OBJETIVOS
eliminaron con agua los compuestos no
● Separar una mezcla de tartrazina y rojo
número 3, colorantes sintéticos usados
en alimentos, por extracción en fase
sólida, aplicando los conceptos de
cromatografía en fase reversa.
● Comprobar la eficiencia de la separación
por medio de la cromatografía en capa
fina sobre gel de sílice.
RESULTADOS
Butanol/Ácido
acético/Agua
4:2:1
RfT1: 0.14
RfR1: 0.83
RfT2:0.19
RfR2:0.87
Fig.1 Cromatoplaca de colorantes, mezcla (M) de rojo de
metilo (R1) y Tartrazina (T1), eluato de Tartrazina (T2) y
eluatos de rojo de metilo eluido con metanol (50%) (R2).
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Se realizó la separación de una mezcla de
colorantes mediante la técnica de extracción en
fase sólida. Esta técnica se realizó en 4 pasos,
el primero fue el acondicionamiento de la
columna pasando 5mL de metanol seguido de
5mL de agua destilada (esto propicia que haya
interacciones iguales en toda la superficie de la
sílice), después se aplicó la muestra, de esta
manera se propiciaron las interacciones entre
las moléculas de los colorantes y de la fase
estacionaria, se retuvieron moléculas de dichos
colorantes en la fase estacionaria,
posteriormente en la etapa de lavado se
adsorbidos y finalmente en la elusión los
compuestos que se encuentran retenidos en la
fase estacionaria son eluidos con un gradiente
de disolventes metanol/agua al 10%, 50% y
metanol, respectivamente; es decir se fue
aumentando la polaridad de la mezcla de
disolventes para extraer a los colorantes. Se
recolectaron los eluatos de tartrazina (amarillo)
y rojo de metilo.
Se realizó una cromatografía en placa fina para
determinar la eficiencia de la separación, se
aplicaron 3 puntos en la placa, el primero: en el
que se aplicó la mezcla de colorantes. Como se
observa en la Figura 1 se puede apreciar la
separación de estos colorantes en dos manchas
perfectamente separadas y con RfT1: 0.14 para
la tartrazina y RfR1: 0.83 para el rojo de metilo.
Estos resultados indican que la tartrazina al
tener un Rf menor en comparación con el rojo de
metilo es más afín por la fase estacionaria y se
puede afirmar que la tartrazina es más polar ya
que es el compuesto que por su polaridad puede
presentar un mayor número de interacciones
con la fase estacionaria. En cambio, el rojo de
metilo es más afín por la fase móvil; y por lo tanto
menos polar al presentar muy poca o casi nula
interacción con la fase estacionaria.
En el segundo punto se aplicó la Tartrazina
obtenido de la extracción en fase sólida, como
se aprecia en la Figura 1 se obtuvo un Rf muy
similar al obtenido en la mezcla, por lo tanto, se
puede concluir que se separó eficientemente
este colorante por SPE.
Para la separación del rojo de metilo se ocupó
una elución con un gradiente de disolventes de
mayor a menor polaridad. En el tercer punto se
aplicó el eluato obtenido con el disolvente
metanol/agua al 50%, en el cual se obtuvó la
separación del colorante rojo de metilo.
 transferencia de uno o más iones de la
fase fluida al sólido por intercambio o
CONCLUSIONES desplazamiento de iones de la misma
● La tartrazina es más polar que el Rojo de carga, que se encuentran unidos por
metilo. fuerzas electrostáticas a grupos
funcionales superficiales.
● La técnica de extracción en fase solida ➢ Fluido supercrítico: Un fluido
separó los colorantes de una manera supercrítico (FSC) es una sustancia que
rápida y eficaz. se encuentra en unas condiciones
operativas de presión y temperatura
superiores a las de su punto crítico.
CUESTIONARIO
2. Discutir en base a las estructuras de
los colorantes, el orden de elución
1. Definir los siguientes conceptos:
esperado de los mismos en la
cromatografía en columna y en la
➢ Eluir: Proceso en el cual los solutos son
cromatografía en placa fina.
arrastrados a través de una fase
estacionaria por el movimiento de una
El orden de elución no fue el mismo puesto que
fase móvil.
no se trabajó bajo las mismas condiciones, las
fases de ambos métodos de separación no
➢ Eluyente: Disolvente (puede ser puro,
fueron las mismas, en la columna se trabaja con
mezcla de varias o disolución) que se usa
fase reversa y en TLC es fase normal.
para transportar los componentes de una
mezcla a través de una fase estacionaria.
3. Explicar si la relación de polaridades
utilizada para la fase estacionaria y
➢ Eluato:Producto o sustancia que se
para fase móvil corresponde a la
separa o sale de la columna.
cromatografía en columna en fase
normal o en fase reversa.
➢ Adsorción: Proceso mediante el cual se
extrae materia de una fase y se concentra
La relación si corresponde, ya que en fase
sobre la superficie de otra fase
normal que fue en la cromatografía en placa fina;
(generalmente sólida). Por ello se
se utilizan: fase estacionaria polar (en nuestro
considera como un fenómeno
caso: silica gel en el cromatofolio) y fase móvil
subsuperficial. La sustancia que se
no polar (Butanol/Ácido acético/Agua) 4:2:1
concentra en la superficie o se adsorbe
Y en fase reversa se utiliza fase estacionaria no
se llama "adsorbato" y la fase adsorbente
polar y fase móvil polar (Metanol/agua).
se llama "adsorbente".

➢ Partición: Reparto o división de un todo

en varias partes.
5.-Explicar ¿Qué se entiende cuando la
➢ Exclusión: Quitar a alguien o algo de un
columna de cromatografía empacada con
lugar, descartar, rechazar, negar
gel de sílice de fase reversa se lleva en su
posibilidades.
etiqueta C12 ó C18?
➢ Intercambio iónico: Operación de
Que se modifica con varios grupos funcionales
separación basada en la transferencia de
hidrofóbicos, entre los cuales el octadecilo es el
materia fluido-sólido. Implica la
más comúnmente empleado (C18), es una
cadena recta de 18 carbonos; un gran número
de hidrocarburos de esta cadena está atado en
la superficie del gel de sílice como también
dentro de sus poros.

BIBLIOGRAFÍA.
SKOOG - Química Analítica - 7ª ed. - McGraw
Hill – México, 2001. Consulta: 3 de octubre,
2017
J.M Acosta, “Diccionario de Química Física”
editorial Díaz de Santos, pág.10 HPLC, química
analítica,PDF , en línea en:
http://www.analitica.cl/PDF/INSUMOS/Columna
s%20HPLC.pdf, fecha de consulta: 4 de
octubre 2017.