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MINISTERIO DE SALUD
SUBDEPARTAMENTO DE SALUD VALDIVIA
HOSPITAL BASE VALDIVIA
Subdireccin Ejecutiva Mdica
Depto. de Apoyo Clnico y Teraputico
Subdepartamento de Laboratorio Central
MANUAL
TOMA DE MUESTRAS
LABORATORIO CENTRAL
AO 2008
INDICE
Pgina
I.- INTRODUCCIN 3
II.- OBJETIVOS 3
III.- CONSIDERACIONES GENERALES 4
IV.- TOMA DE MUESTRA SECCIN HEMATOLOGA 7
V.- TOMA DE MUESTRA INMUNOQUIMICA Y HORMONAS 8
VI.- TOMA DE MUESTRA PARA DETERM. CON TEC. INMUNOFLUORESCENCIA 11
VII.- TOMA DE MUESTRA SECCIN CITOQUIMICOS 12
VIII.- TOMA DE MUESTRA SECCIN PARASITOLOGA 14
IX.- TOMA DE MUESTRA SECCIN DE V.D.R.L. 17
X.- TOMA DE MUESTRA SECCIN ORINA 19
XI.- TOMA DE MUESTRA SECCIN KOCH 20
XII.- TOMA DE MUESTRA Y CONDICIONES ESPECIALES SECCIN 21
BACTERIOLOGIA
*UROCULTIVO 22
*CULTIVOS L.C.R, CAVIDADES SEROSAS, LIQUIDO PLEURAL 27
*MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR 29
*MUESTRAS OCULARES 30
*SECRECIN TICA. 30
*MUESTRAS DE SENOS PARANASALES 31
*MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR 31
*CULTIVO CUANTITATIVO DE ASPIRADO ENDOTRAQUEAL 32
*INFECCIN DE PIEL Y TEJIDO SUBCUTANEO 33
*CULTIVO CUANTITATIVO EN QUEMADOS 36
*COPROCULTIVO 38
*LEUCOCITOS FECALES - ROTAVIRUS 38
*REACCIN AGLUTINACIN 38
*NORMA DE INDICACIN Y TOMA DE MUESTRA PARA HEMOCULTIVOS 39
*DIAGNOSTICO DE INFECCIN RELACIONADA CON EL CATETER 42
VENOSO CENTRAL
2
I. INTRODUCCIN
Los resultados de los procedimientos bioanalticos que realiza el equipo de trabajo del Laboratorio
Central, deben ser de calidad y para ello es importante todo el proceso previo a la fase analtica.
Es necesario garantizar una buena calidad en la fase preanaltica que incluye una adecuada:
Todo el personal que participa en los diferentes procesos referidos a esta fase tiene que disponer de la
capacitacin, habilidades y experiencia necesarias para ejecutar las actividades requeridas.
Una muestra mal tomada da resultados intiles que confunden al profesional que la solicita y
puede n llegar a constituir un riesgo para el paciente.
II. OBJETIVOS
El presente documento se aplica a las muestras de diagnstico que se envan desde el lugar de
obtencin de muestras hasta el Laboratorio Central de Hospital Base Valdivia, y su objetivo es:
o Preservar la integridad de las muestras con la finalidad de mantener la estabilidad de las propiedades
biolgicas que la componen.
o Exponer una serie de requisitos en relacin a preparacin del paciente, toma de muestra y criterios de
rechazo.
o Referir los documentos que deben ser enviados con las muestras.
o Cumplir las condiciones y requisitos de seguridad para minimizar el riesgo que puede implicar en el
personal que transporta las muestras.
o Conseguir que los resultados que puedan obtenerse de las determinaciones realizadas sobre cada una
de las propiedades biolgicas sean iguales o tan prximo posibles a su valor verdadero.
3
III. CONSIDERACIONES GENERALES
INDICACION DE UN EXAMEN
TRAZABILIDAD DE LA MUESTRA
En la actualidad el Laboratorio Central cuenta con un sistema de cdigo de barra para la identificacin
de la muestra en las siguientes secciones
o Hematologa y Coagulacin,
o Qumica sangunea
o Inmunologia
o Qumica orina
o Virologa
o Examen orina
o V.D.R.L.
o Citoqumicos
Importante: La identificacin de la muestra debe coincidir la solicitud por lo tanto los datos del paciente y el
tipo de muestra deben ser corresponder.
CONDICIONES BIOSEGURIDAD
PRECAUCIONES ESTANDAR
4
La preparacin del paciente se realiza segn tipo de muestra y examen solicitado (ver en manual segn
seccin correspondiente).
MUESTRAS DE SANGRE
5
* ROJO SIN SUERO QUIMICA - INMUNO
ANTICOAGU ENDOCRINO.
LANTE PRUEBAS
SEROLOGICAS
Contiene gel
ROJO C/ SIN SUERO QUIMICA - INMUNO separador suero,
AMARILLO ANTICOAGU ENDOCRINO. elementos
LANTE PRUEBAS celulares.
SEROLOGICAS
* Solo estos son utilizados en Laboratorio Central.
FACTORES QUE INCIDEN EN EL RESULTADO DE UN EXAMEN DE LABORATORIO
EN LA FASE PREANALITICA
6
IV.- TOMA DE MUESTRA SECCIN HEMATOLOGIA
Tubo tapa Lila: 3 ml. de sangre total con EDTA como anticoagulante.
Inmediatamente despus de la toma de la muestra, la sangre debe mezclarse muy bien con el
anticoagulante invirtiendo el tubo por lo menos 10 veces pues esto evita la coagulacin parcial o total.
La muestra debe ser tomada en ayuno estricto y llevada inmediatamente al Laboratorio. El volumen
debe ser exacto hasta donde esta indicada la marca en el tubo.
7
Punciones con scalp, deben solicitarse adaptadores para venoject en el Laboratorio, es importante
comenzar por los tubos con anticoagulante y agitarlos de inmediato.
Datos generales
El paciente debe estar en ayunas (mnimo 12 hrs.), a excepcin de los casos en que el mdico indique
en la solicitud de examen, una situacin diferente.
El traslado de las muestras al Laboratorio, debe hacerse inmediatamente una vez tomadas (las clulas
sanguneas consumen e intercambian algunas sustancias presentes en la sangre, alterando su concentracin).
I.- Para las siguientes determinaciones: Tomar 5 ml. de sangre sin anticoagulante. (Tubo venoject tapa roja,
de 5 ml.)
8
Glicemia. T4 Libre. C3.
Uremia. TSH. C4.
Creatinina. ATPO (Ac. Antitiroideo) PCR.
Colesterol total ATG (Ac. Antitiroideo) Factor Reumatoideo.
Colesterol HDL LH. Titulo ASO.
Triglicridos. FSH. Eosinfilos Nasales.
Protenas totales. Progesterona. ANA.
Albumina. Prolactina. ENA.
Ac. rico. Parathormona. DNA.
Calcio. Estradiol. Anticuerpo Anticardiolipina
Fsforo. Cortisol. ACA.
Bilirrubina. Insulina basal. 17-OH Progestorona.
G.O.T. Insulina Post prandial. Electroforesis de Protenas.
G.P.T. BHCG. Monotest.
Fosfatasas alcalinas. Alfa fetoprotenas. Electroforesis de Hb.
LDH. PSA Total.
Amilasa. CEA.
(*) Amonio (autorizado solo a
CK Total. Ca 125.
algunos Servicios Clnicos,
CK-MB. Ca 15-3.
coordinar con el Laboratorio ).
Eletrolticos Na K Cl. Ca 19-9.
Ltio. Ferritina.
Amonio (*) B2 Microglobulina.
Lactato. Digoxina.
Hb Glicosilada A1c. Fenitona.
pH y Gases Arteriales. Carbamazepina.
pH y Gases Venosos. Fenobarbital.
Ph Liq. Pleural. Ac. Valproico.
Test de Tol. de Glucosa. Teofilina.
Perfil Lipdico. Methotrexato.
Clearence de creatinina. IgG.
T3. IgA.
T4. IgM.
IgE.
Nota:
Se necesita:
3 ml. de sangre sin anticoagulante. (tubo tapa roja)
Orina de 24 hrs. (hospitalizados) enviar alcuota 30 ml. indicando diuresis.
Datos de peso y talla del paciente.
1.- Comenzar a las 7 de la maana del primer da; eliminando toda la orina de la primera miccin de la
maana.
2.- Luego juntar toda la orina del da y la noche, incluyendo la primera orina del da siguiente (la de las 07:00
hrs. de la maana), en un envase limpio.
3.- Durante la recoleccin, dejar los envases con las muestras en un sitio fresco.
4.- Traer toda la orina al Laboratorio en envases limpios.
Llamar al anexo 633311 (seccin inmunoqumica) para coordinar la realizacin de estos exmenes.
Lactato: Tomar una muestra de sangre por puncin venosa, en un tubo con fluoruro de sodio (tubo tapa gris)
pedir al Laboratorio.
Una vez tomada la muestra enviar de inmediato al Laboratorio, indicando en la solicitud de examen, la
hora de extraccin de la muestra. Transportar la muestra al laboratorio en hielo.
Amonio: Extraer la muestra de sangre por puncin venosa con ligadura solo en la puncin y soltar
inmediatamente (vena sin estasis) en un tubo con EDTA (tubo tapa lila). La hemlisis y el traumatismo vascular
interfieren en el resultado de la determinacin.
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V.- OTRAS DETERMINACIONES EN ORINA:
o Creatinina o Fsforo
o Calcio o Amilasa
o Nitrgeno Ureico o cido rico
Enviar una alcuota (aprox. 30 ml.) de la muestra de orina de 24 hrs., con la diuresis anotada en la
solicitud de examen.
Preparacin del paciente : El paciente debe tener un ayuno de 6 horas como mnimo antes de tomar la
muestra.
PREPARACION DEL PACIENTE: El paciente debe tener al menos 4 horas de ayuno, antes de tomar la
muestra.
OBTENCION DE LA MUESTRA: Colectar mnimo 4 ml de sangre sin anticoagulante (tubo de tapa roja)
por puncin venosa.
Si las muestras provienen de localidades lejanas al Laboratorio Central, no se debe enviar sangre total.
En estos casos se separa el suero por centrifugacin y se enva en un tubo con cierre hermtico al Laboratorio.
Si no se enva de inmediato, se debe conservar el suero congelado (-20 C.) hasta su envo al
Laboratorio.
La solicitud mdica del examen para V.I.H. debe venir con el nombre completo del paciente, tal
como lo solicita el formulario y se debe adjuntar OBLIGATORIAMENTE A LA PLANILLA para deteccin
de V.I.H.
La planilla, en triplicado debe traer las iniciales y obligatoriamente el RUN, la direccin, fecha de
nacimiento y claramente detallado el grupo de pesquisa del paciente, sobre todo si es embarazada. Adems
debe indicar nombre del Hospital o Consultorio que enva los exmenes y la identificacin de quien toma las
muestras y completa la planilla.
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La muestra que es sangre total sin anticoagulante debe venir bien rotulada: el rtulo de los tubos de
muestra debe traer el nombre y dos apellidos del paciente o si viene con iniciales debe traer adems el
RUN del paciente, para evitar duplicidad de iniciales.
Las muestras deben ser enviadas de inmediato al Laboratorio de lo contrario se debe extraer el suero
y congelarlo a -20C hasta su envo.
Las muestras as obtenidas, se deben colocar en una gradilla para tubos dentro de un recipiente a
prueba de filtraciones, y enviado de inmediato al Laboratorio.
TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS: Colocar las muestras en un recipiente secundario (con gradillas de
tubos) a prueba de filtraciones y termo refrigerado plstico y enviar de inmediato al Laboratorio.
1.-LQUIDO AMNITICO:
La muestra debe ser tomada por el mdico y vaciada en dos tubos estriles tapados hermticamente.
En lo posible, no debe estar contaminada con sangre ni meconio y debe venir protegida de la luz.
Enviar de inmediato al Laboratorio, con los datos del paciente, nombre y dos apellidos en una
gradilla porta tubos, la cual debe estar dentro de una caja termo aislante.
Enviar rpidamente al Laboratorio, rotulada con los datos del paciente, nombres y dos apellidos
en gradilla para tubos, la cual debe estar dentro de una caja termo aislante.
Se debe enviar de inmediato al laboratorio, rotulada con los nombres y dos apellidos del paciente, junto a
la solicitud de examen.
4.- CAROTENOS:
Carotinemia Basal:
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El paciente debe estar en ayunas.
Tomar una muestra de sangre, en tubo sin anticoagulante (mnimo 5 ml) el cual debe venir protegido de la
luz.
Enviar rpidamente al laboratorio, rotulado con los datos del paciente, nombre y dos apellidos,
junto a la solicitud de examen.
Instrucciones:
La muestra debe venir rotulada con los nombres y dos apellidos del paciente adjuntando la solicitud de
examen.
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1.- COPROPARASITOLGICO SERIADO:
INSTRUCCIONES:
a) Requisitos:
Muestra de deposicin debe obtenerse en un recipiente limpio, evitando el contacto con orina o sangre,
con la paletita provista en la tapa del frasco.
Si es de un lactante, obtenerla de la parte central del paal, recin emitida.
Tomar 3 muestras, da por medio, en el mismo frasco. Tapar hermticamente.
El volumen mximo de deposicin debe ser aproximadamente igual a la cantidad de fijador que contiene
el frasco.
El paciente no debe haber ingerido en los ltimos 10 das: antibiticos, quimioterpicos, purgantes oleosos,
antiparasitarios, carbn ni bario.
Conservacin: Las muestras fijadas pueden ser almacenadas en un lugar fresco y si es posible en refrigerador
a 4 C, por no ms de 1 semana antes de enviarlas al Laboratorio, previamente rotuladas con los datos del
paciente.
Instrucciones:
Se le entrega al paciente material para recoleccin de muestra, con las instrucciones las cuales debe leer
inmediatamente para aclarar dudas si es necesario.
El paciente debe poner una pequea cantidad de deposicin en las reas indicadas en la tarjeta, durante 3
deposiciones consecutivas, que pueden ser el mismo da o en das seguidos.
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El paciente no debe ingerir carnes ni pescado, 48 hrs. antes de obtener las muestras.
Rotular con los datos del paciente.
Enviar de inmediato, una vez obtenidas las 3 muestras, al Laboratorio.
PREPARACION DEL PACIENTE: El paciente debe tener al menos 4 horas de ayuno antes de tomar la
muestra.
OBTENCION DE LA MUESTRA: Colectar mnimo 4 ml de sangre sin anticoagulante (tubo tapa roja) por
puncin venosa, rotular con nombre y dos apellidos, enviar al Laboratorio.
TRANSPORTE DE LA MUESTRA:
Para transportarlas colocar las muestras en un recipiente secundario (con gradilla de tubos) a
prueba de filtraciones y termo refrigerado de plstico y enviar de inmediato al laboratorio.
LAS MUESTRAS DEBEN LLEGAR SEGN LAS CONDICIONES ANTES SEALADAS,
COMPLETANDO EL FORMULARIO ESPECIFICO PARA LA REALIZACIN DEL EXAMEN.
Las instrucciones son las mismas dadas para la muestra de coproparasitolgico seriado.
La muestra es, secrecin nasofarngea en nios y en el adulto, expectoracin inducida, complementada con
lavado broncoalveolar si la anterior es negativa y el diagnstico es sugerente.
Las muestras deben ser enviadas rpidamente al Laboratorio, rotuladas con los datos del
paciente.
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IX.- TOMA DE MUESTRA SECCIN DE V.D.R.L.
1. OBTENCION DE LA MUESTRA:
I.- Pruebas no treponemicas:
V.D.R.L. en sangre : El paciente debe encontrarse en ayunas o a lo menos 2 horas despus de las comidas,
para evitar sueros quilosos.
Tomar mnimo 3cc de sangre en un frasco sin anticoagulante (tapa roja).
Rotular el frasco con nombre y dos apellidos del paciente.
V.D.R.L. en LCR.: Extraer en forma asptica 1 ml de lquido cefalorraqudeo, mediante puncin lumbar, en
frasco estril. Identificar la muestra con nombre y dos apellidos del paciente.
2. TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS: Al enviar las muestras, se debe adjuntar una planilla en
triplicado que debe contener los siguientes datos:
N RUN.
Nombres y dos apellidos del paciente.
Ficha clnica.
Procedencia y direccin.
Grupo de pesquisa.
Especificar si es 1 o 2 examen o control.
Fecha de coleccin y envo de muestras.
La muestra debe ser enviada de inmediato al Laboratorio, en gradilla porta tubos la cual debe estar
dentro de una caja termo aislante.
Cuando es posible separar el suero, ste debe mantenerse refrigerado hasta su envo al Laboratorio,
destacando sueros quilosos.
Al enviar las muestras para MHA-TP, se debe adjuntar una Solicitud de hemoaglutinacin MHA-TP
que debe contener los siguientes datos:
N RUN.
Nombres y dos apellidos del paciente.
Ficha clnica.
Procedencia.
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Antecedentes serolgicos y clnicos del paciente.
La muestra debe ser enviada de inmediato al Laboratorio, en gradilla porta tubos la cual debe estar
dentro de una caja termo aislante.
Cuando es posible separar el suero de la muestra, este debe mantenerse refrigerado hasta su envo al
Laboratorio, descartando sueros quilosos.
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X.- TOMA DE MUESTRA SECCIN ORINA
ORINA DE 24 HORAS
Para obtener esta muestra debe comenzarse en la maana, la primera orina es descartada, desde ese
momento, todas las orinas emitidas deben ser recolectadas en un envase, en un plazo que comprende 24 hrs.,
o sea hasta la primera orina del da siguiente.
- Amilasuria
- Creatininuria
- Electrolitos
NOTA: Las muestras deben llegar en envase de boca ancha hermtico, rotuladas con nombre completo y
legible, adems, deben llegar en bolsas plsticas separadas de la solicitud de examen.
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Hasta 2 horas puede retrasare el envo hacia el laboratorio, en ese intertanto la muestra debe estar
refrigerada; despus de 4 horas los elementos estructurales en la orina se destruyen y el resultado del
sedimento no ser copia fiel de la realidad del paciente.
1.- EXPECTORACION:
Primera miccin matinal, 2 chorro, mnimo 100 ml. idealmente, frasco estril.
Traer diariamente cada muestra al Laboratorio.
3 muestras en ayunas, en das seguidos, No se utiliza esta muestra para control de tratamiento.
En frasco estril con suero fisiolgico agua destilada; en ningn caso, en fijadores como formalina.
6.- PUS:
21
EN GENERAL: Todo tipo de muestra para estudio bacteriolgico de Koch debe ser protegido de la luz,
en casos indispensables conservadas a 4C y ptimamente derivadas lo antes posible a Laboratorio
Central para su procesamiento.
Obtener una muestra de acuerdo a la localizacin, que permita un ptimo rendimiento del examen
bacteriolgico, libre de contaminacin.
Si la calidad de la muestra es poco adecuada, se producir informacin que es clnicamente intil y causa
potenciales errores en el manejo del paciente.
DESTINADA A:
CONSIDERACIONES GENERALES:
1. Para obtener el mximo rendimiento de los exmenes bacteriolgicos, se debe acortar el tiempo
transcurrido entre toma de muestra y siembra en el laboratorio. En especial cuando se sospecha de
microorganismos lbiles (Ej. Neisseria sp., Haemophylus sp.).
2. La toma de muestra para cultivo bacteriolgico debe ser realizada por personal capacitado , con tcnica
asptica y uso de material estril.
3. La peticin de examen debe ser realizada en el formulario Solicitud de examen microbiolgico, el cual se
debe completar en todos sus puntos.
4. El laboratorio provee de medios de transporte para exmenes que no pueden ser enviados
inmediatamente al laboratorio, los cuales podran ser.
Amies o Stuart: medio de transporte para todo tipo de secreciones tomadas con trula
n Cary Blair: medio de transporte utilizado para coprocultivos.
Los medios de transporte deben mantenerse refrigerados para evitar desecacin, sin embargo se debe
tener la precaucin de mantenerlos a temperatura ambiente al momento de la toma de muestra.
La muestra una vez en el medio de transporte se mantiene a temperatura ambiente, hasta ser enviada al
Laboratorio con un plazo mximo de 72 horas.
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Exmenes cuantitativos no deben ser tomados con medio de transporte.
El tipo de medio de transporte puede variar de acuerdo a la disponibilidad de los proveedores, lo que ser
avisado cada vez en recepcin de muestras.
5. En las muestras que se solicite TINCIN DE GRAM se debe adicionar una muestra en tubo estril sin
medio de transporte.
1. Nombre:
2. RUT:
3. N Ficha:
4. Sexo:
5. Fecha Nacimiento:
6. Servicio:
7. Sala:
8. Tipo de muestra: Debe registrarse el mtodo de obtencin de la muestra
9. Examen solicitado:
10. Diagnstico:
11. Tratamiento Antibitico:
12. Mdico solicitante:
13. Fecha de solicitud:
UROCULTIVO
Muestra: Orina
Obtencin de la muestra:
o Es una etapa fundamental en el procesamiento de los urocultivos ya que la posibilidad de contaminacin
con bacterias de la flora comensal de piel, perin y uretra distal, es muy alta e induce a la generacin de
resultados falsamente positivos.
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Recomendaciones:
o Preferentemente se debe obtener la primera orina de la maana, por tratarse de una muestra ms
concentrada.
o Si esto no es posible el paciente debe abstenerse de orinar dur ante las 3 horas previas a la toma de la
muestra.
o No se debe forzar la ingestin de lquidos previo, ya que esto diluye la orina, pudiendo alterar el recuento
bacteriano.
Existen diferentes mtodos de obtencin de muestra de orina, de acuerdo al tipo de paciente, adulto o
peditrico y al uso o no de catter urinario.
TIPO DE
MUESTRAS
METODOS NO METODOS
INVASORES INVASORES
Paciente Hospitalizado
o Previo a la toma de muestra se debe realizar lavado genital del paciente, con rin limpio, trulas limpias,
guantes de procedimientos y jabn antisptico presentado en dispensador.
o Luego del aseo genital, el paciente debe orinar y en segundo chorro obtener orina directo en frasco de
urocultivo o en rin estril.
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Paciente ambulatorio
25
El frasco debe sujetarse para que no tome
contacto con piernas, vulva o ropa del paciente.
26
Retraer completamente el prepucio (piel
del pene). Limpiar el glande (extremidad
del pene) con jabn neutro.
Eliminar los restos de jabn enjuagndolo
con agua corriente
Orinar desechando el primer chorro de
orina, tras lo cual y sin interrumpir la
miccin se recoger el resto de la orina
en el recipiente estril. Llenar hasta la
mitad.
NO DEBE RECOGER NI LA PRIMERA,
NI LA LTIMA PARTE DEL CHORRO
DE ORINA.
Una vez recogida la muestra de orina ,
tapar el frasco con su tapa
Existe el riesgo de contaminar con la flora perineal, por lo cual se debe realizar aseo genital previo a la
instalacin del recolector.
27
til si resultado es negativo o si se obtiene recuento significativo de una sola cepa
Si el nio no ha orinado en 30 minutos, se debe cambiar nuevamente el recolector, previo a lo cual se
debe realizar aseo genital.
Procedimiento:
Realizar lavado clnico de manos
Abrir la bolsa
Retirar el papel que recubre el adhesivo, teniendo cuidado de no manipular la parte interna.
Fijar la bolsa, pegando los bordes en los labios mayores en el caso de las nias y en la zona de alrededor
del pene en caso de los nios
Cambiar la bolsa cada 30 minutos en caso de que la muestra sea para Urocultivo, volviendo a lavar la
zona.
Colocar nombre al recolector. Colocar dentro de un frasco estril.
Enviar la muestra a Laboratorio.
SITIO DE PUNCION
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Puncin vesical: es el mtodo de referencia para la obtencin de orina a cultivar ya que evita la
contaminacin con flora uretral; sin embargo, se reserva para casos especiales por ser un procedimiento
invasor.
Cateterizacin vesical transitoria: se considera una alternativa a la puncin vesical pero es tambin un
procedimiento invasor y puede generar arrastre retrgrado de microorganismos.
Transporte de la muestra
La orina es un buen medio de cultivo que permite la multiplicacin de los microorganismos incrementando
el recuento bacteriano, por lo que las muestras deben procesarse antes de 2 horas de obtenidas.
Si no es posible lo anterior, debe refrigerarse a 4C hasta 24 horas sin que se altere el recuento
bacteriano.
LQUIDO CEFALORRAQUIDEO
La muestra de LCR debe ser obtenida por un mdico entrenado en la tcnica de puncin lumbar.
Procedimiento:
2.- Realizar antisepsia de la piel segn Norma N 3 (Uso de antispticos y desinfectantes, Comit IIH),
mediante la realizacin de movimientos concntricos que van desde el lugar donde se realiza la puncin hacia
fuera. Esperar tiempo de latencia del antisptico.
4.- Recolectar el LCR. en tres frascos estriles. Utilizar el segundo frasco para el estudio microbiolgico ya
que el primero tiene ms posibilidades de contaminacin.
5.- La cantidad de LCR. afecta directamente la sensibilidad del diagnstico bacteriolgico. En general,
cantidades de 1-3 ml. de LCR para estudio bacteriolgico, son adecuadas.
Transporte:
Se debe realizar a la mayor brevedad posible, en tubos estriles con tapa rosca y/o frasco estril, ya
que la mayora de los microorganismos causantes de meningitis son sensibles a los cambios de temperatura y
desecacin.
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En procesos infecciosos aumenta su volumen y dan lugar al desarrollo de diversos microorganismos.
Toma de muestra:
Estas muestras se obtienen generalmente por puncin percutnea, por lo tanto, se debe realizar una
rigurosa limpieza de la piel y antisepsia de la zona que se va a puncionar, para evitar la contaminacin de la
muestra con flora cutnea y minimizar el riesgo de infeccin del paciente asociado al procedimiento. La
muestra debe ser obtenida por un mdico experimentado en la tcnica y un asistente, ambos vestidos con ropa
estril, guantes y mascarilla.
Transporte de la muestra :
Las muestras deben ser conducidas a la mayor brevedad posible al Laboratorio, a temperatura
ambiente, en frasco estril.
LQUIDO PLEURAL
Toma de muestra:
Debe ser realizada por un mdico entrenado en la tcnica de toracocentesis. La puncin aspirativa
debe realizarse bajo rigurosa tcnica asptica.
Transporte:
SECRECIN FARNGEA:
Toma de Muestra:
a) Cultivo corriente:
1.- Buena iluminacin y exposicin de la faringe del paciente.
2.- Deprimir la lengua con baja lengua.
3.- Frotar la trula contra la pared posterior de la faringe y amgdalas, tocando
cualquier exudado.
4.- Evitar tocar la lengua.
30
b) Cultivo en sospecha de Difteria:
- Tomar dos muestras con trula, utilizando baja lengua, pasndola por el reborde de la pseudo membrana.
Transporte:
SECRECIN NASAL:
Toma de muestra:
Introducir una trula humedecida en solucin salina estril y rotar en el vestbulo de ambas fosas
nasales (tabique y cara interna de aletas nasales).
Transporte:
MUESTRAS OCULARES
Toma de Muestra:
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- Rotar la trula suavemente, para que toda la superficie del algodn se empape de la secrecin purulenta.
Transporte de la muestra:
SECRECIN TICA
Muestra:
Toma de la muestra:
a) Timpanocentesis:
- Antes de tomar la muestra proveniente de odo externo, hacer aseo cuidadoso de la piel de modo de
disminuir las posibilidades de arrastrar bacterias presentes normalmente en esa zona.
- Dirigir la trula en sentido oblicuo de atrs hacia adelante y de abajo hacia arriba.
Transporte:
* Cultivo aerbico:
Transportar la muestra a temperatura ambiente en medio de transporte (Amies, Stuart), antes de 2 horas al
laboratorio.
* Cultivo Anaerbico:
Transportar la muestra en medio de transporte anaerbico comercial.
Muestra:
Toma de Muestra:
32
Transporte:
* Cultivo Aerbico:
Depositar la muestra en medio de transporte (Amies, Stuart) enviar a Laboratorio Central a temperatura
ambiente.
* Cultivo Anaerobio:
Enviar de inmediato al laboratorio en medios de transportes comerciales para anaerobios, a temperatura
ambiente.
Recoleccin:
Esta muestra puede ser obtenida de un paciente conciente, que comprenda las indicaciones.
2.- El paciente debe lavarse los dientes y realizar enjuagues con agua para limpiar cavidad oral.
3.- Mediante tos espontnea o provocada, eliminar el esputo en un frasco de boca ancha. El mdico,
kinesilogo o enfermera, debe asistir al paciente durante la obtencin de la muestra.
Transporte:
No debe demorar ms de dos horas. En caso contrario, la muestra debe ser refrigerada, aunque esto
tiene el inconveniente de disminuir el recuento bacteriano de algunos microorganismos ms sensibles. Ejemplo
Haemophyllus sp.
33
microorganismos prevalentes y resistencia antimicrobiana en una unidad, reducir y racionalizar el uso de
antimicrobianos y discriminar casos con mayor o menor probabilidad de NAVM.
INDICACION:
Todo paciente con sospecha de Neumona asociada a ventilacin mecnica (NAVM ), conexin a
ventilacin mecnica ms de 48 horas y presencia de criterios clnicos radiolgicos, en el cual no se hayan
efectuado cambios de tratamiento antimicrobiano durante las ltimas 72 horas.
OBTENCION DE LA MUESTRA:
La muestra debe ser obtenida con tcnica asptica.
El procedimiento debe ser realizado por profesional capacitado en procedimientos sobre la va area.
Se obtiene introduciendo sonda de aspiracin por el tubo endotraqueal y conectando el otro extremo de
la sonda a tubo de aspiracin.
No se debe instilar suero fisiolgico con el fin de facilitar la recoleccin ya que se diluye la muestra
(recuerde que se trata de un cultivo cuantitativo).
Si las secreciones son espesas, se deben aplicar aspiraciones intermitentes hasta conseguir la muestra.
La muestra debe ser enviada inmediatamente a seccin bacteriologa Laboratorio Central.
Se debe especificar claramente en solicitud de examen:
Examen solicitado: CULTIVO CUANTITATIVO ASPIRADO ENDOTRAQUEAL.
RECEPCIN DE MUESTRA:
34
INFORME DE LABORATORIO E INTERPRETACION DE RESULTADOS
3
Un recuento menor a 10 ufc/ml est asociado a una menor probabilidad de NAVM, lo que permite
plantear la exclusin del diagnstico. Esta interpretacin es vlida, si no se han realizado modificaciones a la
terapia antimicrobiana en las ltimas 72 horas.
3 6
Recuento intermedio entre estos valores (mayor de 10 y menor a 10 ) seala VPN y VPP variables
que deben quedar a criterio de los mdicos tratantes.
HERIDAS Y LCERAS:
Indicacin de cultivo:
Infeccin profunda: estn involucradas adems, la facia y msculo, pudiendo o no comprometer cavidades u
rganos.
ABCESOS CERRADOS:
1.- Realizar limpieza de la piel de la lesin y luego antisepsia con antisptico segn Norma N 3 Comit IIH.
2.- Realizar puncin del absceso con aguja y jeringa y aspirar la secrecin, obteniendo mnimo 0.5cc.
3.- Enviar al laboratorio en la misma jeringa, tapada con un tapn estril.
1.- Realizar limpieza de la piel de la lesin y luego antisepsia con antisptico segn Norma N 3 Comit IIH.
2.- Introducir 0.5 a 1.5cc de suero fisiolgico estril con jeringa con aguja N 21, estril.
3.- Aspirar y enviar en la misma jeringa de inmediato al laboratorio. Si esto no es posible, conservarlas a
temperatura ambiente hasta su envo. No refrigerarlas.
TOMA DE MUESTRA:
A) Procesos cerrados (Abscesos): previa antisepsia de la piel con povidona yodada, puncionar con jeringa
estril con aguja de dimetro ancho. La muestra se vaca a tubo o frasco estril.
B) Procesos abiertos: (heridas, fstulas, procesos abiertos) la muestra se toma con trula estril de la parte
ms central de la lesin de preferencia del fondo de la lesin, con el fin de evitar la contaminacin de la
muestra con microorganismos de la piel o del medio ambiente. En caso que el pus sea muy abundante, se
puede aspirar con jeringa.
1.- Puncin aspirativa: Si existen evidencias clnicas y radiolgicas de infeccin protsica, la puncin aspirativa
articular para obtener lquido para cultivo, es una ayuda valiosa para el estudio diagnstico. Para un mejor
rendimiento del procedimiento, conviene realizarlo bajo fluoroscopia (la sensibilidad es de 50 a 70% y
especificidad de 80%).
Tomar una muestra y vaciar en frasco de hemocultivo y enviar a Laboratorio Central.
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IMPORTANTE: Si desea Tincin Gram, enviar fraccin de muestra en jeringa o frasco estril.
ARTRITIS SPTICA
Lquido articular:
OSTEOMIELITIS AGUDA
1.- Muestra intraoperatoria de tejido sinovial o tejido seo: Las muestras de tejido seo o sinovial, obtenidas
por procedimiento quirrgico, deben ser inoculadas en frasco de hemocultivo.
2.- Muestra por puncin percutnea: Las muestras osteoarticulares, por puncin percutnea bajo visin
radiolgicas, deben ser inoculadas en frasco de hemocultivo. .
IMPORTANTE: En aquellos pacientes en quienes se sospecha una bacteremia simultnea, obtener muestra de
sangre para hemocultivos.
NOTA:
1.- En aquellos pacientes con mltiples focos seos infecciosos, tomar 1 muestra desde la lesin ms
representativa de cada miembro.
2.- Muestra intraoperatoria: Tomar slo una muestra representativa, posterior a aseo con suero fisiolgico
y previo a la antisepsia del aseo quirrgico (no tomar muestras pre -aseo ni post-aseo quirrgico).
3.- Pacientes con nico foco de infeccin, tomar slo una muestra representativa del sitio. En caso de
infeccin de prtesis de cadera, tomar 1 muestra de cpsula y 2 de membranas.
4.- Transporte: Las muestras tomadas, deben ser enviadas inmediatamente al Laboratorio Central.
I INTRODUCCIN:
Infeccin de la quemadura:
Indicacin:
o Realizar limpieza superficial de la lesin con suero fisiolgico, y luego remocin de tejido superficial.
o Tomar la muestra de la zona ms comprometida.
o Realizar incisin paralela de 2 cms. de largo y 1 cm. de ancho, con margen que incluya piel sana y
profundidad que abarque tejido sano o vital.
Envo de la muestra:
Debe ser enviada antes de las 10:00 A.M. a Anatoma Patolgica, si el informe de la biopsia se desea
obtener durante el da.
En el momento de inscribir el paciente en la tabla quirrgica, se debe avisar al Laboratorio Central (anexo
633312) y a Anatoma Patolgica (anexo 7321), la fecha y hora del procedimiento, con el fin de programar
la realizacin del examen.
Por ser ambas tcnicas en implementacin en ambas unidades, se recibir muestra de 1 paciente cada da.
INFORME:
Bacteriologa:
* Se informa recuento de unidades formadoras de colonias por gramo de tejido (UFC/gr. tejido),
identificacin y antibiograma de la cepa.
* Se establece lmite de 100.000 UFC/gr. Tejido, como valor predictivo de invasin bacteriana.
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TRACTO GENITAL FEMENINO
Secrecin Vaginal:
Recoleccin de la muestra:
Secrecin Cervical:
NOTA: En caso de solicitar de una misma paciente: Cultivo y examen al fresco, se deben enviar dos trulas y
las peticiones de examen por separado.
Secrecin Uretral:
Toma de muestra:
Si la secrecin es escasa introducir la trula unos 2 cm. por la uretra, girarla en ambos sentidos, permitiendo
que absorba secrecin y luego retirarla.
Transporte:
COPROCULTIVO
Solicitud de la muestra:
Con el fin de orientar el diagnstico bacteriano, siempre se debe consignar la edad del paciente.
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Toma de muestra:
- Trula de algodn o sonda rectal. Estas tcnicas se utilizan especialmente en el nio menor.
Si se obtiene la muestra con trula, sta debe humedecerse en el medio de transporte Cary Blair, e
introducirse por el ano aproximadamente 2 cm. hacindola girar suavemente.
Si se utiliza sonda rectal, se debe emplear una sonda nelaton fina y se aspira con jeringa.
Cantidad:
Cuando la deposicin es lquida se deben obtener entre 1 - 5 ml. En caso de que la muestra se
obtenga con trula de algodn, tratar de que sta se impregne de deposicin.
Transporte:
Tomar deposiciones frescas diarreicas, mnimo 1 cc, en frasco estril, enviar rpidamente a
Laboratorio.
REACCIN AGLUTINACIN
Extraer 5 cc. de sangre sin anticoagulante, en tubo venoject tapa roja. Enviar al Laboratorio.
OBJETIVO:
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Obtener una muestra de sangre que permita un ptimo rendimiento del examen, libre de
contaminacin.
DEFINICIONES :
HEMOCULTIVO:
2.-Bacteremia transitoria:
3.-Contaminacin:
La incidencia de bacteremia, vara de acuerdo al tipo de infeccin que la origina, por ejemplo:
Porcentaje de Bacteremia:
Endocarditis bacteriana 77-100 %
Neumonia Bacteriana 20-30 %
Artitis sptica 10-60 %
Neutropnicos febriles 20-30 %
Meningitis bacteriana 45-55 %
Haemophilus influenzae tipo b 80 %
Neisseria meningitidis 33 %
Streptococcus pneumoniae 52 %
Nios febriles menores de 2 aos 6 %
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-Indicacin del examen
-Nmero de muestras cultivadas
-Volumen de sangre cultivada
-Dilucin de cultivo
-Aditivos del medio.
La mayora de las bacteriemias, con excepcin de las asociadas a endocarditis bacteriana e infecciones
intravasculares y las que se producen en los nios, son intermitentes y de baja magnitud.
Se ha demostrado que en un episodio bactermico la positividad de una, dos y tres muestras para
hemocultivo es de 91%, 98% y 99% respectivamente, al no existir diferencia significativa al tomar 2 o 3
muestra se indicar:
Adultos: 2 muestras.
Nios : 2 muestras.
Paciente con sospecha de Endocarditis bacteriana: obtener 2 muestras para hemocultivo, si estos van
negativos a las 24 horas, obtener un segundo set de 2 hemocultivos ms.
En ningn momento est recomendada la obtencin de una muestra de sangre para hemocultivo en
forma aislada, disminuye la positividad diagnstica y la evaluacin de contaminacin.
VOLUMEN DE MUESTRA:
Adultos:
Por la baja incidencia de las bacteremias en los adultos, existe una relacin directa entre el
volumen de sangre cultivada y el porcentaje de bacteremias detectadas, por lo tanto, se
recomienda tomar un volumen total de 20 ml en las 2 muestras, (07-10ml por muestra).
Nios:
El volumen es variable segn edad:
Edad Volumen
Recin Nacidos 1-2 ml
Lactantes de 1mes a 2 aos 2 a 3 ml
Mayores de 2 aos 5ml
Adolescentes 10ml
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INTERVALO DE TOMA DE MUESTRA:
Se ha documentado que el mejor momento para obtener la muestra de sangre es entre 2 horas a 30
minutos antes del peak febril, lo cual generalmente coincide con un periodo de calofros.
Ambas muestras pueden ser obtenidas en el mismo momento, de diferentes sitios de puncin, no
siendo necesario fijar plazos determinados entre una muestra y otra.
En pacientes con terapia antimicrobiana la muestra debe ser obtenida inmediatamente antes de la
prxima dosis de antimicrobiano.
Se debe obtener los 2 hemocultivos en un periodo en mximo de 24 horas.
.
EVITAR CONTAMINACION:
Se recomienda:
-Tcnica asptica en la toma de la muestra.
-Lavado de piel del paciente con agua y jabn.
-Uso de antisptico.
Se sabe que los porcentajes de contaminacin se reducen, cuando los frascos que se usan, estn
cerrados con tapn de goma a travs del cual se inyecta la sangre.
Toma de muestras:
La muestra debe extraerse utilizando tcnica asptica para reducir la posibilidad de contaminacin, de
acuerdo a Norma de toma de muestras para hemocultivos.
Para la toma de muestra se puede utilizar sistema de extraccin al vaco.
Los frascos deben identificarse con el nombre del paciente en el lugar sealado en la etiqueta, cuidando
no escribir sobre el cdigo de barras.
Recepcin de muestras:
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Informe final negativo, se enviar al 5 da de cultivo.
Informes positivos, se comunicarn inmediatamente.
1. Cultivo positivo del extremo del catter: mayor o igual a 15 ufc en su extremo distal, con identificacin
del mismo microorganismo que en la sangre.
2. Hemocultivos cuantitativos simultneos a travs del catter y por venopuncin con una razn mayor o
igual a 4:1(sangre por catter vs sangre perifrica).
En la indicacin del mtodo de cultivo se debe considerar adems la patogenia de las infecciones
relacionadas a dispositivos intravasculares:
MTODO NO CONSERVADOR:
CULTIVO DE PUNTA DE CATETER (TCNICA SEMICUANTITATIVA DE MAKI):
Sigue siendo el mtodo ms utilizado.
No requiere gran equipamiento y es de bajo costo.
Slo recupera microorganismos desde la superficie externa del catter, su mxima utilidad es para el
diagnstico de bacteremia relacionada a catteres de corta duracin.
I.- INDICACIONES:
Paciente con catter venoso central que presente fiebre mayor de 38 C, sin foco infeccioso aparente,
que lo explique.
Signos de infeccin, a nivel de la herida cutnea, donde se inserta el catter.
Si se informa desarrollo menor de 15 colonias (15 UFC), se interpreta como contaminacin del catter
al momento de retirarlo.
Si se informa desarrollo igual o mayor de 15 colonias (> o = 15 UFC) se interpreta como una
infeccin del catter, la cual puede ser la causa del cuadro clnico del paciente, si adems se ha
aislado el mismo microorganismo que en los hemocultivos perifricos.
MTODO CONSERVADOR
HEMOCULTIVOS CUANTITATIVOS
Permiten el diagnstico microbiolgico de sepsis, por catter venoso central y est indicado para no
remover el catter venoso central. Por este mtodo se deben tomar muestras de sangre desde va perifrica y
va central, con el fin de comparar recuento de co de microorganismo cuya interpretacin definir si el paciente
presenta una bacteremia asociada a catter venoso central.
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I.- TOMA DE MUESTRA
Preparacin de la piel, lavado por arrastre con jabn antisptico.
Lavado clnico de manos con jabn antisptico, uso de guantes estriles.
Extraer de vena perifrica 2 hemocultivo de la forma habitual y enviar al laboratorio.
Extraer con el 1 hemocultivo, 1 ml. de sangre en jeringa heparinizada, (0,05 ml. de
Heparina), luego tapar con tcnica asptica.
Identificar con el nombre del paciente y lugar en que se obtuvo.
Enviar de inmediato al laboratorio.
Extraer 1 ml. de sangre por catter venosos central y eliminar.
Extraer 1 ml. de sangre en jeringa heparinizada (0,05 ml. de heparina) por el catter central, luego tapar con
tcnica asptica lo mas cercano al paciente.
Identificar con el nombre del paciente y lugar en que se obtuvo.
Enviar de inmediato al laboratorio.
Se informa recuento de colonias por 1 ml. en hemocultivo perifrico y recuento de colonias por
hemocultivo central. (UFC/ml = unidades formadoras de colonias por ml).
Recuento central mayor de 100ufc/ml, con hemocultivo cuantitativo perifrico negativo. Sensibilidad: 82%
y Especificidad: 100%
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