Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul

FACULDADE DE BIOCIÊNCIAS

Curso de Medicina
Disciplina: Fundamentos Morfológicos I

Regulação da Expressão Gênica e

Células-Tronco

Profa. Ana Paula Franco Lambert

Dogma Central da Biologia
Molecular
Gene Estrutural - Eucariotos
Empacotamento do DNA
 Inicio da
Transcrição
Acentuadores (enhancers)
Silenciadores
 Transcrição reprimida pela
metilação do DNA
• Inativação do cromossomo X
Regulação da Expressão
Gênica
Indução e formação dos órgãos
• Indutor – respondedor
– Interação epitélio mesenquimal
Sinalização Celular
 Sinalização celular
• Sinalização parácrinas- proteínas
difusíveis
• FGF
• WNT
• Hedgehog
• TGF-β
• Sinalização justácrina- não envolve
proteínas difusíveis.
 Células-Tronco definição:
Diferem de outras células do organismo por apresentarem três
características:
a) são células indiferenciadas e não especializadas,
b) capazes de se multiplicar por longos períodos mantendo-se
indiferenciadas, um pequeno número pode originar uma grande
população de células semelhantes,
c) são capazes de se diferenciar em células especializadas
 LEI DE BIOSSEGURANÇA
A lei, aprovada em 2005, libera o
uso das células-tronco embrionárias
em pesquisas ou no tratamento de
doenças desde que sejam retiradas
de embriões produzidos por
fertilização in vitro, congelados há
mais três anos, ou que tenham se
tornado inviáveis, ou seja, não darão

A célula-tronco embrionária
mais origem a um bebê.

Problemas éticos
x

a célula-tronco do adulto
 Células-Tronco
Tipos
• Embrionárias – Pluripotente
– Incluem células derivadas do embrião, do feto ou de
um tipo de célula híbrida em um processo chamado de
transferência de núcleo somático (ou “clonagem”).

• Adultas- Multipotente
– Hematopoiéticas- Medula óssea, Cordão Umbilical
– Mesenquimais- presente em diversos tecidos
– outras
A célula-tronco embrionária
 Células-tronco pluripotentes

São células capazes de dar origem aos mais de 250 tipos

diferentes de tecidos do adulto.

1. Células-tronco embrionárias.
– Óvulo + espermatozóide = repetidas divisões
formando um “embrião” que, se conseguir se
implantar no útero poderá desenvolver-se e gerar um
novo ser.
 botão
1 2 3 4 5 6 7 interno

trofoblasto

As primeiras células embrionárias são

Células-tronco (stem cells) pluripotentes

LEI DE BIOSSEGURANÇA
2. Células germinais embrionárias. Numa fase mais
avançada do desenvolvimento fetal (5º – 10º semana), da
região da prega gonadal (de onde vão se originar as
células germinais do adulto) podem ser retiradas células
que dão origem a células pluripotenciais, geralmente
denominadas de células embrionárias germinais.
3. Transferência de núcleo somático. Esse método permite
criar uma célula pluripotente a partir de uma célula
somática (= célula do corpo de um adulto). O núcleo de
uma célula adulta (por exemplo, da pele) é retirado e
transferido para um óvulo do qual o próprio núcleo foi
removido. Essa célula híbrida pode ser estimulada a se
dividir, e origina uma massa celular semelhante à blástula
de um embrião normal. Dessa massa celular podem ser
retiradas células que, sob condições apropriadas
diferenciam-se em muitos (ou todos) tecidos humanos.
 Teratomas
O grande problema das
Células -tronco Embrionárias

Será que realmente vale investir em

pesquisas com células-tronco
embrionárias???????
A célula-tronco “adulta”
Diariamente morrem milhões de
células, mas nós continuamos
vivos.

Temos uma grande capacidade

de auto-renovação
Como os tecidos se regeneram?
 Células-tronco de adultos
· Células-tronco hematopoiéticas: obtidas de medula óssea,
sangue ou cordão umbilical

· Células-tronco de cérebro

· Células-tronco mesenquimais: medula óssea, pele, cérebro,

fígado, tecido adiposo, polpa dentária, músculos, coração

Vários tecidos humanos (ou talvez todos) têm células-

tronco, que são usadas para repor:
• células maduras desgastadas
• quando ocorre lesão
• remodelação de tecidos.
Qual a plasticidade das
células-tronco adultas?
Importância do Nicho
As células são
atraídas para o
local da lesão.
 Stem cell -
• Células-tronco hematopoiética -Transplantes de
Medula Óssea
• Células-Tronco do Cordão Umbilical (Bancos de Sangue
de Cordão).

• Células-Tronco Mesenquimais-

Vários estudos pré-clínicos

Alguns estudos clínicos
Estudos pré-Clinicos
Camundongos transgênicos para green fluorescent protein (gfp)

células fluorescentes
Terapia celular

Camundongo modelo de doença

Diabético
AVC Avaliação da doença
Isquemia Cardíaca presença de células gfp+
Hepatites no local da lesão (nicho)
 Questão ainda não definida:

há indicações de grande plasticidade

Reprogramação?
fusão?
Estudos Clínicos
Tecido mais comumente utilizado como fonte: medula óssea

1 – coleta da medula
óssea

2 – isolamento
da fração
mononuclear
 fração
mononuclear
•Questão:
•isolar as células-tronco ou empregar fração mononuclear medula óssea ?

célula-tronco hematopoiética? célula-tronco mesenquimal?

 Tópicos Importantes
• Células-tronco adultas ou embrionárias
• Principais usos:

Doenças Cardíacas- “Doença de Chagas”

Doenças Neurológicas

Doenças hepáticas Doenças Auto-imunes

Lesões na medula espinhal

• Células-tronco do adulto do tecido a ser regenerado.

• Células-tronco de adultos ou fetais diferenciadas in

vitro.

• Injeção direta de células-tronco.

• Estimulação das células-tronco endógenas.

 Opinião sobre Células-Tronco

Ótimo

Bom

Ruim
Comparando células-tronco embrionárias e do
adulto:
embrião adulto
• questões éticas

• questões legais

• facilidade de obtenção

• potencial de diferenciação

• segurança

• (histocompatibilidade)
 Células Tronco do Líquido
Amniótico
• obtidas por amniocentese.

Célula-tronco Célula-tronco
embrionária Adulta

Célula tronco
do Líquido Amniótico
•Não apresenta os problemas éticos da embrionária
•Apresenta maior plasticidade que as células-tronco Adultas

•(Jan 2007 – Nature Biotechnology)

 iPS

• Induzidas(iPS) Fatores Yamanaka

(OCT4, SOX2, KLF4, C-MYC)
 Questionamentos sobre o uso de
Células-tronco embrionárias
• Ética –
– Onde começa a vida?
• No embrião?
• No feto após X semanas de gestação?
• Após o nascimento?

• Religiosas
– Diferentes pontos de vista em relação à origem da
vida.
• Interesse econômico.
 Pesquisa com Células-Tronco
embrionária
• Vários segmentos da população tem assumido uma posição
contrária a este tipo de pesquisas, pois afirmam que o bem da
sociedade não pode ser obtido a partir da morte de alguns
indivíduos, mesmo que ainda em fase embrionária.
• A Igreja Católica Romana tem defendido a posição de que a vida
de uma pessoa tem início na fecundação, desta forma não há
justificativa eticamente adequada para tal tipo de pesquisa.

1. É moralmente lícito produzir ou utilizar embriões humanos vivos para a

preparação de células-tronco?
2. É moralmente lícito o uso da “clonagem terapêutica” através da
produção de embriões clonados e posterior destruição?
3. É moralmente lícito produzir ou fornecer comercialmente células
tronco e as suas células diferenciadas?
O princípio da moralidade médica e cirúrgica é nunca
realizar um experimento no ser humano que possa
causar-lhe dano, de qualquer magnitude, ainda que o
resultado seja altamente vantajoso para a sociedade .
Claude Bernard
 Várias questões éticas permanecem na área da
pesquisa em células-tronco embrionárias:
• É adequado utilizar embriões produzidos para fins reprodutivos e não
utilizados, cujos prazos legais de utilização foram ultrapassados, para
gerar células-tronco embrionárias ?
• É aceitável produzir embriões humanos sem finalidade reprodutiva
apenas para produzir células-tronco ?
• A justificativa da necessidade de desenvolver novas terapêuticas está
acima da vida dos embriões produzidos para este fim ?
• Por que não incentivar as pesquisas utilizando células-tronco obtidas
de outras formas, que também tem demonstrado bom potencial ?
• É aceitável a utilização de óvulos não humanos para servirem
substrato biológico para pesquisas em células-tronco humanas,
desconhecendo-se os riscos envolvidos neste tipo de procedimento ?
• É justo criar um clima de expectativa para pacientes e familiares de
pacientes sobre a possibilidade de uso terapêutico de células que não
foram testadas em experimentos básicos ?
Questões econômicas envolvendo a
utilização de células-tronco:
• Descoberta de células-tronco em prol da vida podem
ser de uso particular ou devem ser de uso público?
• Banco de células-tronco do cordão umbilical – Altos
custos mensais para manutenção das células em
congelamento. É correto?
• Banco de células-tronco particulares que cobram para
o uso em terapias regenerativas.
• Venda de células-tronco em pó, em cápsulas etc...
Muito Obrigado!