UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS ESPE

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y DE LA AGRICULTURA

INGENIERIA EN BIOTECNOLOGIA
INFORME DE LABORATORIO

Integrantes: Sasha Siguenza Materia: Fitoquímica

Jennifer Tapia
Camila Velandia
Fecha: 11-05-2017 NRC: 2469

1. TEMA:
Identificación de los componentes de los aceites esenciales por reacciones de
coloración y cromatografía

2. OBJETIVOS

Objetivo General:
Identificar los componentes de los aceites esenciales por reacciones de coloración y
cromatografía

Objetivos Específicos:
 Identificar los grupos funcionales presentes en el aceite esencial y en el
hidrodestilado de eucalipto mediante pruebas de coloración.
 Determinar los compuestos presentes en el aceite esencial por medio de
cromatografía de capa fina.
 Identificar los compuestos separados del aceite esencial de eucalipto en base
al cálculo del factor de retardo.
3. RESULTADOS Y OBSERVACIONES
Tabla 1. Resultados de las pruebas colorimétricas de aceite esencial de eucalipto

Muestra Aceite esencial de Eucalipto (Eucalyptus globulus)

Prueba Aceite esencial Hidrodestilado Fotos

++
Dos fases Amarillo -
Alcoholes ↓
con
reactivo de + HCl  +H2O
Lucas

Linalool
 + +++
Amarillo ↓
Aldehídos y
cetonas con
reactivo de
Brandy + 
isovaleraldehído

+++ +
Espejo de plata Espejo de plata
Aldehídos
con
reactivo de
Tollens

cuminaldehído

+ +
Naranja ↓ Naranja ↓

Detección
de ésteres

-----------------------------------

-
-

Fenoles
-----------------------------------

+++
Insaturacio
Reducción del -
nes
KMnO4
 Limoneno

+++ -

Hidrocarbu
ros
aromáticos

P-cimeno

Detección
de Ácidos - -
con KI+ Lila Lila
KIO3

Tabla 2. Placa de cromatografía de placa fina con muestras de aceite esencial de eucalipto
Placa de cromatografía Resultados
Fase móvil: tolueno-acetato de etilo (93:7)
Fase estacionaria: Placa de silica Gel
 a= distancia recorrida por el
compuesto (cm)
b= distancia recorrida por el
solvente (cm)
a1= 3.1
a2= 4.1
a3=4.9
a4=7.2
a5=9.1
a6=10.7

CALCULOS
Fórmula factor de retardo Rf:
𝑎
𝑅𝑓 = ∗ 100 %
𝑏
Tabla 3. Resultados de la cromatografía de capa fina del aceite de eucalipto
Muestra Distancia Distancia Factor Factor Principio
recorrida recorrida por de activo
de
por el el compuesto
retardo retardo
solvente (b) (an)
%
(cm) (cm)

3.1 0.26 26 Linalol

 4.1 0.34 34 Geraniol

4.9 0.41 41 Eucaliptol

7.2 0.6 60
Cuminaldehid
o
Aceite
esencial 9.1 0.76 76 Limoneno
12
de
eucalipto
10.7 0.89 89 Pineno

4. Discusión
Según (Thornton, 1998) el reactivo de Lucas permite identificar la presencia de alcoholes
primarios, secundarios o terciarios diferenciándolos por su velocidad de reacción, la cual
presenta la formación de dos fases, el aceite esencial dio positivo a esta prueba debido a la
presencia del linalool que es un terpeno con un grupo hidroxilo en su estructura. El ensayo
con 2,4-dinitrofenilhidracina es positivo para cetonas y aldehídos. Estos grupos funcionales
pueden distinguirse mediante el ensayo de Tollens que solamente dan los aldehídos ya que
se oxidan más fácilmente, debido a la presencia del cuminaldehído, al igual que en el ensayo
de Brady en donde la presencia de carbonilos saturados como: p-cimeno, da coloración
amarillenta, (Gallego, 2006).
La presencia de insaturaciones se pone de manifiesto mediante una cis hidroxilación con
KMnO4 (Gallego, 2006), el resultado del aceite esencial dio positivo por el precipitado de
color café que indica la reducción del Mn por presencia de alquenos como el α- pineno. Para
la identificación de hidrocarburos aromáticos después de la aplicación de los reactivos se
deben presentar colores intensos que dependen de la naturaleza del anillo, el aceite esencial
adquirió un color anaranjado-rojizo lo que indica que es un derivado del benceno que en este
caso es el limoneno. (OIT, 1998). Las pruebas que resultaron negativas fueron: fenoles,
detección de ácidos debido a que no se observó la coloración azul y detección de esteres ya
que los positivos presentados en el ensayo fueron insignificantes y por otro lado no existe
bibliografía que indique la presencia de ésteres en el eucalipto.
La cromatografía comprende un método físico de separación en el que los componentes a
separar se distribuyen entre dos fases una de las cuales está en reposo mientras que la otra se
mueve en una dirección definida (Gennaro, 2003). Se usa diferentes combinaciones de
eluyentes, que ofrezcan una buena retención y la máxima resolución entre los compuestos de
interés. En la práctica se utilizó dos solventes: Tolueno: Acetato de etilo sobre una placa de
sílica gel en vidrio. En el análisis cromatográfico de Eucalyptus globulus según (Avello,
2016) indica que el aceite esencial en su mayoría posee terpenos como el 1,8-cineol, que se
encuentra en mayor cantidad en el eucalipto con 84,2%, α-pineno 45,8%, limoneno 4,6%, p-
cimeno 7.4%, geraniol 6.8%, linalool 3.4% (Horvath, 2013), cada uno tiene un valor
constante de factor de retardo Rf en condiciones cromatográficas determinadas. Los
resultados obtenidos en el cálculo del factor de retardo, concuerdan con la bibliografía, según
(BLADT, 2001) el 1,8-cineol posee un (Rf=0,40) mientras que en la práctica el factor de
retardo calculado para el mismo compuesto fue de 0.41. De igual manera para el α-pineno
(Rf=0.80), limoneno (Rf=0.75), geraniol (Rf=0,39), linalool (Rf=0.30), se encuentran dentro
del rango, donde se puede afirmar que dichos compuestos están presentes en el aceite esencial
de eucalipto.
5. Conclusiones
 Se identificó los grupos funcionales presentes en el aceite esencial y en el
hidrodestilado de eucalipto mediante pruebas de coloración, los grupos
funcionales que fueron reconocidos son alcoholes secundarios, aldehído y
cetonas, al igual que insaturaciones, hidrocarburos aromáticos y ésteres.
 Se determinó los compuestos presentes en el aceite esencial por medio de
cromatografía de capa fina, los cuales fueron 1,8-cineol, que se encuentra en
mayor cantidad en el eucalipto con 84,2%, α-pineno 45,8%, limoneno
4,6%, p-cimeno 7.4%, geraniol 6.8%, linalool 3.4%.

6. Bibliografía

Avello, M. (2016). Efecto pediculicida de una formulación en base a Eucaliptus globulus L.

Scielo.
BLADT, W. (2001). PLANT DRUG ANALYSIS. NUEVA YORK: SEGUNDA EDICIÓN.
Brewster, R. (1970). Curso practico de quimica organica. Madrid.
Gallego, M. d. (2006). Laboratorio de quimica organica .
Gennaro, A. (2003). Remington Farmacia. Buenos Aires : Medica Panamericana .
Granados, R. (2007). Experimental Organic Chemistry. Barcelona: REVERTE2007.
Horvath, G. (2013). Detection of antibacterial activity of essential oil components by
TLCbioautography. Department of Pharmacognosy, Medical School, University of
Pécs.
OIT, E. d. (1998). Jeanne Mager Stellman.
R. Romano, V. T. (2000). COMPONENTES BIOACTIVOS RELACIONADOS CON LA
FUNCIÓN PULMONAR EN. Mendoza.
Thornton, R. (1998). Quimica organica .