You are on page 1of 6

Pada praktikum Imunohematologi dan Bank Darah kali ini, dilakukan pemeriksaan

golongan darah ABO dan rhesus dimana pemeriksaan ini didasarkan pada reaksi antara antigen
yang terdapat pada sel darah dengan antibodi pada serum/ plasma sehingga menunjukkan reaksi
aglutinasi. Aglutinasi adalah penggumpalan sel darah merah. Hal ini terjadi ketika sel yang peka
berhubungan satu sama lain sehingga menghasilkan pembentukan agregat. Reaksi antigen-
antibodi terjadi dalam dua tahap. Tahap pertama antigen bergabung dengan antibodi, dan pada
tahap kedua perubahan lebih lanjut terjadi sebagai hasil persatuan yang mana ditunjukkan dengan
terjadinya aglutinasi. Kondisi yang optimal pada tahap pertama belum tentu sama seperti kondisi
yang optimal untuk tahap kedua. Reaksi antibodi-antigen golongan darah biasanya ditunjukkan
oleh aglutinasi di tahap kedua, karena pada tahap pertama, berbagai kondisi tertentu terkadang
dibutuhkan untuk menghasilkan aglutinasi di tahap kedua. Hal ini mungkin diperlukan untuk
menangguhkan sel dalam albumin, atau serum manusia, atau mungkin perlu pencucian sel dan
menambahkan pereaksi antiglobulin untuk menghasilkan aglutinasi(F. Stration 2011).
Eritrosit adalah struktur kompleks yang mengandung banyak antigenik dengan komponen
khas. Ini ditandai dengan terdapatnya berbagai jenis golongan darah. Akibatnya, jika eritrosit
digunakan sebagai antigen, baik pada manusia atau hewan, banyak antibodi yang berbeda dapat
diproduksi dan hal ini dapat dipisahkan satu sama lain dengan penyerapan dan berbagai cara
lainnya. Dalam proses Cell Grouping reaksi yang terjadi didasarkan pada antigen yang terdapat di
permukaan sel darah merah, dan antibodi terhadap antigen tersebut sehingga dapat ditentukan
golongan darah. Pada permukaan sel darah merah terdapat adanya glikoprotein dan glikolipid yang
berperan sebagai antigen. Antigen adalah zat kimia yang kompleks zat yang pada umumnya
merupakan protein, meski banyak antigen non-protein sudah diketahui. Terkadang proteinnya
mungkin sangat kompleks dan mungkin mengandung banyak antigen yang berbeda. Sedangkan
Antibodi, adalah protein yang terdapat dalam serum darah yang diproduksi sebagai hasil stimulus
antigenik yang bereaksi dengan antigen. Antigen dan antibodi bereaksi bersama secara khususnya
(meski tidak mutlak secara khusus, seperti yang akan terlihat nanti) untuk memberi hasil yang bisa
diamati, dan reaksi yang bisa diamati akan terjadi sangat tergantung pada keadaan antigen atau
sifat dari antigen pada sel darah merah. Dalam kasus sel darah merah antigen dan antibodi yang
sesuai dengan hasil yang dapat diamati aglutinasi atau hemolisis eritrosit (F. Stration 2011).
Dalam praktikum ini suspensi sel darah merah disiapkan dalam konsentrasi 5%, 10% dan
40%. Suspensi sel darah merah (RCS) adalah sistem indikator yang digunakan secara universal
untuk menunjukkan reaksi antigen dan antibodi secara in vitro. (Keith, 2014) Suspensi sel darah
merah adalah reagen umum yang digunakan untuk prosedur serologis. Suspensi sel darah merah
memberikan perbandingan sel ke sel yang sesuai untuk memungkinkan penilaian dan interpretasi
hasil uji (Provincial Blood Coordinating Program, 2012).
Menurut (Martin GL, 2014) Suspensi 2 persen sampai 5 persen merupakan konsentrasi
antigen optimal untuk aplikasi pemeriksaan laboratorium bank darah seperti ABO dan
crossmatching. Rasio atau perbandingan serum terhadap sel darah merah dapat mempengaruhi
sensitivitas tes aglutinasi. Suspensi sel darah merah 5% merupakan yang umum dalam banyak
prosedur serologis. Dalam praktik dilaboratorium suspensi yang dibuat tidak harus persis 5%;
kebanyakan prosedur uji menggunakan perkiraan untuk mencapai rasio sel-sel yang sesuai.
(Biswas, 2013). Proses pencucian sel darah merah dengan Saline berfungsi untuk menghilangkan
bekas plasma yang mungkin mengandung zat yang bisa mengganggu reaksi antigen-antibodi.
Dimana zat yang dimaksud termasuk antigen terlarut seperti A dan B, yang apabila zat tersebut
terdapat dalam sampel, dapat dapat menetralisir reagen; Mengganggu protein seperti jeli Wharton,
yang mungkin menyebabkannya agregasi sel darah merah secara nonspesifik; dan substansi
lainnya yang menyebabkan rouleaux seperti globulin dan fibrinogen, yang apabila terdapat dalam
sampel menyebabkan reaksi nonspesifik dan kesalahan interpretasi.(Keith, 2014)
Pada pemeriksaan golongan darah dan rhesus ini dilakukan pada dua orang probandus.
Probandus pertama atas nama I Wayan Bagus Adigunawan, laki-laki umur 20 tahun dimana hasil
cell grouping pada bioplate yang diteteskan dengan reagen anti A, anti B dan suspense eritrosit
10%, tidak menunjukkan adanya aglutinasi sedangkan pada well yang diteteskan reagen anti D
dan suspense eritrosit 40% menunjukkan adanya aglutinasi dengan derajat aglutinasi (4+). Hal ini
menunjukkan bahwa pada sel darah merah probandus tidak mengandung antigen A dan antigen B
namun mengandung antigen D. Hasil serum grouping menunjukkan aglutinasi pada well yang
diteteskan dengan reagen Sel eri A 10% dan Sel eri B 10% yang kemudian diteteskan serum dapat
diamati derajat aglutinasi masing-masing well (3+) dimana hal ini menunjukkan pada serum
probandus terdapat antibodi terhadap antigen A dan antigen B. Sehingga dapat diketahui bahwa
probandus memiliki golongan darah O dengan rhesus positif (+).
Sistem Rh telah lama dikenal sebagai salah satu sistem kelompok darah yang paling
kompleks. Selain adanya atau tidak adanya antigen D, terdapat antigen Rh lainnya termasuk alelel
C atau c, dan E atau e. Lebih dari lima puluh antigen Rh yang berbeda telah diidentifikasi dengan
menyelidiki spesifisitas antibodi yang dihasilkan setelah transfusi darah atau kehamilan (Westhoff,
2007). Namun, anti-D secara klinis adalah antibodi kelompok darah yang paling penting dalam
pengobatan transfusi, karena anti-D dapat menyebabkan reaksi transfusi hemolitik akut dan akut
yang parah dan HDFN berat. Anti-D (-RH1) dari sistem golongan darah Rh secara klinis penting
karena menyebabkan reaksi transfusi hemolitik dan penyakit hemolitik pada janin dan bayi baru
lahir. Anti-D sangat imunogenik, dengan sekitar 20-30% pasien D yang menerima volume darah
rhesus D positif yang besar menghasilkan anti-D. Oleh karena itu, penting bahwa sel darah merah
rhesus D positif tidak ditransfusikan ke pasien dengan anti-D atau dengan riwayat memiliki anti-
D, sampai anak perempuan dengan rhesus D negatif dan wanita usia subur, atau pasien dengan
potensi ketergantungan transfusi. Pasien dengan banyak fenotipe varian D mampu menghasilkan
alloanti-D jika diimunisasi dengan sel darah merah rhesus D positif (Daniels, 2013). Untuk alasan
ini, status Rh secara rutin ditentukan pada donor darah, penerima transfusi, dan calon ibu (National
Institute of Biologicals, 2013).
Sejarah sistem Rh dimulai pada tahun 1941 dengan penemuannya sebagai penyebab
penyakit kuning parah dan kematian janin, yaitu eritroblastosis fetalis. Sindrom ini telah diamati
selama bertahun-tahun karena menyebabkan komplikasi pada kehamilan.
Sindrom ini, yang disebut sebagai penyakit hemolitik pada bayi baru lahir (HDN), pada prinsipnya
disebabkan oleh sensitisasi ibu terhadap Rh, khususnya antigen D. HDN karena ketidakcocokan
D lazim terjadi pada orang Kaukasia, yang memiliki insiden fenotip D-negatif tertinggi (15-17%),
namun jarang terjadi pada kelompok etnis lain. Insiden HDN secara dramatis berubah saat disadari
bahwa ketidakcocokan ABO antara ibu dan janin memiliki efek perlindungan parsial terhadap
imunisasi terhadap anti-D. Hal ini menyarankan pemikiran untuk pengembangan globulin imun
Rh. Pada tahun 1960-an, 20 tahun setelah ditemukannya ketidakcocokan Rh, HDN yang
disebabkan karena anti-D dapat dicegah secara efektif (Westhoff, 2007).
Praktik pemeriksaan rhesus yang direkomendasikan di Inggris adalah bahwa pasien,
termasuk wanita hamil, harus diuji secara duplikat (kecuali sampel diuji pada alat otomatisasi
aman) dengan aglutinasi langsung dengan monoklonal anti-D kuat (Milkins et al, 2013). Reagen
ini dipilih untuk mendeteksi semua varian anti-D dan memberikan reaksi negatif dengan sel darah
merah DVI. Akibatnya, pasien yang memiliki fenotipe DVI dan karena itu cenderung
menggunakan anti-D, dinyatakan sebagai rhesus D negatif dan diperlakukan sebagai rhesus negatif
untuk transfusi darah dan pemberian immunoglobulin anti-D selama kehamilan dan setelah
melahirkan bayi. Pasien dengan hasil uji anti-D yang sangat lemah, termasuk yang dengan fenotipe
DEL, juga akan dinyatakan sebagai rhesus D negatif (Daniels, 2013).
Menurut pedoman UK, ketika hasil yang sangat lemah diperoleh pada pemeriksaan anti-D
rutin dari sel darah merah pasien, maka pasien harus dipertimbangkan sebagai rhesus D positif
kecuali mereka adalah pasien wanita potensial melahirkan atau pasien yang cenderung
memerlukan dukungan transfusi jangka panjang, dalam hal ini mereka harus diperlakukan sebagai
rhesus D negatif sampai penyebab hasil menyimpang dipecahkan. Pengujian lebih lanjut dengan
panel antibodi monoklonal D, atau dengan kit komersial, akan membantu mengidentifikasi
beberapa varian anti-D yang lebih umum, terutama tipe D lemah 1 dan 2 dan DAR (tetapi tidak
dengan varian anti-DIIIa). Identifikasi yang lebih definitif dapat dicapai dengan pengujian
molekuler, baik dengan kit atau susunan yang dirancang untuk mengidentifikasi banyak atau
sebagian besar varian anti-D yang diketahui, atau dengan mengurutkan RHD, yang juga akan
mengidentifikasi varian baru. Begitu varian telah diidentifikasi, maka sebuah kebijakan harus
dilakukan untuk transfusi dan memberi profilaksis anti-D (Daniels, 2013).
Di Inggris, kebijakan untuk donor tipe D (UK Blood Transfusion & Tissue Transplantation
Services, 2005) adalah sebagai berikut:
Golongan darah dengan rhesus D harus ditentukan pada setiap sumbangan darah.
Dalam pengujian donor yang dikelompokkan untuk pertama kalinya, dua reagen
pengelompokan darah anti-D yang mampu mendeteksi antara mereka DIV, DV dan DVI
harus digunakan. Jika dua monoklonal anti-D digunakan, mereka harus dari klon yang
berbeda.
Donor yang sel darah merahnya memberikan reaksi positif atau negatif yang tegas dengan
reagen anti-D masing-masing harus dianggap sebagai D positif dan D negatif.
Jika hasil dengan reagen anti-D tidak sesuai atau samar, pengujian harus diulang. Ketika
rhesus D diragukan, lebih aman untuk mengklasifikasikan donor semacam itu sebagai anti-
D positif.
Untuk donor yang diketahui (berulang), satu pereaksi anti-D, atau reagen campuran, yang
mendeteksi D, DV, DV dan DVI yang lemah dapat digunakan (Daniels, 2013).
Selanjutnya, pemeriksaan golongan darah dan rhesus dilakukan pada probandus kedua atas
nama I Gusti Ngurah Gede Jaya Atmaja, laki-laki umur 20 tahun diperoleh hasil cell grouping
pada bioplate yang diteteskan dengan reagen anti A, anti B dan suspense eritrosit 10%,
menunjukkan adanya aglutinasi pada anti B dengan derajat (4+). Aglutinasi juga ditunjukkan pada
well yang diteteskan reagen anti D dan suspense eritrosit 40% dengan nilai derajat aglutinasi 4+,
sehingga dapat diketahui bahwa pada sel darah merah probandus terdapat antigen B dan antigen
D. Hasil serum grouping menunjukkan aglutinasi pada well yang diteteskan dengan reagen Sel eri
A 10% yang juga diteteskan serum dapat diamati derajat aglutinasi well (3+) dimana hal ini
menunjukkan pada serum probandus terdapat antibodi terhadap antigen A. Sehingga dapat
diketahui bahwa probandus memiliki golongan darah B dengan rhesus positif (+). Sedangkan pada
kedua tes, bovine albumin 22% yang ditambahkan suspense sel dengan konsentrasi 40%
menunjukkan hasil negative dimana reagent tersebut berfungsi untuk meningkatkan reaktivitas
antibodi dalam pemeriksaan golongan darah, baik dalam tes aglutinasi langsung atau uji
antiglobulin tidak langsung. Bovine albumin sering digunakan sebagai kontrol untuk pemeriksaan
Rhesus, untuk pengujian kompatibilitas, deteksi antibodi, identifikasi dan titrasi. Bovine albumin
juga berfungsi sebagai bahan pelapis permukaan. Bovine albumin menstabilkan protein / antibodi
(Mitra 2008).
Seorang tenaga Medical Technologist (Lab) memiliki tanggung jawab untuk melakukan
pengelompokan ABO terhadap donor dan pasien. Medical Technologist (Lab) melakukan tes sel
darah merah dan tes serum lainnya. Jika terjadi ketidaksesuaian dalam pengelompokan sel dan
serum, semua tes harus diulang oleh Teknisi Medis yang sama (Lab) menggunakan reagen baru.
Jika ketidaksesuaian berlanjut, pengumpulan sampel harus diulang untuk mendapatkan hasil yang
benar. Hal ini merupakan tanggung jawab semua staf yang melakukan pengelompokan ABO untuk
memastikan bahwa pereaksi yang dikontrol dengan kualitas dan konsentrasi sel yang digunakan
tepat (Biswas 2013).

DAFTAR PUSTAKA
Biswas, Kamruzzaman. 2013. STANDARD OPERATING PROCEDURE FOR BLOOD
TRANSFUSION.
F. Stration. 2011. Practical Blood Grouping.
Mitra, J. 2008. JML Range of Blood Grouping... : 13.
Biswas, K. (2013). STANDARD OPERATING PROCEDURE FOR BLOOD TRANSFUSION.
Keith, M. H. and M. A. (2014). Journal of Blood Group Serology and Molecular Genetics V.
Journal of Blood Group Serology.
Provincial Blood Coordinating Program. 2012. Standard Operating Procedure for Preparation of
Red Cell Suspensions.
[http://www.health.gov.nl.ca/health/bloodservices/pdf/prep_red_cell_susp.pdf]

Daniels, G. (2013). Variants of RhD current testing and clinical consequences, 461470.
https://doi.org/10.1111/bjh.12275

National Institute of Biologicals. 2013. Guidance manual on ABO and Rh blood grouping .

Westhoff. (2007). The Structure and Function of the Rh antigen Complex, 44(1), 4250.