UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTÓBAL DE HUAMANGA

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA Y METALURGIA

ESCUELA DE FORMACIÓN PROFESIONAL DE INGENIERÍA QUÍMICA

PRÁCTICA Nº3 DE QU-342

ANÁLISIS ESPECTROFOTOMÉTRICO DE UNA MEZCLA BINARIA Y TITULACIÓN FOTOMÉTRICA

DOCENTE (teoría y prácticas): Garcia Blasquez Morote, Jorge

INTEGRANTES : Flores Alvites, Jorge Luis
:huamaccto banesa

GRUPO: Martes (10-1 Pm)

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I. OBJETIVOS
 Aplicar la ley de Beer al análisis de una mezcla de dos componentes.
 Elaborar los espectros de cada componente.
 Determinar la concentración de cada componente presente en la mezcla.
 Elaborar la curva de titulación fotométrica del cobre con EDTA y determinar su
concentración.
 Observar la secuencia de operaciones en cada determinación.
II. FUNDAMENTO TEÓRICO

Ley de Lambert-Beer

Esta ley expresa la relación entre absorbancia de luz monocromática (de longitud de onda
fija) y concentración de un cromóforo en solución:

A = log I/Io = ε·c·l

La absorbancia de una solución es directamente proporcional a su concentración a mayor

número de moléculas mayor interacción de la luz con ellas; también depende de la
distancia que recorre la luz por la solución a igual concentración, cuanto mayor distancia
recorre la luz por la muestra más moléculas se encontrará; y por último, depende de ε, una
constante de proporcionalidad denominada coeficiente de extinción que es específica de
cada cromóforo. Como A es adimensional, las dimensiones de ε dependen de las de c y l.
La segunda magnitud (l) se expresa siempre en cm mientras que la primera (c) se hace,
-1 -1
siempre que sea posible, en M, con lo que las dimensiones de ε resultan ser M ·cm . Este
coeficiente así expresado, en términos de unidades de concentración molar (o un
submúltiplo apropiado), se denomina coeficiente de extinción molar (ε ). Cuando, por
M
desconocerse el peso molecular del soluto, la concentración de la disolución se expresa
-1
en otras unidades distintas de M, por ejemplo g·L , las dimensiones de ε resultan ser
-1 -1
distintas, por ejemplo g ·L·cm , y al coeficiente así expresado se denomina coeficiente de
extinción específico (ε ).
s
La ley de Lambert-Beer se cumple para soluciones diluidas; para valores de c altos, ε varía
con la concentración, debido a fenómenos de dispersión de la luz, agregación de
moléculas, cambios del medio, etc.

Instrumentación para la medición de absorbancias de la luz visible y ultravioleta:

espectrofotómetro UV-visible
La medición de absorbancia de la luz por las moléculas se realiza en unos aparatos
llamados espectrofotómetros. Aunque pueden variar en diseño, en especial con la
incorporación de ordenadores para el análisis de datos, todos los espectrofotómetros
constan, según se indica en la figura, de:
1. Una fuente de energía radiante: lámpara de deuterio y tungsteno.
2. Un monocromador para la selección de radiaciones de una determinada longitud de
onda: filtros, prismas, redes de difracción.
3. Un compartimento donde se aloja un recipiente transparente (cubetas o tubos) que
contenga la muestra Pueden ser de vidrio, cuarzo o plástico transparente. Para medir en
UV se deben usar las de cuarzo o sílice fundido, porque el vidrio no transmite la radiación
UV.
4. Un detector de luz y un amplificador convertidor de las señales luminosas en señales
eléctricas.
5. Un registrador o sistema de lectura de datos.

Desde el punto de vista operativo, el primer paso es seleccionar la fuente de luz y longitud
de onda a la que se va a realizar la medida. Hay espectrofotómetros de un solo haz (con
una sola celdilla para alojar la cubeta con la muestra) y de doble haz (con dos celdillas
para dos cubetas); en nuestro caso se trabajará con los de un solo haz.
Se mide primero la absorbancia del disolvente (conocido como blanco) y al que se le
asigna el valor de cero mediante el ajuste del mando, de forma que la intensidad incidente
y transmitida sean iguales (I = I ), y por tanto la absorbancia es cero. A continuación se
o t
pone en la celdilla la cubeta con la muestra y se lee la absorbancia de ésta.

Obtención de un espectro de absorción

El espectro de absorción es una representación gráfica que indica cantidad de luz absorbida (ε) a
diferentes valores de λ.
A partir de una solución diluida de un compuesto, cuya absorbancia máxima entra dentro del rango
de medida del espectrofotómetro, se verá el valor de absorbancia a diferentes longitudes de onda
frente a un blanco que contenga el disolvente de la solución de la muestra a caracterizar. A partir
del espectro de absorción se obtendrá el valor de λ al que el compuesto presenta la mayor
absorbancia (λ ). Dicho λ se utilizará a la hora de hacer determinaciones cualitativas y
max
cuantitativas del compuesto.
El espectro de absorción de un cromóforo depende, fundamentalmente, de la estructura
química de la molécula.
No obstante, hay una gran cantidad de factores que originan variaciones en los valores de
λ y ε , entre los que se incluye el pH, la polaridad del solvente o moléculas vecinas y la
max M
orientación de los cromóforos vecinos; y cada uno afecta de forma particular. Por ejemplo,
variaciones originadas por cambios de pH son debidas al efecto de éste sobre la
ionización del compuesto. A continuación se muestran como ejemplo los espectros de
absorción de HNTS (un reactivo empleado para la determinación de especies oxidantes) y
comprobándose que por espectrotometría se puede seguir el efecto que ejercen el pH y
los oxidantes.

Curvas de calibrado

Para obtener una curva de calibrado de un compuesto se preparan soluciones de

diferentes concentraciones del mismo, determinándose para cada una de ellas el valor de
absorbancia a λ . Estos valores de absorbancia se representan en el eje de abscisas
max
(eje de x) y los de concentración en el eje de ordenadas (eje de y). Se observará que, a
bajas concentraciones, el aumento de concentración se corresponde con un incremento
 lineal en la absorbancia (zona de cumplimiento de la ley de Lambert-Beer). A
concentraciones altas la linealidad se pierde y se observa que la línea se aplana, por lo
que las medidas son poco fiables.
La representación de Lambert-Beer, A = ε·c·l, nos permitirá calcular el valor del coeficiente
de extinción molar, que corresponde a la pendiente de la recta.

III. MATERILAES Y REACTIVOS

 Espectrofotómetro.
 Balanza analítica
 Erlemmeyer
 Espátula
 Vaso precipitado
 Varilla de vidrio
 Fiolas
 Pipietas volumétricas
 Matraz
 Agua destilada
 Permanganato de potasio (𝐾𝑀𝑛𝑂4 )
 Dicromato de potasio (𝐾2 𝐶𝑟2 𝑂7 )
 Luna de reloj
 Sal sódica de EDTA, 0.02M
 𝐶𝑢𝑆𝑂4 4𝑥10−3 M

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1.1. Análisis fotométrica de una mezcla binaria

Principio: si dos sustancias tienen diferentes espectros de absorción, sus mezclas se
pueden analizar realizando lecturas de absorbancias a dos longitudes de onda,basado
en que las absorbancias son aditivas.
Reactivos:
 𝐾𝑀𝑛𝑂4 : 2.5x10−3 , y 2.5x10−4 M
 𝐾2 𝐶𝑟2 𝑂7 : 2.5x10−3 , y 2.5x10−4 M

Procedimiento:
 Con las soluciones de 2.5x10−4 M, elaborar los espectros de absorción de
cada componente y determinar la longitud de onda de máxima absorción.
 Medir las absorbancias de los componentes puros y concentraciones
cocnocidas a las longitudes de onda determinadas para cada componente.
 Proceder de la misma manera con la muestra problema.

Tabla 𝑛°1

Componente C(M) A1(523nm) A2(350nm)

𝐾𝑀𝑛𝑂4 (a) 1𝑥10−3 2.208 1.216

𝐾2 𝐶𝑟2 𝑂7 (b) 5𝑥10−4 0.023 1.654

mezcla ------------- 0.323 0.998

Evaluación:

1. Presentar los espectros de absorción, indicando la longitud de onda de máxima

absorción.
2. Determinar las absortividades molares de cada componente.

𝑚𝑜𝑙 158 𝑔 1000𝑚𝑔 𝑚𝑔

𝐶𝐾𝑀𝑛𝑂4 = 1𝑥10−3 𝑥 𝑥 = 158.04
𝐿 1 𝑚𝑜𝑙 𝐾𝑀𝑛𝑂4 1𝑔 𝐿

𝑚𝑜𝑙 294.2 𝑔 1000𝑚𝑔 𝑚𝑔

𝐶𝐾2𝐶𝑟2 𝑂7 = 5𝑥10−4 𝑥 𝑥 = 147.1
𝐿 1 𝑚𝑜𝑙 𝐾2 𝐶𝑟2 𝑂7 1𝑔 𝐿

Ley de lambert-beer para (523 nm)

𝐴𝑎 = 𝑎𝑎 𝑥 𝑏 𝑥 𝐶𝑎 , 𝑏 = 1

Reemplazando datos de la tabla 1

2.208 = 𝑎𝑎 𝑥 158.04
𝑎𝑎 = 0.0139 𝐿𝑥𝑚𝑔−1

Remplazamos Luego para b

0.023 = 𝑎𝑏 𝑥147.1
𝑎𝑏 = 1.564𝑥10−4 𝐿𝑥𝑚𝑔−1

Ley de lambert-beer para (350 nm)

𝐴𝑎 = 𝑎𝑎 𝑥 𝑏 𝑥 𝐶𝑎 , 𝑏 = 1

Reemplazando datos de la tabla 1

1.216 = 𝑎𝑎 𝑥 158.04
𝑎𝑎 = 7.694𝑥10−3 𝐿𝑥𝑚𝑔−1

Remplazamos Luego para b

1.654 = 𝑎𝑏 𝑥147.1
𝑎𝑏 = 0.0113 𝐿𝑥𝑚𝑔−1

3. Determinar las concentraciones molares y los mg/L de los componentes en la

mezcla problema.
Para amplitud de onda de 523 nm

𝑨𝑴 = 𝑨𝒂 + 𝑨𝒃
𝒏𝒐𝒕𝒆𝒈 = 𝒂𝒂 𝒙𝑪𝒂 + 𝒂𝒃 𝒙𝑪𝒃
𝒏𝒐𝒕𝒆𝒏𝒈 = 0.0139 𝑥𝑪𝒂 + 1.564𝑥10−4 𝒙𝑪𝒃 … … … … … … . (𝑰)

Para amplitud de onda de 350 nm

𝑨𝑴 = 𝑨𝒂 + 𝑨𝒃
𝒏𝒐𝒕𝒆𝒈 = 𝒂𝒂 𝒙𝑪𝒂 + 𝒂𝒃 𝒙𝑪𝒃
𝒏𝒐𝒕𝒆𝒏𝒈 = 7.694𝑥10−3 𝑥𝑪𝒂 + 0.0113 𝒙𝑪𝒃 … … … … … … . (𝑰𝑰)
 Luego (I) Y (II) para obtener las concentraciones de la mezcla

𝒏𝒐𝒕𝒆𝒏𝒈 = 0.0139 𝑥𝑪𝒂 + 1.564𝑥10−4 𝒙𝑪𝒃

𝒏𝒐𝒕𝒆𝒏𝒈 = 7.694𝑥10−3 𝑥𝑪𝒂 + 0.0113 𝒙𝑪𝒃
𝑪𝒂 =
𝑪𝒃 =

OBSERVACIONES

 Las concentraciones del permanganato de potasio y bicromato de potasio que se

utilizaron en la práctica fueron 1x10−3 y 5𝑥10−4 respectivamente para que la practica
resultara correctamente.
 Los reactivos de permanganato de potasio y bicromato de potasio se utilizaron por el
diferente color que presentan es tos reactivos, por lo que se puede realizar una práctica
mucho más aceptable.
 Para poder determinar las absortividades molares de cada componente se tuvo que
trasformar las unidades de las concentraciones iniciales de los reactivos. Porque las
absortividades tienen diferentes unidades que las del coeficiente de extinción.

4.2. TITULACIÓN FOTOMÉTRICA

Principio: el acido etilen diaminotetraaacetico (EDTA) es uno de los agentes quelantes

mas importantes en las valoraciones complexo métricas. El EDTA (𝐻4 𝑌) forma
complejos muy estables con la mayoría de los iones metalicos en la proporción molar
1:1, todos los complejos son solubles en agua y la mayoría suelen ser incoloros o
ligeramente coloreados, intensifican de acuerdo a la concentración del producto, que
facilitan medir la variación de la absorbancia según se agrega el titulante.

Reactivos:
 Sal sódica de EDTA, 0.02M
 𝐶𝑢𝑆𝑂4 4𝑥10−3 M

Procedimiento:

Valoración del EDTA

𝑚𝐶𝑎𝐶𝑂3 = 0.400𝑔 en 500 mL
0.4
𝑀𝐶𝑎𝐶𝑂3 = = 7.993𝑥10−3 𝑀
100.09𝑥0.5
𝑉𝐶𝑎𝐶𝑂3 = 20 𝑚𝐿
𝑉𝐸𝐷𝑇𝐴 = 17.1 𝑚𝐿
𝑛° 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐶𝑎𝐶𝑂3 = 𝑛° 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐸𝐷𝑇𝐴

(𝑀𝑥𝑉)𝐶𝑎𝐶𝑂3 = (𝑀𝑥𝑉)𝐸𝐷𝑇𝐴

(𝑀)𝐸𝐷𝑇𝐴 = 9.348𝑥10−3 𝑀

 Medir exactamente 5 ml de solución de Cu (II), con una pipeta volumétrica a un

erlemmeyer de 50 ml y leer la absorbancia de esta solución a 710 nm,
calibrando el equipo con agua destilada.
 Agregar a la celda con una microbureta 0.2 ml de la solución de EDTA
desodica, mezclar y leer su absorbancia a 710 nm.
 Continuar con la titulación agregando porciones de 0.2 ml de titulante en
porciones de 0.2 ml hasta notar constancia en la absorbancia.
Evaluación:
1. Corregir las absorbancias leídas por el factor de dilución (V+v)/V, donde V= 5 ml y
v= 𝑚𝑙 de EDTA añadido.
Tabla n
V(ml) A(710nm) A(710nm) cor
0 0.042 0.042
0.2 0.085 0.0884
0.4 0.135 0.1458
0.6 0.175 0.196
0.8 0.223 0.25868
1.0 0.251 0.3012
1.2 0.293 0.36332
1.4 0.29 0.3712
1.6 0.283 0.37356
1.8 0.274 0.37264
2.0 0.266 0.3724
2.2 0.271 0.39024
2.4 0.262 0.38776
2.6 0.255 0.3876

2. Elaborar la curva de titulación: A corregida Vs V de EDTA agregado y determinar el

punto de equivalencia.

El punto de equivalencia es (1.2; 0.36332)

3. Calcular la concentración del cobre en la muestra en molaridad y partes por

millón.

𝑛° 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐶𝑢 = 𝑛° 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐸𝐷𝑇𝐴

 (𝑀𝑥𝑉)𝐶𝑢 = (𝑀𝑥𝑉)𝐸𝐷𝑇𝐴

9.348𝑥10−3 𝑥1.2
(𝑀)𝐶𝑢 =
5

(𝑀)𝐶𝑢 = 2.2435𝑥10−3 𝑀

𝑚𝑜𝑙 159.62𝑔 1000𝑚𝑔 𝑚𝑔

 2.2435𝑥10−3 𝑥 𝑥 = 358.11
𝐿 1𝑚𝑜𝑙 𝑑𝑒 𝐶𝑢𝑆𝑂4 1𝑔 𝐿

4. Averiguar el valor de la constante de estabilidad para el complejo formado y

comentar el comportamiento del pH a lo largo de la titulación.

El espectro de absorción de un cromóforo depende, fundamentalmente, de la

estructura química de la molécula.
No obstante, hay una gran cantidad de factores que originan variaciones en los
valores de λ y ε , entre los que se incluye el pH, la polaridad del solvente o
max M
moléculas vecinas y la orientación de los cromóforos vecinos; y cada uno afecta de
forma particular. Por ejemplo, variaciones originadas por cambios de pH son
debidas al efecto de éste sobre la ionización del compuesto. A continuación se
muestran como ejemplo los espectros de absorción de HNTS (un reactivo
empleado para la determinación de especies oxidantes) y comprobándose que por
espectrotometría se puede seguir el efecto que ejercen el pH y los oxidantes

OBSERVACIONES
 La concentración valorada del EDTA que se obtuvo fue 9.348𝑥10−3 M y fue la que se
utilizo para realizar la titulación fotométrica.
 La absorvancia leída sin corregir se alejaba de curva de titulación por lo no eran
resultados aceptables para el ensayo.
 Se tuvo que calibrar el espectrofotómetro cada dos leídas de absorvancia para no
tener un erar demasiado.

V. CONCLUSIONES

 La espectrofotometría es una técnica analítica que nos permite determinar la

concentración de un compuesto en solución. Se basa en que las moléculas absorben
las radiaciones electromagnéticas y a su vez que la cantidad de luz absorbida
depende de forma lineal de la concentración.
 se aplico la ley de beer a una mezcla de dos componentes, y se pudo determinar sus
concentraciones y absortividades correctamente.
 Se elaboro correctamente la curva de titulación fotométrica debido a corregir las
absorvancias por el factor de dilución del cobre con el EDTA. por lo tanto se pudo
determinar el punto de equivalencia de la curva.

 En esta práctica se dio a conocer las características generales y conceptos

relacionados con la espectrofotometría. tras la explicación del funcionamiento del
espectrofotómetro para realizar espectros de absorción con el fin de determinar la
longitud de onda donde la muestra presenta la máxima absorción, y tras realizar las
correspondientes rectas de calibrado se cuantificarán las concentraciones.

VI. BIBLIOGRAFIA

 http://eurlex.europa.eu/LexUriServ/LexUriServ.do?uri=OJ:L:2009:006:0020:0063:
ES:PDF
 http://ec.europa.eu/food/fs/sfp/addit_flavor/flav13_es.pdf
 file:///E:/analisis%20instrumental/Colorantes%20Naturales%20Del%20Valle.htm
 http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Carminic_acid_structure.png