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CICLO : IV
ESTUDIANTES :
- CASTILLO SANCHEZ, Evelin.
- FARROMEQUE FERNNDEZ, Sara.
- VERGARA CERRN, Yeriff.
- VILLACAQUI COCHACHIN. Dennys.
HUARAZ PER
2014
NDICE
1. OBJETIVOS . 4
2. MARCO TERICO . 4
2.1. Radiacin Solar ....................................................................................4
2.2. Efecto de la radiacin UV-A y de la temperatura
2.2.1. Efectos de la radiacin UV
2.2.2. Efectos de la temperatura (radiacin infrarroja)
2.2.3. Efecto de la Radiacin UV en los patgenos
2.3. Factores que influyen en la muerte de microorganismos
2.3.1. Factor clima
2.3.2. Factor turbidez
2.3.3. Oxigeno
3. ANTECEDENTES.9
4. MATERIALES Y MTODOS...12
4.1. Materiales
4.2. Mtodos
5. RESULTADOS E INTERPRETACIN14
6. DISCUSIN DE RESULTADOS .15
7. CONCLUSIONES16
8. RECOMENDACIONES..1
9. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS.1
10. ANEXOS.20
2
INTRODUCCIN
3
I. OBJETIVOS.-
Objetivo General
4
II. MARCO TERICO.-
2.1. Radiacin Solar
5
La radiacin solar que llega a la tierra, se conoce tambin con el nombre de
radiacin de onda corta, por los valores de longitud de onda en los que se
concentran el mximo de emisin de energa solar. La atmosfera es
mayormente transparente a la radiacin solar entrante. Considerando,
como se ilustra, que al tope de la atmosfera llega un 100% de radiacin
solar, solo un 25% llega directamente a la superficie de la tierra (radiacin
directa) y un 26% es dispersado por la atmosfera como radiacin difusa
hacia la superficie, esto hace que un 51% de la radiacin llegue a la
superficie terrestre. Un 19% es absorbido por las nubes y gases
atmosfricos. El otro 30% se pierde hacia el espacio, de esto la atmosfera
dispersa un 6% las nubes reflejan un 20% y el suelo refleja otro 4 %.
Entonces la radiacin solar que llega a la atmosfera puede ser dispersada,
reflejada o absorbida por sus componentes. Esto depende a la longitud de
onda de la energa transmitida y del tamao y naturaleza de la sustancia
que modifica la radiacin.
6
2.2. Efecto de la radiacin UV-A y de la temperatura
7
La luz UV-A tiene un efecto letal en los patgenos presentes en el
agua que afectan a los humanos. Estos patgenos no se adaptan bien a las
condiciones ambientales agresivas, pues sus condiciones de vida
especficas son las del tracto gastrointestinal humano. Por lo tanto, son ms
sensibles a la luz solar que los organismos que abundan en el ambiente.
La radiacin UV-A interacta directamente con el ADN, los cidos
nucleicos y las enzimas de las clulas vivas, cambia la estructura molecular
y puede producir la muerte de la clula. La radiacin UV tambin reacciona
con el oxgeno disuelto en el agua y produce formas altamente reactivas de
oxgenos (radicales libres de oxgeno y perxidos de hidrgeno). Estas
molculas tambin interfieren con las estructuras celulares y matan a los
patgenos.
Segn Bolton, el mecanismo de desinfeccin por UV depende de la
absorcin de la radiacin por las protenas, y por los cidos nucleicos de un
dado microorganismo. La absorcin de dosis altas de UV por las protenas
presentes en las membranas celulares lleva a la ruptura de las membranas
y, a la muerte de la clula. La absorcin de dosis ms bajas de UV por el
ADN puede interrumpir la capacidad del microorganismo para reproducirse.
Algunas molculas que conforman el ADN llamadas bases (como
las purinas y pirimidinas) absorben fuertemente la radiacin ultravioleta y
pueden sufrir cambios qumicos, que las llevan a formar dimeros (tiamina,
esencialmente). La dimerizacin de la tiamina ha sido considerada como la
causa principal del efecto mutagenico de la radiacin UV. Si una de dos
tiaminas adyacentes absorbe un fotn UV, se forma el dimero y se romper
la estructura del ADN; se bloquea as la engolacin de las cintas hijas
durante la replicacin del ADN y se inhibe la capacidad de reproduccin del
microorganismo.
Tanto la radiacin ionizante del tipo ultravioleta (UV) como la
radiacin electromagntica de la luz visible son capaces de inducir daos a
las clulas y provocar su muerte. El efecto se basa en daar las molculas
clave en las clulas como los cidos nuclicos, ya sea separndolos
8
fsicamente de tal forma que se reproduzcan incorrectamente o por
reacciones fotoqumicas que conducen a errores en la subsecuente sntesis
de protenas, lo cual significa que el organismo no puede sobrevivir.
El efecto bactericida de la luz solar, o fotodesinfeccin, es conocido
desde hace mucho tiempo. Al principio se pens que era debido a la accin
exclusiva de los rayos UV, pero posteriormente se comprob que es la
combinacin de varias longitudes de onda del espectro la que determina
dicho efecto.
Recientemente se han llevado a cabo numerosos estudios con el
fin de determinar bajo qu condiciones es posible la desinfeccin con luz
solar. Los resultados de estos estudios demuestran que, sobre todo en
lugares situados en los trpicos (de preferencia entre los 15 y los 35 de
latitud), donde la radiacin solar incidente alcanza un cierto nivel (>500
W/m2), es posible la desinfeccin de pequeos volmenes de agua
contenidos en envases de vidrio o plstico translucido. Lawand, et. al,
(1994) reportan que se puede asumir que la desinfeccin es segura y se
obtiene 100% de inactivacin, cuando los niveles acumulados de radiacin
solar exceden los 4000 W-hs/m2 durante el tiempo de exposicin, que
generalmente es del orden de 5 6 horas.
En estudios experimentales, se ha determinado el tiempo para
alcanzar una remocin completa de algunos microorganismos vara entre
15 min y 8 horas.
9
A. Flavus 3 horas
Candida y Geotrichum spp 3 horas
Suspensin de Penicillum sp 6-8 horas
Cuadro 1. Tiempos de inactivacin observados para diferentes organismos
(Acra, et al. 1984)
Los siguientes factores se consideran como los ms significativos y
determinantes en la remocin de los microorganismos.
1. La intensidad de la luz solar y el tiempo de exposicin depende de la
localizacin geogrfica (latitud), variaciones estacionales, nubes, el
rango efectivo de longitudes de onda de la luz y la hora.
2. La clase de bacterias expuestas, la naturaleza y composicin del medio
y la presencia de nutrientes capaces de soportar el crecimiento y la
multiplicacin de los microorganismos.
3. El tipo y las caractersticas de los recipientes (color, forma, tamao,
grosor y transparencia a la luz del sol)
4. El grado de turbidez, volumen y profundidad del agua.
10
contra la radiacin UV. Por lo tanto, es posible usar la temperatura y la
radiacin UV para inactivar a estos patgenos.
Las investigaciones han demostrado que radiacin solar destruye
las bacterias y los virus patgenos. Se ha documentado la inactivacin de
los siguientes microorganismos:
Bacterias: Escherichia coli (E.coli), Vibrio cholerae, Streptococcus faecalis,
Pseudomonas aerugenosa, Shigella flexneri, Salmonella typhii, Salmonella
enteritidis, Salmonella paratyphi.
Virus: Bacterifagos f2, Rotavirus, Virus de la Encefalomiocarditis.
Levaduras y mohos: Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Candida,
Geotrichum.
Sin embargo, todava no se ha evaluado sistemticamente la
inactivacin de organismos que forman quistes y esporas como
protozoarios, Entamoeba hystolitica, Giardia intestinalis, Cryptosporidium
parvum y helmintos, mediante la desinfeccin solar del agua.
Es posible destruir estos organismos usando la temperatura
(hirviendo o pasteurizando el agua). Todos los microorganismos tienen una
sensibilidad especfica al calor. El punto de muerte trmica de los quistes
de amebas y Giardia es 57C (durante 1 minuto de exposicin). La radiacin
solar destruir eficazmente estos patgenos si el agua en las botellas
expuestas a la luz solar alcanza la temperatura de 57C durante 1 minuto o
si el agua contaminada mantiene una temperatura de 50C durante 1 hora.
La mayora de patgenos que ataca a los humanos es muy frgil;
fuera del cuerpo humano no puede multiplicarse y muere. Una de las pocas
excepciones la constituye la Salmonella, la cual, sin embargo, requiere
condiciones ambientales favorables (como un suministro adecuado de
nutrientes) para sobrevivir.
Es importante sealar que la radiacin solar no produce agua
estril. Organismos, diferentes a los patgenos que afectan a los humanos,
por ejemplo las algas, se adaptan bien a las condiciones ambientales dentro
las botellas expuestas a radiacin solar y pueden incluso desarrollarse all;
11
sin embargo, estos organismos no representan un peligro para la salud
humana.
12
Si la turbiedad del agua es mayor a 30 UNT, es necesario pre-tratar
el agua antes de exponerla a la luz solar. Los slidos y partculas ms
grandes se pueden eliminar almacenando el agua cruda durante un da y
dejando que las partculas se asienten en el fondo y luego, se decanta el
agua. Se puede separar la materia slida mediante filtracin, usando una
capa de arena o un pao. Tambin se puede reducir la turbiedad mediante
floculacin/sedimentacin, usando sulfato de aluminio o semillas trituradas
de Moringa olefera.
De no ser posible reducir la turbiedad mediante diferentes
mecanismos de pre-tratamiento, es posible inactivar los microorganismos
mediante la temperatura en lugar de mediante la radiacin UV-A (mediante
pasteurizacin solar o hirviendo el agua).
2.3.3. OXGENO
La desinfeccin solar es ms eficaz en agua con altos niveles de
oxgeno: la luz solar produce formas altamente reactivas de oxgeno
(radicales libres de oxgeno y perxidos de hidrgeno) en el agua. Estas
molculas reactivas reaccionan con las estructuras celulares y matan a los
patgenos.
III. ANTECEDENTES.-
La idea de la Desinfeccin Solar del Agua fue presentada por primera vez
por Aftim Acra en un folleto publicado por UNICEF en 1984. Un equipo de
13
investigacin de EAWAG/SANDEC inici exhaustivos experimentos de
laboratorio durante 1991, con el fin de evaluar el potencial de este mtodo para
inactivar bacterias y virus. La investigacin de laboratorio revel sinergias en la
inactivacin de microorganismos mediante el uso combinado de radiacin UV-A
y un incremento en la temperatura del agua. Las pruebas de campo confirmaron
este efecto que ampla significativamente el potencial de este mtodo de
desinfeccin del agua utilizando la energa solar, conocido como SODIS.
Posteriormente, se someti este proceso simple de tratamiento del agua a
pruebas de campo en proyectos de demostracin para evaluar su aceptacin
sociocultural y econmica por parte de la poblacin. La respuesta y el inters por
SODIS fueron muy positivos.
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- Esmalte para pintar botellas (color: rojo. azul, negro, blanco)
- Placas Petri
- Mecheros Bunsen
- Asas de kolle
- Tubos de ensayos
- Matraz Erlenmeyer
- Pipetas
- Piscetas
- Probetas
- Guantes quirrgicos (recoger muestras)
- Papel Kraft
Equipos
- Medidor de pH
- Autoclave
- Incubadora.
4.2. Mtodos
Para llevar a cabo el proyecto, se realizaron tres muestreos cada uno
en diferentes puntos de desembocadura de agua residual de la ciudad de
Huaraz, llenando las botellas de colores (rojo, negro, azul, blanco y
transparente; previamente pintados) y el frasco mbar, la misma que nos
servir para comparar los resultados despus de la exposicin.
Las botellas de colores fueron expuestas a radiacin solar directa,
variando el tiempo de exposicin para cada muestreo, un da para el primer
muestreo, cinco das para el segundo muestreo y siete das para el tercer
muestreo.
El trabajo en laboratorio, para evaluar disminucin de coliformes
presentes en el agua residual se realiza la siembra de las muestras usando
el mtodo de diluciones sucesivas en Lauril Sulfato Caldo (caldo Lauril),
la siembra del frasco mbar se realiza el da del muestreo y las dems
botellas al terminar el tiempo de exposicin.
15
Se procedi de la misma manera en las 3 muestras.
16
RESULTADOS E INTERPRETACIN.-
200000
150000
100000
46000
50000
0
negro Blanco Azul Rojo Transparente
Interpretacin:
17
MUESTRA DILUCIONES NMERO MS PROBABLE
RECOGIDA EN:
MUESTRAS
DE COLONIAS
-1 -2 -3 -4
3 3 3 2 Frasco mbar 1100 x 103 NMP colif/100ml
3 3 2 Negro 1100 x 102 NMP colif/100ml
AFLUENTE 2 1 0 Blanco 15 x 102 NMP colif/100ml
SAN
GERONIMO 3 3 0 Azul 240 x 102 NMP colif/100ml
3 3 0 Rojo 240 x 102 NMP colif/100ml
3 3 2 Transparente 1100 x 102 NMP colif/100ml
150000
110000 110000
100000
Interpretacin:
18
Nmero colonias vs Color
Interpretacin:
Para 7 das exposicin es mejor usar el color blanco y transparente para tener mejores
resultados.
Microorganismos identificados:
Enterobacter cloacae
Enterobacter aerogenes
Escherichia coli
19
Colonias obtenidas a partir de un determinado color:
300000
250000 1, 240000 7, 240000
200000
COLONIAS
150000
100000 5, 110000
50000
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
COLOR
Interpretacin:
Para obtener resultados con la botella de color de negro se deber exponer 5 dias a la
radiacin solar.
20
Colonias VS Das de exposicin
Colonias obtenidas
300000
250000 1, 240000
200000
COLINAS
150000
100000 7, 110000
50000
0 5, 1500
0 1 2 3 4 5 6 7 8
DIAS
Interpretacin:
Para obtener resultados con la botella de color de blanco se deber exponer 5 das a la
radiacin solar.
21
Colonias VS Dias de exposicin
Colonias obtenidas
300000
250000 1, 240000 7, 240000
COLONIAS
200000
150000
100000
50000
5, 24000
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
DIAS
Interpretacin:
Para obtener resultados con la botella de color de azul se deber exponer 5 das a la
radiacin solar que en 7 o 1 dia.
22
Colonias VS Das de exposicin
Colonias obtenidas
300000
250000 7, 240000
COLONIAS
200000
150000
100000
50000 1, 46000
5, 24000
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
DIAS
Interpretacin:
Para obtener resultados con la botella de color de rojo se deber exponer 5 das a la
radiacin solar .
23
Colonias VS Das de exposicin
Colonias obtenidas
300000
250000 1, 240000
200000
COLONIAS
150000
100000 5, 110000 7, 110000
50000
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
DIAS
Interpretacin:
Para obtener resultados con la botella de color de negro se deber exponer 5 y 7 das a la
radiacin solar.
V. DISCUSIN DE RESULTADOS.-
En caso del color azul este atrae al espectro azul de la luz visible la cual tienen de
470-450 nm. De longitud de onda
24
VI. CONCLUSIONES.-
La radiacin solar tuvo efecto en la muestra del afluente Tacllan en el
color rojo lo cual fue 460 x 102 NMP colif/100ml y los demas colores fueron
2400 x 103 NMP colif/100ml la cual fue expuesta por un dia.
En la muestra tomada en el afluente San Gernimo fue expuesta 5 dias;
la radiacin solar tuvo efecto en en los colores Azul y Rojo resultando una
cantidad aproximada de microorganismos de 2400 x 103 NMP colif/100ml; en
el color blanco fue de 15 x 102 NMP colif/100ml y en el transparente de 1100
x 102 NMP colif/100ml igual que en el frasco sin exponer.
En la muestra del afluente del afluente Quenuacocha expuesta por 7 dias
a la radiacion solar se obtuvo 1100 x 102 NMP colif/100ml en los colores blanco
y transparente y en los dems colores fue 2400 x 103 NMP colif/100ml.
En todas las muestras tomadas el color que favoreca en la muerte de
microorganismos fue el blanco debido a que deja pasar fcil los rayos
solares.
VII. RECOMENDACIONES.-
Se recomienda utilizar bolsas de polietileno debido a que esta da un mejor
resultado.
Agitar la botella por ms de 20 segundos ya que esto permite la aeracin.
Se debe tomar agua que no est tan turbia ya que esto no dejara pasar
los rayos solares.
Se recomienda no usar un volumen a 1.5 litros por recipiente ya que este
procedimiento no funciona en grandes volmenes.
Es recomendable usar botellas de plstico en vez de vidrio.
25
AGVE
2013
Proyecto de Biogas a partir de aguas residuales.
Consultado en:
http://www.agve.com.ar/biogasaguasresiduales.php.
Consultado en:
http://www.youtube.com/watch?v=ZdieLPQUpcw.
26
EDITORIAL DE LA UNIVERSIDAD TECNOLGICA NACIONAL DE
ARGENTINA
2012
Disponible en:
http://books.google.com.pe/books?id=K_ETVnqnMZIC&
pg=PA218&dq=rayos+infrarrojos+y+microorganismos&
hl=es&sa=X&ei=GkbuU4X8GcrJsQSgqYG4DA&ved=0
CBkQ6AEwAA#v=onepage&q=rayos%20infrarrojos%20
y%20microorganismos&f=false
IX. ANEXOS.-
27
Realizacin del trabajo de siembra en el laboratorio
Produccin de biogs
28