ejercicio
1
Mecanismos
de transporte
y permeabilidad celular
C
ada célula de tu organismo está rodeada por una mem-
brana plasmática que la separa del líquido intersticial.
La función principal de la membrana plasmática es
permitir el intercambio selectivo de moléculas entre la
célula y el líquido intersticial, de modo que la célula pueda
tomar las sustancias que necesita mientras que elimina las
que no necesita. Entre estas sustancias se incluyen gases, ta-
les como oxígeno y dióxido de carbono, iones y moléculas
más grandes tales como glucosa, aminoácidos, ácidos grasos
y vitaminas.
Las moléculas se mueven a través de la membrana plas-
mática pasiva o activamente. En el transporte activo, las mo-
léculas se mueven a través de la membrana plasmática consu-
miendo energía celular (ATP). En el transporte pasivo, las
moléculas pasan a través de la membrana plasmática sin gasto
de energía. Los ejemplos del transporte pasivo son la difusión
simple, la ósmosis y la difusión facilitada. La difusión sim-
ple es el movimiento espontáneo de moléculas a través de la
bicapa lipídica de una membrana biológica desde un área con
una concentración más alta hasta otra con una concentración
más baja. La ósmosis es la difusión de agua a través de una
membrana semipermeable. La difusión facilitada es el mo-
vimiento de moléculas a través de una membrana selectiva-
mente permeable con la ayuda de proteínas especializadas de
transporte incrustadas dentro de la membrana.
En este ejercicio, simularemos cada uno de estos meca-
nismos de transporte celular. Comenzaremos examinando la
difusión simple.
Difusión simple
Todas las moléculas, sean de sólidos, líquidos o gases, están
en continuo movimiento o vibración. Si hay un aumento en la
temperatura, las moléculas se moverán más rápidamente. Las
moléculas que se mueven chocan entre sí, cambiando su di-
rección. Así, el movimiento de moléculas se dice que es «al
azar». Si uno vertiera una gota de colorante líquido alimenti-
cio en un recipiente grande de agua, las moléculas del colo-
rante se moverían aleatoriamente hasta que su concentración
fuera igual en todo el recipiente. Las moléculas alcanzarían el
equilibrio a través del proceso de difusión. Definimos la difu-
sión como el movimiento de moléculas de un lugar a otro
como resultado de su movimiento térmico al azar. La difu-
sión simple es la difusión a través de la bicapa lipídica de una
membrana biológica.
La velocidad a la cual una molécula se mueve a través de
una membrana depende en parte de la masa, o peso molecu-
lar, de la molécula. Cuanto más grande es la masa, más lenta-
Objetivos
1. Entender la función de permeabilidad selectiva de
la membrana plasmática.
2. Poder describir los diversos mecanismos por los
cuales las moléculas pueden cruzar pasivamente
la membrana plasmática.
3. Poder describir los diversos mecanismos por los
cuales las moléculas son transportadas activa-
mente a través de la membrana plasmática.
4. Entender las diferencias entre los mecanismos de
transporte de la membrana con y sin gasto de
energía metabólica.
5. Definir transporte pasivo, transporte activo, di-
fusión simple, difusión facilitada, ósmosis,
bomba de solutos, hipotónico, isotónico e hiper-
tónico.
mente difundirá la molécula. Normalmente, la velocidad a la
que una sustancia difunde a través de la membrana puede ser
determinada midiendo la velocidad a la cual su concentración
en un lado de la membrana se acerca a la concentración de la
sustancia en el otro lado de la membrana. La magnitud del
movimiento neto a través de la membrana, o flujo (F), es pro-
porcional a la diferencia de concentración entre los dos lados
de la membrana (Co " Ci), a su área superficial (A) y a su
constante de permeabilidad (kp):
F # kpA(Co " Ci)
Las sustancias no polares difundirán con bastante rapi-
dez a través de una membrana. La razón es que estas sustan-
cias se disolverán en las regiones no polares de la membrana
—regiones que están ocupadas por cadenas de ácidos grasos
de fosfolípidos de membrana. Los gases, tales como el oxí-
geno y el dióxido de carbono, los esteroides y los ácidos gra-
sos son las principales moléculas no polares que difundirán
rápidamente a través de una membrana.
Por el contrario, las sustancias polares tienen una solubi-
lidad mucho más baja en los fosfolípidos de membrana. Cier-
tos compuestos intermediarios del metabolismo, general-
mente, no son capaces de atravesar la membrana, ya que a
menudo están ionizados y contienen grupos tales como fos-
fato. Así, una vez producidos en la célula no pueden abando-
narla incluso si sus concentraciones son más altas dentro que
fuera de ella. De esto podemos concluir que la porción de la bi-
capa lipídica de la membrana plasmática es la responsable de
su selectividad en cuanto al paso de sustancias a través de sí.
1
2 Ejercicio 1
Los iones, tales como Na$ y Cl", tienden a difundir con
bastante rapidez a través de una membrana. Esto sugiere la
implicación de un componente proteico de la membrana —y,
de hecho, las proteínas forman los canales que permiten que
estos iones pasen de un lado de la membrana al otro. Re-
cuerda que los canales son selectivos. Los que permiten pasar
al sodio generalmente no permitirán el paso a otros iones, ta-
les como el calcio.
La difusión conducirá a un estado en el cual la concen-
tración de los solutos que difunden es constante en el espacio
y el tiempo. La difusión a través de una membrana tiende a un
equilibrio donde hay concentraciones iguales de soluto en
ambos lados de la membrana. La velocidad de difusión es
proporcional al área de la membrana y a la diferencia en la
concentración del soluto a ambos lados de la misma. La pri-
mera ley de Fick de la difusión indica
J # "DA %c/%x
donde
J # velocidad neta de difusión (g o moles/unidad de
tiempo)
D # coeficiente de difusión para el soluto que difunde
A # área de la membrana
Figura 1.1 Pantalla de inicio del experimento de Difusión simple.
%c # diferencia de concentración a través de la mem-
brana
%x # grosor de la membrana
Actividad 1:
Simulando la difusión simple
Sigue las instrucciones de la sección «Primeros pasos» al co-
mienzo de este manual para iniciar PhysioEx 6.0. Del menú
principal selecciona el primer ejercicio: Mecanismos de
Transporte y Permeabilidad Celular (Cell Transport Me-
chanisms and Permeability). Verás la pantalla de inicio de la
actividad de «Difusión Simple» (Simple Diffusion), mostrada
en la Figura 1.1.
En esta actividad simularemos el proceso de la difusión a
través de la membrana plasmática. Observa los dos recipientes
de cristal en la parte superior de la pantalla. Llenarás cada re-
cipiente con líquido. Imagina que el recipiente de la derecha
representa el interior de una célula, mientras que el de la iz-
quierda representa el fluído extracelular (intersticial). Entre los
dos recipientes hay un contenedor de membranas en el cual
colocarás una de las cuatro membranas de diálisis que se
 Mecanismos de transporte y permeabilidad celular 3

encuentran en la parte derecha de la pantalla. Cada una de ellas 11. Ahora, repite los pasos 1-10 con cada una de las restantes
tiene un «MWCO» diferente que significa «límite de peso mo- membranas de diálisis. Asegúrate de guardar los datos de
lecular». Las moléculas con un peso molecular inferior a este cada uno de los experimentos. Después de cada experimento,
valor pueden atravesar la membrana, mientras que las molécu- limpia cada uno de los recipientes y devuelve la membrana de
las con un peso molecular superior no pueden. Para mover una diálisis a su lugar.
membrana al contenedor, pulsa sobre ella, arrástrala al conte-
nedor de membranas y suelta el botón del ratón —la mem- Ayúdate de la Tabla Periódica de elementos de la pág. 4 de
brana se colocará en su lugar entre los dos recipientes. este libro.
Debajo de cada uno de los recipientes hay un dosificador ¿Cuál es el peso molecular del Na$? ________
de soluciones. Puedes seleccionar cuántos milimoles (mM)
de los diferentes solutos (Na$/Cl", urea, albúmina o glucosa) ¿Cuál es el peso molecular del Cl"? ________
deseas dosificar en cada recipiente pulsando los botones ($)
o (") debajo del nombre de cada soluto. También puedes do- ¿Qué límite (MWCO) de membrana de diálisis permitió el
sificar agua desionizada en cualquier recipiente pulsando el
botón Agua Desionizada (Deionized Water) debajo del reci- paso de ambos iones? ________
piente que desees llenar. Pulsando los botones de Dosificar
12. Repite este experimento usando cada uno de los solutos
(Dispense) debajo de cada recipiente se llenarán los recipien-
restantes (urea, albúmina y glucosa) en el recipiente de la iz-
tes con líquido. Pulsando los botones Limpiar (Flush) de-
bajo de cada recipiente éstos se vaciarán. quierda y agua desionizada en el recipiente de la derecha.
En la parte inferior de la pantalla hay un módulo de re- Asegúrate de pulsar Guardar Datos (Record Data), limpiar
gistro de datos. Después de cada experimento debes guardar ambos recipientes y sustituir la membrana de diálisis después
tus datos pulsando el botón Guardar Datos (Record Data). de cada experimento. Pulsa Herramientas (Tools) ! Impri-
Si deseas borrar los datos de cualquier experimento, simple- mir Datos (Print Data) para imprimir tus datos.
mente resalta la línea de datos que deseas suprimir y pulsa 13. Completa la siguiente tabla con tus resultados.
Borrar Experimento (Delete Run). También puedes impri-
mir tus datos pulsando Herramientas (Tools) (en la parte su-
perior de la pantalla) y después seleccionando Imprimir Da-
tos (Print Data). Tabla 1 ¿Se produjo difusión?
1. Con el ratón pulsa sobre la membrana de diálisis con el
MWCO de 20 y arrástrala al contenedor de membranas. Membrana (MWCO)
2. Ajusta la concentración de Na$/Cl" del recipiente de la
izquierda a 9 mM pulsando el botón ($). Pulsa entonces el Soluto 20 50 100 200
botón de Dosificar (Dispense) debajo del recipiente de la iz-
quierda para que se llene. NaCl
3. Pulsa el botón Agua Desionizada (Deionized Water) de-
bajo del recipiente de la derecha y pulsa Dosificar (Dispense) Urea
debajo del mismo recipiente para que se llene.
Albúmina
4. Fija el Temporizador (Timer) a 60 minutos pulsando el
botón ($) junto al indicador de tiempo (que estará compri-
mido en 60 segundos.) Glucosa
5. Pulsa el botón Iniciar (Start) para comenzar el experi-
mento. Observa que el contenedor de membranas desciende
al interior del equipo. Observa también que el botón Iniciar
¿Qué materiales difundieron del recipiente de la izquierda al
(Start) cambia ahora a un botón de Pausa (Pause), que pue-
recipiente de la derecha?
des pulsar para interrumpir el experimento.
6. Cuando el indicador de Tiempo Transcurrido (Elapsed
Time) llega a 60, fíjate en las lecturas de concentración de
cada uno de los recipientes en los indicadores situados junto ¿Cuáles no difundieron?
a cada uno de ellos.
7. Una vez que el indicador de Tiempo Transcurrido (Elap-
sed Time) ha llegado a 60, verás aparecer una caja de diálogo ¿Por qué?
indicando si se ha alcanzado o no el equilibrio.
8. Pulsa Guardar Datos (Record Data) para guardar los
datos de este experiemento.
9. Pulsa los botones Limpiar (Flush) de ambos lados, iz-
quierdo y derecho, para vaciar los recipientes.
10. Devuelve la membrana de diálisis a su lugar inicial pul-
sando sobre ella y arrastrándola al contenedor de membranas. ■
 4

IA VIIIA
1 1 Número atómico 18
1 H Símbolo 2
H Hidrógeno Nombre He
Hidrógeno 1.008 Peso atómico
Ejercicio 1

IIA IIIA IVA VA VIA VIIA Helio

1.008 2 13 14 15 16 17 4.003
3 4 5 6 7 8 9 10
Li Be B C N O F Ne
Litio Berilio Boro Carbono Nitrógeno Oxígeno Flúor Neón
6.941 9.012 10.81 12.01 14.01 16.00 19.00 20.18
11 12 13 14 15 16 17 18
Na Mg VIIIB Al Si P S Cl Ar
Sodio Magnesio IIIB IVB VB VIB VIIB IB IIB Aluminio Silicio Fósforo Azufre Cloro Argón
22.99 24.31 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 26.98 28.09 30.97 32.06 35.45 39.95
19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36
K Ca Sc Ti V Cr Mn Fe Co Ni Cu Zn Ga Ge As Se Br Kr
Potasio Calcio Escandio Titanio Vanadio Cromo Manganeso Hierro Cobalto Níquel Cobre Cinc Galio Germanio Arsénico Selenio Bromo Criptón
39.10 40.08 44.96 47.88 50.94 52.0 54.94 55.85 58.93 58.70 63.55 65.38 69.72 72.59 74.92 78.96 79.90 83.80
37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54
Rb Sr Y Zr Nb Mo Tc Ru Rh Pd Ag Cd In Sn Sb Te I Xe
Rubidio Estroncio Itrio Circonio Niobio Molibdeno Tecnecio Rutenio Rodio Paladio Plata Cadmio Indio Estaño Antimonio Teluro Yodo Xenón
85.47 87.62 88.91 91.22 92.91 95.94 (98) 101.1 102.9 106.4 107.9 112.4 114.8 118.7 121.8 127.6 126.9 131.3
55 56 57 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86
Cs Ba La* Hf Ta W Re Os Ir Pt Au Hg Tl Pb Bi Po At Rn
Cesio Bario Lantano Hafnio Tantalio Volframio Renio Osmio Iridio Platinio Oro Mercurio Talio Plomo Bismuto Polonio Astato Radón
132.9 137.3 138.9 178.5 180.9 183.9 186.2 190.2 192.2 195.1 197.0 200.6 204.4 207.2 209.0 (209) (210) (222)
87 88 89 104 105 106 107 108 109
Fr Ra Ac** Rf Db Sg Bh Hs Mt
Francio Radio Actinio Rutherfordio Dubnio Seaborgio Bohrio Hassio Meitnerio
(223) (226) (227) (261) (262) (263) (262) (265) (266)

58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71
Ce Pr Nd Pm Sm Eu Gd Tb Dy Ho Er Tm Yb Lu
* Serie Lantánido Cerio Praseodimio Neodimio Promecio Samario Europio Gadolinio Terbio Disprosio Holmio Erbio Tulio Iterbio Lutecio
140.1 140.9 144.2 (145) 150.4 152.0 157.3 158.9 162.5 164.9 167.3 168.9 173.0 175.0
90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103

** Serie Actínido
Th Pa U Np Pu Am Cm Bk Cf Es Fm Md No Lr
Torio Protactinio Uranio Neptunio Plutonio Americio Curio Berkelio Californio Einstenio Fermio Mendelevio Nobelio Laurencio
232.0 (231) 238.0 (237) (244) (243) (247) (247) (251) (252) (257) (258) (259) (262)

Tabla Periódica de elementos


Actividad 2:
Simulando la diálisis
Ahora, vamos simular un experimento en la máquina de diá-
lisis. Estas máquinas se utilizan en los pacientes que han per-
dido la función renal. La urea, un producto de degradación de
los aminoácidos, debe eliminarse de la sangre del paciente o
llegará a ser tóxica para el organismo causando su muerte.
Las máquinas de diálisis toman la sangre del paciente y la pa-
san a través de una membrana selectivamente permeable para
eliminar la urea de la sangre. En un lado de la membrana está
la sangre del paciente; en el otro están las soluciones selec-
cionados cuidadosamente para mimetizar las concentracio-
nes de sustancias tales como Na$, K$, Ca$$ y HCO3" que se
encuentran en el organismo. Para simular este proceso:
1. Coloca la membrana de diálisis de 200 MWCO en el
contenedor de membranas.
2. Ajusta el recipiente de la izquierda a 10 mM para cada
uno de los cuatro solutos y dosifica. Este recipiente represen-
tará la sangre del paciente sometido a diálisis.
3. Ajusta el recipiente de la derecha de la misma manera,
con excepción de la urea que se ajusta a 0 mM —es decir, el
recipiente de la derecha no contendrá urea.
4. Ajusta el Temporizador (Timer) a 60 minutos, después
pulsa Iniciar (Start) y espera a que se complete el experi-
mento.
¿Qué sucede con la concentración de urea en el recipiente de
la izquierda (el paciente)?
¿Por qué ocurre esto?
Normalmente, las máquinas de diálisis se ajustan de forma que
la sangre se somete dos veces a difusión y la urea se reduce un
75% en vez del 50%. Además se extrae el exceso de agua del
paciente, que no tiene ninguna otra manera de eliminar el ex-
ceso de líquido. Los pacientes sometidos a diálisis necesitan
hacerse pruebas analíticas para asegurarse de que las concen-
traciones de iones se mantienen en los niveles normales.
Difusión facilitada
La difusión simple solo considera para el transporte a través
de la membrana algunos iones, pero no todos. Algunas molé-
culas, que son demasiado polares para difundir, pueden
conseguir atravesar la bicapa lipídica de la membrana plas-
mática. Igualmente, algunas moléculas que son demasiado
grandes para pasar a través de los canales proteicos consiguen
cruzar la membrana. ¿Cómo? El paso de tales moléculas y el
Mecanismo de transporte y permeabilidad celular 5
movimiento sin difusión de iones a través de una membrana
está mediado por proteínas integrales conocidas como trans-
portadores. Los transportadores están incrustados dentro de
la membrana plasmática y experimentan un cambio confor-
macional que permite que se produzca el transporte. Primero,
se une una molécula al sitio receptor de un transportador.
Cuando está unida, el transportador cambia de conformación
de modo que el sitio de unión se mueve de un lado de la mem-
brana al otro. Entonces, la molécula se disocia del transporta-
dor y se libera en el otro lado de la membrana. Este tipo de
transporte se denomina difusión facilitada. Se considera una
forma de transporte pasivo porque no se consume energía ce-
lular en el proceso.
El término difusión facilitada es un poco engañoso
puesto que el proceso realmente no implica difusión (que,
como recordarás, es el movimiento de moléculas de un lugar
a otro siguiendo un gradiente de concentración, como resul-
tado del movimiento térmico al azar). En la difusión facili-
tada las moléculas también se mueven de un lugar a otro si-
guiendo un gradiente de concentración, pero son las proteínas
transportadoras las que dan lugar a este movimiento —no el
movimiento térmico al azar. Los resultados finales de la difu-
sión y de la difusión facilitada son los mismos. El flujo neto
se produce de un área de alta concentración a otra de baja
concentración hasta que estas se igualan a ambos lados de la
membrana.
Entre los sistemas de difusión facilitada más importantes
del organismo están los que mueven la glucosa a través de la
membrana. Sin los transportadores, esta molécula polar rela-
tivamente grande nunca podría pasar a la célula. Sin em-
bargo, el número de proteínas de transporte en una membrana
celular dada es finito, de forma que solo cierta cantidad de
glucosa puede transportarse por unidad de tiempo. El trans-
porte de glucosa dentro de la célula es especialmente intere-
sante, ya que es convertida a glucosa-6-fosfato tan pronto
como se incorpora a la célula, de modo que siempre hay una
baja concentración de glucosa en su interior, lo que favorece
el transporte hacia el interior celular. ■
Actividad 3:
Difusión facilitada
Usando el ratón, pulsa Experimento (Experiment) en la parte
superior de la pantalla. Aparecerá un menú desplegable. Se-
lecciona Difusión Facilitada (Facilited Diffusion). Apa-
recerá una nueva pantalla (Figura 1.2). Notarás dos cambios
fundamentales respecto a la primera pantalla. Primero, en lu-
gar de las membranas de diálisis a la derecha de la pantalla,
ahora hay un «Constructor de Membranas» (Membrane Buil-
der). Será utilizado para «fabricar» membranas que transpor-
tarán las moléculas de un recipiente a otro. El segundo cam-
bio es que, en este experimento, trabajaremos sólamente con
glucosa, Na$ y Cl".
1. Observa que el indicador de Transportadores de Glu-
cosa (Glucose Carriers) en este momento está fijado a 500.
Pulsa Construir Membrana (Build Membrane) para crear
una membrana con 500 transportadores.
2. Pulsa y arrastra esta membrana al contenedor de mem-
branas situado entre los dos recipientes.
6 Ejercicio 1

Figura 1.2 Pantalla de inicio del experimento de Difusión facilitada.

3. En el recipiente de la izquierda fija el Na$/Cl" a 9 mM y 10. Construye una membrana con 900 transportadores de
la glucosa a 9 mM pulsando los botones ($) correspondien- glucosa y repite este experimento.
tes. Entonces pulsa Dosificar (Dispense) para llenar el reci- 11. Para comparar, disminuye la concentración de glucosa
piente de la izquierda. a 3 mM y repite los pasos 1-10 del experimento. Guarda tus
4. En el recipiente de la derecha pulsa el botón Agua De- resultados después de cada experimento pulsando Guardar
sionizada (Deionized Water) debajo del mismo y después Datos (Record Data) y completa la Tabla 2.
Dosificar (Dispense).
5. Fija el Temporizador (Timer) a 60 minutos y pulsa Ini-
ciar (Start).
Tabla 2 Resultados de Difusión facilitada
6. Deja que termine experimento. Cuando el indicador de
Tiempo Transcurrido (Elapsed Time) llega a 60, pulsa Guar-
dar Datos (Record Data) para guardar tus datos. Anota tam- Concentración N.o de proteínas
bién tus datos en la Tabla 2. de glucosa transportadas de glucosa
(mM) 300 500 700 900
7. Pulsa el botón Limpiar (Flush) debajo de cada reci-
piente para vaciarlos y devuelve la membrana al constructor 3
de membranas.
8. Construye una nueva membrana con 300 transportadores 9
de glucosa y repite este experimento. Asegúrate de guardar
tus resultados, limpiar los recipientes y reemplazar la mem-
brana después de cada experimento.
9. Construye una membrana con 700 transportadores de 12. Pulsa Herramientas (Tools) ! Imprimir Datos (Print
glucosa y repite este experimento. Data) para imprimir tus datos.

A una concentración dada de glucosa, ¿cómo varía el tiempo
necesario para alcanzar el equilibrio en función del número
de transportadores empleados «para construir» la membrana?
¿Varía la velocidad de difusión del Na$/Cl" con el número de
receptores?
¿Cuál es el mecanismo de transporte del Na$/Cl"?
Si pones la misma cantidad de glucosa en el recipiente de la
derecha y en el de la izquierda, ¿se observaría difusión?
El hecho de no observar difusión, ¿significa necesariamente
que no está ocurriendo la difusión?
■ Ósmosis
Ósmosis
Una membrana semipermeable es una membrana que es per-
meable al agua pero no a los solutos. La ósmosis se define
como el flujo de agua a través de una membrana semipermea-
ble desde un área con una mayor concentración de agua (una
concentración más baja de solutos) hasta otra con una menor
concentración de agua (una concentración más alta de solu-
tos). Cuanto mayor es la concentración de solutos, menor es
la concentración de agua. La ósmosis se define también como
una «propiedad coligativa» porque depende de la concentra-
ción del soluto más que de sus propiedades químicas. El agua
es una pequeña molécula polar que difunde muy rápidamente
a través de las membranas celulares. Debido a su naturaleza
polar, es de esperar que el agua no penetre en las regiones li-
pídicas no polares de la membrana celular. Proteínas de
membrana, denominadas acuaporinas, forman canales a tra-
vés de los cuales puede difundir el agua. La concentración de
estas acuaporinas varía con el tipo de tejido.
Es esencial entender que el grado hasta el cual disminuye
la concentración de agua por la adición de solutos depende del
número de las partículas de soluto agregadas. Por ejemplo, 1
mol de glucosa disminuye la concentración de agua aproxima-
damente lo mismo que una solución de 1 mol de aminoácido o
1 mol de urea. Una molécula que se ioniza disminuye la con-
centración de agua en proporción al número de iones que se
forman. Por lo tanto, una solución de 1 mol de Na$/Cl" pro-
duce una solución de Na$ de 1 mol más una solución de Cl"
de 1 mol. Por tanto, básicamente es una solución de 2 moles.
Dos recipientes separados por una membrana de diálisis
(tales como con los que hemos estado trabajando) no son in-
finitamente distensibles. La transferencia de agua desde un
Mecanismo de transporte y permeabilidad celular 7
compartimento a otro aumentará la cantidad de agua en el se-
gundo. Si los límites del recipiente no pueden ampliarse, la
presión dentro del segundo recipiente aumentará, impidiendo
la entrada adicional de agua. La presión que necesita ser apli-
cada al segundo recipiente para impedir la entrada adicional
de agua desde el primero se denomina presión osmótica. La
presión osmótica es otra característica que depende de la con-
centración de agua de la solución.
Si las soluciones en los recipientes tienen la misma con-
centración de solutos que no atraviesan de un lado a otro de la
membrana, las dos soluciones se dice que son isotónicas (iso
# iguales). Los solutos que «atraviesan» la membrana no con-
tribuyen a la tonicidad de una solución ya que pasan de un lado
a otro de la membrana sin problemas. Cuando se comparan dos
soluciones y una tiene una concentración más baja de solutos,
esa solución se dice que es hipotónica (hipo # menos). La otra
solución, la que tiene la concentración más alta, se dice que es
hipertónica (hiper # más). Esto es importante al hablar de cé-
lulas. Si una célula es hipertónica con respecto a su medio cir-
cundante, el agua fluirá a su interior para diluir la solución hi-
pertónica. A menudo entra tanta agua que la célula estalla.
Actividad 4:
Pulsa Experimento (Experiment) en la parte superior de la
pantalla y selecciona Ósmosis. Aparecerá una nueva pantalla
(Figura 1.3). Esta es similar a la que vimos para el experi-
mento de Difusión Simple (Simple Diffusion). El principal
cambio es que en la parte superior de cada recipiente hay un
indicador de presión, que veremos durante el transcurso de
los experimentos.
1. Arrastra una membrana de 20 MWCO y colócala entre
los dos recipientes.
2. Fija la concentración de Na$/Cl" del recipiente de la iz-
quierda a 9 mM y pulsa Dosificar (Dispense).
3. Llena el recipiente de la derecha con Agua Desionizada
(Deionized Water) y pulsa Dosificar (Dispense).
4. Fija el Temporizador (Timer) a 60 minutos.
5. Pulsa Iniciar (Start) y deja que transcurra el experi-
mento. Presta atención a los indicadores de «presión» (Pres-
sure) en la parte superior de cada recipiente.
6. Una vez detenido el Tiempo Transcurrido (Elapsed
Time) pulsa Guardar Datos (Record Data). Anota también
los datos en la Tabla 3 de la pág. 8.
7. Pulsa Limpiar (Flush) debajo de ambos recipientes para
vaciarlos.
8. Devuelve la membrana a su lugar original.
9. Repite el experimento usando las tres membranas restan-
tes. Asegúrate de guardar todos tus datos y limpiar los reci-
pientes entre cada experimento.
¿Observaste cambios de presión durante este experimento? Si
es así ¿en qué recipiente(s) y con qué membranas?
8 Ejercicio 1

Figura 1.3 Pantalla de inicio del experimento de Ósmosis.

¿Por qué? 10. Repite el experimento usando primero albúmina 9 mM

en el recipiente de la izquierda y después glucosa 9 mM.
Pulsa Guardar Datos (Record Data) después de cada expe-
rimento; anota también tus datos en la Tabla 3.

¿Difundieron el Na$/Cl" desde el recipiente de la izquierda Tabla 3 Resultads de Ósmosis

al de la derecha? Si es así, ¿con qué membrana(s)? (presión en mm Hg)

Membrana (MWCO)

Soluto 20 50 100 200

¿Por qué? Na!/Cl"

Albúmina

Glucosa

11. Pulsa Herramientas (Tools) ! Imprimir Datos (Print
Data) para imprimir tus datos.
Explica la relación entre la concentración de solutos y la pre-
sión osmótica.
¿La difusión permite que se genere presión osmótica?
¿Se generaría presión si las concentraciones de solutos fueran
iguales a ambos lados de la membrana?
¿Por qué o por qué no?
¿Se generaría presión si tuvieras glucosa 9 mM en un lado de
la membrana de 200 MWCO y NaCl 9 mM en el otro lado?
Si es así, ¿qué solución generaría la presión?
¿Se generaría presión si tuvieras albúmina 9 mM en un lado
de la membrana de 200 MWCO y NaCl 9 mM en el otro
lado? Si es así, ¿qué solución generaría la presión?
■ ron detectados en la membrana usada para la filtración.
Filtración
A la vez que la difusión permite que las células tomen oxí-
geno y alimentos mientras eliminan el dióxido de carbono y
los desechos metabólicos, también está ocurriendo otro pro-
ceso. Este proceso se produce principalmente en los capilares
del organismo (tales como los renales) donde la presión del
fluido sanguíneo —denominada presión hidrostática— fuerza
a los materiales a atravesar la pared capilar. Tanto la sangre
como el fluido intersticial contienen solutos disueltos. Gene-
ralmente, la presión osmótica del fluido intersticial no es tan
grande como la presión hidrostática de la sangre, por lo que
hay un movimiento neto de fluidos y/o solutos hacia fuera de
los capilares —un proceso denominado filtración. Lo que se
filtra hacia fuera depende solamente del tamaño molecular
del soluto y del tamaño de los «poros» de la membrana. La
filtración se considera un proceso pasivo, puesto que ocurre
sin gasto de energía metabólica.
Actividad 5:
Filtración
Pulsa Experimento (Experiment) en la parte superior de la
pantalla y selecciona Filtración (Filtration). Verás una pan-
talla de inicio bastante diferente a las de las actividades
Mecanismo de transporte y permeabilidad celular 9
anteriores (Figura 1.4). Observa los dos recipientes situados
en el lado izquierdo de la pantalla, uno encima del otro. Ob-
serva también que el recipiente superior contiene un indica-
dor de presión. A diferencia del experimento de ósmosis, en
el cual el indicador de presión medía la presión desarrollada
debido al movimiento del agua, este indicador de presión
mide la presión hidrostática que filtrará el líquido del reci-
piente superior al recipiente inferior. Finalmente, observa el
módulo de «Análisis de Residuos de Membrana» (Membrana
Residue Análisis). Éste se utilizará para detectar si queda al-
gún soluto en la membrana después de cada experimento.
1. Pulsa y arrastra la membrana de 20 MWCO al contene-
dor de membranas situado entre los dos recipientes.
2. Fija el Na$/Cl" a 9 mM, la urea (Urea) y la glucosa
(Glucose) a 5 mM y el carbón vegetal en polvo (Powdered
Charcoal) a 5 mg/ml pulsando el botón ($) junto a cada so-
luto. Entonces pulsa Dosificar (Dispense) para verterlo en el
recipiente superior.
3. Deja la presión en 50 mm Hg y el Temporizador (Timer)
en 60 minutos, los ajustes por defecto. Pulsa Iniciar (Start).
Verás como el líquido es filtrado al recipiente inferior.
4. Mira el módulo Unidad de Análisis del Filtrado al lado
del recipiente inferior para cualquier actividad. Ello te indi-
cará qué solutos están pasando a través de la membrana.
5. Cuando hayan pasado los 60 minutos, arrastra la mem-
brana al módulo de Análisis de Residuos de Membrana
(Membrana Residue Analysis) y suelta el ratón. La membrana
se colocará en su lugar. Pulsa Iniciar Análisis (Start Analy-
sis). En el módulo de datos inferior, verás qué soluto(s) fue-
6. Guarda tus datos pulsando Guardar Datos (Record
Data).
¿Cuáles fueron los resultados del análisis inicial de la mem-
brana?
7. Pulsa Limpiar (Flush) y devuelve la membrana a su lu-
gar original.
8. Arrastra la membrana de 50 MWCO al contenedor de
membranas situado entre los dos recipientes.
9. Mantén la presión en 50 y repite el experimento. Cuando
el Temporizador (Timer) haya alcanzado los 60 minutos, rea-
liza un análisis de la membrana y pulsa Guardar Datos (Re-
cord Data).
10. Pulsa Limpiar (Flush) y devuelve la membrana a su
lugar.
11. Repite los pasos 8-10 con las dos membranas restantes.
Asegúrate de guardar tus datos para cada experimento.
12. Aumenta la presión a 100 mm Hg y repite el experi-
mento completo. Una vez más, guarda todos los datos experi-
mentales.
13. Pulsa Herramientas (Tools) ! Imprimir Datos (Print
Data) para imprimir tus datos.
10 Ejercicio 1
Figura 1.4 Pantalla de inicio del experimento de Filtración.
¿Afecta el límite de la membrana (MWCO) a la velocidad de
filtración (Filtration Rate)?
¿Afecta la presión aplicada a la velocidad de filtración (Fil-
tration Rate)?
¿Pasaron todos los solutos a través de todas las membranas?
Si no, ¿cuál o cuáles no lo hicieron?
¿Por qué?
¿Cómo puede el organismo aumentar selectivamente la veloci-
dad de filtración (Filtration Rate) de un órgano o sistema dado?
■
Transporte Activo
El transporte activo difiere del transporte pasivo en que se
utiliza energía metabólica para mover solutos a través de la
membrana. También se diferencia en que los solutos se mue-
ven desde un área de menor concentración a otra de mayor
concentración —al contrario de lo que ocurre en la difusión
facilitada. Como en la difusión facilitada, se requiere la unión
de una sustancia a un transportador. Puesto que la sustancia
unida se está moviendo «cuesta arriba» hasta un área de
mayor concentración, los transportadores se denominan, a

menudo, bombas. El movimiento neto desde una concentra-
ción menor a otra mayor y el mantenimiento de una concen-
tración elevada estable en un lado de la membrana solo puede
alcanzarse mediante la aportación continua de energía al me-
canismo de transporte activo. El aporte de energía puede alte-
rar la afinidad del lugar de unión del transportador de modo
que haya una afinidad más alta a un lado que al otro, o la
energía puede alterar la velocidad a la que el transportador
mueve el sitio de unión de un lado de la membrana al otro.
Como en la difusión facilitada, el número de las moléculas
transportadoras por la célula es finito.
La energía para el transporte activo deriva del metabo-
lismo celular. La inhibición del ATP bloquea el mecanismo
de transporte activo. Para que los solutos se muevan desde un
área de menor concentración a otra de mayor concentración,
el transporte debe estar acoplado con el flujo de energía desde
un nivel energético mayor hasta otro menor. Si el ATP se uti-
liza directamente en el transporte, el mecanismo de trans-
porte se conoce como transporte activo primario.
La energía se produce mediante la hidrólisis de ATP por un
transportador que es un ATPasa que cataliza la rotura del ATP
y su autofosforilación. Esta fosforilación del transportador
Figura 1.5 Pantalla de inicio del experimento de Transporte activo.
Mecanismo de transporte y permeabilidad celular 11
alterará la afinidad del sitio de unión o bien la velocidad del
cambio conformacional. Se han identificado cuatro proteínas
de transporte activo primario. En todas las membranas plas-
máticas hay una sodio-potasio ATPasa, responsable del flujo
hacia el exterior de sodio y del flujo hacia el interior de pota-
sio. El sodio es el principal ión encontrado en el fluido extra-
celular, mientras que el potasio es más abundante en el inte-
rior de las células. Otras proteínas de transporte están
implicadas en el transporte de calcio, transporte de hidrógeno
y en el transporte de hidrógeno-potasio.
Actividad 6:
Transporte activo
Pulsa Experimento (Experiment) en la parte superior de la
pantalla y selecciona Transporte Activo (Active Transport).
Aparecerá una nueva pantalla que se asemeja a la pantalla de
la difusión facilitada (Figura 1.5). El principal cambio es la
adición de un dosificador de ATP encima de los recipientes.
Recuerda que, puesto que el ATP es necesario para que el sis-
tema funcione, debe ser agregado en cada experimento.
12 Ejercicio 1

1. Asegúrate que en el Constructor de Membranas (Mem- Ahora que has realizado el experimento básico, vamos a lle-
brane Builder) el número de transportadores de glucosa está var a cabo dos variaciones.
fijado en 500 y el número de bombas Na$/K$ también está fi-
12. Repite el experimento sin incrementar la cantidad de
jado en 500.
ATP añadida al sistema.
2. Pulsa Construir Membrana (Build Membrane).
¿Varía la cantidad de NaCl/KCl transportados?
3. Arrastra la membrana «construida» al contenedor de
membranas situado entre los dos recipientes.
4. En el recipiente de la izquierda, fija a 9 mM el
Na$/Cl"pulsando el botón ($) y pulsa Dosificar (Dispense). 13. Repite el experimento sin cambiar el número de trans-
portadores y bombas cuando construyas la membrana.
5. En el recipiente de la derecha, pulsa Agua Desionizada
(Deionized Water) y después Dosificar (Dispense). La cantidad de solutos transportada a través de la membrana
¿varía con el aumento de transportadores o de bombas?
6. Fija el ATP a 1 mM y después pulsa Dosificar ATP (Dis-
pense ATP).
7. Asegúrate de que el Temporizador (Timer) está fijado a
60 minutos y pulsa Iniciar (Start). ¿Algún soluto se ve más afectado que otro?
$ "
Al final de este experimento, ¿se movieron el Na /Cl desde
el recipiente de la izquierda al recipiente de la derecha?

La membrana que has «construido», ¿permite la difusión

simple?

¿Por qué?
Si colocaras NaCl 9 mM en un lado de la membrana y 15 mM
en el otro, ¿habría movimiento del NaCl?

8. Pulsa Limpiar (Flush) debajo de ambos recipientes.

9. Añade 9 mM de Na$/Cl" al recipiente de la izquierda y
9 mM de KCl al recipiente de la derecha. Pulsa Dosificar
(Dispense).
¿Por qué?
10. Fija el ATP a 1 mM, pulsa Dosificar ATP (Dispense
ATP) y después Iniciar (Start).
11. Al final del experimento pulsa Guardar Datos (Record
Data).
¿Produce alguna diferencia la cantidad de ATP agregada?
A medida que el experimento progresa, las concentraciones
de los solutos cambiarán en las ventanas situadas al lado de
los recipientes. La velocidad disminuirá notablemente, para
pararse antes de completarse el experimento. ¿Por qué?

14. Pulsa Herramientas (Tools) ! Imprimir Datos (Print

Data) para imprimir tus datos guardados. ■