Ingrid Denisse Salavarria Aguirre Grupo 7 - V Semestre Gentica: Dr.

Olando Xavier Gomez

Ingrid Denisse Salavarria Aguirre Grupo 7 - V Semestre Gentica: Dr. Olando Xavier Gomez

Resumen
Los flavivirus y alfavirus son familias de virus causantes de enfermedades en humanos
que transmiten por vectores como el mosquito. Dentro de los flavivirus se encuentran el
virus del dengue, fiebre amarilla, entre otros. Dentro de los alfavirus podemos mencionar
el virus chikungunya. Aunque existen ms virus dentro de estas familias, lo nombrados
anteriormente son de importancia para Sudamrica.
La confirmacin de estas familias de virus se hace mediante laboratorio, los cuales han
desarrollarlo tcnicas como la transcripcin reversa del ARN seguido de reaccin en
cadena de la polimerasa (RT-PCR) para amplificar secuencias de nucletidos con
sensibilidad y especificidad elevada, sin embargo, estos estudios requieren de tcnicas
laboriosas y costosas.
Lo que proponen los autores es el uso de tecnologa de ADN recombinante para clonar
secuencias especficas del genoma de diferentes agentes virales. En este artculo se
demuestra la clonacin de secuencias de alfavirus CHIKV y los flavivirus zika, DENV-
1, DENV-2, DENV-3 y DENV-4 con el fin de sugerir el uso de estos clones como
controles positivos en tcnicas moleculares, lo que reducira el uso de sistemas de
multiplicacin viral evitando poner en riesgo al personal que realiza la prueba.
El vector de clonacin fue el plsmido comercial pGEM-T (sistema conveniente para
clonar productos de PCR) y para la multiplicacin y mantenimiento del ADN plasmdico
usaron clulas de Escherichia coli. Extrajeron secuencias especficas de los virus para
luego amplificarlos y unirlos al plasmido mediante ligasa, este plasmido fue introducido
a la E. coli para su multiplicacin, el siguiente paso fue la identificacin de la colonia que
tena el ADN recombinante para finalmente extraer el ADN plasmdico los cuales se
amplificaren mediante PCR.

Opinin
El desarrollo de nuevas tcnicas para la identificacin de enfermedades infecciosas en
especial las transmitidos por virus es un campo muy amplio donde est involucrada la
gentica. Identificar si una persona est infectada atribuye un riesgo para el personal del
laboratorio ya que se usan procedimientos donde se manipula al virus con toda su
patogenia y virulencia y donde el ms mnimo error puede provocar el contagio del
personal, recordemos tambin que existen virus mortales. Sin embargo, actualmente se
estn usando tcnicas genticas para la identificacin de virus, es decir, la manipulacin
de lugares especficos dentro del genoma de estos microorganismos que nos permitan
diferenciarlos y usarlos como mtodos diagnsticos y para poder usar estos fragmentos
es necesario multiplicarlo, el mtodo utilizado en este artculo fue la clonacin.
El articulo tambin propone que todos los laboratorios deberan crear su propia base de
datos con ADNc de virus, debido a que los virus pueden variar de acuerdo con la zona y
regin, recordemos que son microorganismo que estn en constante mutacin, y la
realizacin de estas tcnicas reducira costos y tiempo, pudiendo darle ms accesibilidad
y ayudando al personal de salud para actuar a tiempo frente a un virus especifico.
Ingrid Denisse Salavarria Aguirre Grupo 7 - V Semestre Gentica: Dr. Olando Xavier Gomez

Bibliografa
Dara Camacho1, a. J., Franco, L., Comach, G., & Ferrer, E. (Junio de 2016). Clonacin de
secuencias de alfavirus y flavivirus para su uso como controles positivos en el
diagnstico molecular. Obtenido de Scielo Peru:
http://www.scielo.org.pe/scielo.php?pid=S1726-
46342016000200011&script=sci_arttext&tlng=en

Promega. (2017). pGEM-T Vector Systems. Obtenido de Promega :

https://worldwide.promega.com/products/pcr/pcr-cloning/pgem-t-vector-
systems/?catNum=A3600