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IMPORTANCIA DE LOS

SISTEMAS DE
CARACTERIZACION DE
ADN DEL TEJIDO
DENTAL EXPUESTO A
ALTAS TEMPERATURAS
INTRODUCCION
Cuando los mtodos de identificacin dentales
convencionales fallan, este material biolgico puede
proporcionar el enlace necesario demostrar identidad. Con
el advenimiento de la reaccin en cadena de la polimerasa
(PCR), una tcnica que permite la amplificacin de ADN en
sitios especficos preseleccionados, esta fuente de pruebas
se est convirtiendo cada vez en una herramienta util para
los investigadores.
Planteamiento del problema
Cual es la importancia del tejido dental en la caracterizacin de ADN para la

identificacin de restos humanos incinerados?


Justificacin
La funcin ms comn del odontlogo forense es la
identificacin dental. El anlisis que se realiza al fallecido
toma dos formas principales. En primer lugar, el examen se
realiza con ms frecuencia es una identificacin
comparativa que se utiliza para establecer (con un alto
grado de certeza) de que los restos de un difunto y una
persona representada por antemortem (antes de la muerte)
son correspondientes.
ANTECEDENTES
Jeffery (1985) describe las regiones hipervariables del
ADN humano y la aplicabilidad de estos polimorfismos de
ADN a la individualizacin de la sangre y tejidos humanos.
La reaccin en cadena de la polimerasa (PCR), present
originalmente por Saiki et al. y posteriormente
automatizado por Mullis y Faloona
Schwartz et al. en 1991 aislo ADN de dientes en
diferentes condiciones ambientales tales como el pH
variable, humedad, temperatura, almacenamiento, etc
Sweet and Sweet (1995). presenta un caso de
identificacin de restos humanos, por un tercer molar no
erupcionado conservado que permiti la extraccin de
1,35 microgramos de ADN a partir de la pulpa dental.
DIENTE COMO FUENTE IMPORTANTE DE ADN
TEJIDO COMPONENTE COMPONENTE
INORGANICO ORGANICO

ESMALTE 96% 4%

CEMENTO 70% 30%

DENTINA 45% 32%

PULPA CONTENIDO
CELULAR
ADN MITOCONDRIAL Y NUCLEAR
ODONTOBLASTOS
FIBROBLASTOS
FIBROCITOS
CELULAS
MESENQUIMATOSAS
INDIFERECIADAS
OTROS COMPONENTES
CELULARES
DIFERENTES TECNICAS
J Forensic Dent Sci. 2010
Jul-Dec; 2(2): 6368.

10.4103/0975-1475.81284
PCR (REACCION CADENA POLIMERASA)
Tecnicas de extraccion Alakoc YD, Aka PS. Orthograde
entrance technique to recover
DNA from ancient teeth preserving
MOLER EL DIENTE COMPLETAMENTE the physical structure. Forensic Sci
Int. 2009;188:968.

ACCESO ENDODONCTICO CONVENCIONAL Sweet D, Hildebrand D. Recovery


of DNA from human teeth by
cryogenic grinding. J Forensic
MOLIENDA CRIOGENICA Sci.1998;43:1199202.

SECCIONAMIENTO DEL DIENTE


ESTABILIDAD DE LAS CELULAS EN
DIFERENTES CONDICIONES
Schwartz (1991) aisl ADN de dientes a 4C, durante 6
semanas.
TC Boles (1995) pudo extraer ADN de manera exitosa
de dientes enterrados durante 10 aos
Es posible determinar a un individuo de otro con un
alto nivel de confianza partiendo de solo 1 ng o menos
La cantidad de ADN pulpar que se puede extraer de un
diente es de 0.023-0.031cc lo cual es cerca de 15-20
mg.
ESTABILIDAD DE LAS CELULAS EN
DIFERENTES CONDICIONES
Remualdo (2004) evaluaron la amplificacin por PCR
de ADN recuperado de los dientes sometidos a calor
(200 C, 400 C, 500 C y 600 C) durante 60
minutos, poniendo a prueba tres diferentes mtodos de
extraccin (orgnico; acetato de amonio / isopropanol y
slice).
ESTABILIDAD DE LAS CELULAS EN
DIFERENTES CONDICIONES
Utilizando el mtodo orgnico para la extraccin de
ADN, el 50% de las muestras sometidas a altas
temperaturas fueron amplificadas, pero slo a
temperaturas ms bajas (200 C y 400 C).
A temperaturas ms altas (500 C y 600 C), el
mtodo de extraccin con acetato de isopropanol /
amoniaco dio mejores resultados, sobre todo para la
extraccin de ADN mitocondrial (ADNmt)
VARIACIONES DE MATERIAL
GENETICO
Tipo de diente (incisivo, canino, premolar o
molar)
Condicion del diente (caries)
Periodo de extraccion de ADN
Edad del individuo
VARIACIONES DE MATERIAL
GENETICO
Tipo de diente (incisivo, canino, premolar o
molar)
Condicion del diente (caries)
Periodo de extraccion de ADN
Edad del individuo
Un estudio reciente ha descubierto que el ADN puede
obtenerse del polvo de dentina obtenida mediante molienda
criognica, y tambin a travs de la dentina en el caso de
dientes con endodoncia

La pulpa produce las seales de amplificacin PCR


fuertes, mientras que las seales de dentina y cemento son
muy similares entre s.
Conclusiones
Violencia y crmenes contra la vida humana, como los
son las explosiones de bombas, guerras, accidentes
aereos, asi como todos los casos de cuerpos
carbonizados o en avanzado estado de
descomposicin, entre otras circunstancias, incrementa
la necesidad de emplear mtodos ms rpidos y
precisos para la identificacin de vctimas.
En tales casos, los hallazgos de muchos estudios
revisados en este documento demuestran que los
dientes representan una excelente fuente de ADN, el
cual est protegido por tejido epitelial, conectivo,
muscular y seo en caso de incineracin.
REFERENCIAS
1. Pakhmode VK, Pakhmode CK. Dental DNA for genetic finger printing. IAOFG. 1998;1:45.

2. Sweet D. Why a dentist for identification? Dent Clin North Am. 2001;45:23751. [PubMed]

3. Smith BC, Fisher DL, Weedn VW, Warnock GR, Holland MM. A systemic approach to the
sampling of dental DNA. J Forensic Sci. 1993;38:1194209. [PubMed]

4. Sweet D, Hildebrand D, Phillips D. Identification of skeleton using DNA from teeth and a PAP
smear. J Forensic Sci. 1999;44:6303. [PubMed]

5. Sweet D, Hildebrand D. Recovery of DNA from human teeth by cryogenic grinding. J Forensic
Sci.1998;43:1199202. [PubMed]

6. Jeffreys AJ, Wilson V, Thein SL. Hypervariable minisatellite regions in human DNA. Nature.
1985;314:6773. [PubMed]

7. Dodd BE. DNA finger printing in matters of family and crime. Nature. 1985;318:5067.
[PubMed]

8. Saiki RK, Scharf S, Faloona F, Mullis KB, Horn GT, Erlich HA, et al. Enzymatic amplification of
ss-globin sequences and restriction site analysis for diagnosis of sickle cell anemia. Science.
1985;230:13504. [PubMed]

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