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Separacin y Procesos
Biotecnolgicos
Cules son las etapas en las
cuales hay una Separacin
Slido-Lquido?
Caldo de Fermentacin
Con Clulas Sin Clulas
Clulas inmovilizadas
Clulas retenidas
Separacin de Clulas
Clulas
Rompimiento Clulas
Separacin Material
Intracelular (Desechos)
Sobrenadante
Precipitacin cidos
Nucleicos, Proteasas
Tratamiento de cuerpos
incluidos
Concentracin
Purificacin Alta
Resolucin
Permite
Refinamiento Altos niveles de pureza
Estabilidad del producto
Caldo de Fermentacin
Con Clulas Sin Clulas
Clulas inmovilizadas
Clulas retenidas
Separacin de Clulas
Clulas
Rompimiento Clulas
Separacin Material
Intracelular (Desechos)
Sobrenadante
Precipitacin cidos
Nucleicos, Proteasas
Tratamiento de cuerpos
incluidos
Concentracin
Purificacin Alta
Resolucin
Permite
Refinamiento Altos niveles de pureza
Estabilidad del producto
Procesos de Separaciones Slido-Lquido
Separacin de clulas
Separacin de desechos celulares
Recuperacin de cuerpos incluidos Qu son?
Concentracin
Procesos de Separaciones Slido-Lquido
Diferentes escalas
Caractersticas de Procesamiento
Tipo de Mtodo de Capacidad Flujo de la Fuerza g
Centrifuga descarga de lavado de Alimentacin Mxima
slidos torta L/min
Tubular Intermitente Ninguna 8 - 100 12,000 - 16,000
Cmara Mltiple Intermitente Ninguna 1.5 - 335 5,000 - 9,000
Discos y boquillas Continuo Moderada 3,8 - 3,780 5,000 - 8,500
Discos Tazn abierto Intermitente Ninguna 3,8 - 1,500 5,000 - 7,000
Discos y boquillas Intermitente Ninguna 3,8 - 570 14,000 - 16,000
Discos Intermitentes Intermitente Ninguna 0,38 - 1,500 5,000 - 8,000
Tazn Slido Intermitente Ninguna 1,5 - 250 500 - 800
Decantadora Continuo Moderada 3, 8 - 1,800 2,000 - 3,200
Caractersticas de la materia celular
Tipo de Clulas Tamao Densidad Reistencia Proceso Tipico de
( m m) (g/ m3) al esfuerzo de Separacin
Corte
Fuerza de Flotacin G
FD 3 d m v
E
(2)
G
Donde
m= viscosidad del medio
v = velocidad de la partcula
Debido a estas 2 fuerzas, cuando el sistema alcance el equilibrio,
la partcula se mover a una velocidad constante, igual a la
velocidad terminal cuando:
FB = FD (3)
d v
Estas condiciones se cumplen cuando: Re <1
m
Casi siempre se cumple en sistemas biolgicos
d3
FB ( s ) a FD 3 d m v
6
A partir de (3) se puede determinar la velocidad
terminal.
d2
v ( s ) a (4)
18m
Si es campo gravitacional vg
d2
( s ). g (5)
(sedimentacin) 18m
ds
vg
distancia que debe recorrer (5a)
ts tiempo que demora en sedimentar
Ejemplo 1 Sedimentacin de clulas inmovilizadas
vr g
d2
(s ) 2 r (6)
18 m
Donde
r : radio desde el centro de la centrfuga a la posicin donde se encuentra la
partcula
: velocidad angular de rotacin
n: revoluciones por minuto
2 n rad
( )
60 s
2 .r dr
g vg .
g dt
Factor G
2
.r
G g
vg g
Generalmente las condiciones de operacin de definen en funcin de los
G que se deben aplicar.
ECUACION DE DISEO
dr d2 r 2
vr g ( s ) r vg (
2
) (10)
dt 18 m g
R3 2 t
dr
R r vg ( g )o dt (11)
1
Integrando
R3 2 (12)
ln vg ( ) t
R1 g
Ejemplo 2 Centrifugacin discontinua de Clulas de levadura
CENTRIFUGA TUBULAR
Movimiento en Direccin z
dz Q Q (7)
vz
dt A ( R32 R12 )
Q: Flujo de alimentacin
dr d 2 r 2
vr g ( s ) r 2 vg ( ) (8)
dt 18 m g
Q: Flujo de alimentacin
El movimiento combinado
dr
dr dt g r 2 ( Ro2 R12 )
vg ( ) (9)
dz dz vz g Q
dt
Dependiendo de los valores de vg y Q depender la posicin de la
partcula en la centrfuga.
Se puede calcular un flujo ptimo para que una partcula que ingresa
por el centro, slo se pegue a la pared al final. Tal que:
z=L
r = R3
2 L ( R32 R12 )
Q vg
g ln
R3 (10)
R1
Simplificando
( R32 R12 ) R3 + R1
2R donde R
R3 2
ln
R1
(17)
2 L R 2 2
Q vg vg TubuLar
g
CENTRIFUGA DE DISCOS
2 N D 2 ( R 33 R 31) cot
Q vg vg Discos
3* g (18)
ND : Nmero de discos.
Belter P., Cussler E.L. and Hu Wei Shou "Bioseparations : Dowstream Processing for
Biotechnology":, John Wiley and Sons , 1988.
Ejemplo 3 Centrifuga continua de Disco para Chlorella
Clulas de Chlorella han sido cultivadas en un estanque abierto, las
clulas sern cosechadas hacindolas pasar a travs de una
centrfuga de discos.
La velocidad de sedimentacin de estas clulas ha sido medida y es
de 1.07 x 10-4 cm/seg.
La centrfuga tiene 80 discos con un ngulo de 40, el radio externo es
15,7 cm y el dimetro interno de 6 cm.
a) Mtodos Cualitativos
b) Mtodos Cuantitativos
a) Mtodos cualitativo (Estimacin Gruesa)
2 Ro (19)
G t t
g
Slido Gt
[sec]
Clulas eucariontes 0.3 10-6
Cloroplastos 0.3 10-6
Desechos clulas eucariotes 2.0 10-6
Ncleo de clula 2.0 10-6
Protenas precipitadas 9.0 10-6
Bacterias 18 10-6
Mitocondrias 18 10-6
Desechos bacterias 54 10-6
Lisosomas 1100 10-6
Ribosomas 1100 10-6
Polisomas 1100 10-6
Para cada tipo de centrfuga se define segn una ecuacin del tipo:
Q Q
(21)
Tipo1 Tipo 2
Eficiencia, , para cada tipo de centrfuga, es:
N de discos 33 50 66
Radio externo [cm] 35 35 35
Radio interno [cm] 15 15 15
ngulo [] 51 51 51
Velocidad mxima 5000 6500 5000
Rotacin [r.p.m.]
Potencia
C: precio compra
I: indice de costos
t1: base de costeo a tiempo t1
t2: tiempo