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ner
veu
La synapse neuro-musculaire : communication
x (on
de entre deux cellules excitables diffrencies
de
dp
ola membrane prsynaptique (neurone)
ris atio
n = p fente synaptique
ote
ntie
motoneurone l d' membrane postsynaptique (cellule musculaire),
act
ion trs diffrencie, avec de nombreuses
cellule invaginations qui augmentent la surface,
musculaire donc la possibilit de fixation de
strie neuromdiateur, et donc de dpolarisation.
(ext)
(int)
N
N
rapsyne maintenant les
N N rcepteurs Ach
nombreux noyaux : la cellule N N N leur bonne place, en
musculaire strie est un liaison avec le
syncytium. cytosquelette
Seuls les noyaux au Synapse neuro-musculaire
voisinage de la synapse
transcrivent les gnes du
rcepteur Ach. actylcholine qui se
fixe sur le
rcepteur
La cellule prsynaptique met un
neuromdiateur, l'actycholine.
Ce neuromdiateur traverses la fente
synaptique (= espace synaptique),
et agit sur des rcepteurs de la
membrane post-synaptique, en
augmentant la permabilit au entre de Na+ grce
sodium. l'ouverture du rcepteur
(canal chimio-dpendant)
==> dpolarisation de la
membrane
Le rcepteur actylcholine a t purifi vers 1975 grce
l'emploi de matriel biologique spcialis. Les muscles Purification du rcepteur
normaux ont peu de synapses, donc peu de rcepteurs.
Organe lectrique de Torpille (Chondrichtyen
l'actylcholine par
marin voisin de la Raie, pouvant produire des chromatographie
dcharges lectriques de 500 V et 0,5 A.
L'organe lectrique provient par volution d'affinit, grce l'-
d'un muscle, spcialis dans la gnration de
courant lectrique. Le courant vient de
bungarotoxine
l'entre massive de Na+ dans des cellules 1) on verse sur la colonne
(nombreuses cellules en parallle et en un extrait cellulaire
srie). Il y a donc de nombreux rcepteurs colonne de contenant une
actylcholine. chromatographie : multitude d'autres
-bungarotoxine : neurotoxine de serpent voisin phase fixe constituants cellulaires
du Cobra. Elle inhibe spcifiquement, avec sur laquelle mlangs aux
une liaison trs forte, le rcepteur Ach, ce on a fix des molcules recherches
qui provoque la paralysie de la proie. On ligands spcifiques
utilise des toxines marques (ce qui permet des molcules =>capture spcifique
un reprage microscopique) et des toxines recherches. des molcules
fixes sur un support solide, ce qui permet recherches : les
une sparation par chromatographie autres constituants
d'affinit. traversent la colonne et
sortent, alors que les
molcules recherches
Mthode : sont retenues par les
- broyage de l'organe lectrique ligands spcifiques de
- solubilisation des membranes par un la colonne ayant une
dtergent affinit spcifique pour
- chromatographie d'affinit, sur une colonne elles
o est fixe de la toxine de serpent : les
molcules de rcepteur restent fixes la 2) lution des molcules
colonne, alors que les autres constituants recherches : en
cellulaires ne sont pas retenus versant un autre
- lution du rcepteur et analyse biochimiques, liquide, les molcules
se dcrochent, et sont
rcupres.
2 protomres
, portant O Le rcepteur
chacun un CH3 C
O
CH3 nicotinique
site N+ CH
rcepteur
CH2 CH2
3 actylcholine : un
Ach actyl
(ext)
CH3 canal ionique
choline chimiodpendant
actylcholine = ester de l'acide actique et de
la choline (amino-alcool)
(int)
anneau de 5
leucines
M = 290 kDa (hydrophobes)
canal
ionique ==> tanchit
Le rcepteur a une structure pentamre : 2 , ,
, (ici, le a t enlev) - -
- -
Les divers protomres sont semblables : 4 hlices - -
transmembranaires. L'une des hlice borde le canal, et est - - rsidus acides (-) =>
riche en AA chargs ngativement (GLU-ASP). repoussent les
Chaque protomre porte un site de fixation Ach, ce qui fait anions, et ne
deux sites pour l'ensemble de la molcule. laissent passer
que les cations
Divers ligands possibles pour le rcepteur de l'Ach :
- actylcholine contrle de la permabilit du canal par les rsidus
- nicotine (d'o le nom de rcepteur nicotinique) Fonctionnement normal du rcepteur nicotinique actylcholine :
- bungarotoxine (==> paralysie) - l'tat normal, le canal est ferm
- curare (toxine vgtale entranant aussi une paralysie) - s'il y a fixation de 2 Ach sur les 2 sites rcepteurs, la conformation
- la myasthnie grave est une maladie auto-immune, o change, et le canal s'ouvre, d'o une forte entre de Na+ (plus d'un
l'organisme fabrique des anticorps contre le rcepteur million d'ions par seconde) : c'est un canal ionique
Ach. chimiodpendant.
- l'Ach reste statistiquement fix au rcepteur tant qu'il existe de l'Ach
dans la fente synaptique : il y a un quilibre Ach libre / Ach fix.
- normalement, l'Ach prsente dans la fente synaptique est rapidement
hydrolyse par l'actylcholinestrase qui s'y trouve. Donc l'Ach n'est
plus fixe sur le rcepteur, qui peut revenir l'tat ferm.
- mme si l'Ach reste fixe sur le rcepteur, le canal se referme
spontanment ("tat dsensibilis" ).
Mise en vidence de la dualit d'action de l'actylcholine :
- l'Ach stimule la fibre musculaire strie squelettique, mais inhibe la fibre cardiaque Deux types de rcepteurs
- la nicotine est un agoniste de l'Ach (facilite son action) sur la fibre strie, mais n'a pas
d'effet sur la fibre cardiaque.
l'actylcholine :
- Par contre, la muscarine est un agoniste de l'Ach pour les fibres cardiaques, et n'a pas nicotinique et
d'effet sur la fibre strie squelettique.
=> il existe (au moins) deux types de rcepteurs. muscarinique
cellules musculaires
cellules musculaires stries
cardiaques, cellules
lieux squelettiques musculaires lisses
agonistes nicotine muscarine
atropine (en application sur
curare (flches l'oeil, cause la dilatation de
empoisonnes au curare ==> la pupille par relchement
antagonistes paralysie de la proie) des muscles
rcepteur protines G (un
canal ionique seul protomre, 7 hlices
chimiodpendant (5 transmembranaires). Action
type protomres). Action rapide complexe et lente, en
molculaire par ouverture directe de particulier par ouverture
du rcepteur canaux Na+ indirecte de canaux K+
Dans l'ordre d'importance connatre :
- actylcholine, et ses deux types de rcepteurs, nicotinique et muscarinique.
Diversit des
neuromdiateurs
- noradrnaline et autres catcholamines (adrnaline, DOPA, dopamine...):
agissent toujours par des protines G htrotrimriques, grce un
rcepteur 7 hlices transmembranaires. CHOH CH2 NH3
La fixation du messager provoque un changement de conformation du
rcepteur, donc de la protine G, qui devient capable de fixer le GTP au
lieu du GDP sur son protomre . Les protomres se sparent et vont HO
agir sur d'autres molcules...
OH
noradrnaline = norpinphrine
- GABA = acide gamma-amino-butyrique : synapses inhibitrices, qui
empchent la dpolarisation.
NH
- divers acides amins tels que l'acide glutamique... 2
(ext)
protine
(int) G
COOH
CH3
O
CH3 C OH CH2 CH2 N+
CH3
cellule musculaire Ach fix sur le
rcepteur =>
OH
CH3
pntration de
Rsultats de l'hydrolyse :
Na+
- acide actique
- choline
L'actylcholine est dtruite en tant hydrolyse, mais les autres neuromdiateurs sont plutt
recycls .
Par exemple, la noradrnaline est rabsorbe par la cellule nerveuse prsynaptique. Ce
recyclage est inhib par la cocane (la cocane a des effets "sympathico-mimtiques")
Expriences historiques de Sutherland vers 1950
Mise en vidence du rcepteur
Le foie est un effecteur important pour rguler la
glycmie : libration de glucose dans le sang par membranaire pour l'action du
glycognolyse, stockage du glucose sous forme de
glycogne par glycognogense.
glucagon sur les hpatocytes
Le glucagon est une hormone hyperglycmiante libre glucagon
par le pancras (ilts de Langerhans). Cette (en bleu) augmentation de l'activit
hormone agit sur le foie, en provoquant la mesure de l'activit glycogne-
phosphorolyse du glycogne par l'enzyme phosphorylase par
glycogne-phosphorylase (enzyme cytosolique) : phosphorylase l'addition de glucagon :
glycogne c'est normal
glycognen + (P)i ---> glycognen-1 + glucose 1(P) phosphorylase
(en rouge) glucagon
(en bleu) pas
d'augmentation,
mesure de l'activit
alors que
n
go
phosphorylase l'enzyme y est
nt gon
a
uc
physiquement
ea ca
gl
ag lu
de
rn g
s u de
n
yla la
tio
au ition
se
or nt
di
ph tie
ad
os on
ad
ph i c
qu
ce
nt
cellules de l'activit
at
phosphorylase
io
foie phosphorylase
n
remlange
Conclusion :
avec le culot Il y a dans les membranes quelque
chose d'indispensable l'action de
l'hormone (glucagon) sur la cellule-
cible (hpatocyte).
Le rcepteur de l'hormone est sur la
membrane plasmique, et envoie un
second messager vers le cytosol,
o est l'enzyme qui va tre active.
carbone Adnine
5'
CH2 O
HC CH Formation et destruction de l'AMPc
O
O cycle ribose (P) O CH2 Adnine CH2 O Adnine
O normal
O O O CH2 O Adnine
CH CH (P)
(P) (P)
P
OH O O
O- O
carbone 3' (P) adnylate cyclase phosphodiestrase
cycle form par la liaison (enzyme
phosphodiester (entre membranaire)
structure de l'AMPc
5' et 3')
L'AMP cyclique est une molcule "tordue" : l'nergie pour
faire la liaison phosphodiester provient de l'hydrolyse
de l'ATP, et cette liaison phosphodiester peut se
couper spontanment.
Le glucagon se fixe sur son rcepteur, et
en change la conformation, ce qui
change la conformation de la protine
G, dont la sous-unit devient capable
glucagon de fixer le GTP au lieu du GDP.
Le protomre se dtache, et va activer
l'adnylate-cyclase, qui transforme C'est l'AMPc qui va agir l'intrieur de la
l'ATP en AMPc, cellule, en activant ou en inactivant des
(ext) enzymes cellulaires (c'est un effecteur
allostrique de ces enzymes).
IP3, soluble,
HO (P) agissant comme 2e messager HO (P) IP3 = inositol
C C C C triphosphate
(P)
(P)
C HO C C HO C
(P) (P)
CH2
OH OH
acide gras -O-CH
OH
(int)
partie intracellulaire
avec activit
enzymatique ==>
phophorylation de
COOH protines
membranaires ou
cytosoliques
Structure gnrale d'un rcepteur-enzyme : une seule
hlice transmembranaire
R Zn2+ Zn2+
R
protines
rgulatrice
rcepteur dimris s
activ "doigt zinc" : replis de protine,
dtaches
avec des CYS lis des ions
Zn2+ : reconnaissance de l'ADN