Fenolik

Role of phenolic in Plants

• Nearly 10,000 individual compunds
• Large chemical diversity
• Defense compounds against herbivores and pathogens (tannins,
isoflavanoids)
• Mechanical support (lignin)
• Attract pollinators and fruits dispersers (anthocyanins)
• Absorb harmful UV radiation (flavonoids)
Definisi
• Senyawa organik aromatis dengan substituen gugus hidroksi
• Terbagi ke dalam 2 kelompok :
• Fenol sederhana, misal : asam galat
• Polifenol : senyawa yg memiliki cincin benzen lebih dari satu yg mengikat
gugus hidroksi, misal : kurkumin dan flavonoid
• Polimer : lignan, tanin
Sifat kimia
• Reaktif secara kimiawi
• Relatif asam
• Larut dalam larutan Natrium Karbonat
• Memiliki ikatan hidrogen, baik inter (pembentukan tanin) maupun
intramolekuler (mis.kuersetin)
• Dapat membentuk khelat dengan logam
• Mudah teroksidasi oleh enzim phenolase
• Mono  diphenol  polimer
Sifat Fisik
• Aroma dan rasa Teh : 30% polifenol
• Rasa biter bir : floroglucinol (humolon)
• Warna merah minuman (bir) : anthosian (malvin)

Malvin
Polyphenols in processed foods
• Polyphenols are unstable species that undergo numerous reactions in
the course of food processing and storage
• Enzymatic oxidation, esterases, glycosidases, and decarboxylases may
catalyze transformations and degradations of polyphenolic
• Resulted in ‘browning’  detrimental to quality (fresh fruits or juice),
but desirable for some products (eg. Tea, coffee, cocoa)
Isolasi senyawa fenolik
• Beberapa hal yg perlu diperhatikan :
• Senyawa fenolik cenderung untuk berpolimerisasi dalam proses yg
melibatkan pemanasan
• Bentuk glikosida tidak tahan terhadap pengaruh pengasaman dan pemanasan
• Cenderung untuk membentuk ikatan yg kuat dengan gugus silanol dari fase
diam silika
• Bentuk glikosida memberikan sifat kelarutan tinggi pada pelarut polar
FLAVONOID
Flavonoid
• Senyawa polifenol tersusun atas 2 inti benzen yg dihubungkan oleh 3
atom karbon yg dapat membentuk cincin ketiga sehingga tersusun
kerangka dasar C₆-C₃-C₆
• Merupakan senyawa-senyawa hasil metabolisme gabungan dari jalur
sikimat-fenilpropan dan poliketida
Keberadaan flavonoid pada tumbuhan
• Flavonoid polimetoksi terdapat pada Pteridophyta (paku-pakuan)
• Flavonoid jarang terdapat pada bakteri, jamur, ganggang, dan lumut
• Flavonoid banyak terdapat pada suku Rutaceae, leguminosae,
apiaceae, anacardiaceae, euphorbiaceae, asteraceae, poligonaceae
• Pada tumbuhan, flavonoid tersebar pada berbagai organ
• Pada tk.seluler, flavonoid terdistribusi di sitoplasma (vakuola) atau
pada dinding sel dan kloroplas
Biosintesis Flavonoid
• Molekul flavonoid terbentuk dari
satu molekul 4-kumaroil-CoA
dari jalur sikimat dan 3 molekul
malonil-CoA dari jalur asetat
Klasifikasi Flavonoid
• Istilah flavonoid berasal dari kata flavon yg merupakan salah satu jenis
flavonoid yg terbanyak dan lazim ditemukan (selain flavonol, antosianidin)
• Flavon mempunyai kerangka 2-fenilkroman
• Berdasarkan cincin non benzeniknya, flavonoid diklasifikasikan menjadi :
O
O
O

Piran O
Pirilium
Piron
Substitusi Flavonoid
• Bentuk aglikon : hanya sebagian kecil terdapat di alam, umumnya
termetilasi atau teresterifikasi, bersifat lipofilik sebagai produk di
kelenjar trichoma epidermal. Jika tingkat metilasi tinggi akan bersifat
toksik
• Bentuk glikosida :
• O-glikosida umumnya pada posisi 3 dan 7
• C-glikosida umumnya posisi 6 dan 8
• Subsitusi pada flavonoid :
• Ring B : terutama 4’ selalu ada OH, posisi 3’ dan 5’ opsional tersubstitusi OH
(merupakan posisi substitusi lanjutan, metilasi, esterifikasi)
• Ring A : OH pada posisi 5 dan 7 yg selanjutnya dapat mengalami substitusi
metil atau glikosida (O-glikosida). Posisi 6 dan 8 dapat mengalami substitusi
gula (C-glikosida)
• Ring C : posisi 3 merupakan posisi yg sering mengalami substitusi baik metil,
ester, maupun gula
Flavonoid C-glikosida
Kelarutan
• Flavonoid polimetoksi
• Larut dalam heksan, PE, kloroform, Eter, Etil asetat, etanol
• Tidak larut dalam air
• Aglikon flavonoid polihidroksi
• Tidak larut dalam kloroform, PE, heksan, dan air dingin
• Larut dalam eter, etil asetat, dan etanol
• Sedikit larut dalam air panas
• Glikosida flavonoid
• Tidak larut dalam heksan, PE, kloroform, dan eter
• Sedikit larut dalam etil asetat, dan etanol
• Larut dalam air
Ekstraksi : Pemilihan pelarut
• Flavonoid (terutama glikosida) mudah mengalami degradasi enzimatik
ketika dikoleksi dalam btk segar. Oleh karena itu disarankan koleksi yg
dikeringkan atau dibekukan
• Ekstraksi menggunakan solven yg sesuai dg tipe flavonoid yg
dikehendaki. Polaritas mjd pertimbangan utama. Flavonoid kurang
polar (seperti isoflavon, flavanon, flavon termetilasi, dan flavonol)
terekstraksi dg kloroform, diklormetan, dietileter, atau etilasetat.
Sedangkan glikosida flavonoid dan aglikon yg lebih polar terekstraksi
dg alkohol atau campuran alkohol-air. Glikosida meningkatkan
kelarutan dalam air dan alkohol-air
 Simplisia
Ekstraksi PE
dan Fraksi PE Ampas

Isolasi Aglikon flavonoid polimetoksi Etil asetat

Kloroform dan
asam tartrat

Fraksi EtOAc Ampas

Aglikon flavonoid polihidroksi Etanol

Fraksi etanol Ampas

Flavonoid mono-dan diglikosida Air panas

Fraksi air Ampas

Flavonoid poliglikosida, tanin

Sifat Kimia
• Flavonoid cenderung bersifat asam
• Penambahan basa akan memperpanjang ik.rangkap terkonjugasi
karena resonansi
• Gugus ortohidroksi dan hidroksi karbonil dapat membentuk khelat
dengan logam
• Gugus gula pada flavonoid dapat terhidrolisis dalam suasana asam
dan pemanasan
Deteksi Flavonoid dengan KLT
• Fase diam : Silika gel, selulosa
• Fase gerak :
• Alkoholik = Butanol:As.Asetat:Air (BAW)
• Berair = asam asetat 15%
• Penambahan gugus hidroksi akan menurunkan harga Rf pada kedua
fase gerak
• Penambahan gugus metoksi akan menaikkan harga Rf pada kedua
fase gerak
• Glikosilasi akan menurunkan harga Rf pada fase gerak alkoholik, tetapi
menaikkan harga Rf pada fase gerak berair
Fluoresensi Flavonoid pada UV366nm
1. Flavon dg 5-OH bebas berfluoresensi ungu gelap
2. Flavon tanpa 5-OH bebas berfluoresensi biru
3. Flavon dengan 5-OH tersubstitusi berfluoresensi biru
4. Flavonol dg 5-OH bebas berfluoresensi kuning
5. Flavonol tanpa 5-OH bebas berfluoresensi hijau-kuning
6. Flavonol dg 5-OH bebas, 3-OH tersubstitusi berfluoresensi ungu gelap
7. Flavonol tanpa 5-OH bebas dan 3-OH tersubstitusi berfluoresensi biru
8. Flavonol dg 5-OH dan 3-OH tersubstitusi berfluoresensi biru
9. Flavonol dg 5-OH tersubstitusi berfluoresensi hijau kekuningan
Pola spektra UV
Peran flavonoid
• Bagi tumbuhan
• Untuk menarik serangga yg membantu proses penyerbukan
• Untuk menarik perhatian binatang yang membantu penyebaran biji
• Diduga flavon bekerja seperti auksin dalam menstimulasi perkecambahan biji
gandum
• Bagi manusia
• Dosis kecil, flavon bekerja sebagai stimulan pada jantung, hesperidin
mempengaruhi pembuluh darah kapiler
• Flavon terhidroksilasi bekerja sbg diuretik dan sebagai antioksidan pada lemak
Isoflavon
Transformasi flavanon ke isoflavon
Derivat isoflavon
Transformasi flavon-chalkon (Pembukaan cincin C)

• Glikosida flavanon Neohesperidin dari jeruk pahit (Citrus aurantium) dan

naringin dari kulit grapefruit (Citrus paradisi) adalah senyawa yg berasa
pahit. Konversi dari flavanon menjadi derivat dihidrokhalkonnya dengan
hidrogenasi dalam suasana basa menambah rasa secara drastis menjadi
manis, 300-1000kali manisnya sukrosa. Sehingga dikembangkan lebih lanjut
menjadi pemanis buatan
Antosian
Warna antosian
• Beberapa faktor yg berpengaruh : pH, sifat alami aglikon, panjang
glikosilasi, kompleksasi dengan logam, keberadaan pektin dan gula,
serta kompleks (pada posisi 4) dengan tanin dan fenolik lainnya
• pH : asam-merah, basa-biru
Biflavon
Pterokarpan
Koumestrol
dan Koumestan
Distribusi dan aktivitas biologis koumestan
• Kumestan yg memiliki struktur mirip kumarin merupakan derivat dari
isoflavon. Tidak terdapat aktivitas yg menyerupai kumarin, tetapi ada
aktivitas spt isoflavon
• Kebanyakan dari struktur ini terdapat dari famili fabaceae
• Kumestrol dari Medicago sativa dan Trifolia repens mempunyai sifat
estrogenik lebih kuat dari isoflavon sederhana. Tiga puluh kali lebih
kuat daripada genistein atau formononetin
Flavo-lignan :
adisi fenilpropan
ke molekul
flavonoid
Silibin
• Silibin berasal dari Silybum marianum (Compositae), biji dari
tumbuhan ini berisi senyawa-senyawa flavolignan : silychristin,
silydianin, dan isosilybin. Secara kolektif senyawa-senyawa tsb disebut
silymarin, digunakan scr tradisional di eropa utk pengobatan penyakit
liver. Aktif pada membran sel menghambat absorbsi racun dan juga
karena sifat alami dari fenolik dapat beraksi sbg antioksidan dan
penangkap radikal bebas yg menjadi penyebab kerusakan hati
Neoflavonoid
• Neoflavonoid mempunyai struktur umum dan sifat2 flavonoid.
Diperkirakan terbentuk dg cara seperti yg dialami isoflavon
• Mempunyai kemampuan menghalangi dekomposisi dari kayu
terutama dari genus Dalbergia
Tanin
• Tanin : suatu substansi amorf yang berwarna kuning pucat hingga
coklat kemerahan yang terdistribusi luas pada tumbuhan dan
digunakan dalam penyamakan kulit, pewarnaan, dan pembuatan tinta
• Dalam air bersifat asam dan memiliki rasa khelat/sepat
• Tanin berkontribusi pada rasa sepat, warna, dan rasa pada teh
• Dalam skala industri, tanin digunakan untuk menjernihkan wine dan
bir
• Mayoritas tanin ditemukan dalam vakuola atau kutikula pada sel
tumbuhan
• Tanin tergolong ke dalam glikosida flavonoid
Definisi
• Tanin adalah senyawa fenolik larut air dengan BM 500-3000, dapat
mempresipitasi alkaloid, gelatin, dan protein lainnya
• Definisi yang lebih umum dari tanin adalah senyawa fenolik alam yang
dapat mempresipitasi protein dari larutan berairnya
Klasifikasi tanin
• True tanin : memiliki BM 1000-
5000
• Pseudo-tanin : senyawa-senyawa
fenolik yang memiliki BM
rendah, seperti asam galat,
katekin, flavan-3,4-diol dan asam
klorogenat
Klasifikasi Tanin
Klasifikasi tanin
• Pada tumbuhan tinggi, tanin diklasifikasikan ke dalam 2 kelompok,
yang dibedakan berdasarkan struktur dan asal biogeniknya, yaitu
tanin terhidrolisis dan tanin terkondensasi
• Tanin terhidrolisis diklasifikasikan lagi menjadi :
• Ellagitanin
• Gallotanin
• Tanin kompleks
Tanin terhidrolisis
• Tanin terhidrolisis dapat dihidrolisis oleh asam lemah atau basa lemah
menghasilkan karbohidrat dan asam fenolat
• Contoh gallotanin adalah ester asam galat dengan glukosa pada asam
tanat (banyak ditemukan pada daun dan korteks beberapa
tumbuhan)
• Gallotanin banyak terdapat pada tanaman cengkeh, kelopak bunga
mawar merah
• Ellagitanin banyak ditemukan pada buah delima, korteks delima, dan
daun kayu putih
Gallotanin
• Gallotanin adalah tanin
terhidrolisis yang paling
sederhana, mengandung
polifenol dan residu poliol
• Poliol adalah alkohol dengan
multipel gugus hidroksi
• Kebanyakan gallotanin diisolasi
dari tanaman mengandung
residu poliol turunan D-glukosa
Ellagitanin
• Ellagitanin merupakan kelompok terbesar dari
tanin
• Ellagitanin dibentuk dari beberapa molekul
gallotanin melalui kopling oksidatif, minimal
terdiri dari gabungan 2 unit gallotanin
Tanin kompleks
• Struktur tanin kompleks terdiri dari
sebuah unit gallotanin atau unit
ellagitanin, dan sebuah unit katekin
• Contoh : Acutissimin A, merupakan
senyawa representatif dari tanin kompleks
Tanin terkondensasi
• Merupakan polimer dari 2 sampai 50 (atau lebih) unit-unit flavonoid
yang tergabung dalam ikatan karbon-karbon, yang tidak rentan
diputus oleh reaksi hidrolisis
• Semua tanin terhidrolisis dan kebanyakan tanin terkondensasi adalah
larut air, beberapa tanin terkondensasi dengan BM sangat besar tidak
larut air
• Tanin terkondensasi tidak dapat dihidrolisis menjadi molekul yg lebih
sederhana dan tidak mengandung unit gula (tidak seperti tanin
terhidrolisis)
• Tanin terkondensasi ditambah FeCl₃ terjadi perubahan warna menjadi
hijau, seperti katekol
Sumber tanin terkondensasi
• Korteks : kayu manis, kina, willow, wild cherry, akasia
• Bunga : limau
• Biji : coklat
• Buah : cranberries, anggur
• Daun : teh (khususnya teh hijau)
• Ekstrak dan sari : buah pinang dan akasia
Sifat-sifat
• Larut air, basa encer, alkohol, gliserol, dan aseton
• Sedikit larut dalam pelarut organik
• Terpresipitasi dalam logam berat, alkaloid, dan gelatin
• Jika larutan FeCl₃ ditambahkan pada ekstrak air daun yang
mengandung tanin, akan terjadi perubahan warna biru kemudian
orange-hijau sebanyak FeCl₃ yg ditambahkan
• Asam galat bebas memberikan warna orange dengan penambahan
KIO₃
Tanin terhidrolisis atau terkondensasi?
• Penambahan FeCl₃, gallotanin dan elagitanin akan membentuk
endapan biru kehitaman. Tanin terkondensasi akan membentuk
endapan hijau kecoklatan
• Tanin terkondensasi akan terjadi perubahan warna menjadi merah
dengan vanilin dan HCl
• Gallotanin akan membentuk warna pink dengan kalium iodat
• Ellagitanin akan mengalami perubahan warna dengan penambahan
asam nitrit dalam asam asetat. Reaksi warna : pink  ungu  biru
Ekstraksi tanin
• Tanin terekstraksi menggunakan air dan aseton
• Hasil optimal dapat diperoleh dari jaringan segar atau freeze-dried
tissues
• Pada jaringan kering tanin akan berkombinasi dengan polimer lainnya
secara irreversible
• Ekstrak aseton selanjutnya di-delipidasi dengan n-heksan
• Fraksinasi etil asetat pada ekstrak air dapat memisahkan
proantosianidin dimer dan gallotanin
• Proantosianidin polimer dan gallotanin BM besar berada pada fase air
Efek farmakologi tanin
• Aktivitas terapeutik dihasilkan dari sifat astrigensinya
• Herbal yg mengandung tanin dapat mengendapkan protein
• Penggunaan topikal : melapisi jaringan eksternal yg memiliki sifat
waterproof : melindungi lapisan dibawahnya, misal pada kulit atau mukosa
• Efek vasokonstriktor pada pembuluh darah superfisial
• Mengurangi kehilangan cairan  meningkatkan regenerasi jaringan pada
luka luar terbuka dan luka bakar
• Antidiare
• Efek antiseptik (antibakteri/antifungi)  digunakan untuk diare infektif dan
dermatitis
• Antioksidan, antidot (thd logam berat), astringen utk menghentikan
pendarahan dan hemorroid
Tannins can reduce nutritional values of tissues by
binding to proteins, making them less digestible

Care for a spot of milk in your tea?

Tugas
• Cari 10 contoh senyawa golongan flavonoid, klasifikasikan ke dalam
golongan apa sesuai strukturnya, sumber tanaman, dan efek
farmakologinya
• Cari 10 contoh senyawa golongan tanin, klasifikasikan ke dalam
golongan apa sesuai strukturnya, sumber tanaman, dan efek
farmakologinya