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2017 Volumen 18 Nº 7 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n070717.html

REDVET - Revista electrónica de Veterinaria - ISSN 1695-7504

Mastitis bovina por recuento de células somáticas con


PortaSCC® y Test de California en el fundo de Allpachaca –
UNSCH, Ayacucho, Perú - Bovine mastitis by somatic cell count
with PortaSCC® and California Test at the Allpachaca Ayacucho
Production Unit, Peru

Tineo- Ayala, Javier J1. Andía- Ayme Vidalina2 *


1
Biólogo. Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Nacional de
San Cristóbal de Huamanga.
Mg. Biólogo. Laboratorio de Microbiología de Alimentos. Facultad de
Ciencias Biológicas, Universidad Nacional de San Cristóbal de
Huamanga
*Contacto: vidandia@yahoo.es, nathantin14@gmail.com

Resumen

La mastitis bovina es una enfermedad infecciosa común y compleja que tiene un


impacto en la producción lechera de la región Ayacucho. Con el objetivo de
determinar la frecuencia de mastitis sub clínica y asociar algunos factores: edad,
número de partos y período de lactación. Se evaluaron 95 bovinos de la raza
“Brown Swiss” en producción de leche en el fundo Allpachaca de la Universidad
Nacional de San Cristóbal de Huamanga (UNSCH),Ayacucho Perú ubicado en las
coordenadas 13°23´30.79” S; 74°15´56.48”O, con una altitud de 3528 msnm.
Para estimar la frecuencia de la enfermedad se utilizó el kit de recuento de
células somáticas de PortaSCC® (CCS) yla prueba de California Mastitis Test
(CMT) y para determinar dependencia de los factores asociados se utilizó la
prueba estadística de Chi-cuadrado. Se obtuvo 82,1% y 69.5% de frecuencia de
mastitis subclínica por las pruebas de CMT y CCS respectivamente
considerando trazas como positivos para las dos pruebas y, 65,3% y 62.1% de
frecuencia de mastitis subclínica considerando las trazas como negativos. De
las tres variables evaluadas, dos de ellas tienen una relación de asociación
porque indica que las vacas de mayor edad y con mayor de número de partos
tienen mayor riesgo a la mastitis sub clínica. De acuerdo a la prueba
estadística de Índice Kappa de Cohen, existe una buena concordancia entre la
prueba de CMT y CCS.

Palabras clave: leche, mastitis bovina, células somáticas, California test.

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Abstract

Bovine mastitis is a common and complex infectious disease that has an


impact on the milkmaid production of the Ayacucho region. With the aim to
determine the frequency of subclinical mastitis and to associate some factors:
age, number of births and lactation period. A total of 95 Brown Swiss cattle
were evaluated in milk production at the Allpachaca farm of the National
University of San Cristobal de Huamanga (UNSCH), Ayacucho, Peru; located at
coordinates 13 ° 23'30.79"S; 74 ° 15'56.48"W, with an altitude of 3528 meters
over sea level. To estimate the frequency of the disease, the PortaSCC®
somatic cell count kit (CCS) and the California Mastitis Test (CMT) were used;
and the Chi-square statistical test was used to determine dependence on the
associated factors. 82.1% and 69.5% of frequency of subclinical mastitis by
CMT and CCS, respectively were obtained, considering traces as positive for
both tests; and 65.3% and 62.1% of frequency of subclinical mastitis
considering the traces as negative. Of the three variables evaluated, two of
them have an association relationship because it indicates that older cows and
greater number of births are at greater risk for subclinical mastitis. According
to the Cohen’s Kappa Index statistical test, there is a good agreement between
the CMT test and CCS.

Key words: milk, bovine mastitis, somatic cells, California test.

INTRODUCCIÓN

La mastitis bovina es una enfermedad infecciosa común y compleja que tiene un


impacto en la industria lechera (Huijps et al., 2008; Sánchez et al., 2016; Souza,
et al., 2016), constituye la primera causa de pérdidas económicas en la
producción de leche a nivel mundial porque puede reducir significativamente la
producción y calidad de la leche y, aumentar el costo de producción, mano de
obra y el tratamiento de la enfermedad (Seegers et al., 2003, Gröhn et al., 2004;
Oliveira et al., 2013).La mastitis es una inflamación de la glándula mamaria que
suele ser causada por una infección bacteriana causada frecuentemente por
Streptococcusagalactiae y Staphylococcusaureus (Dohoo et al., 2011; Oliveira et
al., 2013). Además, existen otras causas que predisponen el ingreso de
microorganismos patógenos a las glándulas mamarias como la inadecuada
desinfección de las ubres durante el ordeño, deficiente uso de las máquinas de
ordeño, entre otros factores que pueden causar lesión al tejido y provocarla
mastitis (Acuña et al., 2008; Dohoo et al., 2011).

En condiciones de campo, los animales afectados con mastitis bobina pasan


desapercibidos en la evaluación clínica (Gómez et al., 2015). Por otro lado, los
criterios para el diagnóstico de la mastitis se han evaluado durante muchos años
y existen a la fecha varias metodologías y kit de diagnóstico, siendo una de las
técnicas más empleadas para evaluar la afección de las glándulas mamarias, la
prueba de California para Mastitis (California Mastitis Test) por su practicidad y

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simplicidad, bajo costo, y por su rapidez en la obtención de resultados de


diagnóstico en campo (Dohoo et al., 2011; Al-Edany et al., 2012; Sanford et al.,
2006).La información obtenida del diagnóstico de mastitis debe incluir también
tanto los resultados del cultivo microbiológico como las mediciones de la
inflamación, además de la discusión sobre el número de muestras que se deben
probar para maximizar los parámetros de sensibilidad y especificidad (Dohoo et
al., 2011; Souza, et al., 2016).Los valores de la prueba de California para
mastitis están directamente relacionados con el número de células somáticas en
la leche de vacas con cuartos mamarios afectados (Gómez et al., 2015).De la
misma forma el recuento de células somáticas de la leche (SCC) se ha utilizado
ampliamente como indicador de la mastitis (Dufour et al., 2013).

Una de las actividades importantes de los habitantes de las cuencas lecheras de


la región Ayacucho es la crianza del ganado vacuno con fines de comercialización
de leche y derivados. No obstante, uno de los problemas más relevantes de esta
crianza en la incidencia de la mastitis que ocasiona grandes pérdidas económicas
por la disminución de la calidad y cantidad de leche.

MATERIALES Y MÉTODOS

El presente trabajo de investigación se realizó en el fundo Allpachaca, distrito


de Chiara, provincia de Huamanga, Departamento de Ayacucho, ubicado en las
coordenadas 13°23´30.79” S; 74°15´56.48”O, con una altitud de 3528
msnm., y el Laboratorio de Microbiología de Alimentos de la Facultad de
Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de San Cristóbal de Huamanga
(UNSCH)ubicado en las coordenadas 13°08´44.00 S; 74°13´16.35”O, con una
altitud de 2790 msnm.

En el fundo de Allpachaca de la Universidad Nacional de San Cristóbal de


Huamanga, Ayacucho Perú, se procedió con la toma de muestra de la leche
de95 vacas de la raza “Brown Swiss” en periodo de ordeñoa fines del mes de
octubre e inicios del mes de noviembre de 2015. Para la recolección de datos
se elaboró una ficha que estaba organizado por bloques de los siguientes
datos: generales (nombre y número de arete de las vacas), edad, número de
partos, periodo de lactación. Así como también para los resultados del
diagnóstico del CMT y el recuento de células somáticas de la prueba de
PortaSCC® (CCS).

Recolección de muestras de leche

La toma de muestras se realizó a las primeras horas de la mañana, para ello


antes del ordeño se desinfectó las ubres con agua y jabón, luego se eliminó la
primera porción de leche, se tomó 10 – 12 mL de la muestra en un frasco por
cada pezón la cual se transportó al laboratorio para su análisis del CCS.

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Prueba de California para mastitis (CMT)

Se colocó 2 a 5 mL. de la leche en cada pocillo de la “paleta” con la


correspondiente numeración: pezón anterior derecho (I), pezón anterior
izquierdo (II), pezón posterior derecho (III) y pezón posterior izquierdo (IV),
luego se desechó la muestra de leche excedente hasta tener una cantidad de 2
mL y se agregó igual cantidad de reactivo de California Mastitis Test, después
se agitó en forma circular de 10 a 20 segundos y por último se reportó e
interpretó los resultados en la ficha correspondiente.

Recuento de células somáticas por la prueba de PortaSCC®

Se procedió de acuerdo a la ficha de instrucciones de la prueba, iniciándose


con la identificación de la muestra en cada tirilla, posteriormente se mezcló la
muestra de leche, luego se agregó una gota de leche al pocillo de la tira
utilizando una pipeta del kit. Se dejó que la leche se absorba completamente
en el pocillo; luego se agregó 3 gotas de solución activadora al pocillo de la
tira. Transcurrido 45 minutos se utilizó el lector digital, se realizó la lectura de
acuerdo a la hoja de instrucciones. Lector Digital. Una vez obtenido el
resultado, se multiplicó por 1,000,000 (ej: 0.16 = 160,000 células
somáticas/mL).

Análisis estadístico

Los resultados obtenidos de la prueba de CMT y CCS se agruparon en cuadros


de frecuencia de mastitis. Para determinar la asociación de mastitis y la edad,
número de partos, periodo de lactación, se realizó la prueba estadística no
paramétrica de asociación chi-cuadrado y, para determinar el grado de
concordancia de las dos pruebas se realizó la prueba estadística de Índice
Kappa de Cohen.

RESULTADOS Y DISCUSIONES

Los resultados obtenidos en el ordeño mecanizado en el fundo de Allpachaca y


considerando trazas como positivas de acuerdo a la prueba de CCS y CMT
(Figura 1) se encontró 69,5% y 82,1% de frecuencias de mastitis subclínica
respectivamente; esta información difiere al 39,5% reportado por Ramírez et
al., (2011) en Colombia, así como también difiere al 39,3% y 54,8%para
ordeño manual y mecánico reportado por Ruiz et al., (2008) en Brasil. En caso
de Perú, se asemejan a los trabajos realizados por Santibáñez et al., (2013) en
el distrito de Tamburco, Apurímac quienes reportaron 72,3% de prevalencia de
mastitis subclínica; Ccoya (2005) informó 26% y 19% en Huanacomarca
(Puno) con la prueba de Whiteside y CMT, y difiere al 33% reportado Ever
(2008) en la microcuenca de Allpachaca (Ayacucho). Sin embargo, la
frecuencia de mastitis subclínica considerando trazas como negativas utilizando
las mismas pruebas señaladas (Figura 1), se encontró 62,1% y 65,3% de
frecuencias de mastitis subclínica; estos datos se asemejan a los resultados de
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Santivañezetal., (2013) quienes reportaron 65,6% en el distrito de Tamburco


(Apurímac).Ruiz et al., (2008)realizaron las investigaciones en situación de
ordeño mecanizado y manual;mientras Gómez, et al (2015) desarrolló el
trabajo en situación de ordeño manual.La baja frecuencia reportada por Ruiz.
et al., (2008) se debió muy probablemente que en estas propiedades
productoras de leche se ordeña manual y mecánicamente. Además, reportaron
una frecuencia menor con ordeño manual y mayor con ordeño mecánico, esta
disparidad de resultados se atribuye a la influencia de una gran cantidad de
factores intrínsecos (entre ellos la higiene adecuada de las ubres, el tipo de
alimentación, limpieza del lugar de ordeño, limpieza del hato lechero, etc.) en
cada lugar que condicionan la presentación y forma de manifestación de la
enfermedad.

Figura 1. Frecuencia de mastitis subclínica en vacas individuales en el fundo


Allpachaca - UNSCH, Ayacucho 2015.

De otro lado, considerando trazas como positivas de acuerdo a la prueba CCS


y CMT (Figura 2) se obtuvo una frecuencia total de cuartos 45,3% y 58,5%
respectivamente; esta frecuencia es superior en 34,4% reportado por
Calderón et al., (2008) en sistemas especializados en producción de leche en
el altiplano cundiboyacense (Colombia), así como también es mayor en 20%
hallado por Ramírez et al. (2011) en la microcuenca lechera de altiplano norte
de la Antioquia (Colombia). Asimismo es muy cercano en 48,7% a la
información proporcionada por Gomez et al (2015) en el distrito de Tamburco
(Apurímac), muy superior en 12,9% reportado por Ever (2008) en la
microcuenca de Allpachaca (Ayacucho).Es probable que esta diferencia esté
relacionado con el número de razas que trabajaron en las investigaciones
señaladas, debido que en la presente investigación se trabajó únicamente con
la raza “Brown Swiss”, esto conllevaría que otras razas sean menos

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susceptibles a la infección. En cuanto a los resultados considerando trazas


como negativos de acuerdo a la prueba de CCS y CMT (Figura 2) se obtuvo
una frecuencia total de cuartos 42,3% y 38,5% respectivamente; similares
en42,3% reportado por Gomezet al (2015).

Figura 2. Frecuencia de mastitis subclínica en cuartos totales, en el fundo de Allpachaca


– UNSCH, Ayacucho 2015.

Con respecto a los cuartos individuales y considerando trazas como positivos


de acuerdo a la prueba de CCS y CMT (Figura 3) se hallaron que los cuartos
anterior derecho (39,8% y 55,9%) e izquierdo (37% y 48,9%), cuartos
posterior derecho (55,1% y 66,3%) e izquierdo (50% y 63,3%)
respectivamente, como se puede ver los cuartos posteriores son los que
presentan mayor frecuencia. Esta información es mucho mayor de 6,5%,
13,5%, 9,5% y 12% en el cuarto anterior derecho, anterior izquierdo,
posterior derecho y posterior izquierdo respectivamente mediante la prueba
de Whiteside y 4%, 7%, 7,5% y 7,5% en el cuarto anterior derecho, anterior
izquierdo, posterior derecho y posterior izquierdo respectivamente mediante
la prueba de CMT reportado por Ccoya (2005), así como también difiere de
9,73%, 11,7%, 15,5% y 12,7% en el cuarto anterior derecho, anterior
izquierdo, posterior derecho y posterior izquierdo respectivamente, indicado
por Ever (2008) en la microcuenca de Allpachaka (Ayacucho). Los datos
obtenidos en esta investigación se asemejan a 48,8%, 48,3%, 49,3% y
49,3% en el cuarto anterior derecho, anterior izquierdo, posterior derecho y
posterior izquierdo respectivamente publicado por Santibáñez et al., (2013).

Sin considerar trazas positivas, se tiene que el cuarto posterior derecho es el


más afectado con una frecuencia de 44,9% y 53,9% mediante la prueba de
CCS y CMT y el cuarto anterior izquierdo fue el menos afectado con una
frecuencia del 32,6% y 32,6% respectivamente (Figura 3).Estos resultados
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son similares a los resultados obtenidos por Santivañez et al. (2013) donde
los cuartos posterior derecho fueron los más afectados con 45,4% de
frecuencia y el menos afectado fue el cuarto posterior izquierdo con 40%.

Figura 3. Frecuencia de mastitis subclínica en cuartos individuales, en el fundo de


Allpachaca – UNSCH, Ayacucho 2015.

Existen una variedad de factores de riesgo que en conjunto predisponen a la


presentación de mastitis subclínica, en el presente estudio se evaluaron tres
factores: la edad, número de partos y período de lactación de las vacas. Al
evaluar la edad de acuerdo a la prueba de CCS y CMT considerando trazas
positivas, por la prueba estadística no paramétrica de asociación Chi-cuadrado
(Figura 4) los valores de Chi- cuadrado obtenidos fueron los siguientes:
13,76; 8,20 y sin considerar trazas positivas 8,32; 11,63 respectivamente;
todos los valores son mayores al valor crítico por tanto, existe dependencia
entre la mastitis subclínica y la edad de las vacas. De acuerdo a ello se puede
observar que las vacas que presentan mayor frecuencia de mastitis subclínica
son las que tienen de 5 a más años. Los resultados obtenidos se asemejan a
Ramírez et al., (2011) el cual halló la asociación de la edad y la mastitis; sin
embargo, la edad de 3 a 4 años de las vacas fue un factor de protección que
aquellas mayores a 4 años reportado por Santivañez et al. (2013)

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Figura 4. Frecuencia de mastitis subclínica en vacas con relación a la edad en enel


fundo de Allpachaca – UNSCH, Ayacucho 2015. Determinación utilizando el CCS
(superior) y CMT (inferior).

Con respecto a la variable del número de partos utilizando la prueba de CCS y


CMT considerando trazas positivas (Figura 5) los valores de Chi- cuadrado
obtenidos fueron 17,45; 8,20 y sin considerar trazas positivas 11,08; 18,63
respectivamente, estos resultados obtenidos son superiores al valor crítico,
por tanto existe dependencia entre la mastitis subclínica y el número de
partos de las vacas. Las vacas que presentaron mayor frecuencia de mastitis
subclínica son las que tienen de 3 a más número de partos. Santivañez et al.,
(2013) evaluando 15 variables reportaron que número de partos no afecta en
la presentación de mastitis subclínica. No obstante, los resultados obtenidos
coincide con la frecuencia de número de partos reportado por Ccoya (2005)
en el cual utilizando la prueba de Whiteside observó que a mayor número de
partos hay mayor frecuencia de mastitis subclínica; El mismo autor señala que
de acuerdo a la prueba de CMT la frecuencia fue de 30,43%, 27,9%, 31,42%,
17,14% y 3,12% para el primero, segundo, tercero, cuarto y cinco partos
respectivamente; de acuerdo a esta prueba se puede observar que la relación
es inversamente proporcional en el cual a mayor número de partos es menor
la frecuencia de mastitis subclínica. Así mismo la frecuencia reportada según

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Ever (2008) demuestra que a mayor número de partos es mayor la presencia


de mastitis subclínica.

Figura 5. Frecuencia de mastitis subclínica en vacas con relación al número de partos en


el fundo de Allpachaca – UNSCH, Ayacucho 2015.Determinación utilizando el
PortaSCC(superior) y CMT (inferior)

También se evaluó la variable periodo de lactación de acuerdo a la prueba de


CCS y CMT considerando trazas positivas (Figura 6) los valores de Chi-
cuadrado obtenidos fueron 1,88; 3,03 y sin considerar trazas positivas 3,99;
1,32 respectivamente; todos los valores son menores al valor crítico a
excepción de uno, por tanto no existe dependencia entre la mastitis subclínica
y el periodo de lactación de las vacas. Estos resultados difieren con el trabajo
de Ramírez et al., (2011) quienes afirman que el análisis de regresión reveló
que existe dependencia entre la mastitis subclínica y el periodo de lactación
de las vacas. Asimismo, Ramirez et al., (2011) señalan que la frecuencia por
meses de lactación fue de 43,47%, 39,53%, 42,85%, y 15,62%, para el
primer, segundo, tercero y cuarto a mas meses de lactación de acuerdo a la
prueba de whiteside, por tanto, se puede ver que a más meses de lactación la
frecuencia disminuye. Ccoya (2005) reportó de acuerdo a la prueba de CMT
13,04%; 17,33%; 15,78% y 25% de frecuencia para el primero, segundo,
tercero, cuarto a más meses de lactación. De acuerdo a Ever P. (2008) la
prevalencia según meses de lactación fue de los siguientes intervalos:
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25,71%; 27,08%; 51,51%; 27,27%: 44,44%, para el primero a segundo,


tercero a cuarto, quinto a sexto, séptimo a octavo y de ocho a más meses de
lactación, respectivamente.

Figura 6. Frecuencia de mastitis subclínica en vacas con relación al período de lactación


en el fundo de Allpachaca – UNSCH, Ayacucho 2015. Determinación utilizando el
PortaSCC (superior) y CMT (inferior).

Por último se realizó una comparación para ver el grado de concordancia de


las pruebas de CCS y CMT por la prueba estadística de Índice de Kappa de
Cohen (Tabla 1 y 2) en el cual se comparó las dos pruebas considerando
trazas positivas y negativas. Los resultados que se obtuvieron fueron de 0,663
y 0,704 para trazas positivas y negativas. La teoría afirma que mientras el
valor obtenido se aproxime a 1 es mayor la concordancia, por tanto existe una
muy buena concordancia entre las dos pruebas señaladas.

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Tabla 1. Frecuencia de mastitis subclínica por el test CMT con relación a la frecuencia
de mastitis subclínica por recuento de CCS considerando trazas positivas.

Tabla 2. Frecuencia de mastitis subclínica por el test CMT con relación a la frecuencia de
mastitis subclínica por recuento de CCS considerando trazas negativas.

CONCLUSIONES

1. Se encontró un 66% de mastitis subclínica considerando las trazas como


positivas y un 59% considerando las trazas como negativas utilizando la
prueba de CCS.
2. Se presentó un 78% de mastitis subclínica considerando las trazas como
positivas y un 62% considerando las trazas como negativas de acuerdo
alaprueba del CMT.
3. La edad y número de partos de las vacas presentan una relación directa con
la mastitis subclínica.

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4. La prueba de recuento de CCS y el CMT de acuerdo a la prueba estadística


de índice de Kappa muestra que existe una buena concordancia entre ambas
pruebas para el diagnóstico de la mastitis subclínica.

Agradecimiento:

Al Médico Veterinario Diomedes Ataucusi Yupanqui, Director del Fundo


Allpachaca por el apoyo técnico en la realización del presente trabajo. Al Dr.
Gilmar Peña Rojas, docente de la UNSCH por su asesoría en la elaboración del
presente artículo.

Literatura citada

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Mastitis bovina por recuento de células somáticas con PortaSCC® y Test de California en el fundo de Allpachaca 13
– UNSCH, Ayacucho, Perú
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