Pagina 1

1 PRUEBAS GENERALES PARA AMINOACIDOS Y PROTEINAS

2
Nombres E-mail
Alexander Gil Campo alexandergilcampo@unicauca.edu.co
Yolima Hurtado Yacumal Yolihurtado92@hotmail.com
Kerly Escalante Yiseth_9702Qhotmail.com
3 Biorgánica, Ingeniería Agropecuaria, Facultad de ciencias agrarias, Universidad del Cauca
4 Grupo No: #4
5 Fecha de realización de la práctica: 25/09/2014
6 Fecha de entrega de informe: 02/10/2014
7
8 1. RESUMEN
9 Introducción:
10 Las proteinas son uno de los principales componentes de todas nuestras celulas. los
11 aminoácidos(compuestos orgánicos) son los ladrillos de contruccion de la proteinas. Los
12 aminoácidos se agrupan de acuerdo con su comportamiento químico.
13 la sintesis de las proteinas ocurren mediante la union entre si de las cadenas de aminoácidos. los
14 distintos aminoácidos imparten diferentes comportamientos quimicos en la estructura de las
15 proteinas.
16 Debido a la presencia de diferentes aminoácidos en las uniones peptídicas las proteínas
17 reaccionan con una variedad de compuestos formando productos coloreados.
18 Existen reacciones de coloración que son específicas para aminoácidos de esas proteínas y son
19 importantes tanto para la detección como para el dopaje de aminoácidos y proteínas.
20 Existen también reacciones generales porque sirven para caracterizar grupos comunes a todas
21 las proteínas como grupos amino o uniones peptídicas (ninhidrina y biuret).
22
23 Resultados: las pruebas y el reconocimiento en la práctica al ser positivas indicaban un cambio de
24 color o una reacción esto se podría dar por la desnaturalización de la proteína o lo aminoácidos que
25 la componen dependiendo también del reactivo.
26
27 Conclusión: mediante las pruebas realizadas en laboratorio, se logró identificar la presencia de
28 aminoácidos; las proteínas están constituidas por aminoácidos, por lo cual estos métodos se basan
29 en el reconocimiento de estos, en diferentes muestras.
30
31 RESULTADOS
Hopkins-

PRUEBA Xantoproteica Biuret Ninhidrina cole Ehrlich

Albumina + + violeta + - + rojo

Gelatina - + violeta - - + rojo

Urea - + violeta - - - amarillo

Pruebas generales para aminoacidos y proteinas.

 Pagina 2

Fenilalanina + - + - - amarillo

Asparagina - - + - - amarillo

Glicina - - + - - amarillo

Histidina - + violeta + - + rojo

Agua - - - - - amarillo

Triptófano + + + naranja + rojo

1
2 3. ANALISIS DE RESULTADOS
3 Prueba Xantoproteica: Los compuestos que presentan bencenos sustituidos (con grupos unidos
4 al anillo bencénico), al reaccionar con el ácido nítrico concentrado forman compuestos nitrados de
5 color amarillo, el cual se intensifica en medio alcalino.De los resultados obtenidos presentados en
6 la Tabla 1 las muestras que tuvieron error experimental fueron: Glicina, Asparagina y Gelatina,
7 puesto que al no tener en su estructura anillos aromático, no se debe presentar la coloración
8 amarilla.
9
10 El aminoácido fenilalanina también tiene en su estructura un anillo aromático pero no está
11 activado, por lo tanto el proceso de nitración no se da fácilmente y no se puede percibir entonces
12 la coloración amarilla.
13 Las muestras de Triptófano, Histidina y Albumina al reaccionar con HNO3 y las gotas de solución
14 al 40% de NaOH reaccionaron de forma correcta y el resultado obtenido fue igual al teórico. El
15 agua no presento tinción alguna puesto que su composición no presenta ningún tipo de aminoácido
16 presente estructuralmente.
17
18 Prueba Biuret: Es un método general para la determinación de proteínas o péptidos. Se basa en la
19 reacción del sulfato de cobre con compuestos que tengan dos o más enlaces peptídicos, en un
20 medio alcalino. El producto es un complejo color violeta cuya intensidad de color depende de la
21 cantidad de enlaces peptídicos presentes.
22
23 Los resultados obtenidos, indican que la Albumina, la Gelatina. histidina y la Urea presentan
24 enlaces peptídicos por lo que se observó un color violeta, esto confirma lo establecido en la teoría.
25 Las demás muestras en excepción con la Asparagina al igual que la glicina,histidinay triptófano,
26 que al el no tener enlaces peptídicos sus resultados fueron los esperados (no coloración violeta).
27 La prueba con el triptófano no la realizo el grupo al que le correspondía, por esta razón no se obtuvo
28 un resultado
29
30 Prueba de Ninhidrina: Esta reacción es bastante importante, pues es universalmente empleada
31 para detectar cualitativamente y cuantitativamente a los aminoácidos. Para los aminoácidos estas
32 es la única reacción de color, verdaderamente importante. La Ninhidirna es una agente oxidante
33 1 de los grupos alfa-amino, liberando amoniaco, CO2 y el correspondiente aldehído, así como la
Pruebas generales para aminoacidos y proteinas.
 Pagina 3

1 forma reducida de la Ninhidrina. Una coloración violeta determina positiva la prueba y para este
2 caso también un color Vino tinto la determinara como positiva. En esta prueba se obtienen los
3 resultados esperados para casi todas las muestras en excepción para la Urea, la gelatina y el agua
4 ya que a diferencia de las demás muestras estas no es un alfa- aminoácido Ej. Glicina,Asparagina,
5 Triptófano, Fenilalanina,Albumina, Histidina y Alanina(contienen alfa-amino), ni tampoco
6 contiene alfa- aminoácidos (Ej. Gelatina).
7 El resultado para la muestra de Agua confirma que esta no contiene alfa- aminoácidos.
8
9 Prueba Hopkins cole: Los derivados indol dan productos de condensación cuando se tratan con
10 aldehídos aromáticos en presencia de ácido sulfúrico o clorhídrico. El aminoácido triptófano
11 contiene un grupo indol y por eso la reacción es específica para triptófano. El resultado positivo de
12 esta prueba se puede evidenciar con el anillo indolico que degrada el aminoácido triptófano a
13 Indol produciendo compuestos de color rojizo-anaranjado.
14 Los resultados obtenidos para esta prueba resultado son correctos ya que en ninguna muestra a
15 excepción del Triptófano hay presencia de este, todas las demás muestras están libres en su
16 estructura de este aminoácido (Triptófano) por ende dio un resultado (rojizo-anaranjado).
17
18 Prueba de Ehrlich: La presencia de anillos aromáticos fenólicos o nitrogenados en la cadena
19 lateral de los aminoácidos se puede identificar mediante la reacción con ácido sulfanílico y nitrito
20 de Sodio por formación de sales de Diazonio fuertemente coloreadas permitiendo así detectar la
21 presencia de Histidina libres o formando péptidos y proteínas.
22 El resultado positivo de esta prueba se puede evidenciar con un color rojo o Vino tinto.
23
24 Los resultados se interpretan así: las muestras de Urea, Agua, Glicina, y Fenilalanina (contiene
25 anillo aromático bencénico) tuvieron resultados correctos (negativos) ya que ninguna de estas
26 muestras contiene anillos aromáticos fenólicos y/o nitrogenados.
27 Las muestra de Gelatina y albumina también arrojaron un resultado correcto (presento color rojo o
28 Vino tinto) ya que este si contiene anillos fenólicos y/o nitrogenados. Por el contrario de las
29 muestras de Histidina (contiene anillo aromático nitrogenado),y Triptófano (contiene anillo
30 aromático nitrogenado) se obtuvieron resultados positivos. Finalmente la muestra de Asparagina
31 también arrojo un resultado negativo, ya que presento una coloración amarillenta cuando
32 verdaderamente al este aminoácido no tener ningún anillo aromático fenólicos y/o nitrogenado en
33 su estructura no tenía por qué presentar dicho cambio de color.
34
35
36 4. CONCLUSIONES
37
38 • Existen diferentes pruebas para la identificación de proteínas y aminoácidos que permiten
39 establecer un resultado positivo o negativo de acuerdo a las características y composición
40 de cada una de ellas, evidenciado en coloraciones, presencia de anillos, etc. Se establecieron
41 las características de estas pruebas para la identificación cualitativa de sustancias que
42 pueden contener aminoácidos, proteínas o péptidos. Y cuando se usan varias pruebas en la
43 muestra, se pueden determinar ciertas sustancias en específico.
44 • Muchos resultados no dieron a los esperados (teóricos) pero se pudo deber a la
45 contaminación de las muestras o la contaminación de los equipos (tubos de ensayo).
Pruebas generales para aminoacidos y proteinas.
 Pagina 4

1 • Se pudo determinar que todos los análisis se hicieron de manera cualitativa y que para poder
2 Hacerlo de manera cuantitativa se requiere de la ayuda de otros métodos por ejemplo:
3 Espectrofotométricos.
4
5 PREGUNTAS PRELIMINARES
6 1) ¿ cual es la reacción de un alfa-aminoacido y ninhidrina?
7 2) ¿ cual es la reacción con el reactivo de biuret?
8 3) ¿Que proteínas dan positivas con la prueba de Hopkins-cole?
9
10 DESARROLLO
11 1) El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma complejos coloreados con la ninhidrina:
12 violeta. violeta
13 azuloso en la mayoría de los aminoácidos cuyo grupo amino es primario.
14 2) La producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos, ya que se debe a la
15 presencia
16 del enlace peptídico (- CO- NH -) que se destruye al liberarse los aminoácidos.
17 Cuando una proteína se pone en contacto con un álcali concentrado, se forma una
18 sustancia
19 compleja denominada Biuret.
20 3) La reacción de Hopkins-Cole, también conocida como reacción de Adamkiewiczs, es
21 una prueba estándar para el triptófano y para las proteínas que contienen triptófano. La
22 solución que se va a examinar se mezcla con ácido glioxílico y se agrega ácido sulfúrico
23 concentrado. Un anillo entre violeta y rojo en la unión de los dos líquidos indica que la
24 reacción es positiva.
25 5. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
26 1) Indicar los nombres y las estructuras de al menos 2 B-aminoácidos.
27 2) Cuáles son los aminoácidos denominados esenciales para el organismo
28 humano.
29 3) Consultar las frases S y R de los reactivos a manipular en la práctica.
30 4) Cuáles son las fichas de seguridad de los reactivos a manejar en la práctica.
31 Desarrollo:
32 Beta-Alanina:
33 El grupo amino está unido al segundo carbono a partir del grupo carboxilo.

34
35 2) Cuando un alimento contiene proteínas con todos los aminoácidos esenciales, se dice
36 que son de alta o de buena calidad, aunque en realidad la calidad de cada uno de los
37 aminoácidos contenidos no cambia. Combinaciones de alimentos que suman los
38 aminoácidos esenciales

Pruebas generales para aminoacidos y proteinas.

 Pagina 5

1
2 AMINOÁCIDOS ESENCIALES:

3 Isoleucina: Junto con la L-Leucina y la hormona del crecimiento intervienen en la

4 formación y reparación del tejido muscular.

5 Leucina: Junto con la L-Isoleucina y la hormona del crecimiento (HG), interviene con la
6 formación y reparación del tejido muscular.

7 Lisina: Es uno de los más importantes aminoácidos porque, en asociación con varios
8 aminoácidos más, interviene en diversas funciones, incluyendo el crecimiento, reparación
9 de tejidos, anticuerpos del sistema inmunológico y síntesis de hormonas.

10 Metionina: Colabora en la síntesis de proteínas y constituye el principal limitante en las

11 proteínas de la dieta. El aminoácido limitante, determina el porcentaje de alimento que va
12 a utilizarse a nivel celular.

13 Fenilalanina: Interviene en la producción del colágeno, fundamentalmente en la

14 estructura de la piel y el tejido conectivo, y también en la formación de diversas neuro-
15 hormonas.

16 Triptófano: Está implicado en el crecimiento y en la producción hormonal, especialmente

17 en la función de las glándulas de secreción adrenal. También interviene, en la síntesis de
18 la serotonina, neuro-hormona involucrada en la relajación y el sueño.

19 Treonina: Junto con la con la L-Metionina y el ácido Aspártico, ayuda al hígado en sus
20 funciones generales de desintoxicación.

21 Valina: Estimula el crecimiento y reparación de los tejidos, el mantenimiento de diversos

22 sistemas y balance de nitrógeno.

23 Debemos recordar que, debido a la crítica relación entre los diversos aminoácidos y los
24 aminoácidos limitantes presentes en cualquier alimento. Solo una proporción
25 relativamente pequeña de aminoácidos de cada alimento pasa a formar parte de las
26 proteínas del organismo. El resto se usa como fuente de energía o se convierte en grasa
27 si no debe de usarse inmediatamente.

28 4) las frases S y R de los reactivos.

Pruebas generales para aminoacidos y proteinas.

 Pagina 6

Pruebas generales para aminoacidos y proteinas.

 Pagina 7

Pruebas generales para aminoacidos y proteinas.

 Pagina 8

Pruebas generales para aminoacidos y proteinas.

 Pagina 9

2
Pruebas generales para aminoacidos y proteinas.
 Pagina 10

Pruebas generales para aminoacidos y proteinas.

 Pagina 11

5
6 6. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
7 1. VEJAR EVA IRMA. Prácticas de Bioquímica Descriptiva. Editorial UniSon. 2005.
8 Pag 169.
9 2. GIRALDO GERMAN ANTONIO. Laboratorio de Bioquímica: Una visión práctica.
10 24 Universidad del Quindío. 2010. Pag 97
11 Libro
12 3. Mataix verdu, J, Proteínas(capitulo 5),hergon 2002.Pag 96
13
14 4. http://www.fcn.unp.edu.ar/sitio/quimicabiologica1/wp-content/uploads/2010/08/TP-
15 Proteinas-generalidades.pdf , Fecha de visita: 01/10/1014
16
17 5. http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/FISQ/Fichero
18 s/301a400/nspn0363.pdf, Fecha de visita: 01/10/1014
19
Pruebas generales para aminoacidos y proteinas.
 Pagina 12

1
2 ECUACIONES DE LAS REACCIONES
3 ALBUMINA FENILALALINA
4

5
6
7 GELATINA UREA

9
10

11
12 Compuesto diazonio: Las sales de diazonio son un grupo de compuestos orgánicos cuya
13 estructura general es R−N2+X−, donde R puede ser cualquier residuo orgánico, un alquilo o un
14 arilo, y X− habitualmente un anión haluro. Las sales de diazonio alifáticas son muy inestables y
15 no tienen aplicación práctica. En cambio, históricamente, las sales de diazonio aromáticas, más
16 estables, se han mostrado como importantes intermedios en la síntesis de colorantes.
17

18
Pruebas generales para aminoacidos y proteinas.
 Pagina 13

1 Compuesto azo: son compuestos que llevan el grupo funcional RN = N-R ', en la que R y R'

2 pueden ser un arilo o alquilo. La IUPAC define compuestos azo como: "Derivados de

3 diazeno (diimida), HN = NH, en el que ambos hidrógenos están sustituidos por grupos

4 hidrocarbilo, por ejemplo, PhN = NPh azobenceno o diphényldiazeno." 1 Los derivados más

5 estables contienen dos grupos arilo. La mayoría de los colores de artículos textiles y

6 de cuero son tratados con colorantes azoicos y pigmentos.2

7
8 Química de la fórmula en los azo compuestos.
9
10 UN GRUPO AZO es un grupo funcional del tipo R-N=N-R', en donde R y R' son grupos
11 que contienen átomos de carbono, y los átomos de nitrógeno están unidos por un enlace
12 doble. Los compuestos que contienen el enlace -N=N- se denominan azoderivados,
13 compuestos azoicos, o azocompuestos.
14
15 Cuando el grupo azo está conjugado con dos anillos aromáticos, el compuesto que lo
16 contiene absorbe radiación electromagnética en el espectro visible, por lo que presenta
17 coloración y, además, ésta es intensa. Por esto son empleados como colorantes en la
18 industria textil, papelera, alimentaria, etc. Por ejemplo, el p-dimetilaminoazobenceno se
19 empleó como colorante en la margarina.
20

21
Pruebas generales para aminoacidos y proteinas.
 Pagina 14

1 Aminoacidos que no estan presentes en las proteinas de la caseina: leucina, isoleucina y

2 valina

3 LEUCINA¿Que es?

4 La leucina es un aminoácido esencial. Junto con la isoleucina y la valina forman el grupo de los

5 llamados aminoácidos ramificados (BCAAs) y es uno de los veinte aminoácidos utilizados por

6 las células para sintetizar proteínas. La proporción natural de aminoácidos ramificados en las

7 proteínas animales es 2:1:1 (leucina:isoleucina:valina).

8 BCAA's ¿Que es?

9 Los aminoácidos ramificados (denominados también BCAAs por sus siglas en inglés) se refieren

10 a los aminoácidos leucina, isoleucina y valina. Se trata de los aminoácidos más hidrófobos y son

11 aminoácidos esenciales, lo que implica que es necesario ingerirlos en la dieta. Los aminoácidos,

12 incluidos los BCAA´s, se absorben en el intestino delgado mediante transportadores específicos

13 de aminoácidos hasta ser transportados por el torrente sanguíneo de la vena porta hasta el hígado.

14 La combinación de estos tres aminoácidos compone casi la tercera parte de los músculos y tienen

15 como principal función la síntesis proteica, servir como fuente de energía para músculos y

16 órganos, así como la de ser precursores de otros aminoácidos, como la alanina y la glutamina, en

17 estados catabólicos.

18 LEVÓGIRO: Que desvía hacia la izquierda el plano de polarización de la luz al ser atravesado

19 por ella.

20 ANFOLITO es lo mismo que una sustancia anfotérica o anfótera, es decir tiene grupos ácidos y

21 básicos en la misma molécula comportándose tanto como ácido como base. Ejemplo común: los

22 aminoácidos.

23 Un anillo de lactona entre el grupo carboxilo y el átomo de carbono 4 (configuración dienólica).

Pruebas generales para aminoacidos y proteinas.