TINCIÓN DE WRIGHT

La Tinción de Wright fue diseñada al principio de la década de los noventas por James Homer Wright. Dicha
tinción esta compuesta por azul de métileno y eosina.
Las estructuras con carácter ácido tales como los ácidos nucleicos o las proteínas ácidas son afines por
compuestos básicos como lo es el azul de metileno contenido en la tinción. Por el contrario las estructuras de
carácter básico tales como la hemoglobína y otras proteínas bácicas son afines a compuestos ácidos tales como
la eosina contenida en la tinción por lo que a la vista estas estructuras
tendrán un color rojo-rosado.
Esta coloración es conocida como policromática debido a que produce varios colores. Es una solución de alcohol
metílico de un colorante ácido (eosina) y otro básico (azul de metileno). El alcohol sirve como un fijador del frotis
sanguíneo al portaobjetos. El amortiguador, que consiste en una solución tamponada (buffer de fosfatos con
pH=6.4-7.2), mantiene el pH del colorante y favorece la mejor absorción por los diferentes componentes
celulares.
FUNDAMENTO: La tinción de wright cuyo colorante está compuesto de azul de metileno (que tiñe de color azul
las partes acidas de las células) y eosina (que tiñe las partes alcalinas) disueltos en metanol (que permite la
fijación de las células), adicionando a la preparación buffer de fosfatos (que rehidrata a las células después de
la exposición con metanol)

El reactivo de Wright está compuesto por eosina y azul de metileno, cuando éste se oxida se conoce como azur
B a una concentración de 0.8 g/L empleando como solvente alcohol metílico. La eosina es un colorante ácido
que tiene afi nidad por componentes alcalinos. Existen dos compuestos conocidos como eosina y que
están intrínsecamente relacionados: eosina Y, conocida también como tetrabromofluoresceína –o,
comúnmente, eosina amarilla–, y la eosina B, conocida como dibromodinitrofluoresceína o eritrosina B azulada.
La eosina es un compuesto ácido cuya propiedad está basada en su polaridad negativa, lo que le permite
enlazarse con constituyentes celulares de carga positiva; por esta razón, colorea componentes citoplasmáticos
y se les conoce como acidófilos. La tonalidad resultante de la tinción con eosina es rosada-anaranjada para
citoplasmas, y rojo intenso en el caso de los eritrocitos. El típico color de los núcleos celulares, mayoritariamente
morado, se basa en la interacción molecular entre eosina y un complejo azul de metileno-DNA. La intensidad
de la coloración depende del contenido de azur B y de la relación con la eosina amarilla. El resultado de la
tinción puede ser influido por diferentes factores, como el valor del pH de los colorantes y de la solución
amortiguadora, esto debido a que la tinción se fundamenta en la relación de las características ácido-base
http://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf
CONSTITUCIÓN DE LOS COMPONENTES DE LA TINCIÓN:
 Colorante de Wright: para 100 mL se requiere de colorante de Wright (0.3g),
metanol (97.0 mL) y glicerol (3.0 mL). Disolver en un mortero el colorante con el
glicerol. Una vez disuelto se adiciona el metanol trasvasándolo a un frasco oscuro.
Agitar. Filtrar antes de usar.
 Solución amortiguadora tamponada: en un litro de agua destilada se agregan 3.76 g
de hidrofosfato disódico (Na2HPO4* 2H20) y 2.10g de fosfato de potasio
dihidrogenado (KH2PO4). Mezclar todos los reactivos y guardar en frasco de vidrio
en lugar fresco. Ajustar el pH a 7.2.
https://qbhematologia.files.wordpress.com/2011/08/prc3a1ctica-3.pdf