Universidad De Guayaquil

Ingeniería Química
Laboratorio de Química Analítica

Zárate Morán Jair Rodrigo (100%)

Jair.zaratem@ug.edu.ec
Practica: 10
Paralelo: B
Mesón: F
Fecha de entrega: martes 14 de febrero del 2017

Tema: El coeficiente de absortividad molar en la determinación de la concentración de

antocianinas en una muestra de frutos rojos.

Resumen.

En esta práctica se tiene como objetivo principal conocer la concentración de antocianinas

mediante un espectrofotómetro, para la cual se debe conocer acerca de la práctica y como usar un

espectrofotómetro y todas sus funciones previamente, para realizar todo este proceso se debe tener

lo que son cuatro frutos como son frutilla, mora, remolacha y se debe pesar en la balanza analítica

4 gramos de cada una, ya que estas son sólidas se deben disolver mediante una mezcla de blanco

compuesta por 60% de agua y 40% de alcohol para así proceder a realizar un filtrado de cada

muestra, luego se lleva las muestras al espectrofotómetro para proceder a medir su absorbancia, en

donde las muestras de pechiche y remolacha se debieron diluir mucho más porque el

espectrofotómetro no permitía leer su absorbancia y mediante esto ya se puede sacar la

concentración de estos frutos mediante la fórmula de absorbancia

Marco teórico.

El coeficiente de absortividad tiene como objetivo principal encontrar hasta qué punto

una luz de longitud de onda podrá ingresar en la sustancia que se va a analizar. Se debe

tomar en cuenta que en una sustancia con bajo coeficiente de absortividad, la luz tiende a

absorberse mal y si la sustancia es muy delgada permanecerá transparente a esa longitud

de onda, siempre el coeficiente de absortividad dependerá de la sustancia y también de su

longitud de onda de la luz que está siendo absorbida. Las antocianinas son un grupo de
pigmentos de color rojo, distribuidos en el reino vegetal, las antocianinas están constituidas

por una molécula de antocianida la cual tiene el nombre de aglicona, a la que se le une un

azúcar por medio de un enlace B-glucosídico. De todas las antocianinas que existen las

más importantes son la pelargonidina, delfinidina, cianidina y malvidina, la combinación de

todas estas logran formar diferentes azucares. La espectrofotometría es una técnica

utilizada varios laboratorios, sobre todo en el de analítica, la cual permite determinar la

concentración de un compuesto en una solución, tiene como función hacer que las

moléculas sean capaces de absorber las radiaciones electromagnéticas y a su vez que la

cantidad de luz absorbida depende de forma lineal de la concentración. Para realizar este

tipo de medidas se utiliza un espectrofotómetro, que permite elegir la longitud de onda de

la luz que pasa por la solución y también medir la cantidad de luz absorbida por la misma.

La absorbancia puede definirse como la luz que incide en un cuerpo traslucido, una parte

de esta luz debe ser absorbida por el cuerpo, lo que se da es que a mayor cantidad de luz

absorbida por el cuerpo, mucho mayor será la capacidad de absorbancia del mismo y por

lo tanto la cantidad de luz transmitida por dicho cuerpo será menor. La transmitancia de una

determinada sustancia en una solución es considerada como la relación entre una cantidad

de luz transmitida que tiene como finalidad llegar al detector una vez que ha atravesado la

muestra y la cantidad de luz que incidió sobre ella. La ley de Beer se trata de que un rayo

de luz monocromática pasa a través de un medio absorbente, su intensidad disminuye

exponencialmente a medida que la longitud del medio absorbe aumenta.

Objetivo general.

Usar el coeficiente de absortividad molar para la determinación de concentración de

antocianinas presentes en una muestra de frutos rojos a través de espectrofotometría

Visible.

Objetivos específicos.

 Determinar la absorbancia de las frutas en el espectrofotómetro para realizar los

cálculos correspondientes.

 Manejar el espectrofotómetro adecuadamente para así realizar la practica con

éxito.

 Encontrar la curva de calibración para así saber si los resultados son óptimos.

Materiales y equipos.

Espectrofotómetro Thermo Spectronic Genesys 20, Balanza analítica, Pipetas

volumétricas de 1,5 ml, Vidrio de reloj, 1 pera, 1 varilla de vidrio, 1 piseta, 1 mortero con

pistilo, 1 embudo, 2 tubos de ensayo graduados, 1 trípode,1 triángulo, 1 Erlenmeyer, Mezcla

de metanol agua (mezcla de extracción), Agua destilada, Mora, frutilla, pechiche,

remolacha.

Procedimiento.

Referencia.

(El procedimiento fue tomado de la práctica 10 del laboratorio de la Universidad de

Guayaquil- Laboratorio de Química Analítica- Ing. Augusta Jiménez)

Resultados.

Condiciones.

Longitud de Nombre de la Peso de la Volumen de Volumen

onda nm muestra muestra mezcla de obtenido del

solvente filtrado

añadido (ml)

529 mora 4,0742 8 5

529 frutilla 4,6931 8 4

529 pechiche 4,1013 8 4

529 remolacha 4,0350 8 6

Curva de calibración de antocianina

Curva de concentración vs frutos donde el orden de los puntos van de acuerdo al

cuadro de Excel.
Análisis de resultados.

 Luego de realizar los cálculos correspondientes podemos observar que la fruta

que tiene mayor concentración de antocianina es la de la remolacha con 47,312

mg/L

 Después de sacar los datos estadísticos podemos observar que los datos son

muy óptimos y no varían mucho de lo normal.

 Para algunas frutas como la remolacha se debió diluir varias veces para así poder

ser leída su absorbancia en el espectrofotómetro.

Conclusiones.

 Por consecuencia luego de medir el nivel de antocianina de las muestras se llegó a

la conclusión de que la muestra de remolacha era la de mayor concentración.

 Por ende se debe limpiar la celda con alcohol cada vez que se vaya a probar una

muestra diferente para así tener resultados concretos.

 Por lo tanto se debe realizar la curva de calibración para así comprobar los

resultados obtenidos.

Recomendaciones.

 Se debe programar el espectrofotómetro a la longitud de onda adecuada para así

tener resultados concretos.

 Limpiar la celda cada vez que se vaya a probar cada sustancia y diluir las sustancias

si es necesario.

 Se debe colocar los valores adecuados para realizar la curva de calibración y salga

de una manera correcta.

Bibliografía
Aguilera, M. (02 de 09 de 2010). Biotecnica. Obtenido de

www.biotecnia.uson.mx/revistas/articulos/16-BIO-11-DPA-06.pdf

Diaz, N. A. (06 de 11 de 2008). uco.es. Obtenido de www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-

mol/pdfs/08_ESPECTROFOTOMETRÍA.pdf

Honsberg, C. (04 de 08 de 2010). pveducation. Obtenido de

http://www.pveducation.org/es/fotovoltaica/coeficiente-de-absorci%C3%B3n

Monica, G. (08 de 11 de 2010). Obtenido de http://quimica.laguia2000.com/conceptos-

basicos/transmitancia-y-absorbancia

Villa, F. (2016).

Anexos.

Anexo 1. Espectrofotómetro.
 Anexo 2. Sustancias en medio de filtración.

Cálculos.

Concentración Problema a determinar con el Espectrofotómetro.

1.- Con la ecuación de Absorbancia se despeja para hallar la concentración de la muestra
problema.

A = -log T = log Po/P = ε b c

Antocianinas (mg/L) = A529 nm * V (volumen extracto)* 449 g/ml (PM antoc) *1000
M ( g peso muestra) * 23900 L.mol-1.cm-1 *1cm

Qué fruto presenta la mayor concentración de antocianinas

Remolacha
5g g
mg 2,0147A ∗ ∗ 449 ∗ 1000
[ ]Antocianinas ( ) = ml mol
L 23900L
4g ∗ . cm ∗ 1 cm
mol
mg
[ ]Antocianinas ( ) = 47,312
L
Mora
g g
mg 1,3263 A ∗ 4.5 ∗ 449 ∗ 1000
[ ]Antocianinas ( ) = ml mol
L 23900L
4g ∗ . cm ∗ 1 cm
mol
 mg
[ ]Antocianinas ( ) = 28,03
L

Frutilla
g g
mg 0,6820 A ∗ 5 ∗ 449 ∗ 1000
[ ]Antocianinas ( ) = ml mol
L 23900L
4g ∗ . cm ∗ 1 cm
mol
mg
[ ]Antocianinas ( ) = 15,01
L

Pechiche
g g
mg 0,8643 A ∗ 4.5 ∗ 449 ∗ 1000
[ ]Antocianinas ( ) = ml mol
L 23900L
4g ∗ . cm ∗ 1 cm
mol
mg
[ ]Antocianinas ( ) = 18,26
L