacin sobre 100% suelo y 25% Jal : a) el ndice de
SPAD, b) Efecto de la contaminacin sobre la altura (cm), c) Efecto de la contaminacin sobre el ancho de la hoja (cm),
d) Efecto de la contaminacin sobre el ancho de la hoja (cm)

Estos resultados muestran la necesidad de, segn aumenta el nivel de contaminacin, implementar
practicas agronmicas que permitan resolver esta toxicidad, con el fin de generar una cubierta vegetal
que estabilice e impida la erosin. Trabajos anteriores del grupo de investigacin (Nadal y Aguirre
2014) mostraron un ptimo desarrollo de B. juncea cultivadas sobre jales jvenes de pH neutro de la
misma zona. Estos resultados sugieren el encalado de suelos como una prctica adecuada para
corregir los efectos nocivos de la acidez y permitir el desarrollo vegetal. Otra alternativa es adicionar
fosfatos y/o materia orgnica. Guzmn-Rangel (2012) encontr que con dosis similares a las que se
aplican a los suelos agrcolas, es posible mejorar el desarrollo de plantas indicadoras sensibles a
metales pesados. La aplicacin de estas enmiendas resulta prometedora en plantas tolerantes
(Brassica. juncea), a la vista de los buenos resultados obtenidos con plantas sensibles (Hordeum
vulgare) (Guzmn-Rangel 2012).

Cintica de absorcin-contenido de cationes inorgnicos en extractos celulares

La figura 3 muestra los contenidos de cationes en extractos celulares para cada uno de los muestreos
de las plantas cultivadas sobre la mezcla 100% suelo y la mezcla suelo-jal (25%). Los resultados
obtenidos muestran cmo la absorcin de cationes por B. juncea est determinada por las
caractersticas de contaminacin del sustrato donde se desarrolla, observndose una reduccin
segn aumenta la magnitud de la contaminacin.

Este menor desarrollo de la planta se manifiesta, tanto en una disminucin significativa del desarrollo
de biomasa, necesario en cualquier proceso de fitorremediacin (fitoextraccin / fitoestabilizacin), as
como en una peor capacidad de tolerancia y supervivencia.

Se observa como la absorcin del catin Ca2+ por las plantas de mostaza se vio seriamente afectada
por la contaminacin de la mezcla (25% J) a lo largo de todo el ciclo de crecimiento monitoreado de la
planta (Figura 3 a). Este hecho podra deberse, o bien a la inhibicin de los transportadores de Ca2+
debido a la presencia de metales txicos como Pb2+, Cu+ y Zn2+ en el medio de desarrollo de la planta
(Wojas et al. 2007) y/o al reemplazo de iones Ca2+ con iones como el Pb2+ (White and Broadley 2003)
de los sitios de participacin de este metal alcalino-trreo nutrimental. La misma tendencia se observa
en la absorcin de Mg2+ (Figura 3 b). Esta disminucin en el contendido de Mg2+ en las plantas
cultivadas sobre las mezclas ms contaminadas se correlaciona directamente con la reduccin en el
contenido de clorofila medido a travs del ndice SPAD, al estar estrechamente relacionada con la
absorcin de dicho metal y con la actividad fotosinttica de la planta (Terry y Ulrich 1974). La
 reduccin en el contenido de clorofila, a su vez, se correlaciona directamente con una disminucin de
la divisin y elongacin celular, lo que se manifiesta en un decremento tanto de la longitud de la
planta, como del ndice foliar y de la biomasa (Figura 2) producida, como muestran los resultados de
este trabajo. El efecto de la contaminacin del suelo en la absorcin y traslocacin de K+ se muestra
en la Figura 3c, lo cual se relaciona directamente con los procesos de absorcin de agua de la planta
y de su adecuado desarrollo, muy posiblemente debido a la relacin que guarda el catin potasio (K+)
con la fotosntesis, regulando la apertura y cierre de los estomas, y por lo tanto regulando el
acoplamiento entre la transpiracin con la absorcin de CO2 (Marschner 1995).
100% S 25% J3
45 a) 16
100% S 25% J3 b) 16
100% S 25% J3 c)
40 14 14
Ca 2+ (mol)

35

Mg 2+ (mol)

Mg 2+ (mol)
12 12
30
R = 1 10 10
25
8 8
20
6 R=1 R=1
15 6
10 4 4
5 R = 1 2 R = 1 2 R = 1
0
0 0
35 45 55 65 75 85 95 35 45 55 65 75 85
Das tras trasplante 35 45 55 65 75 85
Das tras trasplante Das tras trasplante

Figura 3. Contenidos del catin (mol) en extracto celular en cada uno de los muestreos y mezclas de jal:suelo
a) Ca2+ , b) Mg2+ y c) K+

CONCLUSIN

B. juncea ha resultado ser una especie capaz de tolerar niveles leves de contaminacin causada por la
presencia de jales conteniendo niveles apreciables de Pb, Zn y Cu en el sustrato de cultivo. Los
resultados obtenidos en este trabajo muestran la necesidad de llevar a cabo prcticas agrcolas
adecuadas que favorezcan el medio de desarrollo de la planta, al grado de permitir que la especie
vegetal seleccionada pueda desarrollarse adecuadamente formando una cubierta vegetal permanente,
al tiempo que pueda ser una planta hiperacumuladora que favorezca la fitoextraccin y el fito-beneficio
minero de metales selectos, ayudando a mejorar no solo las condiciones de trabajo en estas empresas,
sino a la sustentabilidad de los sitios de estas explotaciones.

AGRADECIMIENTOS.

Programa de Apoyo a Estudios de Posgrado. Posgrado en Ciencias de la Tierra Sede Instituto de

Geologa

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