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SECRETARIA DE AGRICULTURA,

GANADERA. DESARROLLO RURAL,


PESCA Y ALIMENTACIN

SERVICIO NACIONAL DE SANIDAD, INOCUIDAD Y CALIDAD


AGROALIMENTARIA

SISTEMA NACIONAL DE VIGILANCIA EPIDEMIOLGICA FITOSANITARIA

PROTOCOLO DE DIAGNSTICO FITOSANITARIO DE LA

DIRECCIN GENERAL DE SANIDAD VEGETAL

PROTOCOLO PARA LA IDENTIFICACIN DE Lobesia botrana Denis & Schiffermller,


1776, MEDIANTE MTODOS TRADICIONALES

Nombre Cargo Firma

Elabora(n): Nancy Lizbeth Morales Salazar Signatario Aprobado

Homero Tovar Hernndez Signatario Aprobado

Marina Ruiz Machuca Signatario Aprobado

Revisa (n):

Autoriza (n):

Datos de Control

Revisin: 00 Fecha de elaboracin: Laboratorio: No. de Pgs.: 27

10 de agosto de 2011 Entomologa y


Acarologa
NDICE

Pgina

Antecedentes. 3

Distribucin geogrfica... 4

Daos 5

Importancia econmica. 6

Origen.. 6

Estatus cuarentenario de la plaga en Mxico. 7

Importancia. 7

Hospederos.. 8

Dispersin. 8

Clasificacin taxonmica... 9

Descripcin.. 10

Huevo. 10

Larva.. 12

Pupa... 13

Adulto 13

Biologa. 14

Protocolo.. 18

Colecta. 18

Envo y recepcin de muestras. 19

Identificacin.. 21

Claves taxonmicas.. 23

Destruccin de la muestra y manejo de desechos. 23

Bibliografa... 24

Apndice 27

2
ANTECEDENTES

La Palomilla europea de la vid, Lobesia botrana es originaria de Europa y es considerada una de las
principales plagas de la vid; pero tambin puede llegar a atacar a otros cultivos como lo son; Rubus
Fruticosus (mora), Prunus avium (cereza), Prunus prsica (durazno), Olea europea (olivo), Prunus
domestica (ciruela), entre otros. El origen de L. botrana es Italia y durante el siglo XIX y finales del XX
esta plaga se fue extendiendo por Austria, Alemania, Suiza, Rusia, Francia, Hungra y Luxemburgo;
tambin distribuida por el norte de frica y hacia el oriente. En el 2008 fue detectada por primera vez
en Amrica, teniendo su primer aparicin en Chile, donde se detecta e identificada por el Laboratorio
del Servicio Agrcola Ganadero, despus se mand corroborar a Norteamrica por el experto en
Tortricidos Dr. John W. Brown en el mismo mes en que se detecto, a partir de la fecha se estructuro
con un plan de contingencia para llevar a cabo la erradicacin de la plaga y se declara como plaga
cuarentenaria y Bajo control oficial. En 2009 Argentina es sorprendida por esta plaga; ya que se emite
una alerta fitosanitaria por la deteccin de un adulto de Lobesia botrana, y posteriormente otras 2
detecciones tienen lugar en Providencia de Mendoza y Maip principales productores de vid, en
octubre del mismo ao. Los Estados Unidos no quedan exentos pues en el 2009 especficamente al
Norte de California se tienen la primera aparicin de la palomilla pero esto no trasciende sino hasta el
2010 donde es interceptada nuevamente en el condado de San Joaqun, a partir de esto se establece
el rea bajo cuarentena ya que detectaron otras dos palomillas en Santa Clara California, tanto los
condados involucrados as como el departamento de Alimentos y Agricultura de California y la
Universidad de California, trabajan en conjunto para establecer las reas de delimitacin y la
vigilancia de la plaga, as como los mtodos que se deben implementar para lograr la erradicacin de
la palomilla; hasta el 2008 se hablaba de que la plaga no se haba poda erradicar de los lugares en
que se encontraba, sin embargo, en noviembre del 2010 se levantaron las restricciones
cuarentenarias en la regin de Atacama, Chile, considerando que desde su aparicin en ese lugar se
han venido aplicando las medidas necesarias para lograr la erradicacin y quitar la barreras de
cuarentena de dicha rea; haciendo aplicaciones en predios donde se haba reportado la palomilla,
as como monitoreo de de las trampas y cumpliendo con 3 ciclos biolgicos tericos sin contar con
nuevos brotes (Servicio Agrcola y Ganadero, 2010).

3
DISTRIBUCIN GEOGRFICA

La distribucin geogrfica original de L. botrana sigue un patrn claro palertico. La


presencia de la palomilla en el centro de frica (Etiopa, Eritrea y Kenia) y Asia oriental
(Japn) es sin duda accidental, y probablemente fue introducido por el hombre. Los registros
del norte de Europa (Finlandia y Suecia) deben ser considerados como accidentales.
Con respecto a las zonas mediterrneas, tenga en cuenta que la presencia de la palomilla en
Cerdea (Italia), se ha documentado claramente en los ltimos aos. Sin embargo, la
palomilla ya no est presente en las Islas Baleares (Espaa), el nico registro que desde
hace 50 aos (Ruiz-Castro, 1943). La falta de registros disponibles de Tnez sugiere una
discontinuidad inesperada en el Mediterrneo, sin embargo, no es improbable que L. botrana
se reproduzca tambin en este pas.

1
Figura 1. Distribucin geogrfica de Lobesia botrana.

1
http://www.cabi.org/cpc/?compid=1&dsid=42794&loadmodule=datasheet&page=868&site=161 (CABI, 2011).

4
Europa: Alemania, Austria, Bulgaria, Chipre, Espaa, Finlandia, Francia, Federacin Rusa, Hungra,
Inglaterra y Gales, Italia, Islas, Baleares, Luxemburgo, Macedonia, Malta, Moldova, Reino Unido,
Repblica Checa, Rumania, Rusia, Serbia y Montenegro, Suiza, Ucrania.
Asia: Armenia, Azerbaijn, Republica de Georgia, Irn, Irak, Israel, Japn, Jordn, Kazakhstan,
Lbano, Siria, Tajikistan, Turqua, Turkmenistn, Uzbekistn.
frica: Algeria, Egipto, Erigtrea, Kenya, Libia, Marruecos.
Amrica: EUA, Chile, Argentina.

DAOS

Estos daos dependen fundamentalmente del estado fenolgico del cultivo. La mayor parte de las
experiencias muestran una gran capacidad de compensacin por parte de la planta, variable segn
variedades, soportando ataques de 1-4 glomrulos (1-2 larvas) (figura 2) o la ablacin de 30 flores por
inflorescencia, sin repercusin significativa en el rendimiento (Roehrich y Schmid, 1979). Se
considera por ello en general, que la vid es tolerante a los daos causados sobre las inflorescencias
(Coscoll et al., 1982). sta es la causa de la tendencia, cada vez ms extendida, de no tratar en
primera generacin. Se exceptan de esta generalizacin, las variedades con inflorescencias muy
pequeas (Basler y Boller, 1976) y las regiones en las que la climatologa favorece los ataques
precoces de podredumbre gris (Acta-ITV, 1980). En consecuencia, los umbrales de intervencin
varan en una amplia banda, entre 10 y 100 larvas por 100 inflorescencias.

2Figura 2. Larva de Lobesia botrana alimentndose.

2
http://ucanr.org/blogs/Raisinramblings/blogfiles/2768.jpg
5
En las generaciones estivales, la prdida de produccin ocasionada por la destruccin de bayas ante
el ataque de grado dbil o medio, puede parecer poco importante si es slo evaluada en peso. (Fig.
1.) Los daos ms severos corresponden a la prdida de calidad, derivada de las heridas producidas
y sobre todo por la aparicin en ellas de diversas podredumbres de origen fngico (Botrytis,
Aspergillus, Alternaria, Rhizopus, Cladosporium, Penicillium), entre las que la podredumbre gris
producida por Botrytis cinerea Pers., es considerada la ms importante. Los racimos de uva de mesa
se deprecian de manera importante y pueden llegar a perder todo su valor, si los ataques son
intensos. En la uva para vinificacin, la presencia de residuos fngicos provoca malos aromas y
sabores en los vinos y ocasiona problemas tcnicos en la clarificacin. Especialmente grave es la
quiebra oxidsica, por la alteracin del color asociada a la precipitacin de compuestos fenlicos.
Aunque B. cinerea tiene poder patognico y capacidad de penetracin directa, su desarrollo se ve
muy favorecido por las vas de penetracin abiertas por las larvas. Fermaud y Le Meen (1989)
demuestran, adems, que las larvas juegan un papel activo en la dispersin del hongo, transportando
las conidias sobre sus tegumentos o en el interior del tubo digestivo, en el que no son desactivadas.
As, las larvas diseminan las esporas con sus movimientos o mediante las heces, que constituyen
adems una base nutritiva adecuada para la germinacin de los propgulos fngicos. En segunda
generacin, la menor sensibilidad de las bayas verdes al desarrollo de B. cinerea, frena el desarrollo
del hongo. Numerosos factores aparecen implicados en el proceso, tanto de naturaleza morfolgica:
ausencia de microfisuras periestomticas en la superficie de la pelcula de la baya inmadura (Bessis,
1972); bioqumica preformada: presencia de proantocianidinas (cianidina y delfinidina) inhibidoras de
los enzimas pectolticos del hongo (Hill et al., 1981) y de cidos orgnicos y pterostilbeno con accin
antifngica (Pezet y Pont, 1988); y bioqumica inducida: presencia de fitoalexinas de tipo estilbeno:
pterostilbeno, resveratrol y sus polmeros (- y -viniferinas) (Langcake, 1981). El hongo permanece
en estado latente en las bayas verdes especialmente localizado en las cicatrices estilares (McClellan
y Hewitt, 1973; Pezet y Pont, 1986) desde donde, a pesar de los mecanismos descritos, puede iniciar
la infeccin.

IMPORTANCIA ECONMICA

Origen
La polilla del racimo, Lobesia botrana, es una de las principales plagas del viedo en el viejo mundo,
especialmente extendida por Europa meridional, norte de frica y Prximo Oriente. En Europa se ha
propagado especialmente a finales del siglo XIX y principios del XX, por lo que su adaptacin a la vid
ha de considerarse como relativamente reciente (Bovey, 1966). Siguiendo a Voukassvitch (1924), a
Ruiz Castro (1943) y a Bovey (1966.), Lobesia botrana se seal por primera vez como plaga de la
vid en Austria en 1800, hace ya dos siglos, en plena Revolucin Agrcola, veinticuatro aos despus

6
de su descripcin en 1776 por Denis y Schiffermller, con tipos originarios del mismo pas. A partir de
este momento, su extensin por todo el viedo europeo fue progresiva. En 1854 se cita de Alemania,
en 1865 de Rusia, en 1869 de Hungra, en 1880 de Suiza y en 1908 de Luxemburgo. En Francia se
constat por vez primera en 1890 en el departamento de los Alpes Martimos tal vez proveniente de
Italia, presuntamente su pas originario (Voukassvitch, 1924).

Estatus cuarentenario de la plaga en Mxico. L. botrana no est presente en Mxico. (CABI, 2010).

Importancia econmica de la plaga


En Mxico, se cultivan un total de 27,872.36 ha de vid para vino y mesa distribuidas en ocho estados
productores. Para el ltimo ciclo agrcola 2009 el valor de la produccin de uva (vino y mesa) alcanz
los 49,143,364,900 pesos y la produccin total alcanz las 274,828.13 toneladas; los tres estados
principales con mayor produccin son: Sonora, Zacatecas, y Baja California (SIAP, 2010).

Cuadro 1. Produccin agrcola de uva en Mxico (SIAP, 2010).

Ciclo: Cclicos y Perennes 2009


Modalidad: Riego + Temporal
UVA
Ubicacin Sup. Sembrada Valor Produccin
(Ha) (Miles de Pesos)
AGUASCALIENTES 861.00 32,882.82
BAJA CALIFORNIA 3,673.81 185,578.69
BAJA CALIFORNIA SUR 8.00 61.05
CAMPECHE 10.00 2,925.00
CHIHUAHUA 288.00 11,966.40
COAHUILA 282.00 15,407.00
COLIMA 6.00 0.00
DURANGO 1.50 162.00
GUANAJUATO 2.00 4.00
JALISCO 49.00 3,080.00
MORELOS 0.80 40.32
PUEBLA 1.00 24.00
QUERTARO 194.00 18,079.50
SONORA 18,881.00 4,495,263.00
ZACATECAS 3,614.25 148,891.12
27,872.36 4,914,364.90

7
HOSPEDEROS

Cuadro 2. Hospederos de Lobesia botrana (CABI, 2007).


Nombre comn Nombre tcnico
Principal Vid Vitis vinfera
Secundarios Grosellas negras y rojas Ribes nigrum
Mora Rubus Fruticosus
Endrino Prunus spinosa
Clavel Dianthus spp.
Cereza Prunus avium
Kiwi/Chino gooseberry Actinidia chinensis
Durazno Prunus prsica
Caqui Diospyros kaki, D. virginiana
Ciruela Prunus domestica
Granada Punica granatum
Olivo Olea europea subsp. europeae

DISPERSIN

Entre los mtodos que se han utilizando y se estn utilizando para llevar a cabo las medidas de
erradicacin de Lobesia botrana se encuentra el de la prevencin de entrada de la plaga a sitios
donde no est presente esto es por medio de restricciones de importaciones de productos que
pudieran estar albergando a esta plaga; ya que uno de los principales mtodos de dispersin de
Lobesia botrana es a travs de movimientos internacionales, por medio de envos de material
propagativo como pudiera ser estacas de vid, barbados o varetas, o bien, las especies vegetales que
pudieran ser hospedantes de la palomilla, lo ms probable en estos casos es que la plaga se traslade
en forma de pupas; tambin otra forma de propagacin dentro de un mismo pas o una localidad a
otra; son por medio de maquinaria agrcola usada localmente pues no se tiene el habito de
desinfeccin o limpieza de estas que pudieran estar contaminadas; como lo son las cosechadoras
mecnicas, moledoras porttiles, podadoras, elementos de transporte utilizados en la cosecha y
acarreo de fruta.
En Chile la SAG declaro las consideraciones de los egresos y el trnsito de reas reglamentadas
poniendo como condiciones que la fruta fresca/pasas de uva sin industrializar se debe contar con
documentacin correspondiente y de resguardo segn el origen y destino final de la carga as como
para fruta de vid con destino industrial que implique molienda; entre otras medidas, se dispuso
8
descargar la fruta remanente despus de la cosecha y destruir los residuos vegetales de cosecha
dentro del mismo predio; y podar las plantas de vid para facilitar las pulverizaciones qumicas y
destruir el material resultante de la poda dentro del mismo predio.
Cabe mencionar que las tareas de divulgacin tambin son importantes ya que la mayora de las
personas consumidoras no saben el riesgo que puede traer el traslado ilegal de productos que sean
hospedantes de dicha plaga y que solo propiciaran la dispersin de esta hacia otros lugares en
donde no est.
En los Estados Unidos el APHIS y CDFA han establecido zonas de cuarentena en todo o en partes
de Fresno, Mendocino, Merced, Napa, San Joaqun, Santa Clara, Solano y Sonoma para prevenir la
propagacin de Lobesia botrana.
Adems de lo ya mencionado el adulto tiene la capacidad de volar; aunque son vuelos muy cortos,
las hembras reportan distancias de entre los 80 y 100 metros cuando est en busca de sitios donde
ovipositar, mientras que para los macho se reporta una distancia un poco ms larga cuando est en
busca de una hembra.

CLASIFICACIN TAXONMICA

Tomado del CAB International, 2005.

Reino: Arthropoda
Clase: Insecta
Orden: Lepidptera
Familia: Tortricidae
Gnero: Lobesia
Especie: L. botrana Denis & Schiffermller, 1776

SINNIMOS

Tomado del CAB International, 2005

Polychrosis botrana Ragonot, 1894.


Eudemis botrana Frey, 1880.
Tortrix botrana Denis & Schiffermller, 1776.
Tortrix vitisana Jacquin, 1788.

9
Tinea premixtana Hbner, 1796.
Tinea reliquana Hbner, 1816.
Tortrix reliquana Treitschke, 1835.
Tortrix romaniana O. Costa, 1840.
Noctua romani O. Costa, 1840.
Cochylis vitisana Audouin, 1842.
Cochylis botrana Herrich-Schaffer, 1843.
Penthina vitivorana Packard, 1860.
Grapholita botrana Heinemann, 1863.
Eudemis rosmarinana Millire, 1866.
Coccyx botrana Praun, 1869.
Lobesia rosmariana. Millire, 1866.

NOMBRES COMNES

Palomilla europea de la vid


Polilla de racimo de la vid
European grape vine moth
Grape berry moth
Grape fruit moth
Vine moth
Grape vine moth
Grape leaf-roller

Fuente: CAB International, 2005

DESCRIPCIN

Huevo .

Llamado tipo plano, con el eje largo horizontal y el micropilo en un extremo del mismo. De forma
lenticular y ligeramente elipsoidal (0,65-0,90 mm de longitud por 0,45-0,75 mm de anchura) con una
excentricidad media de 0,64. Permanece adherido al substrato por el producto de las glndulas
coletricas que se solidifica al contacto con el aire. Con un color de blanco a amarillento plido recin
puesto, toma ms tarde un tinte gris claro translcido, con reflejos irisados (Figura 3). Esta coloracin
patente en los huevos procedentes de puestas en la naturaleza, puede variar en las puestas

10
provenientes de cra artificial, a causa de la alimentacin en el estado larvario. El corin protector, sin
ornamentaciones marcadas, le otorga un aspecto macroscpico liso, aunque presenta una fina
reticulacin poligonal especialmente en los bordes y en torno al micropilo.

3Figura 3. Huevecillos de Lobesia botrana.

4Figura 4. Fases del desarrollo embrionario de


L. botrana. 1) Embrin visible, 2) Ojos visibles,
3) Mandbulas visibles, 4) Cabeza parda o
cabeza oscurecida, 5) Cabeza negra, 6)
Corin tras la eclosin.

Tras la deposicin del huevo, se diferencian 5 fases en el desarrollo embrionario, que permiten
estimar el tiempo transcurrido desde la oviposicin o el que resta para la eclosin. La larva perfora el

3
http://www.sag.cl/OpenNet_Editor/recursos/huevo_amarillo.jpg
4
http://www.agronline.cl/images/clip_image005_0002.gif

11
huevo por uno de los polos empleando las mandbulas y la cabeza, abandonando el corin nacarado
sin ingerirlo, que queda adherido al substrato. Como tpicamente ocurre en los Olethreutinae, los
huevos son dispuestos por la hembra de manera aislada, ms raramente en pequeas agrupaciones
de 2-3 huevos, sin formacin de placas (Feytaud, 1924).

Larva .

El desarrollo larvario pasa por cinco estadios. La larva neonata mide alrededor de 0,95-1,0 mm de
longitud. La cpsula ceflica y el escudo protorcico son pardo-oscuros, casi negros, y el cuerpo
amarillo claro. En los estadios siguientes la cabeza y el escudo son pardo ms claro y el cuerpo de
color variable, de amarillo verdoso a pardo claro segn diversos factores entre los que se halla la
alimentacin. Segn la coloracin de los tegumentos, a menudo se puede ver por transparencia el
contenido del tracto digestivo. Presenta una profusin de sedas sensoriales por todo el cuerpo, cuya
localizacin y morfologa presentan valor taxonmico. Manifiesta un comportamiento vivo y gil, y
nunca transporta un forro protector de seda, caractersticas que la diferencian etolgicamente de E.
ambiguella. Despus de pasar por 5 estadios la larva alcanzar los 10-15 mm, justo antes de la
prepupa. En este momento adquiere una coloracin azul (cra en laboratorio) y deja de alimentarse.
Busca entonces un emplazamiento adecuado, en donde forma un capullo sedoso fusiforme de color
blanquecino, normalmente desprovisto de cuerpos extraos, en cuyo interior se produce la
metamorfosis (Feytaud, 1924).

5
Figura 5. Larvas de Lobesia botrana.

Pupa .

5
http://www.alsurinforma.com/wp-content/uploads/2010/12/lobesia-botrana-1.jpg

12
De color blanquecino, azul o verde recin formada, pasa a pardo o pardo oscuro en pocas horas. Su
tamao y peso son ms elevados en la hembra (macho 4-7 mm; hembra 5-9 mm). Los sexos en este
estado pueden ser ya diferenciados, de manera no destructiva, por la posicin de los primordios
genitales. stos se sitan en el esterno abdominal IX en el macho y VIII en la hembra. Adems, el
orificio genital del macho se sita entre dos pequeas prominencias laterales. La edad aproximada de
la crislida puede ser estimada en funcin de la transparencia y coloracin del tegumento. Lalanne-
Cassou (1977) diferencia 10 etapas en el desarrollo pupal que (a una temperatura de 20 C y
humedad relativa del 75%) presentan las duraciones aproximadas que se indican: 1) ojos
transparentes (> 150 h); 2) ojos pardos (40 h); 3) ojos negros (24 h); 4) apndices completos (24 h);
5) alas plateadas (40 h); 6) antenas pardas (20 h); 7) comienzo pigmentacin alar (5 h); 8)
pigmentacin alar incompleta (8 h); 9) pigmentacin alar completa (22 h) y 10) escamas visibles (6 h).
Cuando la emergencia es inminente, la crislida, mediante movimientos abdominales y ayuda de las
espinas dorsales y de los ganchos caudales, perfora el capullo y libera al adulto. La emergencia se
acompaa de la proyeccin de un meconio blanco verdoso, usualmente expulsado en mayor cantidad
por los machos. La exuvia queda fijada exteriormente por el cremaster, en una posicin caracterstica
a muchos Tortricidae. (Luis Miguel Torres-Vila, 2001).

6
Figura 6. Pupa de Lobesia botrana.

Adulto .

Es un lepidptero de aproximadamente 10-13 mm de envergadura alar y 6-8 mm de longitud en


reposo. Su tamao, no obstante, depende mucho de la calidad del substrato nutritivo a lo largo del
estado larvario (Torres-Vila et al., 1999). En el anverso, las ornamentaciones en mosaico de las alas
anteriores (pardo-rojo-azul) contrastan con el tinte grisceo ms o menos uniforme de las alas

6
http://www.corbisimages.com/images/Corbis-42-26949252.jpg?size=67&uid=3f00aeb1-41ec-4f21-bc4a-3bd9d70cbd7a
13
posteriores, ocultas en posicin de reposo. En el reverso predomina tambin una coloracin griscea.
A lo largo del tegmen de ambos pares de alas se dispone una fila de fimbrias del mismo color de cada
ala respectiva. No existe dimorfismo sexual pronunciado y el diseo alar es similar. Sin embargo, los
sexos son fcilmente diferenciables tanto por su morfologa como por su comportamiento. Los
machos, al igual que en el estado de crislida, son ms pequeos, presentan un abdomen ms
estrecho, poseen un peine anal de escamas modificadas, y movimientos mucho ms giles y
nerviosos cuando se les molesta. Se ha descrito un mutante melnico derivado de laboratorio cuya
herencia est regulada por un gen recesivo no ligado al sexo (roe) (Torres-Vila et al., 1996b).

7
Figura 7. Adulto de Lobesia botrana

BIOLOGA

La palomilla del racimo es una especie polivoltina que tiene dos generaciones en las regiones
septentrionales de su rea de reparticin, pero en latitudes ms meridionales, presenta normalmente
un ciclo trivoltino. El nmero de generaciones es modulado conjuntamente por la temperatura y el
fotoperodo, que actan respectivamente sobre la velocidad de desarrollo y la induccin de la
diapausa. Una fotofase entre 8 y 12 h, aplicada durante ms de la mitad del estado larvario induce la
diapausa de la larva, que se expresar en la crislida, sin que la alimentacin juegue al respecto
(Komarova, 1949; Roehrich, 1969). En las latitudes de Europa meridional, la induccin ocurre

7
www.cuencarural.com

14
normalmente a partir de la segunda quincena de agosto. Antes de este perodo crtico, la integral
trmica acumulada previamente, determina el nmero de generaciones en un ao dado.
L. botrana es capaz de desarrollarse sobre un gran nmero de especies vegetales agrestes y
cultivadas, dada su extensa polifagia. En la revisin de Bovey (1966) se sealan 15 especies a las
que se asocia naturalmente L. botrana. El mismo autor, citando a Luestner y a Voukassovitch resea
otras 17 que, aunque no estimulan la oviposicin en la hembra, son capaces de suministrar un
substrato nutritivo adecuado a la larva para la buena finalizacin del ciclo biolgico. El hecho no
presenta en realidad un gran inters ecolgico, pero s aplicado a la cra del insecto en laboratorio
sobre otros substratos vegetales alternativos. La via virgen Parthenocissus tricuspidata se muestra
letal para las larvas (Torres-Vila et al., 1992). Entre las especies vegetales seleccionadas
naturalmente para la puesta, merece mencin especial el torvisco (Daphne gnidium L.) dado que fue
propuesto por Marchal (1912) como la posible planta husped originaria de L. botrana antes de la
invasin de los viedos, si bien existen opiniones encontradas al respecto (Bovey, 1966). Stoeva
(1982), completa ms tarde la lista de hospedadores naturales de L. botrana. Algunos cultivos
tradicionalmente asumidos como hospedadores naturales de L. botrana (p.e. alfalfa y papa) deben de
ser eliminados de la lista de hospedadores naturales, en la cual se incluyeron probablemente por
error a partir de la literatura ms antigua relacionada con el desarrollo larvario de la polilla sobre
vegetales no seleccionados naturalmente para la oviposicin (Torres-Vila, 1999).

8
Figura 8. Ciclo biolgico trivoltino de L. botrana sobre vid.

8
http://www.seea.es/conlupa/lbotrana/lbcb.h7.gif
15
Cuando la polilla se asocia a la vid, la primera generacin (mayo-junio) daa las inflorescencias, la
segunda (julio) las bayas verdes y la tercera (agosto-septiembre) las bayas en envero y maduracin.
L. botrana inverna como crislida, con la diapausa inducida, desde septiembre-octubre hasta la
primavera siguiente. Se ubica preferentemente bajo la corteza de las plantas, y en las grietas de los
rodrigones cuando la vid se conduce en espaldera (Causse et al., 1984), en el interior de un capullo
de textura ms recia y consistente que cuando la crislida es no diapausante (Roehrich, com. per.).
En el mecanismo de inhibicin de la diapausa, todava no bien conocido, interviene decisivamente la
temperatura media de final del invierno e inicio de primavera (Gabel y Roehrich, 1990).
Las emergencias del primer vuelo se inician de finales de marzo a primeros de abril, con una
protandria de algunos das, y se prolongan alrededor de 4-6 semanas. Los adultos presentan una
actividad mxima durante el crepsculo: vuelo, llamada, acoplamiento, puesta y alimentacin. Menos
frecuentemente pueden mostrar tambin cierta actividad durante el alba o en das nublados.
Las hembras son usualmente monndricas pero varios factores pueden promover acoplamientos
mltiples (Torres-Vila et al., 1997b). Al contrario, los machos son predominantemente polignicos
(Torres-Vila, et al., 1995). Las hembras, 1 a 3 das tras el acoplamiento, segn la temperatura, inician
la puesta sobre las brcteas, los botones florales y, ms raramente, sobre el raquis de las
inflorescencias y hojas, ya que las superficies lisas del vegetal estimulan especialmente el reflejo de
puesta (Marchal, 1912). Los huevecillos eclosionan 7-10 das despus (65-75 C-da en base 10,
Touzeau (1981)), las larvas efectan desplazamientos de duracin variable en funcin de la
insolacin y la temperatura de hasta 24 horas (Marchal, 1912), en busca de un emplazamiento
adecuado para instalarse. El proceso dispersivo se produce tanto mediante el uso de hilos de seda
(balloning behaviour) como por locomocin sobre el sustrato y se muestra dependiente de la
densidad larvaria (Torres-Vila et al., 1997c). Tras la instalacin en un emplazamiento adecuado y
eventualmente tras protegerse mediante una envoltura sedosa, las larvas de primer estadio
comienzan la perforacin de los botones florales y, una vez instaladas en el interior, se nutren
fundamentalmente de los primordios estaminales y del gineceo. Ms tarde, cuando su tamao se lo
permite, unen varias flores por medio de hilos de seda constituyendo un glomrulo, y protegidas en su
interior continan su desarrollo. El cambio de ubicacin y la formacin de un segundo glomrulo es
habitual, una vez que la mayor parte de las flores en torno al original han sido destruidas. Despus de
pasar por cinco estadios larvarios, las larvas abandonan las inflorescencias para pupar,
preferentemente sobre las hojas (Causse et al., 1984). La duracin del estado larvario es de 20-28
das y la del estado pupal 12-14 das (170 C-da y 130 C-da en base 10 respectivamente, Touzeau
(1981)).
A finales de junio emergen los primeros adultos del segundo vuelo. Las hembras ovipositan sobre las
bayas verdes, usualmente en la zona ms sombreada de los racimos. Las larvas neonatas presentan
el mismo comportamiento errtico que en la primera generacin. Finalmente se instalan iniciando una
16
perforacin en la insercin peduncular o en el punto de contacto de dos bayas, localizaciones que
estimulan su tigmotropismo. La larva durante su desarrollo perfora varias bayas que une mediante un
tejido sedoso, refugindose normalmente en los ltimos estadios en el interior del hollejo vaciado de
una de ellas. Sealar aqu, que si bien el comportamiento defensivo tpico de la larva es el de huida,
con violentos culebreos hacia atrs, ste se modifica por necesidad cuando estn localizadas en el
interior de las bayas; si son levemente hostigadas con un objeto punzante a travs del orificio de
penetracin, sacan bruscamente la cabeza e incluso intentan bloquearlo con las mandbulas.
El desarrollo larvario requiere una mayor integral trmica que en primera generacin, alrededor de
255 C-da en base 10 (Touzeau, 1981), debido a la menor riqueza en nitrgeno de las bayas. La
larva de quinto estadio pupa a mediados de julio, siguiendo las mismas pautas que en primera
generacin. La pupa requiere para su desarrollo una integral trmica anloga a la de la primera
generacin.
El tercer vuelo se inicia, normalmente, a primeros de agosto, prologndose durante todo el mes. La
oviposicin tiene lugar sobre las bayas en envero y maduracin (Eichhorn y Lorenz, 1977). Las larvas
se desarrollan durante agosto-septiembre. El comportamiento de las larvas es anlogo al descrito en
segunda generacin, salvo que las larvas con la diapausa inducida prefieren realizar la ninfosis bajo
la corteza de las cepas o en las grietas de los tutores y rodrigones, en lugar de en las partes verdes
de la planta (Causse et al., 1984). Las crislidas invernan hasta la primavera siguiente en la que se
iniciar un nuevo ciclo.
Sealar que una rpida velocidad de desarrollo de las larvas, propiciada por unas temperaturas
primaverales y estivales anormalmente elevadas, puede provocar que la diapausa no llegue a
inducirse en la tercera generacin de larvas. Esto es el origen de un cuarto vuelo parcial, o total, cuya
descendencia se pierde en su prctica totalidad ante los rigores invernales, por falta de tiempo y
condiciones apropiadas para completar una nueva generacin y alcanzar el estado diapausante.

PROTOCOLO

COLECTA .

Cualquier palomilla encontrada en las trampas con feromonas que sean pequeas; de
aproximadamente 4 a 7 mm y de color pardo con ornamentaciones en color gris deber ser remitida a
un laboratorio para su identificacin correcta (Fig. 9). En caso de que al laboratorio lleguen muestras
de larvas vivas o que an estn en el hospedero, lo primero que deber hacer es el matado de la
larva; esto es, introducir el ejemplar en agua hirviendo por un periodo de 30 segundos, apagar el
fuego o retirar el contenedor del fuego y espera a que se enfre el agua. Despus del enfriado se
trasfiere el espcimen a alcohol etlico o isoproplico al 70%. Si la larva ya viene matada asegrese
de que se encuentre en alcohol al 70%, si no es as deber hacer el cambio de alcohol.
17
9
Figura 9. Lobesia botrana Den. & Schiff.

Observacin de larvas en microscopio.

Con el fin de evitar confusiones, es importante mencionar que para observar bajo el microscopio una
larva hay que acomodar la misma de tal manera, que la cabeza vaya dirigida hacia la parte izquierda
del observador y la parte caudal hacia la derecha; la razn de lo anterior se debe a que todas las
claves taxonmicas de identificacin a nivel mundial se basan en esta orientacin (CNRF, 2011).
Las larvas se podrn conservar en alcohol al 70% llevando dentro del Vial en que se encuentre su
etiqueta escrita con lpiz. Por fuera tambin se puede rotular de igual manera con lpiz; ya que el
alcohol contenido puede derramarse y borrar la tinta de pluma (CNRF, 2011).

ENVO Y RECEPCIN DE MUESTRAS

La palomilla no debe ser despegada de la trampa por el tcnico de campo. La trampa debe enviarse
completa, teniendo cuidado de que no se maltraten los ejemplares. Las muestras deben estar
identificadas y venir acompaadas con la informacin que se pide en el formato para solicitud de
anlisis de muestras nacionales.
Se le da el manejo de identificacin normal para su registro en el laboratorio mediante el uso de base
de datos fsicos y/o digitales.

9
http://2.bp.blogspot.com/_OfMklflqpiA/TJ_sqeuLjXI/AAAAAAAAAOc/9dep7S7rELs/s1600/92730383'83.gif

18
Debe estar en buen estado, esto es, que el ejemplar este completo y que conserve las escamas en el
caso de adultos, que no est deshidratada.
En el caso de que el laboratorio al que llegue la muestra no pueda hacer la identificacin (por las
razones que sea) deber enviarla al Centro Nacional de Referencia Fitosanitaria para su diagnstico,
considerando lo siguiente:
Deber cerciorarse de que los ejemplares se encuentren en buen estado (que estn
completos), enviar de preferencia 6 trampas por muestra con 4 insectos mnimo por trampa
para realizar la extraccin de genitalias.
En caso de que la trampa solo tenga un espcimen podr cortar la parte donde est adherido
el insecto, y colocar el trozo en una caja pequea para evitar el envi de toda la trampa, en
este caso se debe asegurar a las paredes de la caja el trozo de trampa para evitar que las
paredes se peguen, o bien, colocar un panel de unicel, hule espuma o cartn.

Datos de la Muestra

Los datos que debe contener la muestra son: nmero demuestra, fecha de recolecta, localidad (si la
muestra fue recolectada en un rea rural, proporcione la ubicacin con respecto al poblado o ciudad
ms cercana), domicilio (si la muestra fue recolectada en un rea urbana), nombre cientfico y/o
nombre comn de la planta hospedante sobre la que fue recolectada la muestra, nombre del
recolector y fecha de envo (CNRF, 2011).
Si la muestra enviada cumple con todo lo anterior se reciben en el rea de muestras por procesar,
estas son ordenadas en base a su nmero de registro y se rotulan (cada una) en el formato o bitcora
respectiva.

Caractersticas de un Tortricidae adulto

a) Presenta antena simple o filiforme, nunca pectinada.


b) Alas anteriores (AA) con las puntas muy cuadradas. Cu2 en AA originada a la mitad o de la
celda discal.
c) Tmpano ausente. Los miembros de Pyralidae presentan tmpano en el primer externito del
abdomen.
d) Palpos labiales. Proyectados hacia el frente; algunas especies de Pyraloidae presentan los
palpos labiales proyectados hacia arriba.

19
e) Palpos maxilares. Muy reducibles, no visibles en Tortricidos y perfectamente visibles en
Pyralidae.
f) Probscide. Presenta una probscide sin escamas, los miembros de Gelechiidae y Pyralidae
si las tienen.
g) Presenta Chaetosema; esto se refiere a un arreglo de setas presentes por encima del ojo
compuesto, un poco difcil de ver (Fig. 10).

10
Figura 10. Vista lateral de la Cabeza.

IDENTIFICACIN

a) Todas las especies de Lobesia botrana tienen una barra que cruza el ala de lado a lado
aproximadamente poco menos de la mitad del ala y esta barra se encuentra ensanchada
hacia la parte basal; si estuvieran las alas en reposo la unin de estas sera donde se
encuentra la parte ms ancha de la barra; esta barra es de color gris y esta delineada de color
blanco (Fig. 11 a).
b) La mayora de las especies de Lobesia botrana presentan un patrn en forma de Y
horizontal en el rea casi terminal del ala; si las alas estuvieran en reposo los brazos de las
Y chocaran entre s, esta marca puede llegar a no ser tan evidente pero con una inspeccin
detallada podran encontrarse rastros de ella (Fig. 11 b).

10
Zimmerman (1978).

20
11
Figura 11. Adulto de L. botrana.

Diseccin del abdomen y extraccin de la genitalia para su identificacin.

Los procedimientos estndar para la diseccin de lepidpteros se describen en Clarke (1951) y


Robinson (1976). La genitalia separada del abdomen debe estar perfectamente limpia y completa
(Fig. 3 y Apndice 1).

Lobesia botrana puede ser separada de los otros gneros de Paralobesia sp. Basado en las
siguientes caractersticas:
a) Machos.
Valva larga y estrecha con espinas alrededor del margen ventral (Fig. 12 a), cucullus separado
del sacculus por una notable muesca sin espinas (Fig. 12 b).
b) Hembras.
Ducto bursae largo y delgado no diferenciado de corpus bursae que se va ensanchando hacia
la parte terminal. Presenta signum en forma de pluma (Fig. 12 c).

11
Gilligan et al., 2010. Tortricidae screening and identification Aid. European Grapevine Moth Lobesia botrana (Denis &
Schiff.).
21
12
Figura 11. Genitalia del macho y la hembra de L. botrana.

CLAVE PARA LA IDENTIFICACIN DE Lobesia botrana EN CALIFORNIA

1. Tmpano abdominal o torcico presente, antena pectinada, palpos


labiales proyectados hacia arriba, probscide con escamas o ausente, No se trata de Lobesia
palomillas que no miden de 4-7 mm de largo botrana
1. Tmpano ausente den el trax o abdomen; antena simple; palpo labial
proyectado hacia enfrente; probscide sin escamas, palomillas de 4 a7
mm de largo .. 2
2. Alas anteriores con una prominente barra gris a la mitad de esta y una
marca en forma de Y acostada, o invertida si el ala est extendida, en el
extremos del ala de color gris estas marcas estas delineadas de color
blanco (Fig. 1 y 2) .... 3
2. Alas anteriores sin las caractersticas que se describen arriba No se trata de Lobesia
botrana
3. Macho............................. 4
3. Hembras.... 5
4. Valva del macho con una distintiva muesca entre el cucullus y el Lobesia botrana

12
Gilligan et al., 2010. Tortricidae screening and identification Aid. European Grapevine Moth Lobesia botrana (Denis &
Schiff.).
22
sacculus (Fig. 3, a y b).....
4. Valva del macho sin las caractersticas anteriores........... No se trata de Lobesia
botrana
5. Hembras con un largo estrecho ducto bursae que poco a poco se
expande dentro del corpus bursae y con un solo signum y largo (Fig. 3,
c) . Lobesia botrana
5. Hembras sin el ducto bursae largo y estrecho y sin expandirse dentro No se trata de Lobesia
el corpus bursae; signum ausente ms de uno presente botrana

DESTRUCCIN DE LA MUESTRA Y MANEJO DE DESECHOS

1. En caso de que el diagnstico resulte positivo y concluido el tiempo de almacenamiento


reglamentario, los ejemplares deben ser preservados y aadidos a la coleccin de referencia
debidamente identificados.
2. Los restos de reactivos, utilizados para la extraccin de la genitalia, son colocados en un
recipiente con tapa de rosca para ser recolectados por un proveedor autorizado.

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APNDICE 1

A. Tcnica de Extraccin de Genitalias para palomillas de Lepidpteros adultos que son


encontrados en trampas pegajosas.

Materiales:
Pincel o cepillo sintticos.
Pinzas.
Siracusa.
Caja de Petri.
Hidrxido de potasio (KOH 3%)
Xilol (puede ser sustituido por otra sustancia como gasolina blanca).
Agua.
Portaobjetos y cubreobjetos.

Procedimiento
1. Corte la pieza de la trampa pegajosa que contiene el espcimen o el abdomen del insecto.
26
2. En una caja de Petri coloque unas gotas de xilol y sumerja la pieza cortada de la trampa o el
abdomen hasta que este quede libre.
3. Desprenda con cuidado el abdomen y colquelo en la siracusa y agregue unas gotas de KOH
al 4%. Durante 1 hora a temperatura ambiente.
4. Enjuague el abdomen con agua, djelo en el agua para el siguiente paso.
5. Con el pincel retire las escamas, la grasa y otros residuos con cepillos y ayuda de pinzas.
Cambie el agua si es necesario y retire tambin los residuos del insecto que haya generado.
6. Diseccin del espcimen.
i. Retire la cpsula genital con una aguja o con pinzas.
ii. Limpie los restos de la cpsula genital como piel adherida o grasa.

B. Preparacin de genitalia.
Colocar el abdomen completo en alcohol al 70% para reblandecer la estructura, posteriormente
pasarlo a KOH 10% y dejarlo ah toda la noche, si se requiere acelerar el proceso, en un tubo
de ensayo se coloca el abdomen junto con el KOH 10% y se pone en bao Mara durante
media hora o hasta que se desprendan las escamas y el abdomen se aclare. Posteriormente,
se enjuaga con agua destilada y se procede a la diseccin, abriendo el abdomen lateralmente
a lo largo y retirar la genitalia (Angulo y Olvales, 2011)

C. Montaje.
1. Agregar unas gotas de Blsamo de Canad en portaobjetos limpio.
2. Coloque el espcimen en la posicin adecuada y empjelo hasta el fondo de la gota.
3. Con cuidado coloque un cubreobjetos de manera que no queden burbujas dentro.
4. Si es necesario, coloque la laminilla en una plancha a 40 C para ayudarse a extraer las
burbujas.
5. Etiquetar con informacin adecuada.
6. Colquelo en estufa a 40C durante 2 a 3 das para permitir que se fije el Blsamo.

Tomado de: Herramientas para el diagnstico de palomilla marrn de la manzana, modificado y


adaptado a Lobesia botrana.

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