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(RESUMEN)
1. BIORREMEDIACIOÓ N
Se define como biorremediacioó n o biorremedacioó n a cualquier proceso que utilice
microorganismos, hongos, plantas o las enzimas derivadas de ellos para retornar un medio
ambiente alterado por contaminantes a su condicioó n natural. La biorremediacioó n puede ser
empleada para atacar contaminantes especíóficos del suelo, por ejemplo, en la degradacioó n
bacteriana de compuestos organoclorados o de hidrocarburos. Un ejemplo de un tratamiento
maó s generalizado es el de la limpieza de derrames de petroó leo por medio de la adicioó n de
fertilizantes con nitratos o sulfatos para estimular la reproduccioó n de bacterias nativas o
exoó genas (introducidas) y de esta forma facilitar la descomposicioó n del petroó leo crudo.
1.1. VENTAJAS
La biorremediacioó n tiene una serie de ventajas sobre otros meó todos. En el caso de que la
contaminacioó n esteó en lugares inaccesibles se puede realizar sin necesidad de cavar. Por
ejemplo, en el caso de derrames de petroó leo que hayan penetrado en el suelo y amenacen
contaminar a la capa de agua. Esto resulta mucho menos costoso que el proceso de excavacioó n
e incineracioó n que seríóa la otra alternativa. El empleo de desechos orgaó nicos de faó cil
degradacioó n como aditivos o correctores de densidad, resulta una alternativa teó cnicamente
factible, viable y sencilla que favorece la degradacioó n de contaminantes orgaó nicos en suelos a
traveó s de procesos de composteo, ya que eó stos mejoran las propiedades del sistema y aportan
nutrientes para mantener activas las poblaciones microbianas.
Mientras que los tratamientos fíósicos y buena parte de los quíómicos estaó n basados en
transferir la contaminacioó n entre medios gaseoso, líóquido y soó lido, en la biorremediacioó n se
transfiere poca contaminacioó n de un medio a otro. Es una tecnologíóa poco intrusiva en el
medio y generalmente no requiere componentes estructurales o mecaó nicos dignos de
destacar. Comparativamente, es econoó mica y, al tratarse de un proceso natural, suele tener
aceptacioó n por parte de la opinioó n puó blica.
1.2. APLICABILIDAD
• Disponibilidad del contaminante. Es un factor críótico, maó s importante que la propia presencia
de comunidades microbianas. Para que la degradacioó n de un contaminante pueda producirse,
es necesario que interaccione con la ceó lula en medio acuoso. Inicialmente lo haraó con la parte
exterior de su pared para posteriormente ser transportado al interior de la misma. La forma
maó s comuó n de transporte es la complejacioó n con enzimas extracelulares producidos por los
microorganismos. Muchos contaminantes orgaó nicos, como los derivados del petroó leo, PCBs,
hidrocarburos aromaó ticos policíóclicos (naftaleno, pireno, fluoreno), solventes halogenados,
etc., son hidrofoó bicos y tienden a adsorberse en el suelo, concretamente a la fraccioó n orgaó nica
(aó cidos huó micos, aó cidos fuó lvicos y humina). Esta es una de las causas, por ejemplo, de la
persistencia de muchos pesticidas. La produccioó n de surfactantes por los microorganismos es
un factor determinante, como veremos, que atenuó a este problema y facilita la degradacioó n.
- Componentes muy
- Abundancia
pesados abundantes en
de hidrocarburos alifaó ticos
la mezcla
lineales y escasa presencia
- Porosidad media - Mezcla de compuestos
de resinas y asfaltenos - Rocas fracturadas
- Elevada orgaó nicos e inorgaó nicos
- Concentraciones bajas - Baja permeabilidad
permeabilidad - Concentraciones
- Presencia de poblaciones - Compleja
- Mineralogíóa toó xicas
microbianas diversas mineralogíóa
uniforme - Escasa actividad
- Adecuada oxigenacioó n -Heterogeneidad
- Homogeneidad microbiana
- pH = 6-8
- Ambientes anoó xicos
- Temperaturas superiores a
- pH extremos
15 ºC
-Temperaturas bajas
1.3. FUNDAMENTACION BIOQUIMICA DE LA
BIODEGRADACION
El fundamento bioquíómico de la biorremediacioó n se basa, principalmente, en la serie de
reacciones de oó xido-reduccioó n (cuyo fin es la obtencioó n de energíóa) que se producen en la
cadena respiratoria, o transportadora de electrones de las ceó lulas.
Un suelo con baja permeabilidad impediraó los movimientos de agua, nutrientes y oxíógeno al
formarse complejos huó micos de arcilla disminuyendo la disponibilidad para los
microorganismos, de la misma forma esto contribuye a la formacioó n de residuos
persistentes en el ambiente.
El contaminante puede ser absorbido en las partíóculas del suelo formando agregados
los cuales son difíócilmente transportados hasta las ceó lulas que los degradan con lo cual
aumenta la concentracioó n de la contaminacioó n.
1.3.2. ESTRUCTURA DEL CONTAMINANTE.
La estructura molecular del contaminante, afecta a sus propiedades quíómicas y fíósicas y su
capacidad para ser biodegradado.
La capacidad para ser biodegradado estaó relacionada con factores tales como la solubilidad, el
grado de ramificacioó n, el grado de saturacioó n y la naturaleza y el efecto de los sustituyentes.
Si las concentraciones presentes en el suelo son muy bajas los compuestos presentes no
suministran la energíóa suficiente para el mantenimiento de los microorganismos.
Si las concentraciones de HCs son altas pueden ser toó xicos para las ceó lulas al generar
cambios en la estructura y funcioó n de la membrana celular.
Tabla 3: ECA para Suelos. Fuente: D.S. N° 002-2013-MINAM Estándar Nacional de Calidad
Ambiental para Suelo.
2. MICROORGANISMOS EN LA BIORREMEDIACIOÓ N
El estudio hecho sobre la adaptacioó n y seleccioó n de microorganismos autoó ctonos en medios de
cultivo enriquecidos con petroó leo crudo realizado por Maríóa del Carmen Rivera-Cruz 2002
indicoó que los microorganismos con crecimiento abundante aislados de suelos receptores de
derrames recientes y croó nicos de petroó leo crudo y otros no contaminados, son considerados
degradadores de petroó leo.
2.1. PSEUDOMONAS
Las bacterias del geó nero Pseudomonas poseen la habilidad para utilizar diversos substratos,
incluyendo aquellos creados por el petroó leo. Las Pseudomonas son bacterias Gram negativas,
ubicuas, que pertenecen a la subclase gamma de las Proteobacterias. Las Pseudomonas son
bacterias productoras de biosurfactantes como los ramnolipidos involucrados en procesos de
remocioó n de aceites y productos relacionados, Bushnell y Hass fueron de los primeros en
describir bacterias productoras de biosurfactantes, como el Corynebacterium simplex y cepas
de Pseudomonas.
2.2. LACTOBACILUS
Tambieó n conocidas por su nomenclatura oficial: aó cido 2-hidroxi-propanoico o aó cido α-
hidroxi-propanoico, son compuestos quíómicos que juega importantes roles en diversos
procesos bioquíómicos, como la fermentacioó n laó ctica.
El aó cido laó ctico es un quiroó mero, por lo que posee dos isoó meros oó pticos. Uno es el dextroó giro
aó cido D-(-)-laó ctico o d-aó cido laó ctico (en este caso, el aó cido (R)-laó ctico); el otro es el
levoó giro aó cido L-(+)-laó ctico o ℓ-aó cido laó ctico (en este caso, aó cido (S)-laó ctico), que es el
que tiene importancia bioloó gica. La mezcla raceó mica (cantidades ideó nticas de estos
isoó meros) se llama d,ℓ-aó cido laó ctico.
Las bacteria acido laó cticas producen aó cido laó ctico de azuó cares y otros carbohidratos,
producidos por las bacterias fototroó picas y levaduras. Por eso, algunas comidas y bebidas
como el yogur y los encurtidos son hechas con bacterias acidolaó cticas desde tiempos remotos.
Sin embargo, el aó cido laó ctico es un compuesto esterilizante fuerte que suprime
microorganismos danñ inos y ayuda a la descomposicioó n de materiales como la lignina y la
celulosa, fermentaó ndolos y removiendo efectos no deseables de la materia orgaó nica no
descompuesta.
2.3. RHODOCOCCUS.
Uno de los geó neros bacterianos maó s explotados en bioprocesos no convencionales es
El Rhododoccus posee una gran variedad de víóas metaboó licas para la degradacioó n y
modificacioó n de compuestos aromaó ticos, incluyendo las actividades de dioxigenasa y
monooxigenasa sobre anillos, asíó como la actividad de ruptura de catecol. Algunas cepas
presentan tambieó n la víóa del 3oxoadipato. Lo anterior sumado a su capacidad de crecimiento
en medios con escasos nutrientes, la carencia de un sistema de represioó n cataboó lica y su
persistencia ambiental las hacen excelentes candidatas para los tratamientos de
biorremediacioó n.
Nuevas especies de Rhodococcus que presentan una nueva mutacioó n tienen la capacidad de
degradar compuestos alifaó ticos con enlaces dobles principalmente en el noveno
carbono del grupo metilo terminal (alquenos).
2.4. HONGOS
Los hongos son altamente protistas, no tienen movimiento y emplean materia orgaó nica como
fuente de carbono y energíóa. Algunos de los hongos mejor conocidos son mohos, levaduras y
setas.
En comparacioó n con las bacterias, los hongos son menos numerosos y crecen a
velocidades considerablemente bajas; ademaó s, los procesos metaboó licos de eó stos son menos
diversos. Como grupo, los hongos tienden a ser maó s tolerantes a los aó cidos que las
bacterias (muchas especies crecen a un pH oó ptimo de 5 o menos) y son maó s sensibles a la
variacioó n en la humedad.
En comparacioó n con las bacterias, los hongos son menos numerosos y crecen a
velocidades considerablemente bajas; ademaó s, los procesos metaboó licos de eó stos son menos
diversos. Como grupo, los hongos tienden a ser maó s tolerantes a los aó cidos que las
bacterias (muchas especies crecen a un pH oó ptimo de 5 o menos) y son maó s sensibles a la
variacioó n en la humedad.
Los principios generales de las reacciones quíómicas se aplican tambieó n a las reacciones
enzimaó ticas
2.5.2.
CONCENTRACIOÓ N DE SUSTRATO
2.5.4. TEMPERATURA
k = A exp (-Ea/RT)
o Para muchas enzimas la regioó n de inactivacioó n teó rmica estaó muy proó xima
de la temperatura oó ptima.
• Michaelis y Menten propusieron un modelo para relacionar la velocidad de reaccioó n con la
concentracioó n de substrato. Suponiendo la existencia de un solo complejo central, el esquema
de reaccioó n seríóa:
2.5.5.
. Vmax = velocidad maó xima teoó rica = la velocidad cuando todos los centros activos
estaó n ocupados con sustrato (nunca alcanzada en la realidad)
2, Km (constante de Michaelis-Menten para cada enzima) = concentracioó n de S a la
que la V es 1/2 Vmax.
La Linearizacioó n de Lineweaver-Burk .
Artificio matemaó tico que permite deducir graó ficamente los valores de km y Vm.
El artificio consiste en convertir a la ecuacioó n M-M en la ecuacioó n de una recta.
Recta de forma Y = A + BX, donde:
o Y = 1/v,
o A = 1/Vm,
o B = km/Vm, y
o X = 1/[S]