Identificacin de Flavonoides

MARCO TERICO

Los flavonoides son compuestos de bajo peso molecular que comparten un

esqueleto comn de difenilpiranos (C6-C3-C6), compuesto por dos anillos de fenilos
(A y B) ligados a travs de un anillo C de pirano (heterocclico). Los tomos de
carbono en los anillos C y A se numeran del 2 al 8, y los del anillo B desde el 2' al
6'12 (figura 1). La actividad de los flavonoides como antioxidantes depende de las
propiedades redox de sus grupos hidroxifenlicos y de la relacin estructural entre
las diferentes partes de la estructura qumica. Esta estructura bsica permite una
multitud de patrones de sustitucin y variaciones en el anillo C. En funcin de sus
caractersticas estructurales se pueden clasificar en:
Flavanos, como la catequina, con un grupo -OH en posicin 3 del anillo C.
Flavonoles, representados por la quercitina, que posee un grupo carbonilo en
posicin 4 y un grupo -OH en posicin 3 del anillo C.
Flavonas, como la diosmetina, que poseen un grupo carbonilo en posicin 4
del anillo C y carecen del grupo hidroxilo en posicin C3.
Antocianidinas, que tienen unido el grupo -OH en posicin 3 pero adems
poseen un doble enlace entre los carbonos 3 y 4 del anillo C.

Tres caractersticas estructurales son importantes para su funcin: a) La presencia

en el anillo B de la estructura catecol u O-dihidroxi; b) La presencia de un doble
enlace en posicin 2,3; c) La presencia de grupos hidroxilo en posicin 3 y 5[1].

Figura 1. Flavonoides. Estructura bsica y tipos

La Calendula officinalis Lin., familia de las Compuestas, es una hierba anual ms o

menos pelosa, de 30 a 60 cm de altura; hojas simples, alternas, algo gruesas, de
oblongas a obovadas, enteras o diminutas y remotamente denticuladas; cabezuelas
solitarias en pednculos robustos, vistosos de 3,75 a 5 cm de dimetro; los radios
planos, extendidos de color amarillo blanquecino hasta anaranjado subido, que se
cierran por la noche; a veces la planta es prolifera desde el involucro, y porta varias
cabezuelas pedunculadas en un crculo. Las flores de Calndula presentan un
amplio espectro de tipos de compuestos qumicos, lo cual est en concordancia con
la diversidad de acciones farmacolgicas que presenta la planta. Entre los
compuestos ms investigados dado su inters farmacolgico estn los carotenoides
y los flavonoides. En relacin con los flavonoides se plantea un contenido de 0,88 y
0,33 % de flavonoides totales en las flores liguladas y receptculos respectivamente,
y de los compuestos identificados se encuentran isorhamnetina 3-0 glicsido,
isorhamnetina, rutinsido, isorhamnetina neohesperidsido, quercetina glucsido,
calendoflosido, calendoflavosido, calendoflavobiosido, narcisina, isoquercetina,
quercetina, rutsido y kaempferol, entre otros[2].

Hygrophila tyttha (Acanthaceae) fines ansiolticos y parte de rituales mgicos se

utiliza popularmente en Colombia. Uno de los estudios que se han hecho a esta
especie demostr que: el anlisis fitoqumico preliminar aplicado al extracto
etanlico permiti identificar mediante ensayos cualitativos, los grupos de
metabolitos presentes en la especie. La presencia de stos se confirm realizando
cromatografas en capa delgada. Dentro de estos metabolitos se destacan:
cumarinas, flavonoides, esteroides y/o terpenos y saponinas. Con el fraccionamiento
fitoqumico se obtuvieron 4 fracciones de diferente polaridad: acuosa, clorofrmica,
metanlica y hexnica[3].

METODOLOGA
 Figura 2. Procedimiento para extraccin de flavonoides.

RESULTADOS

MUESTRA RESULTADO PRUEBAS DE TUBO

Calndula - Acetato de Etilo

Calndula - n- Butanol

Amansa Guapos - Acetato de Etilo

Amansa Guapos - n-Butanol

Tabla 1. Resultados de las pruebas de tubo aplicadas a muestras de extracto de

Calndula y amansa guapos
Los nmeros bajo los tubos indican el tipo de caracterizacin de flavonoides que se
realiz, siendo estos: 1) Patrn o blanco; 2) ensayo del cloruro frrico; 3) ensayo de
Magnesio-cido Clorhdrico; 4) ensayo para leucoantocianidinas.
 Figura 3. Resultado de la placa cromatogrfica
Fase estacionaria: Slica Gel
Fase mvil: acetato - cido actico - cido frmico - agua (100:11:11:27)
Revelado con NP-PEG
Rf (patrn catequina): 0.93
Rf (fluorescencia amarilla calndula): 0.58
Rf (fluorescencia amarilla amansa guapos): 0.88
Rf (color amarillo amansa guapos): 0,35

DISCUSIN DE RESULTADOS

De la Tabla 1 se puede decir que se observan mejores resultados en los tubos que
contienen n-Butanol, es decir, al realizar la segunda extraccin con este solvente se
separaron mejor los compuestos de inters (flavonoides), puesto que las fases orgnicas de
las muestras de Calndula y amansa guapos correspondientes a la primera extraccin
hecha con acetato de etilo da resultados un poco confusos, esto debido a que el n-butanol
es ms polar que el acetato de etilo.

Con respecto a la caracterizacin de flavonoides para el extracto de Calndula se puede

decir que:
el ensayo de cloruro frrico arroja un tono verde (bastante oscuro) lo que indica que
esta especie contiene algn porcentaje de compuestos fenlicos.
en el ensayo de magnesio-cido clorhdrico se observan mejores resultados en los
tubos que contienen la fase orgnica extrada con n-butanol (dando una coloracin
naranja o rojiza) comparada con la de acetato de etilo (primera extraccin dando un
tono marrn oscuro). Esto significa que la muestra de Calndula contiene
compuestos (gama) benzopironas.
en el ensayo de leucocianidinas se observa un tono marrn oscuro para la primera
extraccin correspondiente a la hecha con acetato de etilo y un tono ms claro algo
rojizo para la hecha con n-butanol lo que significa que esta especie contiene dichos
un algn porcentaje de estos compuestos.
Con respecto a la caracterizacin de flavonoides para el extracto de amansa guapos se
puede decir que en general las pruebas de tubo realizadas dieron positivas, aunque los
resultados se observan mejor en aquellos que posean la fase orgnica de la primera
extraccin porque en los otros se observaban unas coloraciones totalmente oscuras que
eran posibles de reconocer slo al contraponerlas a la luz.

Lo que pudimos comparar con los artculos es que los flavonoides que tiene la calndula
son diferentes a los de la amansa guapos, la calndula cuenta con isorhamnetina 3-0
glicsido, isorhamnetina, rutinsido, isorhamnetina neohesperidsido, quercetina glucsido,
calendoflosido, calendoflavosido, calendoflavobiosido, narcisina, isoquercetina, quercetina,
rutsido y kaempferol, mientras que en el amansa guapos se encuentra quercetina, rutina,
luteolin 7-O--D-glucopiransido, luteolin 7-O--D-glucurnido y tienen algunos
compuestos en comn como quercetina, isoquercetina y rutsido [4]. La myricetina es un
flavonoide que tiene ramnosa en R1 de C3 y un grupo hidroxilo en R2 de C5 y el luteolin
tiene glucopiranosa y glucurnido es decir se oxido esa glucosa del luteolin, estos 2
compuestos el luteolin y la myricetina probablemente son los responsables de que en la
cromatografa en el amansa guapos se obtuvieron factores de retencin ms altos que los
de calndula ya que estos compuestos como tienen azcares son ms polares y adems
como la fase mvil es acetato - cido actico - cido frmico - agua (100:11:11:27) que es
una fase polar por el agua y los cidos van a arrastrar a los compuestos ms polares y por
eso los flavonoides de la calndula no tienen un Rf tan alto como el de amansa
guapos.apenas 0.58 mientras en amansa guapos 0.88 casi igual al del patrn que es
catequina un polifenol y dio un Rf de 0.93 pero como podemos ver en la placa este da una
coloracin anaranjada mientras los dems no por esto sabemos que no es el mismo
compuesto, los flavonoides presentan fluorescencia de color amarilla en longitud de onda
UV de 365.

CONCLUSIONES

Las especies de calndula (Calendula officinalis) y Amansa Guapos

(Hygrophila tyttha) contienen flavonoides
La Hygrophila tyttha tiene flavonoides ms polares que los de Calendula
officinalis
La Hygrophila tyttha dio positivo para todos los ensayos esto quiere decir que
hay flavonoides de tipo leucoantocianidinas y compuestos fenlicos.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Culebras, J. Gonzlez, J. Martnez, S. Tun, M. J. Los flavonoides: propiedades y

acciones antioxidantes. Nutricin Hospitalaria. (2002). Pp: 272-273.
2. Lastra, H. Piquet, R. CALENDULA OFFICINALIS. Revista Cubana Farm. 1999;33(3).
Pgina: 191.
3. Sandra Y. Ariza, Javier Rincn y Mario F. Guerrero. Efectos sobre el sistema
nervioso central del extracto etanlico y fracciones de Hygrophila tyttha. Revista
Colombiana de Ciencias Qumico - Farmacuticas. Junio, 2006.
4. Chin-Wen Ho , Rong-Dih Lin , Tzong-Huei Lee , Chien-Hung Lin , Chi-Luan Wen ,
Yu-Ting Tseng and Mei-Hsien Lee, Chemical and pharmacological investigation of
micropropagated Hygrophila pogonocalyx produced from leaf explants, Ho et al.
Botanical Studies 2013, 54:51
5. Enrique Aguilar F. Pablo Bonilla R, 15 ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE E
INMUNOLGICA DE FLAVONOIDES AISLADOS DE HOJAS DE Smallanthus
sonchifolius (YACN)