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Prácticas de Laboratorio
1º Bachillerato Biología y Geología
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Departamento de Ciencias
Prácticas de Laboratorio
1º Bachillerato Biología y Geología
Introducción……………….………………………………………………………………..3
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Tanto la Biología como la Geología son ciencias empíricas y como tal el trabajo
experimental en el laboratorio (o incluso en casa) debe formar parte del proceso de
enseñanza-aprendizaje. Esto nos permitirá estudiarlas de una forma mucho más amena.
Ni que decir tiene que, a pesar de la sencillez de las experiencias que se detallan en este
trabajo y de su aparente inocuidad, algunas de las sustancias que se emplean pueden
resultar peligrosas si no se manejan con las debidas precauciones, por lo que es necesario
tener en cuenta las normas de seguridad.
Cada práctica consta de unos objetivos, un listado del material necesario, el procedimiento
a seguir y unas cuestiones.
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En el laboratorio se usan muchos instrumentos y reactivos que pueden ser peligrosos por lo
que es muy importante atenerse a unas normas de seguridad básicas:
Entramos por orden de lista, cogemos las gafas de seguridad y nos colocamos
siempre en la mesa que nos asigne el profesor el primer día.
Antes de empezar a realizar cada práctica hay que informarse de las medidas de
seguridad que corresponde aplicar, de qué precauciones se han de tomar con los
reactivos y de dónde han de verter los materiales de desecho. Esta información se
encontrará en el guión de la práctica. Si tenéis dudas preguntar al profesor.
Antes de comenzar hay que comprobar que se dispone de todo el material y de que
éste está limpio y en buenas condiciones.
Todas las prescripciones que se hagan en el guión de prácticas sobre el uso de gafas
de protección y de la campana extractora (vitrina) son de obligado cumplimiento.
Para oler se hará a distancia, fuera de la vertical del recipiente y con la mano frente
a la nariz, hasta asegurarnos de que un producto (o sistema material en estudio) no
desprende vapores tóxicos que sean invisibles al ojo (más cuidado aún si son
visibles).
No tocar los productos químicos con las manos. Usar guantes de caucho para
trasvasar reactivos líquidos (ácidos, álcalis o bases, disolventes...), y la cucharilla
espátula para coger los productos sólidos.
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No encender nunca un mechero con otro mechero. Se hace con cerillas de madera.
Los alumnos con pelo largo deben llevarlo recogido en una coleta cuando usen los
mecheros por el riesgo de que salga ardiendo con el uso de estos.
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Corrosivo: sustancias que en contacto con Evitar el contacto con el cuerpo, la ropa
nuestro cuerpo u otros materiales destruyen su u otros objetos así como inhalar sus
superficie progresivamente. vapores.
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1. OBJETIVO
La cromatografía se basa en que cualquier sustancia, al ser disuelta en dos disolventes distintos no
miscibles, se reparte entre ambos con arreglo a su solubilidad. Si uno de los disolventes se mantiene
fijo (fase estacionaria) se puede hacer desplazar el otro disolvente (fase móvil) sobre el primero. Las
sustancias a cromatografiar se verán sometidas a una distribución entre las fases estacionaria y móvil
de modo que las más solubles en la fase móvil avanzarán más que las que sean retenidas por la fase
estacionaria.
Según la fase estacionaria que se emplee, se distinguen dos tipos de cromatografía: cromatografía en
papel o en capa fina y cromatografía en columna.
En esta práctica no vamos a separar biomoléculas sino que vamos a separar e identificar los
pigmentos que forman parte de la tinta comercial y para ello utilizaremos la técnica de
cromatografía en papel.
2. MATERIAL UTILIZADO
• Papel poroso
• Rotuladores o bolígrafos de distintos colores
• Vaso de precipitado
• Alcohol
3. PROCEDIMIE!TO
1. Recorta una tira del papel poroso que tenga unos 4 cm de ancho y que sea un poco más larga que la
altura del vaso.
2. Enrolla un extremo en un bolígrafo (puedes ayudarte de cinta adhesiva) de tal manera que el otro
extremo llegue al fondo del vaso. (ver dibujo)
3. Dibuja una mancha con un rotulador negro en el extremo libre de la tira, a unos 2 cm del borde.
Procura que sea intensa y que no ocupe mucho. (ver dibujo)
5. Sitúa la tira dentro del vaso de tal manera que el extremo quede sumergido en el alcohol pero la
mancha que has hecho sobre ella quede fuera de él. Ten mucho cuidado de que el alcohol no llegue a
tocar la mancha de tinta.
7. Observa lo que ocurre: a medida que el alcohol va ascendiendo a lo largo de la tira, arrastra consigo
los diversos pigmentos que contiene la mancha de tinta. Como no todos son arrastrados con la misma
velocidad, al cabo de un rato se ven franjas de colores.
4. CUESTIO!ES
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1. OBJETIVO
La cromatografía se basa en que cualquier sustancia, al ser disuelta en dos disolventes distintos no
miscibles, se reparte entre ambos con arreglo a su solubilidad. Si uno de los disolventes se mantiene
fijo (fase estacionaria) se puede hacer desplazar el otro disolvente (fase móvil) sobre el primero. Las
sustancias a cromatografiar se verán sometidas a una distribución entre las fases estacionaria y móvil
de modo que las más solubles en la fase móvil avanzarán más que las que sean retenidas por la fase
estacionaria.
Según la fase estacionaria que se emplee, se distinguen dos tipos de cromatografía: cromatografía en
papel o en capa fina y cromatografía en columna.
En esta práctica vamos a separar los pigmentos presentes en las células vegetales de las hojas verdes
de una planta utilizando la técnica de cromatografía en papel.
Los cloroplastos (orgánulos típicos de las células vegetales) poseen una mezcla de pigmentos con
diferentes colores: clorofila-a (verde intenso), clorofila-b (verde), carotenos (amarillo claro) y
xantofilas (amarillo anaranjado) en diferentes proporciones. Todas estas sustancias presentan un
grado diferente de solubilidad en disolventes apolares, lo que permite su separación cuando una
solución de las mismas asciende por capilaridad a través de una tira de papel poroso (papel de
cromatografía o de filtro) dispuesta verticalmente sobre una película de un disolvente orgánico
(etanol), ya que las más solubles se desplazarán a mayor velocidad, pues acompañarán fácilmente al
disolvente a medida que éste asciende. Las menos solubles avanzarán menos en la tira de papel de
filtro. Aparecerán, por tanto, varias bandas de diferentes colores (hasta siete o más, dependiendo del
material utilizado) que estarán más o menos alejados de la disolución alcohólica según la mayor o
menor solubilidad de los pigmentos. Estas bandas poseerán diferente grosor, dependiendo de la
abundancia del pigmento en la disolución.
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2. MATERIAL UTILIZADO
• Mortero
• Tijeras
• Hojas verdes de un vegetal
• Embudo con papel de filtro
• Tubos de ensayo y gradilla
• Éter etílico
• Alcohol metílico puro (manejar en la campana extractora)
• Carbonato de calcio
• Vaso de precipitados
• Cuentagotas
• Papel de filtro
3. PROCEDIMIE!TO
1. Colocar en un mortero trozos de hojas lavadas, quitando las nerviaciones más gruesas, junto con 10
o 15 ml de éter etílico y una pequeña cantidad de carbonato de calcio (evita la degradación de los
pigmentos vegetales).
2. Triturar sin golpear hasta que el líquido adquiera una coloración verde intensa (utilizar campana de
gases a lo largo de toda la práctica).
3. Filtrar en un embudo con papel de filtro y recoger en un tubo de ensayo (es suficiente con 2 o 3 ml
de solución de pigmentos).
4. Colocar en un vaso de precipitados metanol absoluto hasta una altura de 0,5 a 1 cm.
7. Colocar el papel cromatográfico a lo largo dentro del vaso de precipitados con la mancha de
pigmento a 1 cm. de la superficie del eluyente. Podemos fijar el papel cromatográfico con una
varilla de vidirio y un poco de celo.
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4. CUESTIO!ES
1. La solubilidad en alcohol de los pigmentos es, de mayor a menor: carotenos, xantofila, clorofila a y
clorofila b. Indicar qué pigmento corresponde a cada banda.
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RECO!OCIMIE!TO DE ROCAS
MAGMÁTICAS MEDIA!TE CLAVE
DICOTÓMICA
1. OBJETIVO
El objetivo de esta práctica es la identificación de rocas magmáticas mediante la observación de
algunas características como su textura.
A través de la observación de las texturas que hemos estudiado, podemos identificar algunas de las
rocas de la colección que tenemos en el laboratorio.
Utilizando una sencilla clave dicotómica y observando estas propiedades observables a simple vista
podemos diferenciar unas rocas de otras.
2. MATERIAL UTILIZADO
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3. PROCEDIMIE!TO
Utilizando la clave dicotómica proporcionada seguir las cuestiones de forma ordenada hasta
clasificar e identificar cada una de las rocas numeradas.
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4. CUESTIO!ES:
1.
2.
3.
4.
• Indica su textura.
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RECO!OCIMIE!TO DE ROCAS
METAMÓRFICAS MEDIA!TE CLAVE
DICOTÓMICA
1. OBJETIVO
El objetivo de esta práctica es la identificación de rocas metamórficas mediante la observación de
algunas características.
A través de la observación de las texturas que hemos estudiado, podemos identificar algunas de las
rocas de la colección que tenemos en el laboratorio.
Utilizando una sencilla clave dicotómica y observando estas propiedades observables a simple vista
podemos diferenciar unas rocas de otras.
2. MATERIAL UTILIZADO
3. PROCEDIMIE!TO
Utilizando la clave dicotómica proporcionada seguir las cuestiones de forma ordenada hasta
clasificar e identificar cada una de las rocas numeradas.
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4. CUESTIO!ES:
• Indica el nombre de cada una de las rocas identificadas.
1.
2.
3.
4.
5.
• Clasifícalas dentro de los dos grupos básicos de rocas metamórficas que ya conoces.
• Indica el factor predominante que interviene en el metamorfismo de cada uno de los dos
grupos.
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RECO!OCIMIE!TO DE ROCAS
SEDIME!TARIAS MEDIA!TE CLAVE
DICOTÓMICA
1. OBJETIVO
2. MATERIAL
3. PROCEDIMIE!TO
Utilizando la clave dicotómica proporcionada seguir las cuestiones de forma ordenada hasta
clasificar e identificar cada una de las rocas numeradas.
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4. CUESTIO!ES:
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
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1. OBJETIVO
La composición de distintos suelos conduce a que estos tengan propiedades diferentes. Por tanto, un
primer punto a la hora de estudiar un suelo es averiguar su composición. Se sugieren a continuación
una serie de actividades prácticas encaminadas a conocer la composición del suelo y determinar
algunas de sus propiedades químicas.
Se deberá recoger una porción del horizonte superficial del suelo que se pretende analizar,
desprovista de hojarasca, así como una muestra del nivel subsuperficial, a unos 30 o 40 cm de
profundidad. Se mezclan ambas muestras en un frasco, se tapa y se etiqueta adecuadamente,
señalando el lugar y la fecha en que se tomó la muestra.
MATERIAL
• Tubo de ensayo
• Frasco de agua
PROCEDIMIE!TO
Se añade una muestra del suelo original al tubo de ensayo, se agrega agua y se observa si se forman
burbujas.
MATERIAL
• Balanza
• Mechero
• Varilla de vidrio
PROCEDIMIE!TO
Se pesan 100 gramos de suelo y se calientan con el mechero durante 10 o 15 minutos, removiendo con
una varilla de vidrio. Se vuelve a pesar la muestra de suelo y, calculando la diferencia entre la primera
y la segunda pesadas, se obtiene la cantidad de agua que contenía la muestra (en %).
MATERIAL
• Balanza
• Vaso de precipitados
• Embudo
• Papel de filtro
PROCEDIMIE!TO
Se pesan 100 gramos de suelo y se ponen en un vaso de precipitados. A continuación, se añade agua
oxigenada y se remueve. El agua oxigenada es muy agresiva hacia la materia orgánica, y la destruye
emitiendo espuma.
Se vuelve a añadir agua oxigenada hasta que deje de emitir espuma (señal de que toda la materia
orgánica ha sido destruida). Entonces se filtra la mezcla y se deja secar cerca de un radiador, sobre el
mismo papel de filtro utilizado. Una vez seca, se pesa la porción de suelo; la diferencia con la pesada
inicial proporciona el porcentaje de materia orgánica que contiene el suelo.
MATERIAL
• Papel indicador de pH
• Vidrio de reloj
• Agua destilada
PROCEDIMIE!TO
Se toma una pequeña cantidad de suelo de la muestra original y se pone en el vidrio de reloj. Se añade
agua destilada y se deja reposar durante un minuto.
La acidez se mide mediante la escala de pH. El pH se define como el logaritmo decimal, cambiado de
signo, de la concentración de protones (H+) en la disolución; recuerda que cuanto mayor sea la
concentración de protones, más alta será la acidez. pH= −log [H+]. A causa del signo negativo, cuanto
mayor sea la acidez, menor será el pH.
Los papeles indicadores de pH tienen la propiedad de que viran de color cuando se sumergen en
disoluciones con diferente acidez. Así, habremos de introducir una tira de papel indicador en el vidrio
de reloj, observar el color que adquiere y compararlo con la escala que nos proporcionan, De esta
MATERIAL
• Criba de 0,06 mm
• Frasco de cristal
• Balanza
• Agua
PROCEDIMIE!TO
1.- Análisis granulométrico: Se tamiza una porción de suelo con una criba de 0,06 mm. Se pesan las
dos fracciones de suelo obtenidas, es decir, la fracción que ha pasado la criba (limos y arcillas) y la
fracción que se ha quedado en ella (arenas). Según la proporción de ambas, se determinará cada tipo de
suelo:
100-85 Arena
2.- Sedimentación: Se coloca la muestra de suelo en un frasco de vidrio con agua, se agita con fuerza y
se deja reposar 24 horas. Como sabemos, la arcilla tiende a permanecer flotando, por lo que se puede
averiguar el porcentaje de arcilla que contenía la muestra, extrayendo el líquido, dejándolo secar y
pesando.
2. Elabora un cuadro donde anotes todos los resultados obtenidos en el análisis de la muestra
del suelo.
3. Si es posible analizad muestras de suelo tomadas en diferentes zonas o de suelos destinados
a diferentes usos (cultivo, jardín, zona de paso, etc) y comparar las diferencias en los datos
obtenidos en el análisis.
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1. OBJETIVO
Un corte geológico representa una sección vertical de una región y nos permite conocer, aplicando
unas sencillas reglas, los acontecimientos esenciales que ha sufrido una zona a lo largo del tiempo.
23 metamorfismo.
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2. MATERIAL UTILIZADO
• Cortes geológicos
• Tabla de fósiles y eras
3. PROCEDIMIE!TO Y CUESTIO!ES
Interpreta los siguientes cortes geológicos siguiendo los pasos explicados anteriormente y responde a las
preguntas planteadas en cada uno de ellos:
• CORTE 1:
1. Indica la secuencia de deposición de
los estratos.
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• CORTE 2:
1. Indica la secuencia de
deposición de los estratos.
2. ¿Qué representa la
estructura 5?
• CORTE 3:
1. Indica la secuencia de deposición de los estratos así como algunas de las facies que puedas indicar
de cada uno de ellos.
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• CORTE 4:
1. Identifica a qué tipo de roca pertenecen las que forman cada estrato.
2. ¿Qué tipos de metamorfismo han afectado a la zona? Razona tu respuesta indicando en cada caso
qué fenómenos tectónicos han producido.
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RECO!OCIMIE!TO DE BIOMOLÉCULAS
ORGÁ!ICAS: GLÚCIDOS
1. OBJETIVO
En esta práctica vamos a determinar la presencia de glúcidos mediante técnicas bioquímicas. Para
ello vamos a utilizar soluciones patrón de estos compuestos pero también algunos alimentos que
tomamos en nuestra dieta de forma habitual para comprobar si contienen estas biomoléculas.
2. FU!DAME!TO TEÓRICO
Hemos estudiado que los monosacáridos, cuando se disuelven en agua, se ciclan formándose un
enlace hemiacetal intramolecular y se libera en la reacción un electrón que puede ser captado por
otra molécula presente en el medio, que se reducirá.
Los disacáridos en los que queda libre el grupo aldehído o cetona de alguno de los monosacáridos
que los componen tienen también poder reductor.
El poder reductor de los glúcidos se pone de manifiesto frente a sales de cobre, ya que el ión cúprico
(Cu2+) capta electrones, reduciéndose y pasando a ión cuproso (Cu+), lo que va acompañado de un
cambio de coloración. El reactivo más empleado para determinar el poder reductor de los
monosacáridos es Fehling A que contiene una sal cúprica (sulfato cúprico) de color azul, y pasa a
óxido cuproso (Cu2O) de color rojo ladrillo que precipita, cuando hay electrones en el medio. La
reacción se realiza en medio alcalino y en caliente.
3. MATERIAL UTILIZADO
• Tubos de ensayo y gradilla
• Agua
• Mechero
• Pinzas de madera
• Pipetas
• Glucosa, sacarosa, lactosa
• Zumo de uva
• Leche
• Reactivo de Fehling A y Fehling B (solución alcalina que acelera la reacción)
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4. PROCEDIMIE!TO
1. Prepara 4 tubos de ensayo con 4 ml de agua en cada uno de ellos y rotúlalos con los
números 1, 2, 3 y 4.
3. Prepara dos tubos más con 2 ml de agua y rotúlalos con los números 5 y 6. Añade al tubo 5
2 ml de zumo de uva y al tubo 6 2 ml de leche.
4. Añade en cada uno de los seis tubos 20 gotas de solución de Fehling A y otras 20 gotas de
Fehling B. Agita bien, para que la mezcla sea homogénea. Observa el color de los tubos y
anótalo.
5. CUESTIO!ES
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RECO!OCIMIE!TO DE BIOMOLÉCULAS
ORGÁ!ICAS: GLÚCIDOS, LÍPIDOS Y PROTEÍ!AS
1. OBJETIVO
Continuando con el objetivo de la práctica anterior, pretendemos identificar en los alimentos que
ingerimos habitualmente algunas de las biomoléculas más importantes que están presentes en los
seres vivos como son los glúcidos, lípidos y proteínas. En el caso de los glúcidos, y para diferenciar
de la práctica ya realizada, analizaremos un polisacárido que carece de poder reductor como es el
almidón. Además de soluciones patrón de estas biomoléculas, emplearemos por tanto, diferentes
alimentos en los cuales podemos encontrarlas.
2. FU!DAME!TO TEÓRICO
La detección de las diferentes moléculas la vamos a realizar con diferentes reactivos que reaccionas
con ellas dando productos coloreados característicos:
• Almidón: emplearemos el Lugol que es una solución de yodo con color amarillo pero que
colorea al almidón con un tono azul intenso debido a una fijación del yodo (I) sobre las
unidades de glucosa de la amilosa.
• Grasas: emplearemos el colorante Sudán III que es específico para identificar grasas
neutras o triglicéridos y las colorea de un tono rojo anaranjado. Este colorante no tiene
afinidad por sustancias polares.
• Proteínas: las proteínas en presencia de ión cúprico (Cu2+), en medio básico, dan
complejos coloreados de violeta por interacción de los iones cúpricos con los enlaces
peptídicos. Esta es la conocida como reacción de Biuret.
3. MATERIAL UTILIZADO
• Tubos de ensayo y gradilla
• Agua
• Pipetas
• Solución de almidón
• Solución de albúmina
• Patata
• Clara de huevo
• Aceite de oliva o girasol
• Lugol
• Rojo Sudán III
• Disolución de NaOH al 10%
• Reactivo de Fehling A
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4. PROCEDIMIE!TO
Detección de almidón:
1. Prepara 3 tubos de ensayo y rotúlalos con los con los números 1, 2 y 3.
• Tubo 1: 4 ml de agua
3. Añade 10 gotas de Lugol a cada uno de los tubos, agita suavemente y observa si se producen
variaciones de color.
2. Añade al tubo 5 una pequeña cantidad de aceite (10 gotas) y emulsiona la mezcla.
3. Añade 10-15 gotas del colorante Sudán III en ambos tubos, agita suavemente y observa si se
producen variaciones de coloración.
2. Añade al tubo 7 una pequeña cantidad de albúmina (3 gramos) y al tubo 8 una porción de
clara de huevo (1 ml).
3. Añade en cada uno de los tubos 1 ml de disolución de NaOH y agita suavemente; vuelve a
añadir 5-10 gotas del reactivo Fehling A y agita otra vez.
4. CUESTIO!ES
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1. OBJETIVO
El objetivo de esta práctica es conocer las partes que componen un microscopio y saber manejarlo
correctamente. Utilizaremos el microscopio para la observación de diferentes muestras de tejidos y
cortes de diferentes órganos que están disponibles en el laboratorio de Biología.
2. FU!DAME!TO TEÓRICO
El microscopio óptico es un instrumento que se utiliza en los laboratorios para observar parte del mundo
microscópico, células y microorganismos. Funcionan por refracción de la luz por lo que la muestra debe
ser lo más transparente posible. Los microscopios ópticos pueden aumentar hasta dos mil veces el
tamaño del objeto observado, aunque lo habitual en los microscopios que se usan en nuestros
laboratorios es entre cuatrocientos y mil aumentos. El microscopio óptico consta de dos partes
fundamentales, una mecánica y otra óptica:
• Parte mecánica: es el soporte de los elementos ópticos y de la preparación a observar. Está formada
por:
Soporte: consta de un brazo, único sitio por donde se puede coger el microscopio, y un pie
donde se encuentra la fuente de iluminación que necesita un transformador.
La platina, placa cuadrada o circular en la que se apoya la preparación a observar. Dispone
de unas pinzas que permiten sujetar la preparación. La platina se halla perforada en el
centro para dejar paso a los rayos luminosos procedentes de la fuente de luz.
El tubo, pieza cilíndrica y hueca en cuya parte superior se sitúa una lente (el ocular) y en la
inferior se encuentra una pieza giratoria llamada revólver que lleva enroscadas otras lentes
(los objetivos) que, en este caso, son tres, aunque en otros modelos de microscopio pueden
ser más.
Tornillos de enfoque, que permiten el desplazamiento de la platina de modo que al acercar
o alejar la preparación del objetivo se consigue el enfoque de la misma. Son el tornillo
macrométrico que hace un desplazamiento rápido y el tornillo micrométrico que hace un
avance fino.
• Parte óptica: consta de tres juegos de lentes:
Oculares: son las lentes situadas en la parte superior del microscopio y es por donde
observamos. Nuestro microscopio solo tiene un ocular.
Objetivos: es la lente que se encuentra sobre la preparación a observar. Es el elemento
óptico más importante puesto que es el que produce la imagen aumentada de la muestra.
Los aumentos de los objetivos vienen indicados sobre los mismos y suelen ser 4x, 10x y
40x. El aumento total del microscopio se obtiene multiplicando los aumentos del ocular
por los del objetivo con el que se está realizando la observación.
Condensador: está por debajo de la preparación y es la lente que concentra los rayos
luminosos sobre la preparación. El diafragma es un dispositivo que regula la cantidad de
31 luz que entra en el condensador y sirve para regular el contraste de la imagen (a mayor
intensidad de luz, menor contraste)
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Para observar microorganismos vivos es necesario realizar una preparación en fresco, pero para ver células
muertas es habitual teñir la preparación con distintos colorantes.
3. MATERIAL
• Microscopio
• Muestras de tejidos
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4. PROCEDIMIE!TO
1. Identifica cada una de las partes que acabamos de mencionar en el microscopio que tienes a tu
disposición.
2. Observa las siguientes preparaciones que están listas para estudiar:
Tejidos vegetales: mitosis en raíz de cebolla, tallo con colénquima, tallo con
esclerénquima, corte transversal de hoja y estomas.
Tejidos animales: Tejido epitelial y conjuntivo (epitelio simple plano estratificado y piel
humana), tejido óseo ( hueso), tejido cartilaginosos (cartílago), tejido muscular (músculo
esquelético y músculo cardiaco), tejido hematopoyético (sangre humana y sangre de pez)
5. CUESTIO!ES
• Dibuja cada una de las muestras de tejidos y órganos que has observado indicando las partes
que puedes diferenciar en cada una de ellas. Utiliza folios adicionales si lo necesitas.
• En la preparación de mitosis tienes que dibujar cada una de las fases de esta división celular que
observes en la preparación.
• ¿Qué diferencias observas entre el músculo estriado y el cardiaco? En la preparación de
músculo estriado hay dos cortes diferentes del mismo tejido ¿En qué sentido cortamos el
músculo en cada uno de ellos?
• ¿Qué diferencia fundamental observas en los frotis de sangre humana y de pez?
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1. OBJETIVO
En esta práctica pretendemos, además del uso del microscopio, saber cómo tenemos que realizar una
preparación para observar células, en este caso bacterias, con dicho microscopio; es decir, vamos a
preparar un frotis bacteriano y para ello utilizaremos muestras bacterianas de diferente procedencia como
pueden ser un yogur o nuestro propio sarro dental. Aprenderemos a distinguir los distintos tipos de
morfologías de células procariotas así como sus agrupaciones.
2. FU!DAME!TO TEÓRICO
Se denomina frotis a la extensión que se realiza sobre un portaobjetos de una muestra o cultivo con
objeto de separar lo más posible los microorganismos, ya que si aparecen agrupados en la preparación
es muy difícil obtener una imagen clara y nítida. Este frotis debe ser posteriormente fijado al vidrio del
portaobjetos para poder aplicar los métodos habituales de tinción que permiten la observación al
microscopio de las bacterias sin que la muestra sea arrastrada en los sucesivos lavados. La fijación de
una extensión bacteriana hace que las bacterias queden inactivadas y adheridas al vidrio alterando lo
menos posible la morfología bacteriana y las posibles agrupaciones de células que pudiera haber.
1. Colocar una pequeña gota de agua en el centro de un portaobjetos limpio. Es necesaria muy poca
cantidad de agua, por lo que se puede usar el asa de siembra, ya que en el extremo curvo de su
filamento queda retenida una mínima gota de agua, que resulta suficiente.
2. Flamear el asa de siembra, tomar, en condiciones asépticas, una pequeña cantidad del cultivo
bacteriano en medio sólido y transferirlo a la gota de agua. Remover la mezcla con el asa de siembra
hasta formar una suspensión homogénea que quede bastante extendida para facilitar su secado.
Si la muestra se toma de un cultivo en medio líquido, no es necesario realizar los dos primeros pasos
ya que basta con colocar y extender una gota de la suspensión bacteriana, que se toma con el asa de
siembra, directamente sobre el portaobjetos.
3. Esperar hasta que el líquido se evapore o acelerar su evaporación acercando el porta a la llama del
mechero. En este caso hay que tener mucha precaución de no calentar demasiado el porta pues las
células pueden deformarse o romperse.
FIJACIÓ! DE LAS BACTERIAS AL PORTAOBJETOS
4. Por calor: Pasar tres veces el portaobjetos por la llama durante unos segundos. Dejar enfriar el porta
entre los pases.
5. Con metanol (para bacterias procedentes de medio líquido). Añadir unas gotas de metanol sobre la
extensión completamente seca. Golpear el portaobjetos por su canto con cuidado contra la mesa de
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trabajo para retirar de inmediato el exceso de metanol. Esperar a que el metanol se evapore
completamente.
Una vez realizado el frotis y fijadas las bacterias, las preparaciones pueden ser observadas al
microscopio, aunque carecen de contraste. Lo normal es continuar con el proceso de tinción.
7. Lavar la preparación con agua para eliminar el colorante. Esta operación se realiza inclinando el
portaobjetos y aplicando el chorro de agua en su parte superior de manera que resbale sobre el frotis,
pero sin que vaya dirigido directamente sobre él, pues podría arrastrar parte del frotis consigo.
Eliminar la máxima cantidad de agua de los portaobjetos golpeándolos por su canto con cuidado
contra la superficie de la mesa de trabajo. Colocar encima un cubreobjetos con mucho cuidado de
que no se formen burbujas que dificulten la observación de la muestra.
8. Secar el porta presionando entre dos papeles de filtro, pero en ningún caso se debe frotar el porta.
3. MATERIAL
• Microscopio
• Mechero
• Pinzas
• Agua
• Portaobjetos
• Cubreobjetos
• Papel absorbente
• Asa de siembra
• Palillos o aguja enmangada
• Muestras bacterianas de origen natural: yogur, sarro dental.
• Azul de metileno
4. PROCEDIMIE!TO
El yogur es un producto lácteo producido por la fermentación natural de la leche. A escala industrial
se realiza la fermentación añadiendo a la leche dosis del 3-4% de una asociación de dos cepas
bacterianas: el Streptococcus termophilus, poco productor de ácido, pero muy aromático, y el
Lactobacillus bulgaricus, muy acidificante. En esta preparación se podrán, por tanto, observar dos
morfologías bacterianas distintas (cocos y bacilos) y un tipo de agrupación (estreptococos, cocos en
cadenas arrosariadas). Además, el tamaño del lactobacilo (unos 30µm de longitud) facilita la
observación aunque no se tenga mucha práctica con el enfoque del microscopio.
1. Realizar el frotis disolviendo una mínima porción de yogur en una pequeña gota de agua y siguiendo
todas las indicaciones que se han dado en el apartado anterior.
4. CUESTIO!ES
1. Dibuja lo que observas en cada una de las preparaciones o frotis realizados a diferentes
aumentos.
2. Indica la morfología de las células procariotas que estás viendo.
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1º Bachillerato Biología y Geología
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1. OBJETIVO
El objetivo de esta práctica es la exploración externa e interna del corazón, con disección e identificación
de las cavidades, válvulas, arterias y venas; además pretendemos que los alumnos se habitúen a manejar
el material y los métodos propios de la disección.
El corazón es el órgano que se encarga de la distribución de la sangre hacia el resto del organismo, está
situado en el lado izquierdo de la cavidad torácica: sus paredes están formadas por el músculo cardiaco o
miocardio, y protegidas externamente por el pericardio.
Está dividido por un septo para separar el lado derecho del izquierdo, cada uno de los cuales se divide a
su vez en aurícula y ventrículo.
La sangre venosa entra por las venas cavas a la aurícula derecha pasando al ventrículo derecho. De aquí
sale por la arteria pulmonar hacia el pulmón donde se oxigena la sangre, retorna al corazón por las venas
pulmonares hacia la aurícula izquierda. Pasa al ventrículo izquierdo y sale la sangre oxigenada por la
arteria aorta hacia el resto del cuerpo. La dirección en que fluye la sangre está controlada por las válvulas.
2. FU!DAME!TO TEÓRICO
La disección es una técnica de trabajo que se utiliza en Biología y en Medicina para conocer la estructura
y el funcionamiento de los órganos de los seres vivos; consiste en dividir y separar metódicamente las
partes y órganos del cuerpo de un ser vivo para el estudio de su disposición y demás caracteres
anatómicos. Las disecciones se llevan a cabo utilizando una serie de materiales específicos:
• Bandeja de disección: es un soporte plano en el que fijamos o depositamos el órgano o cuerpo
que vamos a diseccionar.
• Instrumental de disección: algunos de los instrumentos utilizados son bisturí y tijeras, que se
emplean para cortar, agujas enmangadas y lancetas para separar o sujetar, y pinzas para
separar y extraer muestras.
• Guantes: generalmente de látex, se emplean para no tocar con las manos desnudas muestras
que pueden contener bacterias infecciosas para los seres humanos.
• Bata de laboratorio: impide que te ensucies la ropa con algún resto orgánico.
• Gafas de plástico: utilizadas solo en ocasiones especiales, impiden que te ensucies con sangre.
Realizar una disección no es un juego. Cuando la lleves a cabo, ten en cuenta los siguientes consejos:
• Sigue estrictamente las indicaciones del protocolo o guión que se te proporciona.
• Procura ser lo más cuidadoso y limpio posible. De este modo podrás observar todos los detalles.
• Maneja con cuidado el instrumental. Algunos instrumentos como las agujas, los bisturíes o las
tijeras, pinchan o cortan, y son peligrosos.
• Al acabar el trabajo en el laboratorio, debes dejar todo limpio y ordenado. No olvides lavarte
39 las manos.
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3. MATERIAL
• Corazón de cordero
• Bandeja de disección
• Material de disección: tijeras, bisturí y pinzas
• Guantes
4. PROCEDIMIE!TO
1. Limpia el corazón de grasa externa y de los restos del pericardio, pero no utilices para esta operación el
bisturí.
2. Obsérvalo atentamente. Fíjate en que presenta una cara más plana (cara posterior) y otra más convexa
(cara anterior) y acabada en punta en el extremo inferior. Coloca el corazón sobre la cubeta de disección,
descansando sobre la cara posterior.
3. Identifica las partes de la morfología general externa y haz un dibujo de más detallado posible:
reconoce las aurículas y los ventrículos, observa los vasos que entran y salen del órgano como la arteria
pulmonar que sale del ventrículo derecho y la arteria aorta que sale del ventrículo izquierdo. Observa
también las arterias coronarias. En la cara posterior puede que se vean las venas cavas aunque muy
replegadas porque no contienen sangre.
4. Comenzamos su disección realizando un corte con las tijeras a partir de la arteria pulmonar y abriendo
las paredes del ventrículo derecho. Observa los repliegues membranosos situados en la base de la arteria
pulmonar que son las válvulas sigmoideas, que impiden el retorno de la sangre al corazón, así como la
válvula tricúspide, formada por tres membranas fuertes situadas entre la aurícula y el ventrículo.
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5. Para observar el interior del ventrículo izquierdo realizamos el corte partiendo desde la arteria aorta
a lo largo del ventrículo izquierdo. En la base de la arteria podemos observar nuevamente las
válvulas sigmoideas. Localizamos la válvula mitral. Compara en este momento el grosor de las
paredes de los ventrículos izquierdo y derecho.
6. CUESTIO!ES
Antes de diseccionar el corazón:
1. ¿Qué función tienen las arterias coronarias que rodean al corazón?
2. A qué cavidades cardíacas llegas si introduces un lápiz por:
La arteria aorta:
La arteria pulmonar:
Las venas pulmonares:
Las venas cavas:
3. Haz un dibujo de la anatomía externa del corazón
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