Las pruebas bioquímicas consisten en distintos test químicos aplicados a medios biológicos, los cuales, conocida su

reacción, nos permiten identificar distintos microorganismos presentes.

Su sistema de funcionamiento generalmente consiste en determinar la actividad de una via metabólica a partir de un
sustrato que se incorpora en un medio de cultivo y que la bacteria al crecer incorpora o no.

Para realizar las pruebas bioquímicas se dispone de multiples medios, los cuales se deben aplicar de acuerdo a las
exigencias del microorganismo en estudio.

De la amplia variedad de pruebas bioquímicas, nosotros en laboratorio utilizaremos 10, aplicados a 5 especies de
microorganisos.

Además estudiaremos los resultados que estos test arrojan, comparando resultados experimentales entre los distintos
grupos de trabajo de nuestro laboratorio.

PRUEBAS BIOQUIMICAS

MEDIO DE Tratamiento RESULTADOS

CULTIVO PROPOSITO INOCULACION Post
incubacion POSITIVO NEGATIVO
Agar de Producción de la Yodo (2-3 gotas) Área clara Color negro
Almidón exoenzima alrededor del alrededor del
Amilasa 24-48 h/ cultivo cultivo
37ºC

Agar con Producción de la 24-48h/ 37ºC Colocar en Licuefacción de Solidificación

Gelatina exoenzima Estocada hasta el Nevera por 30 la gelatina
Gelatinasa fondo minutos

Rojo Fenol Determinar si la 24-48h/ 37ºC - Amarillo Rojo, aumento

Carbohidrato bacteria puede (producción de del pH
 Dextrosa utilizar, ese ácidos, (producción de
 Manitol carbohidrato fermentación del sustancias
 Lactosa carbohidrato) alcalinas por
 Sacarosa “loop” Puede haber utilización de
producción de peptonas)
gas

Agar de Tres Ver el patrón de 18-28h/ 37ºC - Utilización de

azucares y fermentación de 1-estocada glucosa
Hierro (TSIA) la bacteria 2

1 Utilizaci
ón de peptonas

Rojo
Rojo
Amarillo
Rojo
2-estriar Utilización de
Lactosa y/o
sucrosa
 Am

Am
En ambos
puede haber
producción de
gas y H2S
(negro)

SIM 1. Determinar si la 24-48h/ 37ºC Para Indol: 2 a 3 Rojo (anillo) – Amarillo, la

bacteria a través Estocada hasta el gotas del presencia de bacteria no
de fondo reactivo de indol (triptófano puede degradar
Triptofanasas Kovac fue degradado). el triptófano
puede degradar
el Triptófano a Medio de
indol. Negro cultivo se
2. Determinar si (precipitado), queda igual.
hay producción producción de
de H2S a partir H2 S
de aminoácidos
azufrados La bacteria sólo
3. Determinar si la crece en la
bacteria es Difuminación de línea de
móvil. la bacteria hacia inoculación
los lados

Caldo MR- Determinar 48h/ 37ºC 2 a 3 gotas de Rojo, presencia Amarillo,no

VP habilidad de las “loop” Rojo de Metilo de ácidos, pH 4 producción de
Prueba de bacterias para (después de los ácidos
Rojo de producir ácidos siete días) estables.
Metilo estables por
fermentación de la
glucosa

Color rosa,
Prueba de Determinar la 10 gotas de α presencia de No desarrollo
Voges- capacidad de naphtol acetoina de color rosa,
Proskauer producir acetoina 5 gotas KOH ausencia de
por fermentación 40% acetoina
de la glucosa 48h/ 37ºC

“loop”

Simmons Utilización del 24-48h/ 37ºC -

Citrate citrato como única Estriar Azul Verde
fuente de carbono.
Caldo de Determinar si la 48h / 37ºC - Rosa intenso Medio
Urea bacteria degrada la “loop” permanece
Urea igual

Litmus Milk Observar 24-48 h/ 37ºC

diferentes “loop”
reacciones
metabólicas que
ocurren en la
leche:
Fermentación - Rosa Violeta

Reducción del - Blanco Violeta

Litmus

Coágulo:
a. Renina - Suave, se No hay
mueve si se formación de
inclina el tubo coágulo
b. Acido - Duro, se queda No hay
atascado en las formación de
paredes del coágulo
tubo, si este se
inclina

Producción de - Coágulo roto Coágulo intacto

Gas
Violeta
Proteólisis - Violeta arriba y
brown acuoso
abajo
Rosa
Reacción Alcalina - Violeta

Agar de Determinar si la 24-48 h/ 37ºC 1 gota de ácido

Nitrato bacteria tiene la sulfanílico Rojo Medio
capacidad de 1 gota de α (sin echar el permanece
reducir nitratos a naphtilamina polvo de zinc) igual (con el
nitritos Polvo de Zinc polvo de zinc
cambia a rojo)

Catalasa : Determinar si la 1 gota de H2O2 a Efervescencia Permanece

Agar bacteria produce una colonia igual
Nutritivo catalasa para
degradar el H2O2.