1.

PARTE PRÁCTICA

1.1. Materiales
1.1.1. Preparación de medio de cultivo

 Cajas Petri
 Matraz o recipiente
 Autoclave
 Balanza
 Cámara de flujo laminar
 Reverbero
 Cuarto de baño maría.
 Masquen
 Marcador permanente

1.1.2. Siembra en placa y conteo de colonias bacteriana

 Mechero de alcohol
 Triángulo de dispersión
 Aguja de inoculación.
 Micropipeta
 Gradilla
 Masquen
 Marcador
 Jeringuillas de 1 ml

1.2. Sustancias

1.2.1. Preparación de medio de cultivo

 Plate Count Agar

 Agua destilada
 Alcohol industrial

1.2.2. Siembra en placa y conteo de colonias bacteriana

 4 tubos de ensayo de solución salina

 3 placas Petri PCA
2. PROCEDIMIENTO:

2.1. Preparación de medio de cultivo

 Realizar los cálculos que consisten
en una regla de tres partiendo del
Leer las instrucciones del
criterio que para 23.5 g de AGAR Preparar la dilucion en un
fabricante del medio de cultivo
PCA se necesitan 1000ml, entonces reciepiente hondo
deshidratado
cuántos g necesitaremos para la
cantidad en mililitros requerida.

Siguiendo intrucciones preparar el Esterilizar la dilución en el

Calentarlo en el reverbero
autoclave autoclave y esperar 30 minutos .

Retirar con cuidado la dilución y

Retirar la dilución y llevarla a la Sacar las cajas petri plásticas del
colocarlo en baño maría de 45 a
cámara de flujo laminar. empaque.
46°C, esperar 20 minutos.

Colocar la desembocadura del Colocar la dilución en cajas petri,

LLevar las cajas petri al
recipiente para evitar la sellar herméticamente y
refrigerador.
contaminación. etiquetarlas.

2.2. Siembra en placa y conteo de colonias bacterianas

Preparar una disolución de
Ubicar los cuatro tubos de Etiquetar los tubos en
1g de tierra tipo R en 99 ml
solución salina en la grafilla. 10-3,10-4, 10-5, 10-6.
de agua destilada

De la solución producida de De la solución producida de

Trasvasar 1ml de la
la mezcla anteriro tomar la mezcla anteriro tomar
disolución de tipo de tierra
1ml de la misma y 1ml de la misma y
R en el tubo de ensayo de
trasvasarlo al tubo de trasvasarlo al tubo de
10-3 .
ensayo de 10-4. ensayo de 10-5.

De la solución producida de Trasvasamos 0.1 ml del

la mezcla anteriro tomar contenido del tubo de
Retirar las cajas petri del
1ml de la misma y ensayo de 10-4 en una de las
refrigerador.
trasvasarlo al tubo de cajas petri y etiquetarla
ensayo de 10-6. como 10-4.

Flamear el triángulo de
Trasvasamos 0.1 ml del Trasvasamos 0.1 ml del
disperción para estirilizarlo,
contenido del tubo de contenido del tubo de
cerca del mechero dispersar
ensayo de 10-5 en una de las ensayo de 10-6 en una de las
con el triángulo la solucion
cajas petri y etiquetarla cajas petri y etiquetarla
en cada una de las placas
como 10-5. como 10-6.
petri.

Retirar las cajas petri de la

Dejar reposar las cajas petri Escoger la caja petri que sea
cámara de encubación y
en la encuvadora por cuatro posible contar sus colonias
realizar el cponteo de las
días y desechar el contenido oscilando de 30 a 300
colonias bacterianas que se
de los tubos de ensayo. colonias.
desarrollaron.

Una vez localizada la caja

petri válida en el rango de
colonias formadas
permitodo ubicar los datos
en base al cuadro
morfofuncional.