El método de diagnóstico mayormente utilizado ante la sospecha de leptospirosis
es el serodiagnóstico mediante ELISA Y MAT, para la determinación de anticuerpos. MAT
Prueba de aglutinación microscópica es la prueba de referencia (Gold standard),
que determina los anticuerpos aglutinantes en el suero de un paciente mediante la mezcla de varias diluciones de éste con leptospiras vivas o muertas (formolizadas). Los anticuerpos antileptospiras presentes en el suero hacen que las leptospiras se peguen unas a otras formando grumos. Los anticuerpos aglutinantes pueden ser de las clases IgM e IgG.
Se puede realizar MAT en diferentes tipos de muestra, suero sanguíneo, lácteo,
orina, líquido cefalorraquídeo, humor acuoso; la muestra de elección es el suero sanguíneo.
Se puede realizar también cultivo, anticuerpos conjugados con marcadores de
fluorescencia, PCR e inmunotinción. Se hace positiva inmediatamente después de la presentación de los síntomas.
La PCR identifica el ADN de manera específica con elevada sensibilidad y en
corto período a cualquier material clínico. Tiene como ventajas la confirmación rápida del diagnóstico en la fase inicial de la enfermedad y la detección del ADN del microorganismo, no dependiendo de la viabilidad del agente. Ésta prueba se vuelve positiva en 8 a 10 días después de la aparición de los síntomas con muestras colectadas secuencialmente. VENTAJA La mayor ventaja de la MAT es su alta especificidad. Desventajas
Una desventaja importante es la necesidad de facilidades para el cultivo
y mantenimiento de paneles de leptospiras vivas. Es técnicamente exigente. Consume mucho tiempo, especialmente cuando el panel es grande. ELISA
Usualmente solo detecta anticuerpos reactivos con un antígeno género
específico ampliamente reactivo y por tanto, no da indicación del serovar o serogrupo causante de la enfermedad. Las pruebas de ELISA son populares y varios ensayos están disponibles; estas pruebas pueden realizarse con kits comerciales o con antígenos producidos “en la casa”.
Un antígeno ampliamente reactivo llamado género específico es generalmente
usado para detectar IgM y algunas veces también anticuerpos IgG. La presencia de anticuerpos IgM pueden indicar una leptospirosis actual o reciente, pero debe recordarse que los anticuerpos IgM pueden permanecer detectables por varios años. El punto de corte (título positivo) se determina mejor sobre la base de las mismas consideraciones presentadas para la MAT. Pruebas género específicas tienden a ser positivas más temprano en la enfermedad que la MAT. Ventajas
La prueba de ELISA puede detectar anticuerpos clase IgM en la fase
temprana de la enfermedad por lo que puede indicar si se trata de una infección actual o reciente. Solo utiliza un antígeno, llamado antígeno género específico, el cuál es compartido por leptospiras patógenas y saprofitas. Al contrario de la MAT, la ELISA puede ser estandarizada. No requiere del cultivo de leptospiras en el laboratorio local, para proveer de antígeno desde que un kit comercial esté disponible. Desventajas
Son menos específicas que la MAT.
Los resultados de la ELISA deben ser, por lo tanto, confirmados por MAT. Como se basa en un antígeno género específico, la prueba de ELISA no da indicación del serovar infectante.